謝慈嘉，趙清，楊皓云，何聚蓮

（廣州中醫(yī)藥大學(xué)第三附屬醫(yī)院檢驗科，廣東 廣州)

0 引言

血小板減少癥是血液病中最常見的分類之一，當(dāng)體內(nèi)血小板極度減少時，易造成人體大出血，嚴(yán)重威脅人類的生命安全。目前治療血小板減少癥最常用且有效的方法主要是進行血小板輸注，但隨著近年來血制品的濫用，血小板輸注無效的情況也越發(fā)嚴(yán)峻，這不僅造成了血制品資源的浪費，還給病人造成許多嚴(yán)重后果。網(wǎng)織血小板是從造血系統(tǒng)中釋放到外圍血的新生血小板，其細(xì)胞內(nèi)還殘留較多的遺傳物質(zhì)，因此網(wǎng)織血小板有其特異性。本研究利用此特異性來檢測外周血中網(wǎng)織血小板的百分比，可以較準(zhǔn)確的反映體內(nèi)血小板的情況[1]，對血小板減少癥患者治療有指導(dǎo)意義，并減少血制品資源的浪費，同明減低血小板輸注無效的發(fā)生率。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2017年1月至2020年5月期間我院血液科收治的45名血小板減少癥患者作為研究對象，并將患者分為ⅠⅡ兩組。Ⅰ組患者為血小板輸注無效（PTR）組，共20例，其中男性患者12例，女性患者8例，年齡17-65歲，平均（32±15.6）歲。Ⅱ組患者為血小板輸注有效組，共25例，其中男性患者18例，女性患者7例，年齡20-63歲，平均（33±12.3）歲。另選擇同時期到我院進行體檢的健康人群40人作為對照組Ⅲ，男女均各設(shè)20例，年齡17-63歲，平均年齡約（34±17.2)歲，排除一切有影響血小板計數(shù)疾病。對比上述分組的臨床資料，不存在統(tǒng)計學(xué)差異P＞0.05。本研究經(jīng)本院醫(yī)學(xué)倫理會審核通過。

1.2 研究方法與方案

1.2.1 檢測儀器與試劑

外周血網(wǎng)織血小板及其他血小板相關(guān)參數(shù)采用希森美康NX-1000進行檢測，檢測用試劑均用本公司生產(chǎn)完裝試劑，實驗期間儀器運行正常，質(zhì)控在控。

1.2.2 研究標(biāo)本采集與準(zhǔn)備

參加本研究的三組人員均空腹8h,在清晨真空采集靜脈血2 mL，使用EDTA-K2抗凝，采集后的血液標(biāo)本常溫保存，并于在半小時內(nèi)完成網(wǎng)織血小板及其他血小板相關(guān)性項目的檢測。其中Ⅰ、Ⅱ研究組，在輸注血小板前1天及輸注同等量機采血小板后連續(xù)2天采集血液，作為療效觀察對比。確保采血過程順利，排除抽血過程因血液凝固或抗凝劑混勻不均等導(dǎo)致血小板假性減小的情況。

1.2.3 檢測過程

檢測過程均由有資質(zhì)的檢驗人員嚴(yán)格按照操作規(guī)程進行操作，杜絕一切人為因素的影響，確保檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性與可靠性。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法

本研究相關(guān)數(shù)據(jù)采用SPSS統(tǒng)計軟件進行分析處理，計量資料用（±s）表示，檢驗方式為t，而計數(shù)資料用率（%）表示，檢驗方案為χ2，當(dāng)所得P＜0.05，則表示有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 對比患者組與健康組網(wǎng)織血小板百分比與血小板數(shù)量

如表1所示，在輸注同等量機采血小板兩天后，Ⅰ組血小板輸注無效患者的網(wǎng)織血小板百分比及血小板數(shù)量明顯低于Ⅱ組血小板輸注有效患者。同時，Ⅰ組血小板輸注無效患者網(wǎng)織血小板百分比及的血小板含量也明顯少于健康體檢者，P＜0.05，Ⅱ組血小板輸注有效患者網(wǎng)織血小板百分比明顯高于健康組，P＜0.05。但血小板數(shù)量仍低于健康組（P＜0.05）。

2.2 對比Ⅰ Ⅱ組患者在輸注血小板前一天及輸注血小板后兩天的網(wǎng)織血小板百分比與血小板數(shù)量變化

如表2、3所示，在輸注血小板前一天與輸注后的連續(xù)兩天外周血中，Ⅰ組（血小板輸注無效）患者中，無論網(wǎng)織血小板百分比（%）或血小板數(shù)量都未發(fā)生明顯變化，變化不存在統(tǒng)計學(xué)意義，P＞0.05。Ⅱ組（血小板輸注有效）患者，在血小板輸注前后網(wǎng)織血小板百分比（%）及血小板數(shù)量均產(chǎn)生明顯的變化，變化存在統(tǒng)計學(xué)意義，P＜0.05。而且在輸注血小板后的第一天、第二天網(wǎng)織血小板百分比及血小板數(shù)量分別存在統(tǒng)計學(xué)差異，（P＜0.05）。

表1 兩患者組輸注血小板兩天后與健康組網(wǎng)織血小板百分比及血小板數(shù)量

表2 兩患者組在輸注血小板前后網(wǎng)織血小板百分比（%）變化

3 討論

血小板減少癥是血液病最常見的分類。是指外周血小板計算異常減少的情況。血小板減少可導(dǎo)致人體血液、消化、呼吸、神經(jīng)、心血管系統(tǒng)出現(xiàn)疾病。血小板減少還可導(dǎo)致人體出現(xiàn)類流感癥狀，并可觸及淺表淋巴結(jié)，導(dǎo)致肝脾腫大等[2]，目前研究表明，導(dǎo)致血小板減少的原因是多種多樣的，其中最常見是血液系統(tǒng)類疾病,其它如藥物、膿毒癥、外界環(huán)境因素等也很大程度引起血小板計數(shù)異常。血液標(biāo)本采集過程失誤或由于采集容器的原因往往會造成血小板的假性降低[3]。

目前對血小板減少癥最直接有效的治療方法為血小板輸注。但近年來由于反復(fù)大量的輸注血小板導(dǎo)致血小板輸注無效情況越發(fā)普遍。這不但造成血液資源的浪費，還對血小板減少癥病人的治療帶來不良影響，嚴(yán)重的甚至能造成病人死亡。因此，血小板輸注無效應(yīng)引起足夠的重視?，F(xiàn)代的研究表明造成血小板輸注無效的原因主要有非免疫因素和免疫因素，而免疫因素是導(dǎo)致的血小板輸注無效最主要的原因[4]。反復(fù)輸注血小板是導(dǎo)致血小板抗體產(chǎn)生最常見的原因，也是導(dǎo)致血小板輸注無效的最重要的原因[5-6],抗-CD36抗體、CD4～+CD25～+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞及轉(zhuǎn)化生長因子-1、HLA-C基因[7-9]等研究在各方面進一步表明了血小板輸注無效的復(fù)雜性與難治性。及早發(fā)現(xiàn)血小板輸注無效情況顯得尤為重要。

本研究利用希森美康NX系列血球儀檢測外周血中網(wǎng)織血小板百分比及血小板數(shù)量來輔助診斷血小板輸注無效，擁有其獨特的簡便性、快捷性、重復(fù)性。網(wǎng)織血小板（RP）為骨髓中剛釋放到外周血中的新生血小板，因其未完全分化成熟，胞體內(nèi)還殘留部位核酸類物質(zhì) ，且其細(xì)胞體積較大，活性較強。相比起流式細(xì)胞術(shù)檢測網(wǎng)織血小板[10]，NX系列血球儀利用半導(dǎo)體激光、核酸染色、鞘流電阻抗檢測等方法[11]，能更快，用血量更少，重復(fù)性更好的檢測外周血網(wǎng)織血小板的百分比。

本次選取45例血小板減少癥患者進行研究，得出的結(jié)果為血小板輸注無效組在輸注血小板前后，網(wǎng)織血小板百分比及血小板數(shù)量并無明顯的變化，P＞0.05。血小板輸注有效組在輸注血小板前后網(wǎng)織血小板百分比及血小板數(shù)量存在明顯差異，差異有統(tǒng)計學(xué)意義，P＜0.05。兩患者組在研究期間，血小板數(shù)量均與健康對照組存在差異，P＜0.05。對于網(wǎng)織血小板百分比，血小板輸注無效組在輸注血小板前后都處于低百分比狀態(tài)，與健康組有統(tǒng)計學(xué)差異，P＜0.05。血小板輸注有效組在輸注血小板前網(wǎng)織血小板百分比處于低水平，與輸注無效組無異。在輸注后網(wǎng)織血小板百分比產(chǎn)生差異，差異與輸注無效組及健康對照組均有統(tǒng)計學(xué)意義，P＜0.05。

表3 兩患者組在輸注血小板前后血小板數(shù)量（109/L)變化同時與健康組對比

綜上所述，檢測外周中網(wǎng)織血小板的百分比可作為血小板輸注是否有效的參考指標(biāo)，亦可作為血小板輸注無效癥的輔助診斷方法。采用血球儀分析外周血小板百分比具有快速、普遍等優(yōu)點。能快速，準(zhǔn)確檢測血液的相關(guān)性疾病，其安全性和穩(wěn)定性已得到認(rèn)可。