蔡娟 孫紅

隨著輸血醫(yī)學理念的發(fā)展, 臨床輸血安全日益得到關注，輸血前不規(guī)則抗體的篩查變得更加重要，臨床輸血技術規(guī)范[1]也明確規(guī)定對于有輸血史及妊娠史的患者輸血前要求進行不規(guī)則抗體篩查。并非所有抗體篩查鑒定工作都是簡單而明確的，在臨床工作中由于諸多因素導致抗體篩查結果常常出現(xiàn)假陽性、弱陽性。一些醫(yī)院，特別是基層醫(yī)院對此項技術的開展還不成熟，對抗體篩查弱陽性結果也認識不足。目前有關弱陽性抗篩結果的報道很少，鑒于此，本研究收集本院患者不規(guī)則抗體篩查弱陽性結果，并分析其特異性分布及可能的原因，希望為輸血工作者提供借鑒。

資料與方法

1 研究對象 選取2017年7月～2019年6月本院不規(guī)則抗體篩查結果凝集強度≤1+弱陽性病例71例，其中男31例，女40例，年齡分布在12～82歲。

2 試劑和儀器 抗體篩選紅細胞試劑盒（上海血液生物醫(yī)藥有限責任公司）；十六系抗體譜紅細胞（荷蘭sanquin公司）；抗人球蛋白（IgG/C3d）檢測卡、AUTOVUE全自動血型及配血分析系統(tǒng)（美國Ortho公司），01-BV-7212離心機（美國Ortho）和Heat Block-32免疫微柱孵育器（美國Ortho）；B600-A低速離心機（北京白洋醫(yī)療器械有限公司）；KA-2200血庫專用離心機（日本久保田（中國）投資有限公司）。

3 方法 采用AUTOVUE全自動血型分析儀進行不規(guī)則抗體篩查，操作步驟參照說明書。同時加做鹽水法不規(guī)則抗體篩查（在各加有患者血漿2滴的3個潔凈試管中分別加入3%～5%Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ抗篩細胞1滴后用血型血清學專用離心機以1 000 g離心15 s觀察結果）。不規(guī)則抗體鑒定：①抗人球蛋白法：抗人球蛋白卡每孔加50 μL 1%對應譜細胞及25 μL的患者血漿，經(jīng)37℃孵育15 min，專用微柱離心機離心觀察結果。②鹽水法：標記相應序號的16支潔凈試管各加入患者血漿2滴，然后分別加入3%～5% 對應序號的抗篩譜細胞1滴，血型血清學專用離心機以1 000 g離心15 s觀察結果。部分抗體鑒定由北京解放軍總院輸血科完成。

4 統(tǒng)計學處理 應用SPSS13.0統(tǒng)計分析，計數(shù)資料采用百分率表示，組間比較采用χ2檢驗，P＜0.05表示差異有統(tǒng)計學意義。

結 果

1 不規(guī)則抗體弱陽性分布情況 共有71 例弱陽性，有輸血史比例高于無輸血史，檢測出抗體特異性的高達73%，具體見表1。

2 不同年齡、性別人群不規(guī)則抗體弱陽性分布情況不規(guī)則抗體弱陽性人群中，女性陽性率高于男性，但無統(tǒng)計學差異（P＞0.05）；不規(guī)則抗體的弱陽性率也與年齡無關（P＞0.05），見表2。

表1 不規(guī)則抗體弱陽性分布情況

表2 不同年齡、性別人群不規(guī)則抗體弱陽性率比較

3 抗體特異性分布情況 檢出特異性抗體52例，其中Rh血型系統(tǒng)13例，占25%；P和MNSs血型系統(tǒng)各10例，均占19.2%；自身抗體6例，占11.5%；Duffy系統(tǒng)抗體4例，占7.7%；Lewis血型系統(tǒng)、Kidd血型系統(tǒng)和抗-HI 各2例，均占3.8%；聯(lián)合抗體3例，占5.8%，具體見表3。

討 論

輸血前進行血型不規(guī)則抗體篩選，選擇無相應抗原的血液輸注對精準輸血和提高輸血療效具有重要的意義[2,3]。 不規(guī)則抗體篩查結果經(jīng)常出現(xiàn)弱陽性，而很多弱陽性結果復查后為假陽性。這種現(xiàn)象致使有的檢驗者認為弱陽性結果基本上以假陽性為主，沒有復查必要，更不需要進一步鑒定，直接判定為假陽性，沒有選擇相應紅細胞輸注，造成臨床輸血患者出現(xiàn)無效輸血或溶血性反應。確實有部分原因使抗篩假陽性以弱陽性結果出現(xiàn)，如文獻報道某些廠家的微柱卡假陽性率較高，原因可能為纖維蛋白原干擾、保存過程中的細胞變形或細胞碎片增多等抗篩細胞的自身問題[4]。也可能與患者自身疾病有關，特別是自身免疫性疾病患者的自身抗體、藥物性抗體，或患者血漿中某些物質與抗人球蛋白卡中物質反應所致[5]。許多醫(yī)院進行了意外抗體篩查，但未能進一步進行抗體鑒定，直接判斷弱陽性為假陽性或無意義。然而并非所有弱陽性結果都是假陽性，有很多實驗人員沒有重視弱陽性結果，甚至認為弱陽性對輸血意義不大。本研究分析71例弱陽性抗篩結果和進一步抗體鑒定結果，提示抗篩弱陽性結果的重要性，為輸血工作者提供參考。

根據(jù)本文資料，不規(guī)則抗體篩查弱陽性結果女性例數(shù)高于男性，不同年齡段的弱陽性率不同，但差異無統(tǒng)計學意義。與張玉萍報道的無效輸血與性別、年齡無關一致[6]。由于本資料弱陽性樣本量較小，對結果一般性有所影響，因此對于不規(guī)則抗體弱陽性與性別、年齡、輸血史的關系，仍需要臨床進一步擴大樣本研究容量，為臨床評估提供更加嚴謹、科學的參考依據(jù)。弱陽性標本檢出特異性抗體52例，包括P、Rh、MNSs、Duffy、Lewis和Kidd血型系統(tǒng)、抗-HI、自身抗體、聯(lián)合抗體等。弱陽性標本檢出抗體的種類與文獻報道的抗篩檢出抗體種類基本一致[2,3]。這些出現(xiàn)弱陽性的抗體，如抗P、抗M，其抗體性質多為IgM型，在微柱介質中凝集強度較弱，而其它抗體可能與劑量效應、低效價抗體有關。

Rh，MNS，Kidd，Duffy血型系統(tǒng)的抗體易出現(xiàn)“劑量效應”現(xiàn)象[7]。其中，抗-E、抗-C、抗-M、抗-S更易表現(xiàn)出“劑量效應”[4]。某些抗篩細胞的抗原譜設計不全或為雜合子，就會出現(xiàn)意外抗體漏檢或凝集較弱[8]。劉自強報道某些抗篩細胞在檢測抗-Fyb、-Jka、-S時, 當抗體效價低于1∶4時存在漏檢可能[9]。人產(chǎn)生不規(guī)則抗體后，若沒有繼續(xù)受到免疫刺激，抗體效價會逐漸降低，但在再次輸入有相應抗原的紅細胞后，會迅速激活記憶細胞產(chǎn)生大量IgG抗體，造成遲發(fā)型溶血。關于低效價不規(guī)則抗體，近年來諸多文獻報道其漏檢是輸血無效的原因之一[9,10]。李海云等報道71例低效價不規(guī)則抗體陽性分布與本文弱陽性標本抗體特異性分布一致[10]。本資料中抗篩弱陽性標本進行抗體鑒定還會出現(xiàn)與譜細胞反應結果全陰性的現(xiàn)象，可能為患者存在低頻抗原對應的抗體或效價低、活性弱的抗體。還有部分弱陽性標本抗體特異性不明確，封彥楠[5]等對同種抗體特異性不明確的81名患者血清學特征分析及紅細胞輸注效果評價，認為抗體特異性不明確原因可能為以下四種：（1）低效價同種抗體；（2）無法明確抗體特異性；（3）特異性抗體聯(lián)合未知抗體；（4）疑似某種特異性抗體。對于弱陽性標本，須同時用鹽水法和微柱凝膠法做交叉配血試驗，選擇相合的血液輸注。

臨床上經(jīng)常有患者存在不明原因的貧血，或輸血后無法解釋Hb不升或下降的現(xiàn)象，大量研究表明，紅細胞血型不規(guī)則抗體是輸血無效及溶血性輸血不良反應的主要原因[10]。如果忽視弱陽性結果，有的患者即使某次輸血沒有產(chǎn)生溶血反應或產(chǎn)生不明顯的反應，當患者再次輸血接受免疫刺激，會誘導潛在抗體與相應抗原發(fā)生免疫記憶反應，產(chǎn)生大量抗體，出現(xiàn)紅細胞輸注無效、遲發(fā)型溶血性輸血反應，并且會加重原發(fā)病甚至威脅生命。應選擇適宜方式篩查不規(guī)則抗體，重視弱陽性結果，以避免漏檢致受血者輸入含有相應抗原的紅細胞，才能保證臨床輸血安全、提高輸注效果[11]。

（本組研究資料得到北京解放軍總醫(yī)院第一醫(yī)學中心輸血科的幫助，在此致謝?。?/p>

利益沖突所有作者均聲明不存在利益沖突