席 雷，楊春青

秋冬季節(jié)天氣多變，病理切片的染色和制片水平極易受天氣影響出現(xiàn)各種問題[1-2]。切片質(zhì)量不僅與染色時間有關(guān)，而且與室溫有密切關(guān)系。室溫可直接影響封片所用中性樹膠的黏稠度。日常工作中，常常由于染色封片人員的疏忽，造成同一批切片的封片質(zhì)量不佳，出現(xiàn)空泡和溢膠現(xiàn)象。其實這種現(xiàn)象可以在每年換季時提前準(zhǔn)備，選擇設(shè)立封片機(jī)冬令和夏令模式而避免。本文將針對全自動染色封片機(jī)的中性樹膠黏稠度變化及相關(guān)調(diào)節(jié)進(jìn)行探討，現(xiàn)介紹如下。

1 材料與方法

1.1 材料載玻片(7105)，蓋玻片。

1.2 儀器及試劑徠卡全自動封片機(jī)(CV5030)，溫度計，中性樹膠，二甲苯。

1.3 方法打開全自動封片機(jī)，長按滴膠按鈕，即可進(jìn)入調(diào)整模式[3-6]；然后對滴膠數(shù)值進(jìn)行增減。隨季節(jié)變化選擇性設(shè)置封片機(jī)的冬令或夏令模式。

2 結(jié)果

當(dāng)正確設(shè)置封片機(jī)冬令和夏令模式后，病理切片中細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核紅藍(lán)對比清晰，染色均勻；封片中無空泡現(xiàn)象和溢膠現(xiàn)象，并且其外觀整潔，不粘手(圖1)。

3 討論

當(dāng)冬季室溫下降，中性樹膠變得黏滯不易流動，使用全自動封片機(jī)封固時，易出現(xiàn)較大的氣泡，影響病理醫(yī)師的閱片感受，甚至干擾診斷。當(dāng)夏季室溫上升，中性樹膠變稀，流動性變大，在全自動封片機(jī)封片過程中易出現(xiàn)溢膠現(xiàn)象；若切片人員的手觸摸切片，常常手指沾滿樹膠，同樣給病理醫(yī)師、貼標(biāo)簽人員和歸檔人員造成困擾。

圖1 封片中無空泡現(xiàn)象和溢膠現(xiàn)象，并且其外觀整潔，不粘手

由于封片中使用的中性樹膠一般以二甲苯作為溶劑，使中性樹膠擴(kuò)散到整張蓋玻片區(qū)域。當(dāng)二甲苯揮發(fā)后，中性樹膠發(fā)揮透明和粘貼固定的作用，使切片易于觀察和保存。在手動封片中，由于容易調(diào)節(jié)滴膠黏稠度，所以不存在滴膠黏稠度的問題。但在全自動染色封片機(jī)中，常因為滴膠黏稠度變化，造成空泡和溢膠現(xiàn)象。其常用的避免空泡和溢膠的方法有2種[7-9]：(1)增加或傾倒封片缸中的二甲苯，通過改變二甲苯的液面高度來控制封片中的中性樹膠黏稠度；(2)直接在中性樹膠中添加不同比例的二甲苯。但第一種方法很難精確控制，無法根據(jù)預(yù)兆來采取措施避免錯誤的發(fā)生，一般是在出現(xiàn)問題后才補(bǔ)救；而第二種方法只有當(dāng)二甲苯揮發(fā)后，中性樹膠黏稠度才會改變，同樣難以控制。當(dāng)我們選擇性設(shè)置封片機(jī)的冬令或夏令模式時，中性樹膠的黏稠度變得適中，并未產(chǎn)生氣泡或溢膠現(xiàn)象，給工作帶來了方便。作者總結(jié)出一個新的避免方法：讓負(fù)責(zé)染色封片的技術(shù)員及時地設(shè)立封片機(jī)的冬令和夏令模式，并且每天留心天氣預(yù)報，同時在染色封片機(jī)的房間墻上懸掛溫度計，根據(jù)室溫的變化情況改變封片機(jī)和中性樹膠的滴膠數(shù)值。對于有條件的單位，應(yīng)在全自動染色封片機(jī)的房間內(nèi)安裝暖氣或空調(diào)設(shè)施，使溫度穩(wěn)定在10～20 ℃。若出現(xiàn)不合格的切片，應(yīng)及時重新封片。作者根據(jù)經(jīng)驗總結(jié)封片機(jī)的調(diào)試方法：最高室溫20 ℃以上或最低室溫10 ℃以上，滴膠數(shù)值設(shè)置為1；最高室溫10～20 ℃或最低室溫5～10 ℃，滴膠數(shù)值設(shè)置為2；最高室溫10 ℃以下或最低室溫5 ℃以下，滴膠數(shù)值設(shè)置為3或4(這是南京地區(qū)得出的經(jīng)驗，其它地區(qū)應(yīng)適當(dāng)調(diào)整其參數(shù))。