黃潔
【摘 要】酶作為一種蛋白質(zhì)催化劑,其具有高效性和專(zhuān)一性等特點(diǎn)[1]。在目前來(lái)說(shuō),食品分析檢測(cè)中通過(guò)進(jìn)行酶制劑的應(yīng)用能夠有效提出檢測(cè)效率,在酶法免疫發(fā)展迅速的同時(shí)其酶標(biāo)免疫為主要方式,能夠用于多重食品安全檢驗(yàn)中。本文通過(guò)對(duì)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定技術(shù)進(jìn)行應(yīng)用,隨后對(duì)相關(guān)進(jìn)行研究。
【關(guān)鍵詞】酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定技術(shù);食品衛(wèi)生;檢驗(yàn)
【中圖分類(lèi)號(hào)】R155.5【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】B【文章編號(hào)】1005-0019(2020)13--02
酶免疫技術(shù)以免疫熒光和組織學(xué)作為基礎(chǔ),其發(fā)展于20世紀(jì)60年代。在1996年酶免疫測(cè)定方式出現(xiàn),同時(shí)在1997年通過(guò)進(jìn)行兔免疫蛋白的標(biāo)記,采用抗體酶標(biāo)記代替免疫分析法。對(duì)于酶聯(lián)免疫測(cè)定吸附來(lái)說(shuō)酶法簡(jiǎn)便本質(zhì)安全。
一、相關(guān)原理測(cè)定
酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定技術(shù)通過(guò)進(jìn)行免疫反應(yīng)特異性和酶催化作用的有機(jī)結(jié)合,從而進(jìn)行應(yīng)用檢測(cè),能夠有效進(jìn)行抗體和抗原的檢測(cè),在抗體檢測(cè)的基礎(chǔ)上通過(guò)進(jìn)行特異性抗原的應(yīng)用,并加入待檢樣品能夠有效形成復(fù)合物。在上述復(fù)合物的基礎(chǔ)上能夠和酶發(fā)生顯色反應(yīng),在待測(cè)樣品中,由于其抗體量和有色產(chǎn)物量成正比,因此能夠借助吸光度值進(jìn)行物濃度的測(cè)定。在上述反應(yīng)中抗原、抗體免疫反應(yīng)可以進(jìn)行多次進(jìn)行。
二、酶聯(lián)免疫測(cè)定技術(shù)的相關(guān)優(yōu)勢(shì)
第一,專(zhuān)一性強(qiáng)。對(duì)于免疫酶技術(shù)來(lái)說(shuō),主要以免疫反應(yīng)作為基礎(chǔ)同時(shí)除抗體酶標(biāo)記之外,其和普通抗體免疫反應(yīng)無(wú)較大差別。第二,靈敏性高。通過(guò)借助相關(guān)底物的形式反映能夠在連接酶的基礎(chǔ)上提高整體靈敏度。第三,藥品與保存較簡(jiǎn)便。經(jīng)相關(guān)酶反應(yīng)顯示,大多數(shù)酶有色反應(yīng)一般情況下比較穩(wěn)定,同時(shí)有利于樣品保存。第四,通過(guò)進(jìn)行相關(guān)檢驗(yàn)結(jié)果的檢查能夠使電子密度得到一定改變,并使被檢物得到明顯顯示。第五,儀器試劑操作較為簡(jiǎn)單,并可以進(jìn)行定量測(cè)定。
三、酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定在食品安全檢測(cè)中的應(yīng)用
1.農(nóng)藥殘留檢測(cè)
在目前來(lái)說(shuō),對(duì)于農(nóng)藥濫用現(xiàn)象使農(nóng)藥殘留物超標(biāo),同時(shí)在傳統(tǒng)殘留檢測(cè)方式中主要應(yīng)用方式為高效液相色譜法和氣相色譜法,由于其需要儀器較為昂貴,同時(shí)需要進(jìn)行復(fù)雜處理,因此分析周期較長(zhǎng)。在酶免疫法后通過(guò)對(duì)農(nóng)藥免疫測(cè)定技術(shù)進(jìn)行應(yīng)用,通過(guò)對(duì)食品安全飼料和環(huán)境進(jìn)行檢查,其具有一定效果。同時(shí)在國(guó)外多個(gè)國(guó)家中,也逐漸應(yīng)用此種技術(shù)進(jìn)行生物技術(shù)監(jiān)測(cè)。我國(guó)在近10年來(lái)也逐漸開(kāi)展了相關(guān)方式研究其具有一定成效,例如山東金鵬生物藥業(yè)公司通過(guò)對(duì)乙酰膽堿脂酶進(jìn)行發(fā)展研究。通過(guò)研制快速檢測(cè)試紙,從而使農(nóng)藥檢測(cè)敏感度逐漸上升。
2.動(dòng)物食品獸藥殘留及相關(guān)違禁物品檢測(cè)
對(duì)于動(dòng)物性食品獸藥來(lái)說(shuō)包括多類(lèi),其中包括驅(qū)蟲(chóng)類(lèi)激素類(lèi)、抗生素類(lèi),通過(guò)采用酶聯(lián)免疫方式能夠進(jìn)行有效快速檢測(cè)。例如瘦肉精作為現(xiàn)階段一種常見(jiàn)添加劑,會(huì)對(duì)患者造成癌變直接影響身體健康。對(duì)于部分含有瘦肉精的肉,臨床出現(xiàn)心悸、四肢麻木和頭痛等不良反應(yīng)。通過(guò)采用酶聯(lián)免疫吸附方式能夠有效進(jìn)行瘦肉靈敏度檢測(cè),其較為迅速。同時(shí)經(jīng)國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢疫局推薦ELISA試劑盒在進(jìn)行動(dòng)物激素抗生素的檢測(cè)中也逐漸成為首選。
3.生物毒素檢測(cè)
在目前來(lái)說(shuō)生物毒素主要是適合在滿足條件下生產(chǎn)的代謝性產(chǎn)物,通過(guò)進(jìn)行相關(guān)加熱烹調(diào)其相關(guān)結(jié)構(gòu)一般未能遭到破壞,在眾多毒素中黃曲霉素作為主要危害毒素之一,將會(huì)造成食品安全。因此各國(guó)都對(duì)于此種食物含量進(jìn)行嚴(yán)格控制,通過(guò)采用抗曲霉毒素以及待測(cè)抗原的免疫反應(yīng)進(jìn)行黃曲霉毒素含量的檢測(cè),分析速度較快,同時(shí)準(zhǔn)確度較高、成本低以及步驟簡(jiǎn)便等。
4.重金屬污染檢測(cè)
在目前來(lái)說(shuō)受環(huán)境污染以及金屬污染等多種污染的基礎(chǔ)下,如何進(jìn)行重金屬污染的檢測(cè)是當(dāng)前的一個(gè)主要方式。對(duì)于重金屬污染在此情況下,通過(guò)進(jìn)行金屬硫蛋白的誘導(dǎo),通過(guò)純化金屬硫蛋白進(jìn)行免疫試驗(yàn),在兔抗血清純化后進(jìn)行相關(guān)氧化酶的標(biāo)記,一般情況下檢查超微量檢測(cè)。
5.病原微生物檢測(cè)
在目前來(lái)說(shuō)食品污染中,其中一個(gè)重要因素為病原微生物檢測(cè)。通過(guò)進(jìn)行酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定技術(shù)能夠有效進(jìn)行致病菌和微生物的檢測(cè),其中沙門(mén)氏菌作為一種常見(jiàn)致病菌,在食品安全中具有一定效果。在傳統(tǒng)檢測(cè)過(guò)程中,沙門(mén)氏菌由于其檢測(cè)周期較長(zhǎng),同時(shí)設(shè)計(jì)較為復(fù)雜,一般情況下應(yīng)用較少。對(duì)于酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定技術(shù)來(lái)說(shuō),能夠進(jìn)行沙門(mén)氏菌[2]污染的快速篩選同時(shí)能夠有效完成金黃色葡萄球菌菌體中蛋白檢測(cè),整體傳統(tǒng)方式相比之前具有一定要縮短,應(yīng)用前景較為廣闊。
6.轉(zhuǎn)基因食品安全性測(cè)定
在目前來(lái)說(shuō)關(guān)于食品安全中的重要討論問(wèn)題之一,一般情況下采用PCR技術(shù)進(jìn)行基因測(cè)定,第二種則為酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定技術(shù)。通過(guò)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定進(jìn)行應(yīng)用,能夠有效檢測(cè)出傳統(tǒng)大豆加工產(chǎn)品中的cp4等消化蛋白質(zhì),目前市場(chǎng)上已經(jīng)有了相關(guān)檢測(cè)方式。
四、結(jié)束語(yǔ)
在目前來(lái)說(shuō),酶聯(lián)免疫測(cè)定技術(shù)特異性、靈敏度較高[3],同時(shí)具有簡(jiǎn)便、低成本以及自動(dòng)化等特點(diǎn)。在此基礎(chǔ)上適當(dāng)選擇性較高,同時(shí)能夠產(chǎn)生相關(guān)交叉反應(yīng),因此通過(guò)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定技術(shù)對(duì)相關(guān)食品安全進(jìn)行測(cè)定,其在未來(lái)應(yīng)成主流趨勢(shì),并發(fā)揮相應(yīng)作用。
參考文獻(xiàn)
李冬陽(yáng).用于毒素檢測(cè)的酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定(ELISA)研究[D].浙江大學(xué),2012.
王亞賓.檢測(cè)硝基咪唑類(lèi)藥物、萊克多巴胺和安定殘留的酶聯(lián)免疫法的建立[D].山東大學(xué),2011.
石超,呂長(zhǎng)鑫,馮敘橋,李萌萌,劉蘇蘇. 酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)在食品檢測(cè)分析中的研究進(jìn)展[J].食品安全質(zhì)量檢測(cè)學(xué)報(bào),2014,5(10):3269-3275.