徐書(shū)星，霍慶赟，楊穎，紀(jì)金浩，張春芬，趙冰英

滄州市婦幼保健院，河北滄州061001

乳腺癌是全球范圍內(nèi)常見(jiàn)的女性惡性腫瘤之一，其惡性程度高、進(jìn)展快，嚴(yán)重危害女性身心健康[1]。腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)在乳腺癌診斷中具有重要指導(dǎo)作用，如血清糖類抗原153(CA153)、癌胚抗原(CEA)為乳腺癌傳統(tǒng)標(biāo)志物，在乳腺癌診斷、療效評(píng)估等方面長(zhǎng)期擔(dān)任重要角色，但其診斷效能不盡理想，臨床亟需乳腺癌相關(guān)的新型靈敏標(biāo)志物[2，3]。近年來(lái)研究指出，鐵蛋白(SF)、三葉因子1(TFF1)、程序性死亡配體1(PD-L1)在乳腺癌組織中表達(dá)較高，可能在乳腺癌細(xì)胞增殖、凋亡方面發(fā)揮調(diào)控作用[4～6]?；诖?，本研究嘗試分析血清SF、TFF1、PD-L1對(duì)乳腺癌的診斷價(jià)值并與傳統(tǒng)腫瘤標(biāo)志物進(jìn)行比較，旨在為臨床診斷乳腺癌提供循證依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 經(jīng)滄州市婦幼保健院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，選取2016年9月～2019年12月收治的乳腺癌患者92例(病例組)。病例組年齡(58.26±7.36)歲，體質(zhì)量(58.19±6.59)kg，絕經(jīng)73例，合并高血壓11例、冠心病8例、糖尿病5例，居住地位于城市52例、農(nóng)村40例，腫瘤直徑>2 cm 53例、≤2 cm 59例，臨床分期Ⅰ～Ⅱ期32例、Ⅲ～Ⅳ期60例，腫瘤中低分化62例、高分化30例，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移58例。納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合乳腺癌診斷標(biāo)準(zhǔn)[7,8]，并經(jīng)術(shù)后病理診斷確診；②均為女性；③認(rèn)知功能正常，無(wú)溝通交流障礙；④入組前均未接受相關(guān)治療。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并其他惡性腫瘤；②合并血液系統(tǒng)疾??；③合并感染性疾??；④合并嚴(yán)重心腦血管疾?。虎莺喜魅拘约膊?；⑥有自身免疫性疾病；⑦妊娠或哺乳期女性；⑧合并肝腎功能嚴(yán)重障礙。另選取同期健康體檢者92例為對(duì)照組，年齡(56.49±6.75)歲，體質(zhì)量(59.64±6.31)kg，絕經(jīng)70例，合并高血壓9例、冠心病7例、糖尿病8例，居住地位于城市49例、農(nóng)村43例。兩組均簽署知情同意書(shū)，其年齡、體質(zhì)量、絕經(jīng)情況、合并癥、居住地等資料具有可比性。

1.2 血清SF、TFF1、PD-L1、CA153、CEA檢測(cè)方法 入組后第1天，囑研究對(duì)象禁食，保持空腹?fàn)顟B(tài)12 h左右；于第2天清晨采集空腹靜脈血4 mL，以3 500 r/min離心5 min得到上層血清，置于-80 ℃冷藏待檢。采用ELISA法測(cè)定血清TFF1、PD-L1水平，試劑盒購(gòu)自南京碧云天科技公司。采用化學(xué)發(fā)光免疫法檢測(cè)血清SF，儀器為美國(guó)雅培公司生產(chǎn)的Architect i2000化學(xué)發(fā)光免疫分析儀。采用化學(xué)發(fā)光免疫法檢測(cè)血清CA153、CEA，儀器為羅氏Cobas e601全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀。

2 結(jié)果

2.1 兩組血清SF、TFF1、PD-L1、CA153、CEA水平比較 與對(duì)照組比較，病例組血清SF、TFF1、PD-L1、CA153、CEA水平均升高(P均<0.05)。見(jiàn)表1。

表1 兩組血清SF、TFF1、PD-L1、CA153、CEA水平比較

2.2 病例組不同臨床特征患者血清SF、TFF1、PD-L1水平比較 不同腫瘤直徑乳腺癌患者血清SF、TFF1、PD-L1水平差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均>0.05)。臨床分期Ⅲ～Ⅳ期、腫瘤中低分化、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的乳腺癌患者血清SF、TFF1、PD-L1水平分別高于臨床分期為Ⅰ～Ⅱ期、腫瘤高分化、無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者(P均<0.05)，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。見(jiàn)表2。

表2 病例組不同臨床特征患者血清SF、TFF1、PD-L1水平比較

2.3 血清SF、TFF1、PD-L1、CA153、CEA對(duì)乳腺癌的診斷價(jià)值 血清TFF1診斷乳腺癌的ROC曲線下面積(AUC)為0.809(95%CI為0.745～0.863)，高于血清SF(AUC為0.799，95%CI為0.734～0.854)、PD-L1(AUC為0.774，95%CI為0.707～0.832)及CA153(AUC為0.725，95%CI為0.655～0.788)、CEA(AUC為0.720，95%CI為0.649～0.784)。血清SF、TFF1、PD-L1聯(lián)合診斷乳腺癌的AUC為0.865，95%CI為0.808～0.911，聯(lián)合診斷敏感度為75.00%、特異度為83.70%，見(jiàn)圖1。

圖1 血清SF、TFF1、PD-L1聯(lián)合診斷乳腺癌的ROC曲線

3 討論

自20世紀(jì)70年代末開(kāi)始，乳腺癌發(fā)病率一直在不斷上升。近年來(lái)，我國(guó)乳腺癌發(fā)病率增長(zhǎng)速度較快，患者年齡逐漸降低[9]。乳腺癌發(fā)病早期的臨床癥狀和體征不典型，不易引起患者重視；大多數(shù)患者在出現(xiàn)明顯癥狀時(shí)才進(jìn)行檢查，多半已處于中晚期，是導(dǎo)致預(yù)后較差的主要因素[10]。因此，早期診斷對(duì)改善患者預(yù)后具有重要意義。目前，臨床診斷乳腺疾病良惡性主要依賴于乳房X線檢查，但此法存在較大局限性；而腫瘤標(biāo)志物具有檢測(cè)便捷、可重復(fù)檢測(cè)等優(yōu)勢(shì)，在多種惡性腫瘤診斷中占據(jù)重要地位[11]。CA153、CEA均為輔助診斷乳腺癌的傳統(tǒng)標(biāo)志物，有助于提高乳腺癌的診斷性能和早期檢出率，但其診斷敏感度、特異度不強(qiáng)，尚存在一定誤診、漏診率[12]。

研究發(fā)現(xiàn)，多種實(shí)體惡性腫瘤可合成、分泌SF，導(dǎo)致血清SF水平異常增高[13]。SF廣泛存在于多種細(xì)胞中，主要參與鐵代謝，同時(shí)參與多種組織細(xì)胞代謝。在惡性腫瘤發(fā)生、進(jìn)展過(guò)程中，機(jī)體對(duì)鐵的利用率會(huì)降低，導(dǎo)致血清SF水平增高[14]。本研究發(fā)現(xiàn)，乳腺癌患者血清SF水平高于健康人群，與楊文蔚等[15]的研究結(jié)果一致。本研究還發(fā)現(xiàn)，乳腺癌患者血清SF表達(dá)隨著腫瘤惡性生物學(xué)行為增加而升高，充分表明SF參與乳腺癌的發(fā)生及發(fā)展。近年研究表明，TFF1高表達(dá)于乳腺癌、胰腺癌、肺癌等多種腫瘤組織，具有調(diào)控腫瘤細(xì)胞增殖和凋亡的作用，同時(shí)能促進(jìn)腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移及新血管形成，被認(rèn)為是一種重要的癌基因[16]。本研究發(fā)現(xiàn)，乳腺癌患者血清TFF1水平升高，提示TFF1可能與乳腺癌的發(fā)生有關(guān)。TFF1是一類主要由胃腸道黏液細(xì)胞分泌的小分子多肽，在胃腸道黏膜屏障維持和修復(fù)中發(fā)揮重要的生理功能，在正常乳腺組織中表達(dá)較少。當(dāng)其表達(dá)增加時(shí)，可導(dǎo)致女性雌激素分泌紊亂，并能通過(guò)增加細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞周期蛋白D1表達(dá)，加速細(xì)胞增殖，最終誘發(fā)乳腺組織癌變[17，18]。此外，本研究還發(fā)現(xiàn)，乳腺癌患者血清PD-L1水平異常升高，與王高強(qiáng)等[19]報(bào)道的結(jié)果一致。

PD-L1是程序性死亡蛋白(PD-1)的配體。PD-1作為一種免疫調(diào)控分子，主要表達(dá)于活化的T細(xì)胞，可通過(guò)抑制T細(xì)胞活性調(diào)節(jié)免疫系統(tǒng)平衡，其配體PD-L1可抑制T細(xì)胞增殖和細(xì)胞因子產(chǎn)生，抑制B細(xì)胞增殖、分化及免疫球蛋白轉(zhuǎn)換，從而促進(jìn)惡性腫瘤發(fā)病、進(jìn)展[20]。本研究顯示，隨著乳腺癌患者腫瘤分期增高、腫瘤分化程度降低及腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移能力增強(qiáng)，血清TFF1及PD-L1水平均呈升高趨勢(shì)，提示TFF1、PD-L1也參與乳腺癌的發(fā)生發(fā)展。

本研究通過(guò)ROC曲線分析發(fā)現(xiàn)，血清SF、TFF1、PD-L1、CA153、CEA在乳腺癌診斷方面均具有一定價(jià)值，且SF、TFF1、PD-L1診斷價(jià)值均高于CA153、CEA，以TFF1最顯著，但單一指標(biāo)檢測(cè)的診斷效能仍不盡理想。為進(jìn)一步提高乳腺癌診斷效能，本研究嘗試將血清SF、TFF1、PD-L1聯(lián)合應(yīng)用，發(fā)現(xiàn)聯(lián)合診斷的AUC高達(dá)0.865，高于各指標(biāo)單一檢測(cè)；聯(lián)合檢測(cè)診斷敏感度為75.00%、特異度為83.70%，有助于提高乳腺癌早期檢出率。血清SF、TFF1、PD-L1在輔助診斷乳腺癌方面具有較好的研究?jī)r(jià)值。