黃綠　付興情　趙榮華　鮑泥滿

摘要：目的研究陽春砂Amomum villosum Lour.種殼的化學成分。方法采用硅膠、Sephadex LH-20、RP C18 柱色譜等手段對陽春砂仁種殼70%乙醇提取物進行分離純化，并通過波譜數據、薄層色譜信息鑒定所得化合物結構。結果從陽春砂仁種殼中分離得到5個化合物，分別鑒定為：β-谷甾醇（β-sitosterol，1）、香草酸（Vanillic acid，2）、原兒茶酸（Protocatechuic acid，3）、槲皮素（Quercetin，4）、谷甾醇-β-D-葡萄糖苷（sitosteryl-β-D-glucoside，5）。結論五個化合物均為首次從砂仁種殼中分離得到。

關鍵詞：陽春砂仁種殼;化學成分;分離鑒定

中圖分類號：R284.2文獻標志碼：A文章編號：1007-2349（2020）04-0077-03

Study on the Chemical Composition of Seed Shell of Amomum Villosum

HUANG Lu，F(xiàn)U Xing-qing，ZHAO Rong-hua，BAO Ni-man

（1. Yunnan University of Traditional Chinese Medicine，Kunming 650500，China;2. Collaborative Innovation Center of Southern Medicine Research，Kunming 650500，China）

【Abstract】Objective：To study the chemical composition of seed shell of Amomum villosum. Methods：The silica gel，Sephadex LH-20，RP C18 column chromatography were used to separate and purify the 70% ethanol extract of the seed shell of Amomum villosum and the structure of the obtained compounds was identified by spectroscopy data and thin layer chromatography information. Results：Five compounds were isolated from the seed shell of Amomum villosum，and were identified as：β-sitosterol（1），vanillic acid（2），and protocatechuic acid（3），Quercetin（4），sitosterol-β-D-glucoside （5）. Conclusion：All five compounds were isolated from Amomum villosum for the first time.

【Key words】seed shell of Amomum villosum，chemical composition，separation and identification

砂仁為我國“四大南藥”之一，始載于《本草拾遺》，為我國藥食同源的大宗藥材，距今已有1300多年的藥用及食用歷史。2015版《中國藥典》記載，砂仁為姜科植物陽春砂Amomum villosum Lour.、綠殼砂 Amomum villosum our.var.xanthioides T.L.Wu et Senjen 或海南砂 Amomum longiligulare T.L.Wu 的干燥成熟果實。性溫、味辛，歸脾、胃經，有化濕開胃、溫脾止瀉、理氣安胎的功效，臨床用于濕濁中阻，脘痞不饑，脾胃虛寒，嘔吐泄瀉，妊娠惡阻，胎動不安等證[1]。中醫(yī)藥中常用砂仁治療腸胃疾病，歷來有化濕醒脾第一要藥之稱，砂仁亦有作為調味佳品、加工食品的輔料等作用。砂仁藥用部位為種子團，種子團粗加工處理會產生大量的廢料種殼，深入認識和開發(fā)砂仁非藥用部位，可合理、綠色利用砂仁藥材資源。

《中藥別名大辭典》[2]記載，砂仁殼為砂仁之果殼，性味功效與砂仁相似，但溫性略減，化濕、行氣之力較弱。適用于脾胃氣滯，脘腹脹滿，嘔惡食少等證。焦樹德《用藥心得十講》云：“砂殼也有理氣醒胃的作用，但缺乏砂仁溫中散寒的效力。砂殼氣味薄，燥性小，肝旺脾弱者用之合宜”[3]。程鐘齡認為砂仁殼與砂仁相比，更能寬胸啟膈，行氣解郁，故在啟膈散一方中使用砂仁殼，而非砂仁[4]。還有醫(yī)家認為砂仁殼煅燒、研末后，可單用治療熱壅上焦致咽喉疼痛和口舌生瘡[5]。中藥發(fā)揮相關療效是因其本身含有的化學成分，所含的成分決定其發(fā)揮對應的功效。現(xiàn)有研究表明砂仁種殼富含揮發(fā)油以及抗氧化性成分，有抑菌、抗氧化等作用但是相關的化學成分以藥理活性研究極少[6]。為揭示陽春砂仁種殼臨床功效物質基礎，合理開發(fā)其藥用資源，本研究對陽春砂仁種殼的化學成分進行提取分離和結構鑒定，從中分離得到5個化合物，分別鑒定為β-谷甾醇（β-sitosterol，1）、香草酸（Vanillic acid，2）、原兒茶酸（Protocatechuic acid，3）、槲皮素（Quercetin，4）、谷甾醇-β-D-葡萄糖苷（sitosteryl-β-D-glucoside，5），所有化合物均為首次從該部位分離得到。

1儀器與材料

暗箱四用紫外分析儀（上海嘉鵬科技有限公司）;旋轉蒸發(fā)器（德國IKA集團）;實驗室級超純水機（南京易普易達科技發(fā)展有限公司）;循環(huán)水真空泵（鞏義市予華牌儀器有限責任公司）;微控數顯電熱板（北京萊伯泰科儀器有限公司）;超聲清洗器（上?？茖x器有限公司）;萬分之一電子天平（奧豪斯儀器有限公司）;核磁共振光譜用Bruker AV-600（600 MHz）超導核磁共振儀測定（TMS內標，德國Bruker公司）。薄層色譜及柱色譜用硅膠（青島海洋化工有限公司）;羥丙基葡聚糖凝膠（Sephadex LH-20 凝膠）為Pharmacia 公司進口分裝;AB-8大孔樹脂（天津浩聚樹脂科技有限公司）;十八烷基鍵合硅膠（Rp-18）為日本富士硅化工產品;分離純化所有試劑均為普通工業(yè)級經重蒸后使用。

實驗用陽春砂仁采自云南金平，經云南中醫(yī)藥大學中藥炮制研究中心趙榮華教授鑒定為陽春砂仁Amomum villosum Lour.，剝取其殼使用。

2提取與分離

取干燥陽春砂仁殼6.75 kg，粉碎，用5倍量70%乙醇浸泡過后超聲（30 min，50 Hz）3次，過濾，濾液合并，濃縮后，用水稀釋至乙醇濃度為10 %左右。經AB-8大孔樹脂粗劃為水部分、30 %乙醇部分，50 %乙醇部分，70 %乙醇部分，90%乙醇部分。50%乙醇部分經乙酸乙酯1：1萃取3次，取乙酸乙酯部分，濃縮，得流分A 29 g，流分A用硅膠柱、Rp-8反相柱、Sephadex LH-20 凝膠柱色譜等分離純化。經熒光，TLC檢測，最終分離得到5個化合物，分別為化合物1（10.3 mg），2（17.5 mg），3（11 mg），4（35.12 mg），5（7.5 mg）。

3結構鑒定

化合物1：白色無定型粉末，TLC紫外燈（254 nm）下檢視呈暗斑，用10%硫酸-乙醇溶液浸板后于80 ℃烘烤至斑點清晰顯紫色。1H-NMR（600 Hz，CDCl3）δ：5.18（1H，s，H-6），6.81（1H，d，J=12.1Hz，H-3），0.85（7H，d，J=6.9 Hz，H-2，H-26，H-9），0.76（1H，d，J=6.4 Hz，H-27）;13C-NMR（150 Hz，CDCl3）δ：141.03（C-5），121.74（C-6），71.49（C-3），56.93（C-14），56.20（C-17），50.32（C-9），46.00（C-24），42.47（C-13），42.00（C-4），39.93（C-12），37.41（C-1），36.67（C-10），36.30（C-20），34.09（C-22），32.05（C-8），31.32（C-7），29.82（C-2），29.23（C-25），28.39（C-16），26.29（C-23），24.43（C-15），23.19（C-28），21.22（C-11），19.88（C-26），19.46（C-19），19.09（C-27），18.87（C-21），12.04（C-18），11.96（C-29）。以上數據與文獻[7]報道基本一致，故鑒定化合物1為β-谷甾醇（β-sitosterol）。

化合物2：淺粉色無定型粉末狀，TLC紫外燈（254 nm）下檢視呈暗斑，用10 %硫酸-乙醇溶液浸板后于80℃烘烤至斑點清晰顯紫色。1H-NMR（600 Hz，CD3OD）δ：7.56（1H，d，J=1.9 Hz，H-2），7.55（1H，d，J=1.8 Hz，H-6），6.83（1H，d，J=8.8 Hz，H-5），3.89（1H，s，3-OCH3）;13C-NMR（150 Hz，CD3OD）δ：169.95（COOH），152.51（C-4），148.52（C-3），125.19（C-1），122.93（C-6），115.72（C-5），113.68（C-2），56.33（3-OCH3）以上數據與文獻[8]報道基本一致，故鑒定化合物2為香草酸（Vanillic acid）。

化合物3：白色無定型粉末狀，TLC紫外燈（254 nm）下檢視呈暗斑，用10 %硫酸-乙醇溶液浸板后于80℃烘烤至斑點清晰顯黃色。1H-NMR（600Hz，CD3OD）δ：7.42（1H，d，J=2.2 Hz，H-2），7.40（1H，dd，J=2.0Hz，H-6），6.78（1H，d，J=8.2Hz，H-5），13C-NMR（150Hz，CD3OD）δ：170.17（C=O），151.42（C-4），145.95（C-3），123.82（C-6），117.65（C-5），115.67（C-2）。以上數據與文獻[9]報道基本一致，故鑒定化合物3原兒茶酸（Protocatechuic acid）。

化合物4：黃色無定型粉末狀，TLC紫外燈（254 nm）下檢視呈暗斑，用10 %硫酸-乙醇溶液浸板后于80 ℃烘烤至斑點清晰顯黃色。1H-NMR（600 Hz，CD3OD）δ：7.73（1H，d，J=2.2 Hz，H-2′），7.63（1H，dd，J=8.5 Hz 2.2Hz，H-6′），6.88（1H，d，J=8.5 Hz，H-5′），6.38（1H，d，J=2.1 Hz，H-8），6.18（1H，d，J=2.1 Hz，H-6）;13C-NMR（150Hz，CD3OD）δ：177.34（C-4），165.58（C-7），162.53（C-5），158.24（C-9），148.78（C-4′），148.00（C-2），146.24（C-3′），137.25（C-3），124.16（C-1′），121.69（C-6′），116.24（C-5′），116.00（C-2′），104.54（C-10），99.24（C-6），94.42（C-8）。以上數據與文獻[10]報道基本一致，故鑒定化合物4為槲皮素（Quercetin）。

化合物5：白色無定型粉末狀，TLC紫外燈（254 nm）下檢視呈暗斑，用10 %硫酸-乙醇溶液浸板后于80 ℃烘烤至斑點清晰顯黃色。1H-NMR（600 Hz，CDCl3）δ：5.30（1H，s，H-6），4.34（1H，dt，J=7.8 Hz 2.3Hz，H-1′），0.77（9H，s），0.61（3H，s）;13C-NMR（150 Hz，CDCl3）δ：140.15（C-5），122.13（C-6），100.98（C-1′），79.12（C-3），76.22（C-3′），75.59（C-5′），73.42（C-2），69.94（C-4′），61.76（C-6′），56.65（C-14），55.96（C-17），50.07（C-9），45.73（C-24），42.24（C-13），39.66（C-12），38.63（C-4），37.15（C-1），36.63（C-10），36.06（C-20），33.85（C-22），31.84（C-8），31.78（C-7），29.53（C-2），29.25（C-25），28.16（C-16），25.95（C-23），24.20（C-15），22.97（C-28），20.97（C-11），19.70（C-27），19.22（C-19），18.90（C-26），18.67（C-21），11.86（C-29），11.25（C-18）。以上數據與文獻[11]報道基本一致，故鑒定化合物5為谷甾醇-β-D-葡萄糖苷（sitosteryl-β-D-glucoside）。

參考文獻：

[1]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典[M].一部.北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2015：253.

[2]劉道清.中藥別名大辭典[M].鄭州：中原農民出版社，2013.01，206.

[3]焦樹德.用藥心得十講[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2005：254.

[4]清.程國彭.田代華 校.醫(yī)學心悟[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2006：105.

[5]明.戴原禮.王 英，江凌圳，竹劍平，校.秘傳證治要訣及類方[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2006：88.

[6]張生潭，王兆玉，汪鐵山，等.中藥砂仁揮發(fā)油化學成分及其抗菌活性[J].天然產物研究與開發(fā)，2011，23：464-472.

[7]張雋榮，井宇星，趙佳文，等.藏藥匙葉翼首草化學成分研究[J].醫(yī)藥導，2019，38（4）：445-451.

[8]任 杰，潘善慶，趙小芳，等.野茉莉葉化學成分研究[J].中草藥，2019，50（1）：30-35.

[9]王閃閃，黃文忠，曾廣智，等.神黃豆莖葉中酚性成分研究[J].云南民族大學學報，2019，28（2）：105-108.

[10]付 琛，陳 程，周光雄，等.陽春砂仁化學成分研究[J].中草藥，2011，42（12）：2410-2412.

[11]Adebayo A.Lasisi，Akinbo A.Adesomoju.New Monoacylglycerol and Antimicrobial Constituents from the Stem Barks of Berlinia confusa[J].Journal of Herbs，Spices & Medicinal Plants，2012，18：111-131.

（收稿日期：2019-12-23）

基金項目：一帶一路地區(qū)——湄公河流域緬甸重要藥材資源調查（30260200500）

作者簡介：黃綠（1994-），女，在讀碩士研究生，研究方向：中藥資源開發(fā)與利用。

通信作者：鮑泥滿，E-mail：baoniman215@163.com