王宏偉 李新萍 史文軍

新疆兵團(tuán)第八師石河子畜牧獸醫(yī)工作站，新疆石河子832000

近年來，石河子地區(qū)進(jìn)行牛結(jié)核病檢測(cè)時(shí)使用的是哈藥集團(tuán)生物疫苗有限公司生產(chǎn)的牛型提純結(jié)核菌素（PPD）。為確保檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確可靠，2019年3-10月使用哈藥集團(tuán)生物疫苗有限公司生產(chǎn)的牛型提純結(jié)核菌素與中國(guó)獸醫(yī)藥品監(jiān)察所生產(chǎn)的牛型結(jié)核菌素（PPD）進(jìn)行了一系列對(duì)比試驗(yàn)。通過對(duì)不同廠家的牛型提純結(jié)核菌素進(jìn)行臨床研究，以期探明不同廠家牛型提純結(jié)核菌素對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響。

1 材料與方法

1.1 材 料

1）結(jié)核菌素來源。牛型提純結(jié)核菌素（凍干制品），購(gòu)自哈藥集團(tuán)生物疫苗有限公司，批準(zhǔn)文號(hào)：獸藥生字（2011）080078097，規(guī)格：50 頭份/瓶；保存：2～8 ℃，有效期120 個(gè)月；牛型提純結(jié)核菌素（液體制品），購(gòu)自中國(guó)獸醫(yī)藥品監(jiān)察所，批號(hào)：201701，規(guī)格：10 mL/瓶，2 萬(wàn)IU/mL；保存：2～8 ℃；生產(chǎn)日期：2017.11.08，有效期：24 個(gè)月。

2）器材。電動(dòng)剃毛剪、1 mL 注射器、電子卡尺、0.9% NaCl、75%酒精等。

3）供檢測(cè)牛場(chǎng)及供檢牛。選取新疆石河子地區(qū)6 個(gè)規(guī)模牛場(chǎng)10 345 頭進(jìn)行檢測(cè)。供檢牛：對(duì)以上6 個(gè)規(guī)模牛場(chǎng)的牛采用試劑為購(gòu)自哈藥集團(tuán)生物疫苗有限公司生產(chǎn)的牛型結(jié)核菌素（凍干制品），通過牛型提純結(jié)核菌素皮內(nèi)變態(tài)反應(yīng)試驗(yàn)進(jìn)行全群普檢，共檢出陽(yáng)性牛475 頭，對(duì)陽(yáng)性牛立刻采取隔離措施，加強(qiáng)消毒，減少外來因素的干擾，并記錄牛號(hào)，45 d 后用中國(guó)獸醫(yī)藥品監(jiān)察所生產(chǎn)的牛型提純結(jié)核菌素（液體制品）進(jìn)行皮內(nèi)變態(tài)反應(yīng)試驗(yàn)；同時(shí)在每個(gè)場(chǎng)選取20 頭哈藥集團(tuán)生物疫苗有限公司生產(chǎn)的牛型結(jié)核菌素檢測(cè)陰性牛用中國(guó)獸醫(yī)藥品監(jiān)察所生產(chǎn)的牛型提純結(jié)核菌素進(jìn)行皮內(nèi)變態(tài)反應(yīng)試驗(yàn)。

1.2 試驗(yàn)方法

嚴(yán)格按照國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)——?jiǎng)游锝Y(jié)核病診斷技術(shù)（GB/T18645-2002）中的結(jié)核分枝桿菌PPD 皮內(nèi)變態(tài)反應(yīng)試驗(yàn)的要求進(jìn)行操作[1]。

1）注射部位：牛頸側(cè)中部上1/3，并對(duì)注射部位剃毛、消毒、注射前測(cè)量并記錄原始皮厚。

2）注射劑量：不論大小牛只，一律皮內(nèi)注射2 000 IU。

3）觀察結(jié)果：皮內(nèi)注射后72 h 觀察術(shù)部有無(wú)熱痛、腫脹等炎性反應(yīng)，用卡尺測(cè)量皮皺厚度，并做好詳細(xì)記錄。對(duì)陰性牛和疑似反應(yīng)牛，于注射后96 h和120 h 再分別觀察和測(cè)量。

4）結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)：按照國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行判定，局部有明顯的炎性反應(yīng)，皮厚差≥4.0 mm，判為陽(yáng)性；局部炎性反應(yīng)不明顯，2.0 mm≤皮厚差＜4.0 mm，判為可疑；無(wú)炎性反應(yīng)，皮厚差＜2.0 mm，判為陰性。

1.3 測(cè)量要求

1）人員。每個(gè)場(chǎng)進(jìn)行檢測(cè)時(shí)測(cè)量原始皮厚、72、96、120 h 皮厚，固定一人操作。

2）測(cè)量工具。使用同一廠家同型號(hào)的電子游標(biāo)卡尺。

2 結(jié) 果

檢測(cè)結(jié)果見表1。

表1 哈藥集團(tuán)與中國(guó)獸醫(yī)藥品監(jiān)察所結(jié)核菌素檢測(cè)結(jié)果比對(duì)

3 討 論

1）從表1可以看出，在本次試驗(yàn)中，采用哈藥集團(tuán)生物疫苗有限公司生產(chǎn)的牛型提純結(jié)核菌素（凍干制品）與中國(guó)獸醫(yī)藥品監(jiān)察所生產(chǎn)的牛型提純結(jié)核菌素（液體制品）進(jìn)行牛結(jié)核皮內(nèi)變態(tài)反應(yīng)試驗(yàn)，結(jié)果顯示陽(yáng)性符合率較高（93.18%～100%），平均96.21%；陰性符合率為100%；排除了不同生產(chǎn)廠家生產(chǎn)的試劑對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響。這一結(jié)果與其他作者的報(bào)道存在一定的差異[2-3]。

2）嚴(yán)格按照國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)——?jiǎng)游锝Y(jié)核病診斷技術(shù)（GB/T18645-2002）中的結(jié)核分枝桿菌PPD 皮內(nèi)變態(tài)反應(yīng)試驗(yàn)的要求進(jìn)行操作[1]，嚴(yán)格試驗(yàn)操作規(guī)范，規(guī)范掌握好具體的操作細(xì)節(jié)，減少人為因素對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響是結(jié)核病檢測(cè)的關(guān)鍵。采用牛提純結(jié)核菌素定期對(duì)牛群進(jìn)行全群檢測(cè)，有利于結(jié)核感染牛的早期檢出，加快結(jié)核病控制的步伐。

3）檢測(cè)時(shí)要熟悉牛群及往年的檢測(cè)情況，要對(duì)牛有所了解，排除某些藥物的治療、疫苗的接種、感染某些寄生蟲等原因可能造成的非特異性反應(yīng)。