金俊杰,侯鳳香,沈 堅(jiān)
(1.溫州科技職業(yè)學(xué)院 325006;2.浙江省臺州市路橋區(qū)農(nóng)業(yè)農(nóng)村局 318050)
獸肉鴿養(yǎng)殖成本低,周期短,見效快,效益高,是鄉(xiāng)村振興、農(nóng)民致富的特種養(yǎng)殖項(xiàng)目。 鴿肉與鴿蛋都具有極高的營養(yǎng)價值,隨著人們生活水平的提高,對鴿制品的需求日益增加,肉鴿養(yǎng)殖成為我國養(yǎng)殖的第四大禽種[1]。 溫州市系華東地區(qū)最大的蛋鴿和乳鴿生產(chǎn)基礎(chǔ),也是浙江省的主要養(yǎng)鴿區(qū),存欄數(shù)約占全省份額的40%,主要集中在平陽、瑞安、樂清等地,已成為當(dāng)?shù)剜l(xiāng)村振興、農(nóng)民致富的主導(dǎo)產(chǎn)業(yè)。
但隨著養(yǎng)殖規(guī)模的擴(kuò)大,集約化的生產(chǎn),鴿細(xì)菌病絡(luò)繹不斷, 特別是鴿大腸桿菌病已成制約養(yǎng)鴿業(yè)發(fā)展的重要細(xì)菌病之一。 各年齡的鴿子均可發(fā)病,且死亡率高[2-,3],在治療大腸桿菌病的過程中,又由于抗生素的不合理使用,造成耐藥菌不斷產(chǎn)生,并且耐藥譜越來越廣,耐藥菌可以不同途徑隨食物鏈進(jìn)入人體,對人的健康構(gòu)成嚴(yán)重威脅[4-,5]。 本文通過對瑞安某鴿場一起鴿大腸桿菌病病例的診斷與治療進(jìn)行總結(jié), 以期為鴿大腸桿菌病的診治提供參考。
病鴿羽毛松亂,呆立,多呼吸困難,精神萎靡,閉眼,流淚,流涕,排綠色水樣的糞便,肛門綠色被糞便污染成,嚴(yán)重者出現(xiàn)仰頭、扭頸等神經(jīng)癥狀。 哺乳鴿臍部脫出,紅腫。
腹腔積液呈膠凍狀,心包炎、肝周炎、氣囊炎等表面被覆大量黃白色的纖維素性分泌物,肝臟腫大呈土黃色,胃內(nèi)充滿綠色糞便,氣管環(huán)狀出血。
伊紅美藍(lán)、營養(yǎng)瓊脂、麥康凱瓊脂、藥敏培養(yǎng)基等購自溫州康泰生物科技有限公司;革蘭氏染色液,細(xì)菌微量生化反應(yīng)管,多粘菌素B、卡那霉素、慶大霉素、復(fù)方新諾明、環(huán)丙沙星等藥敏紙片購于杭州微生物試劑有限公司。
2.2.1 細(xì)菌分離
無菌采集?。ㄋ溃澋男呐K、肝臟、脾臟及糞便等,接種至麥康凱平皿培養(yǎng)基,生化培養(yǎng)箱37℃培養(yǎng)培養(yǎng)18~24h,挑取單個粉紅色菌落,接種至伊紅美藍(lán)平皿培養(yǎng)基內(nèi),生化培養(yǎng)箱37℃培養(yǎng)18~24h。 挑取深紫色、帶金屬光澤單個菌落,接種至營養(yǎng)瓊脂平皿培養(yǎng)基內(nèi),生化培養(yǎng)箱37℃培養(yǎng)18~24h,進(jìn)行細(xì)菌純化。
2.3.1 革蘭氏染色
于營養(yǎng)瓊脂平皿挑選純化的單個菌落進(jìn)行革蘭氏染色,按照試劑操作說明書進(jìn)行細(xì)菌的涂片、干燥、固定、染色等操作,然后鏡檢觀察。
2.3.2 生化試驗(yàn)
將營養(yǎng)瓊脂平皿挑選單個菌落接種至腸桿菌科微量生化反應(yīng)管中,37℃培養(yǎng)24~48h,按照操作說明書定時觀察并記錄生化反應(yīng)結(jié)果,并予以判定。
采用K-B 瓊脂紙片擴(kuò)散法進(jìn)行藥敏試驗(yàn), 根據(jù)CLSI-2016標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行結(jié)果判定[6]。
采集青年鴿和種鴿各20 份血液,分離血清;采用微量血凝試驗(yàn),檢測鴿新城疫抗體。
通過無菌采集病料,依次接種于麥康凱培養(yǎng)基、伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基、 營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基, 在麥康凱培養(yǎng)基上菌落呈粉紅色、圓形、、表面光滑、濕潤;在伊紅美藍(lán)平板菌落呈扁平、深紫色、帶金屬光澤;在營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基上菌落呈半透明灰白色、圓形、光滑,其生長形態(tài)特征、培養(yǎng)特性均與大腸桿菌相符合。
通過染色鏡檢,可見兩端鈍圓、粗短,單個散在,無芽孢、莢膜,中等大小的桿菌。
通過細(xì)菌生化實(shí)驗(yàn),該菌氫氧化鉀拉絲實(shí)驗(yàn)結(jié)果陽性,氧化酶實(shí)驗(yàn)結(jié)果陰性,可以分解葡萄糖、木糖、山梨醇等,硫化氫、枸櫞酸鹽等陰性, 依據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果分離菌符合大腸桿菌的生物學(xué)特性。 生化特性結(jié)果見表1。
表1 分離菌生化特性
由生化試驗(yàn)結(jié)果得出,分離到的菌株符合大腸桿菌的生物學(xué)特性。
通過對臨床分離的6 株大腸桿菌, 選用13 種獸醫(yī)臨床藥物進(jìn)行藥敏試驗(yàn),根據(jù)藥敏試驗(yàn)結(jié)果可以看出,該養(yǎng)殖場大腸桿菌分離菌對麥迪霉素全部耐藥, 耐藥率為100%, 對氯霉素(50.0%)和復(fù)方新諾明(66.8%)的耐藥率較高;對丁胺卡那和頭孢呋辛高度敏感,分離菌株均未出現(xiàn)耐藥性。
表2 藥敏試驗(yàn)結(jié)果
種鴿新城疫血清抗體合格率100%, 效價主要集中在7~9,效價較高;青年鴿新城疫血清抗體合格率95%,效價主要集中在5 和6(具體見過見表3)。
表3 鴿新城疫抗體檢測情況
從以上臨床癥狀、解剖病變、細(xì)菌化驗(yàn)和血清學(xué)檢測結(jié)果,可以排除鴿新城疫, 判定該為鴿大腸桿菌病。 根據(jù)藥敏試驗(yàn)結(jié)果,在飼料中加入多粘菌素B,對部分癥狀嚴(yán)重的,單獨(dú)注射慶大霉素(或鏈霉素)。 雖然頭孢呋辛和丁胺卡那霉素均為敏感藥,但是頭孢呋辛為2 代頭孢菌素類藥物,人用臨床使用較多,動物上一般不建議使用。
大腸桿菌為條件性致病菌,養(yǎng)殖場的環(huán)境衛(wèi)生是導(dǎo)致大腸桿菌病發(fā)生的主要因素,并且各種品種與各日齡的鴿均易感,是養(yǎng)鴿場危害性最大的細(xì)菌病之一[7];且大腸桿菌病常與其他疾病混合感染,如鴿新城疫和支原體等,因此要進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室化驗(yàn)進(jìn)行確診。 通過實(shí)驗(yàn)室檢測,藥敏試驗(yàn)等,選用高敏藥物,既可以提高治療效果,又能延緩(或避免)細(xì)菌耐藥性的產(chǎn)生,同時可以減少抗生素的濫用。
大腸桿菌作為動物機(jī)體常在細(xì)菌,經(jīng)常因管理不當(dāng),天氣變化等應(yīng)激情況造成發(fā)病,因此要加強(qiáng)飼養(yǎng)管理,加強(qiáng)通風(fēng)和保溫,減少鴿群應(yīng)激;及時清除鴿糞,消毒鴿籠、養(yǎng)殖器械與周邊環(huán)境,注意飲水與飼料衛(wèi)生。 同時盡量采用全進(jìn)全出的飼養(yǎng)模式,注意飼養(yǎng)密度,嚴(yán)禁混群飼養(yǎng)。 對于有孵化能力的養(yǎng)殖場,注意種蛋的清潔與消毒。 對于發(fā)病鴿要及時進(jìn)行隔離,對于病死鴿及其糞便進(jìn)行無害化處理。 在治療過程中,切忌盲目用藥,要選用敏感藥物,同時注意聯(lián)合用藥與輪換用藥,有條件的養(yǎng)殖場自己可以進(jìn)行細(xì)菌的分離鑒定與藥敏試驗(yàn), 無條件的就近聯(lián)系科研院所與相關(guān)高校,將病死鴿送實(shí)驗(yàn)室檢測,查明其本場流行的大腸桿菌血清型及本場大腸桿菌的敏感藥物與所耐藥物, 以進(jìn)行精準(zhǔn)有效地預(yù)防與治療,促進(jìn)養(yǎng)鴿業(yè)的健康良性發(fā)展。