張仔堃，張玉利，李美玉，董瑞蘭，孫國(guó)強(qiáng)

（1.青島農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，山東青島 266109；2.濟(jì)南市畜牧技術(shù)推廣站，山東濟(jì)南 250306）

半胱胺（CS）又稱β-巰基乙胺，是構(gòu)成輔酶A分子的成分，是存在于生物體內(nèi)的生理調(diào)節(jié)劑，在動(dòng)物體內(nèi)代謝迅速，最終轉(zhuǎn)化為對(duì)動(dòng)物體無(wú)害的胱胺、半胱胺酸、谷胱甘肽等（劉威等，2015）。王玲（2016）研究表明，CS（含量 30%）添加量為 20 g/（d·頭）可顯著提高奶牛血液中總蛋白（TP）含量和干物質(zhì)（DM）表觀消化率，降低奶牛血液中尿素氮（BUN）含量。過(guò)瘤胃蛋氨酸（RPMet）對(duì)促進(jìn)反芻動(dòng)物小腸氨基酸平衡，提高飼料養(yǎng)分消化率和蛋白質(zhì)利用效率有重要意義（李海霞等，2019）。研究表明，CS（含量30%）和RPMet 在奶牛飼糧中單一最適宜添加量分別為 20 g/（d·頭）（王玲，2016）和 25 g/（d·頭）（張成喜等，2017），目前，鮮見(jiàn) CS和RPMet 聯(lián)合應(yīng)用于奶牛生產(chǎn)的相關(guān)報(bào)道。本試驗(yàn)在前期單獨(dú)添加的基礎(chǔ)上，研究CS 和RPMet組合添加對(duì)奶牛血液生化指標(biāo)和養(yǎng)分消化率的影響，旨在探究最適添加水平組合，為CS 和RPMet的聯(lián)合使用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料 半胱胺組成為半胱胺鹽酸鹽、棕桐油、淀粉等，含量為40%，過(guò)瘤胃率為50%。過(guò)瘤胃蛋氨酸組成為DL－蛋氨酸、棕櫚油、二氧化硅，含量為60%，過(guò)瘤胃率為85%。均購(gòu)自青島潤(rùn)博特生物科技有限公司。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)及飼糧 選用煙臺(tái)荷牧園牧業(yè)有限責(zé)任公司（萊陽(yáng)）提供的體重、胎次、產(chǎn)奶量及泌乳期相近的荷斯坦奶牛40 頭，隨機(jī)分為10 組，每組4 頭。預(yù)試期15 d，正試期60 d。試驗(yàn)設(shè)計(jì)見(jiàn)表1，全混合日糧（TMR）組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表2。

1.3 飼養(yǎng)管理 每天采用全自動(dòng)擠奶器 （丹麥SAC） 在 03:30、11:30、18:30 時(shí)擠奶，使用牽引式TMR 攪拌車在 03:30、13:00 時(shí)加料，試驗(yàn)過(guò)程中保證每天每頭奶牛接觸到TMR 的時(shí)間在20 h 以上，自由采食。

表1 試驗(yàn)設(shè)計(jì) g/d

表2 TMR 組成及營(yíng)養(yǎng)水平（干物質(zhì)基礎(chǔ)）

1.4 血樣采集與指標(biāo)測(cè)定 預(yù)試期的第1 天，正試期的第30、60 天晨飼前逐頭采取試驗(yàn)牛頸靜脈血液20 mL。將采取的血液樣品在3500 r/min 下離心15 min，取上清液，-20 ℃冷凍保存。送至青島金域醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)有限公司，檢測(cè)血清中血糖（GLU）、 總蛋白 （TP）、 白蛋白 （ALB）、 球蛋白（GLOB）、谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）、尿素氮（BUN）、肌酐（CRE）等指標(biāo)的含量。

1.5 TMR 和糞樣的采集與指標(biāo)測(cè)定 于預(yù)試期第 1 天、 正試期第 28、58 天連續(xù)收集 3 d 試驗(yàn)牛TMR 和糞樣。采用五點(diǎn)取樣法收集TMR 樣，并放入65 ℃烘箱中烘干、粉碎待用。采用直腸采糞法收集糞樣，每日 3 次，分別于 05:00、13:00、21:00時(shí)進(jìn)行，將采集的糞樣混勻后稱重，并加硫酸進(jìn)行固氮，硫酸濃度為10%，每100 g 樣品中加25 mL硫酸，并于-20 ℃冷凍保存。樣品中干物質(zhì)（DM）、粗蛋白質(zhì)（CP）、中性洗滌纖維（NDF）參照《中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)》（GB/T 6435—2006、GB/T 6432—2018、GB/T 20806—2006）測(cè)定。酸性洗滌纖維（ADF）參照《飼料中酸性洗滌纖維的測(cè)定》（NY/T 1459—2007） 測(cè) 定。酸 不 溶 灰分參 照Keulen 等（1977）方法測(cè)定，養(yǎng)分表觀消化率采用4N 鹽酸酸不溶灰分法計(jì)算。

1.6 數(shù)據(jù)處理 使用Excel 2010 軟件統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)，應(yīng)用IBMSPSS Statistics 22 軟件進(jìn)行單因素方差分析，Duncan’s 多重比較法比較組間差異性，結(jié)果用“平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤”表示，以P ＜0.05 表示差異顯著性。

2 結(jié)果與分析

2.1 CS 和RPMet 不同組合對(duì)奶牛血液生化指標(biāo)的影響 由表3 可知，LH、MM、MH、HL、HM、HH 組血清總蛋白含量分別比C 組提高5.87%、6.38%、7.44%、8.83%、6.70%、6.06%（P ＜ 0.01），ML 組比 C 組提高 4.16%（P ＜ 0.05）。HL 組血清白蛋白含量比 C 組提高 9.55%（P ＜ 0.01），ML、MH、HM、HH 組 比 C 組 提 高 5.82% 、5.92% 、7.37%、6.96%（P ＜ 0.05）。LH、MM、MH、HL 組血清球蛋白含量比 C 組提高 7.33%、8.50%、8.67%、8.25%（P ＜ 0.05）。LH、ML、MM、MH、HL、HM、HH組血清尿素氮濃度比C 組降低7.27%、8.01%、8.90%、8.46%、9.50%、8.75%、8.16%（P ＜ 0.05）。

2.2 CS 和RPMet 不同組合對(duì)奶牛養(yǎng)分表觀消化率的影響 由表4 可知，各試驗(yàn)組DM 消化率比C組提高1.19%、4.36%、2.08%、2.68%、4.04%、1.59%、6.00%、1.50%、5.60%（P ＜ 0.01）。LM、LH、MM、MH、HL、HH 組 CP 消化率比 C 組提高12.06%、10.61%、13.42%、13.5%、16.61%、14.88%（P ＜ 0.01），ML、HM組比 C 組提高 7.72%、9.97%（P ＜ 0.05）。LM、LH、MH、HL、HH 組 NDF 消化率比 C 組提高 10.94%、7.87% 、13.25% 、16.30% 、10.82% （P ＜ 0.01），ML、MM、HM 組比 C 組提高 7.06%、5.57%、3.65%（P ＜0.05）。MM、HL、HH 組 ADF 消化率比 C 組提高19.74%、20.39%、14.47%（P ＜ 0.01）。

表3 CS 和RPMet 不同組合對(duì)奶牛血液生化指標(biāo)的影響

表4 CS 和RPMet 不同組合對(duì)奶牛養(yǎng)分表觀消化率的影響 %

3 討論

3.1 CS 和RPMet 不同組合對(duì)奶牛血液生化指標(biāo)的影響 血液生化指標(biāo)是反映動(dòng)物機(jī)體生理狀況的重要依據(jù)。CS 分子內(nèi)含有巰基和氨基等活性基團(tuán)，能與生長(zhǎng)抑素（SS）分子直接作用，從而提高奶牛體內(nèi)生長(zhǎng)激素（GH）含量（夏倫志等，2005）。CS 可通過(guò)自身途徑或間接通過(guò)谷胱甘肽起到抗氧化、 增強(qiáng)免疫功能的作用 （常新耀等，2010）。RPMet 有利于促進(jìn)蛋白質(zhì)的合成代謝，促進(jìn)奶牛對(duì)飼料中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收 （王杰等，2017）。RPMet 能增加小腸可吸收氨基酸數(shù)量，有利于加快 NH3-N 向 MCP 的轉(zhuǎn)化（李海霞等，2019）。因此，聯(lián)合添加CS 和RPMet 有利于提高奶牛血清中TP、ALB、GLOB 含量，與本試驗(yàn)研究結(jié)果一致。楊宏波等（2015）試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，添加CS 的試驗(yàn)組奶牛血清中BUN 含量低于對(duì)照組。張成喜等（2017）試驗(yàn)表明，添加RPMet 能降低奶牛血清中BUN 含量。本試驗(yàn)中添加水平較高的7 個(gè)試驗(yàn)組血清BUN 含量顯著降低，這可能與聯(lián)合添加CS 和RPMet 促進(jìn)了蛋白質(zhì)的合成，降低了氮排泄有關(guān)。本試驗(yàn)中，ALT 和AST 濃度無(wú)顯著變化，表明聯(lián)合添加CS 和RPMet 不會(huì)對(duì)奶牛肝臟和心臟造成損傷。

3.2 CS 和RPMet 不同組合對(duì)奶牛養(yǎng)分消化率的影響 CS 通過(guò)抑制奶牛體內(nèi)SS 的活性，促進(jìn)奶牛胃腸道消化液的分泌，加快腸道對(duì)飼料中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的利用（常新耀等，2010）。CS 對(duì)奶牛瘤胃發(fā)酵有重要的作用，有利于奶牛瘤胃中淀粉和纖維素降解，促進(jìn)奶牛對(duì)飼料中養(yǎng)分的吸收利用（周亞強(qiáng)，2018；祁宏偉，2018）。劉紅等（2015）在奶牛飼料中補(bǔ)飼 CS 后，飼料中 CP、NDF、ADF 的表觀消化率均有提高。蛋氨酸是奶牛體內(nèi)蛋白質(zhì)合成的主要限制性氨基酸，也是調(diào)控奶牛體內(nèi)酶合成的必需氨基酸，能促進(jìn)瘤胃發(fā)酵，提高小腸消化酶活性，有利于提高飼料養(yǎng)分消化率（李海霞等，2019）。劉博等（2019）研究表明，RPMet 能提高飼料中DM、CP、NDF 的表觀消化率。本試驗(yàn)中，添加 CS 和 RPMet 的大部分試驗(yàn)組，DM、CP、NDF、ADF 的消化率顯著提高。說(shuō)明在奶牛飼料中添加CS 和RPMet 能改善奶牛瘤胃發(fā)酵狀況，提高小腸消化率，促進(jìn)奶牛機(jī)體對(duì)飼料中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的利用。

4 結(jié)論

飼料中添加不同水平組合的CS 和RPMet 能提高奶牛血清中總蛋白、 白蛋白和球蛋白含量并降低尿素氮濃度，能提高飼料中養(yǎng)分消化率。綜合考慮上述指標(biāo)，以 HL 組，即 CS 17 g/（d·頭）、RPMet 23 g/（d·頭）為最佳添加組合。