楊雪瑩，張譯如，李慧玲，趙玉德，王淑英，鄔 劍 ，蘇曉曼，張 義

(1.佳木斯大學(xué)附屬第一醫(yī)院，黑龍江 佳木斯 154003；2.佳木斯大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院，黑龍江 佳木斯 154007；3.佳木斯市婦幼保健院檢驗(yàn)科，154004)

EB病毒(Epstein-Barr virus)的病毒顆粒為球形。 EB病毒在各人群中具有易感性，其可累及人體全身多個(gè)系統(tǒng)，最初主要以呼吸道感染癥狀為主[1]。EB病毒為非噬肝病毒，但EB病毒感染所致肝損傷極為常見(jiàn)[2]。本次研究對(duì)我院最近一年內(nèi)就診患者的EB病毒檢出率進(jìn)行分析，對(duì)于由該種病毒感染引起的相關(guān)疾病的預(yù)防與治療提供臨床依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 資料來(lái)源

對(duì)于我院2018-10～2019-09接受EBV檢測(cè)的6994名兒童患者的臨床資料進(jìn)行回顧性分析，對(duì)于EB病毒陽(yáng)性結(jié)果進(jìn)行分析，分別統(tǒng)計(jì)出常見(jiàn)臨床癥狀、年齡分布、季節(jié)差異以及病毒載量的檢出情況，對(duì)于本院的EB病毒的預(yù)防及治療提供一定的數(shù)據(jù)支持。

1.2 采集全血

具體操作：專(zhuān)業(yè)護(hù)士用真空采血管(含有抗凝劑)采集受檢兒童的靜脈血2mL，并且立即輕輕混勻后密閉送檢。

1.3 方法

1.3.1 實(shí)驗(yàn)用品

EB病毒檢測(cè)試劑盒、ABI7500熒光定量PCR儀、高速水平離心機(jī)、低速離心機(jī)、淋巴細(xì)胞分離液、DNA提取液。

1.3.2 核酸定量檢測(cè)

它的基本原理是利用EB病毒的特異性引物和熒光探針，用熒光定量PCR的方法進(jìn)行檢測(cè)。

1.3.3 實(shí)驗(yàn)步驟

(1)加入50μLDNA提取液處理陰陽(yáng)對(duì)照。(2)用生理鹽水稀釋全血，加入1mL分離液，低速離心20min后吸取單個(gè)核細(xì)胞層，高速離心5min；在沉淀中加入50μLDNA提取液，混勻后核酸裂解10min；高速離心5min，備用；(3)PCR擴(kuò)增：加樣、編輯、結(jié)果分析。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用WHONET5.6軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，統(tǒng)計(jì)學(xué)方法用χ2檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 EB病毒不同年齡段具體檢出情況

EB病毒不同年齡段的檢出數(shù)不同，本研究中以年齡≤4歲的兒童檢出最高，其次為5～8歲兒童容易感染，見(jiàn)圖1。

圖1 EB病毒不同年齡段的檢出情況

2.2 EB病毒核酸載量分布情況

EB病毒核酸擴(kuò)增熒光定量檢測(cè)的病毒核酸載量以≤5000為主，其次為10000～50000檢出較多。見(jiàn)圖2。

圖2 EB病毒核酸載量分布情況

2.3 EB病毒季節(jié)檢出率比較

2018-10～2019-09本院就診的6994名兒童患者的陽(yáng)性率隨季節(jié)的不同而有所改變，其中秋季EB病毒的陽(yáng)性率最高，具體四個(gè)季節(jié)的EB病毒檢出率情況，見(jiàn)圖3。

圖3 EB病毒季節(jié)陽(yáng)性率(%)對(duì)比分析

2.4 EB病毒陽(yáng)性者常見(jiàn)臨床癥狀

本次研究發(fā)現(xiàn)EB病毒陽(yáng)性的兒童出現(xiàn)的一些癥狀應(yīng)該引起臨床重視，比如：肺炎、發(fā)熱、支氣管炎、急性化膿性扁桃體炎、呼吸道感染、急性腦炎、淋巴結(jié)炎、傳染性單核細(xì)胞增多癥等，見(jiàn)表1。

表1 EB病毒陽(yáng)性者常見(jiàn)臨床癥狀

3 討論

2018-10～2019-09我院EBV兒童檢測(cè)人數(shù)共6994例，EB病毒陽(yáng)性例數(shù)為962例，陽(yáng)性率為13.75%(962/6994)。其中女EB病毒陽(yáng)性數(shù)為430例，檢出率為13.40%(430/6994-3786)；男共有3786例檢測(cè)，EB病毒陽(yáng)性數(shù)為532例，檢出率為14.05%(532/3786)。可見(jiàn)男性檢出率多于女性。本院最近一年內(nèi)檢出EB病毒陽(yáng)性的兒童以≤4歲為主，其次是5～8歲兒童檢出率較高，這可能因?yàn)閮和哪挲g較小，免疫功能也很低下所致。有研究表明，1～10歲患者EB病毒陽(yáng)性檢出率最高，高達(dá)59.13%[3]。本研究中EB病毒的四季檢出率分別為春季：12.44%，夏季：14.96%，秋季：15.68%，冬季：12.95%，以秋季檢出率最高。與某三甲醫(yī)院的檢出情況相似，為春季：26.37%，夏季：22.64%，秋季：36.44%，冬季：13.00%，秋季最高，冬季最低[3]。EB病毒的核酸載量以≤5000檢出最多，其次為病毒載量10000～50000檢出較多。本研究中EB病毒陽(yáng)性的兒童臨床癥狀各種各樣，其中最常見(jiàn)的癥狀為：肺炎、發(fā)熱、支氣管炎、急性化膿性扁桃體炎、呼吸道感染、淋巴結(jié)炎、傳染性單核細(xì)胞增多癥等。繼發(fā)性HPS(噬血細(xì)胞綜合征)以EB病毒感染最多見(jiàn)[4]。慢性活動(dòng)性EB病毒感染是由持久性EB病毒感染引起的一種罕見(jiàn)且可能危及生命的疾病[5]。EB病毒感染臨床表現(xiàn)的多樣性與機(jī)體的免疫狀態(tài)密切相關(guān)[6]。EB病毒感染也見(jiàn)于一些兒科疾病中，如：大細(xì)胞間變性淋巴瘤，川崎病等[7]。由EB病毒引起的疾病可累及全身各系統(tǒng)，其中腎臟損害較少，為0～13%[8]。

EB病毒最初通過(guò)口咽感染人類(lèi)，在發(fā)展中國(guó)家，通常發(fā)生在兒童早期，而發(fā)達(dá)國(guó)家可能較晚[9]。有癥狀的原發(fā)性EB病毒感染通常是青少年的限性疾病[10]。研究表明，EB病毒的存在與腫瘤侵襲性之間可能存在聯(lián)系[11]。目前，腫瘤的治療仍然是一個(gè)很大的挑戰(zhàn)。減少EB病毒移植后淋巴增生性疾病的疫苗將是預(yù)防EB病毒相關(guān)惡性腫瘤的重要原理證明[12]。鼻咽癌是EB病毒引起的最常見(jiàn)的疾病，對(duì)于它的治療也有了一定的進(jìn)展。AKR1B10蛋白可用于治療鼻咽癌[13]。綜上所述，醫(yī)院相關(guān)部門(mén)應(yīng)該加強(qiáng)EB病毒的篩查工作，這對(duì)于預(yù)防EB病毒引起的相關(guān)疾病的發(fā)生意義重大。