田可港，謝春霞，徐淑華，張磊，牟曉峰，朱婕

（青島市中心醫(yī)院 檢驗(yàn)科，山東 青島 266042）

胃癌是我國最常見的消化道惡性腫瘤之一，占惡性腫瘤病死率第2 位，我國新增和死亡病例均居世界前列[1]。胃癌篩查是一種能夠發(fā)現(xiàn)早期胃癌的有效手段，血清腫瘤標(biāo)志物檢測可以為胃癌早期診斷提供一定的參考價(jià)值[2]。近年來，腫瘤患者血清中線粒體肌酸激酶（mitochondrial creatine kinase,MtCK）過表達(dá)現(xiàn)象引起了臨床關(guān)注。MtCK 有廣泛型線粒體肌酸激酶（uMtCK）和肌節(jié)線粒體肌酸激酶（sMtCK）2 種同工酶。目前已有uMtCK 在乳腺癌、前列腺癌患者血清及病理組織中過表達(dá)的報(bào)道[3]。uMtCK 在胃癌患者血清中的表達(dá)研究報(bào)道較少，胃蛋白酶原（Pepsinogen,PG）可以反映局部胃酸分泌狀態(tài)及胃底部或胃幽門等分泌胃酸的功能。有研究表明，腫瘤的發(fā)生可影響PG 的活性[4]。胃泌素-17（Gastrin-17,G-17）能夠通過促進(jìn)胃液的分泌，引起胃黏膜腺體上皮細(xì)胞持續(xù)性增殖和分化，進(jìn)而參與早期胃黏膜的病變過程[5]。糖類抗原72-4（carbohydrate antigen,CA72-4）是消化道的一種非特異腫瘤標(biāo)志物，單獨(dú)檢驗(yàn)臨床意義不大，但是對了解胃癌患者的病情進(jìn)展具有一定的臨床意義[6]。本研究分析uMtCK、PG、G-17及CA72-4 單獨(dú)和/或聯(lián)合檢測在胃癌輔助診斷中的價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2018年3月—2019年10月在青島市中心醫(yī)院住院治療的胃癌患者90 例作為研究組。其中，男性52 例，女性38 例；年齡36 ～72 歲；早期胃癌35 例，進(jìn)展期胃癌55 例。另取同期本院收治的胃部良性病變患者90 例作為對照組。其中，男性50 例，女性40 例；年齡34 ～73 歲；胃潰瘍35 例，胃炎26 例，胃息肉29 例。納入標(biāo)準(zhǔn)： 對本研究知情同意并簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)： 合并嚴(yán)重肝、腎功能障礙；過敏性疾病；神經(jīng)系統(tǒng)疾病、精神疾病及殘胃。本研究通過醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)。兩組性別、年齡等一般資料比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2 檢測儀器和試劑

ST-360 酶標(biāo)儀（上?？迫A生物工程股份有限公司），uMtCK 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）試劑盒（上海圻明生物科技有限公司），Cobas e602 電化學(xué)發(fā)光分析儀及配套CA72-4 檢測試劑盒（瑞士羅氏公司），MAGLUMI 4000 化學(xué)發(fā)光儀及配套G-17 檢測試劑盒（深圳新產(chǎn)業(yè)生物醫(yī)學(xué)工程股份有限公司），IFLASH 3000 化學(xué)發(fā)光儀及配套PG Ⅰ、PG Ⅱ試劑盒（深圳亞輝龍生物科技股份有限公司）。

1.3 檢測方法

患者入院后清晨空腹抽取靜脈血5 ml 置入分離膠采血管，3 000 r/min 離心10 min，收集血清。使用電化學(xué)發(fā)光法檢測CA72-4 水平；使用ELISA 檢測uMtCK 水平；使用化學(xué)發(fā)光法檢測PG Ⅰ、PG Ⅱ及G-17 水平。參考區(qū)間： uMtCK 為0 ～10 u/L，PG Ⅰ為67 ～200 ng/ml，PG Ⅱ?yàn)? ～15 ng/ml，PG Ⅰ/PGⅡ（PGR）為＞3，G-17 為1.7 ～7.6 pmol/L，CA72-4為0.0 ～6.9 u/ml。結(jié)果超過臨界值視為陽性，否則視為正常。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

數(shù)據(jù)分析采用SPSS 16.0 統(tǒng)計(jì)軟件。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，比較用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以率（%）表示，比較用χ2檢驗(yàn)。采用受試者工作特征（ROC）曲線分析各單項(xiàng)與聯(lián)合檢測的診斷效能，以曲線下面積（AUC）＞0.5 為有診斷意義，P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組各項(xiàng)血清檢測指標(biāo)比較

兩組各項(xiàng)血清檢測指標(biāo)比較，經(jīng)t檢驗(yàn)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），研究組血清uMtCK、PGⅡ、G-17及CA72-4 水平高于對照組，而PG Ⅰ、PGR 水平低于對照組（P＜0.05）。見表1。

2.2 兩組各項(xiàng)血清檢測指標(biāo)陽性率比較

兩組血清uMtCK、PG Ⅰ、PG Ⅱ、PGR、G-17、CA72-4 及各項(xiàng)聯(lián)合檢測陽性率比較，經(jīng)χ2檢驗(yàn)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），研究組高于對照組。見表2。

表1 兩組各項(xiàng)血清檢測指標(biāo)比較 （n =90，±s）

表1 兩組各項(xiàng)血清檢測指標(biāo)比較 （n =90，±s）

組別 uMtCK/（u/L） PG Ⅰ/（ng/ml） PG Ⅱ/（ng/ml） PGR G-17/（pmol/L） CA72-4/（u/ml）研究組 25.36±19.59 48.41±22.37 20.77±13.92 2.25±1.51 10.47±7.91 11.76±11.37對照組 3.10±2.85 100.65±32.14 11.57±6.37 8.21±3.50 4.35±3.66 3.31±2.80 t 值 15.683 -7.674 6.460 -12.946 12.481 6.849 P 值 0.000 0.000 0.000 0.000 0.000 0.000

表2 兩組各項(xiàng)血清檢測指標(biāo)陽性率比較 [n =90，例（%）]

2.3 各項(xiàng)血清檢測指標(biāo)單獨(dú)和聯(lián)合檢測的診斷效能

血清uMtCK、PG Ⅱ、G-17 及CA72-4 聯(lián)合檢測的敏感性、準(zhǔn)確性高于各單項(xiàng)指標(biāo)檢測（P＜0.05），uMtCK 檢測的特異性最高。以診斷結(jié)果為狀態(tài)變量，以uMtCK、PG Ⅰ、PG Ⅱ、PGR、G-17、CA72-4 單獨(dú)和uMtCK、PG Ⅱ、G-17、CA72-4 聯(lián)合預(yù)測概率為檢驗(yàn)變量，繪制ROC 曲線（見圖1、2）。AUC 結(jié)果顯示uMtCK、PG Ⅱ、G-17 和CA72-4 聯(lián)合檢測診斷價(jià)值最大，PG Ⅰ診斷價(jià)值最小。見表3、4。

圖1 uMtCK、PG Ⅱ、G-17、CA72-4 單獨(dú)和聯(lián)合檢測的ROC 曲線

圖2 PG Ⅰ和PGR 檢測的ROC 曲線

表3 血清指標(biāo)單獨(dú)和聯(lián)合檢測的診斷效能比較

表4 PG Ⅰ和PGR 檢測的診斷效能的比較

3 討論

在我國，胃癌具有較高的病死率。有調(diào)查結(jié)果顯示，早期胃癌5年生存率＞90%，而晚期生存率可低至20%，故早發(fā)現(xiàn)、早診斷、早治療對胃癌患者具有重要意義[7]。目前，診斷胃癌主要依靠胃鏡，其對患者有一定程度的損傷。血清標(biāo)志物檢測較為簡便、快捷且損傷程度小，逐漸得到了臨床和科研工作者的重視。

肌酸激酶（creatine kinase,CK）是由M、B 2 種不同亞基組成的二聚體，在臨床檢驗(yàn)過程中常出現(xiàn)CK-MB 活性高于CK 活性的現(xiàn)象。當(dāng)CK-MB 活性高于CK 活性時(shí)，除考慮CK-BB 外還要考慮巨CK1 和巨CK2（uMtCK）的干擾。uMtCK 是一種低聚的線粒體CK，作為巨分子酶的一種，常常伴隨各種腫瘤出現(xiàn)，提示其可能是一個(gè)潛在的腫瘤標(biāo)志物。PG 按照其免疫原性的不同分為PG Ⅰ和PG Ⅱ，其中PG Ⅰ主要是由胃底的主細(xì)胞及頸黏液細(xì)胞分泌，而PG Ⅱ除了上述兩類細(xì)胞外，還能夠由幽門腺賁門腺及十二指腸的Brunner 腺分泌[8]。G-17 是胃腸道G 細(xì)胞釋放的多肽類激素，參與胃酸分泌和胃腸道黏膜細(xì)胞的分裂增殖與凋亡，可以提示胃黏膜功能狀態(tài)，其高表達(dá)可能與胃癌的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)[9]。CA72-4 是一種高分子量黏蛋白腫瘤標(biāo)志物，有研究報(bào)道，胃癌患者血清中有較高濃度的CA72-4，提示其在胃癌輔助診斷中有重要價(jià)值[10]。

本研究結(jié)果表明，研究組uMtCK、PG Ⅱ、G-17及CA72-4 水平高于對照組，而PG Ⅰ、PGR 水平低于對照組，表明血清uMtCK、PG Ⅰ、PG Ⅱ、PGR、G-17 及CA72-4 檢測對臨床鑒別胃部良性病變及惡性腫瘤具有一定的參考價(jià)值。研究組uMtCK、PG Ⅰ、PG Ⅱ、PGR、G-17 及CA72-4 的陽性率高于對照組，且聯(lián)合檢測陽性率高于各單項(xiàng)指標(biāo)檢測的陽性率，胃癌患者血清uMtCK、PG Ⅱ、G-17 及CA72-4 聯(lián)合檢測的敏感性、準(zhǔn)確性高于各單項(xiàng)指標(biāo)檢測，AUC 結(jié)果顯示uMtCK、PG Ⅱ、G-17 和CA72-4 聯(lián)合檢測診斷價(jià)值最大，PG I 診斷價(jià)值最小，表明各項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合檢測可提高胃癌診斷的敏感性與準(zhǔn)確性。

本研究由于臨床病例收集有限，對uMtCK 這類新型腫瘤標(biāo)志物在胃癌致病機(jī)制中的相關(guān)作用未能涉及，這也將是筆者下一步探討和研究的重點(diǎn)。綜上所述，血清uMtCK、PG Ⅰ、PG Ⅱ、PGR、G-17 及CA72-4 腫瘤標(biāo)志物在輔助診斷胃部良性病變與胃癌中有一定的價(jià)值，聯(lián)合檢測可提高胃癌診斷的敏感性與準(zhǔn)確性，從而為臨床診斷提供依據(jù)。血清uMtCK、PG Ⅰ、PG Ⅱ、PGR、G-17 及CA72-4 單獨(dú)及聯(lián)合檢測對臨床輔助診斷胃癌均具有重要意義，值得臨床推廣。