張鑫 盧新義 馬久太 李百華 韓東 杜疏煬 陳英 劉峰

摘 要 目的：為提升十味益脾顆粒的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供參考。方法：按2015年版《中國藥典》（四部）通則相關(guān)方法，采用顯微鑒別法鑒別六神曲和雞內(nèi)金藥材，薄層色譜法（TLC）鑒別山楂和萊菔子藥材，高效液相色譜法（HPLC）測定萊菔子中芥子堿硫氰酸鹽的含量。結(jié)果：十味益脾顆粒中六神曲（種皮柵狀細(xì)胞和種皮石細(xì)胞）和雞內(nèi)金（不規(guī)則碎塊）的顯微特征明顯;山楂、萊菔子藥材與熊果酸、芥子堿硫氰酸鹽對照品和萊菔子對照藥材在相應(yīng)位置處顯相同的熒光斑點(diǎn)。芥子堿硫氰酸檢測進(jìn)樣量的線性范圍為23.27～9 574.42 ng（r=1.000 0），檢測限為0.50 μg/mL、定量限為1.68 μg/mL;精密度、重復(fù)性、中間精密度、穩(wěn)定性（24 h）試驗的RSD均小于1.5%，平均回收率為99.40%～100.89%（RSD為0.18%～0.49%，n=3）。3批十味益脾顆粒中芥子堿硫氰酸鹽的含量為0.086 4～0.220 6 mg/g，平均值為0.168 4 mg/g。結(jié)論：成功建立十味益脾顆粒中六神曲、雞內(nèi)金、山楂、萊菔子藥材的鑒別方法和萊菔子中芥子堿硫氰酸鹽的含量測定方法;該品含萊菔子以芥子堿硫氰酸鹽（C16H24NO5·SCN）計不得少于0.16 mg/g。

關(guān)鍵詞 十味益脾顆粒;山楂;萊菔子;熊果酸;芥子堿硫氰酸鹽;顯微鑒別;薄層鑒別;含量測定;質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

中圖分類號 R284.1 文獻(xiàn)標(biāo)志碼 A 文章編號 1001-0408（2020）18-2214-05

DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2020.18.07

ABSTRACT? ?OBJECTIVE： To provide reference for the improvement of quality standards of Shiwei yipi granules. METHODS： According to the general rules of 2015 edition of Chinese Pharmacopeia （part Ⅳ）， microscopic identification was used to identify Massa Medicata Fermentata and Galli Gigerii Endothelium Corneum; TLC method was used to qualitatively identify Crataegi Fructus and Semen Raphani; the content of sinapine thiocyanate in Semen Raphani was determined by HPLC. RESULTS： The microscopic characteristics were obvious for Massa Medicata Fermentata? （palisade cells of testa and stone cells of testa） and Galli Gigerii Endothelium Corneum （irregular fragments）. The same fluorescent spots of Crataegi Fructus and Semen Raphani were displayed at the same position of ursolic acid，sinapine thiocyanate control and Semen Raphani reference substance. The linear range of sinapine thiocyanate was 23.27-9 574.42 ng （r=1.000 0）. The LOD and LOQ were of 0.50 μg/mL and 1.68 μg/mL， respectively. RSDs of precision， repeatability， intermediate precision and stability tests （24 h） were all less than 1.5%. The average recoveries were 99.40%-100.89% （RSDs were 0.18%-0.49%， n=3）. The contents of sinapine thiocyanate in 3 batches of Shiwei yipi granules were 0.086 4-0.220 6 mg/g， the? average was 0.168 4 mg/g. CONCLUSIONS： The identification method of Massa Medicata Fermentata， Galli Gigerii Endothelium Corneum， Crataegi Fructus and Semen Raphani in Shiwei yipi granules as well as the method for content determination of sinapine thiocyanate in Semen Raphani are established successfully. The content of Semen Raphani in the Shiwei yipi granules is no less than 0.16 mg/g calculated by sinapine thiocyanate （C16H24NO5·SCN）.

KEYWORDS? ?Shiwei yipi granules; Crataegi Fructus; Semen Raphani; Ursolic acid; Sinapine thiocyanate; Microscopic identification; TLC; Content determination; Quality standard

十味益脾顆粒是山東步長制藥有限公司國家科技重大專項創(chuàng)制新藥，由山藥、雞內(nèi)金、薏苡仁、蓮子、茯苓、大棗、山楂、六神曲、麥芽和萊菔子組成[1]。方中山楂、麥芽、雞內(nèi)金、六神曲均為消食要藥，其中山楂主消肉食并止瀉痢[2];麥芽主消米面、諸果食積，且能升發(fā)脾胃之氣[3];雞內(nèi)金有消食化石之功效，為消化瘀積之要藥，又善治脾胃之虛弱[4];六神曲為行氣調(diào)中消食開胃之佳品[5]，上述四者同為君藥，其余山藥、薏苡仁、蓮子、茯苓、大棗、萊菔子等均為臣藥，諸藥合用共奏補(bǔ)脾益氣、健胃消食之功效[1]。

目前，按原國家食品藥品監(jiān)督管理局相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)[1]，十味益脾顆粒中麥芽通過顯微鑒別進(jìn)行控制，山藥、蓮子通過薄層色譜（TLC）鑒別進(jìn)行控制，山楂以熊果酸的含量進(jìn)行控制。但由于上述質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)過于簡單，難以全面反映和控制十味益脾顆粒的質(zhì)量。萊菔子作為十味益脾顆粒處方中的臣藥，處方量為165/2 075 g，具有降氣除脹、化痰消食的作用[6-7]，其主要含有芥子堿、萊菔素、芥酸等成分，其中芥子堿硫氰酸鹽具有降壓、消食除脹、潤腸通便等作用，是萊菔子發(fā)揮藥效的關(guān)鍵成分[8-11]。鑒于此，本文在前期研究[12-13]和現(xiàn)行質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的基礎(chǔ)上，參考文獻(xiàn)方法[14-16]，建立了十味益脾顆粒中六神曲和雞內(nèi)金藥材的顯微鑒別法，山楂和萊菔子藥材的TLC鑒別法，萊菔子中芥子堿硫氰酸鹽含量測定的高效液相色譜法（HPLC），旨在為十味益脾顆粒質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的提高和改進(jìn)提供依據(jù)。

1 材料

1.1 儀器

1260型HPLC儀，包括Agilent Chemstation C.01.07 SR2 [255]色譜工作站（美國Agilent公司）;e2695型HPLC儀（美國Waters公司）;DM3000型生物顯微鏡（德國Leica公司）;SK8200Hp型科導(dǎo)超聲儀（上海五久自動化設(shè)備有限公司）;ML204T型萬分之一、XPE205型十萬分之一電子分析天平（瑞士Mettler Toledo公司）。

1.2 藥品與試劑

十味益脾顆粒（山東步長制藥有限公司，批號：190501、181101、180401，規(guī)格：每袋裝5 g）;熊果酸對照品（批號：110742-200517，純度：100%）、萊菔子對照藥材（批號：121074-201805，供鑒別使用）、芥子堿硫氰酸鹽對照品（批號：111702-201605，純度：98.3%）均購自中國食品藥品檢定研究院;乙腈（美國Fisher公司，色譜純）;磷酸二氫鉀（阿法埃莎天津化學(xué)有限公司）;硅膠G薄層板（德國Merck公司、青島海洋化工廠、煙臺化學(xué)工業(yè)研究所）;甲苯、乙酸乙酯、甲醇、環(huán)己烷、甲酸、硫酸、乙醇等（國藥集團(tuán)化學(xué)試劑上海有限公司）均為分析純，水為超純水。

2 方法與結(jié)果

2.1 六神曲、雞內(nèi)金藥材的顯微鑒別

取3個批次的十味益脾顆粒，研成粉末，取少許置于載玻片上，使用水合氯醛進(jìn)行透化，加稀甘油后裝蓋玻片，置于顯微鏡下觀察，結(jié)果見圖1。其中，圖1A為六神曲中的種皮柵狀細(xì)胞，胞腔內(nèi)含淡紅棕色物;圖1B為六神曲中的種皮石細(xì)胞，數(shù)個相連或單個散在，呈類圓形、貝殼形、類多角形，紋孔甚密，二者可共同作為炒六神曲藥材的專屬性顯微鑒別特征[17]。圖1C為雞內(nèi)金中不規(guī)則的無色或棕黃色碎塊，其溝紋樣可以作為雞內(nèi)金藥材的專屬性顯微鑒別特征[4]。

2.2 山楂藥材的TLC鑒別

取3個批次的十味益脾顆粒，研成粉末，各取15 g，分別加入乙酸乙酯30 mL，超聲（功率：500 W，頻率：53 kHz，下同）處理30 min，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇1 mL使溶解，作為供試品溶液。另取熊果酸對照品，加甲醇溶解稀釋制成每1 mL含熊果酸0.2 mg的溶液。取處方量的1/10，按照十味益脾顆粒處方工藝制備模擬陽性樣品和缺山楂藥材的陰性樣品，再按上述供試品溶液制備方法制成模擬陽性樣品溶液和陰性樣品溶液。按照2015年版《中國藥典》（四部）中TLC法[18]，吸取上述溶液5～8 μL，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸（20 ∶ 4 ∶ 0.5，V/V/V）為展開劑，展開，取出，晾干，噴灑10%硫酸乙醇試液，在105 ℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，分別置于日光和紫外光燈（365 nm）下檢視。結(jié)果，供試品和模擬陽性樣品在與熊果酸對照品相應(yīng)位置處顯相同的熒光斑點(diǎn)，且陰性樣品無干擾，詳見圖2。

2.3 萊菔子藥材的TLC鑒別

取3個批次的十味益脾顆粒，研成粉末，各取10 g，分別加甲醇50 mL，超聲處理30 min，濾過，濾液蒸干，殘渣加水20 mL使溶解，再用水飽和的正丁醇振搖萃取2次，每次20 mL，合并正丁醇液，蒸干，殘渣加甲醇1 mL使溶解，作為供試品溶液。另取萊菔子對照藥材1 g，按上述供試品溶液制備方法制成對照藥材溶液。再取芥子堿硫氰酸鹽對照品，加甲醇溶解稀釋制成每1 mL含1 mg的溶液，作為對照品溶液。取處方量的1/10，按照十味益脾顆粒處方工藝制備模擬陽性樣品和缺萊菔子藥材的陰性樣品，按上述供試品溶液制備方法制成模擬陽性樣品溶液和陰性樣品溶液。按照2015年版《中國藥典》（四部）中TLC法[18]，吸取上述溶液各3 μL，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯-甲酸-水（10 ∶ 2 ∶ 3，V/V/V）的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，置于紫外光燈（365 nm）下檢視。結(jié)果，供試品和模擬陽性樣品在與萊菔子對照藥材和芥子堿硫氰酸鹽對照品相應(yīng)位置處顯相同的熒光斑點(diǎn)，且陰性樣品無干擾，詳見圖3。

2.4 萊菔子藥材中芥子堿硫氰酸鹽的含量測定

2.4.1 色譜條件 色譜柱：Waters Xterra-RP C18（250 mm×4.6 mm，5 μm）;流動相：乙腈-0.08 mol/L磷酸二氫鉀溶液（10 ∶ 90，V/V）;流速：1.0 mL/min;檢測波長：326 nm，柱溫：30 ℃，進(jìn)樣量：10 μL。

2.4.2 系列對照品溶液的制備 稱取芥子堿硫氰酸鹽對照品適量，精密稱定，置于10 mL量瓶中，加流動相溶解并稀釋至刻度，制成質(zhì)量濃度分別為2.33、7.76、28.85、86.17、287.23、957.44 μg/mL的系列對照品溶液。

2.4.3 供試品溶液的制備 取十味益脾顆粒，研成粉末，取約5 g，精密稱定，置于具塞錐形瓶中，精密加入70%甲醇50 mL，稱定質(zhì)量，超聲處理30 min，取出放涼，再次稱定質(zhì)量，用70%甲醇補(bǔ)足減失質(zhì)量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液用0.45 μm濾膜濾過，即得供試品溶液。

2.4.4 陰性樣品溶液的制備 取處方量的1/10，按照十味益脾顆粒處方工藝，制備缺萊菔子藥材的陰性樣品，再按照“2.4.3”項下方法制成陰性樣品溶液。

2.4.5 專屬性考察 分別取“2.4.2”“2.4.3”“2.4.4”項下對照品溶液（28.85 μg/mL）、供試品溶液（批號：190501）和陰性樣品溶液，按照“2.4.1”項下色譜條件進(jìn)樣測定，記錄色譜圖。結(jié)果，陰性樣品對芥子堿硫氰酸鹽的含量測定無干擾，理論板數(shù)按芥子堿硫氰酸鹽峰計不低于8 000，詳見圖4。

2.4.6 線性關(guān)系、檢測限、定量限考察 精密吸取“2.4.2”項下的系列對照品溶液，按照“2.4.1”項下色譜條件進(jìn)樣測定，記錄峰面積。各樣品平行進(jìn)樣2次。以峰面積的平均值為縱坐標(biāo)（y）、進(jìn)樣量為橫坐標(biāo)（x，ng）進(jìn)行回歸分析，得回歸方程為y=3.296 2x+22.047（r=1.000 0）。結(jié)果顯示，芥子堿硫氰酸鹽檢測進(jìn)樣量的線性范圍為23.27～9 574.42 ng。以信噪比3 ∶ 1得檢測限為0.50 μg/mL，以信噪比10 ∶ 1得定量限為1.68? μg/mL。

2.4.7 精密度試驗 分別精密吸取質(zhì)量濃度為28.85 μg/mL的對照品溶液，按照“2.4.1”項下色譜條件重復(fù)測定峰面積6次。結(jié)果，峰面積的RSD為0.24%（n=6），表明儀器的精密度良好。

2.4.8 重復(fù)性試驗 精密稱取批號為190501的十味益脾顆粒5.0 g，共6份，按照“2.4.3”項下方法制成供試品溶液，再按照“2.4.1”項下色譜條件進(jìn)樣測定，記錄峰面積并按標(biāo)準(zhǔn)曲線法計算含量。結(jié)果，芥子堿硫氰酸鹽的平均含量為0.225 8 mg/g，RSD為0.29%（n=6），表明該方法的重復(fù)性良好。

2.4.9 中間精密度試驗 按“2.4.8”項下方法，由同一實(shí)驗室的不同分析人員在不同時間分別制備十味益脾顆粒（批號：190501）供試品溶液6份，并按“2.4.1”項下色譜條件以不同儀器測定其中芥子堿硫氰酸鹽的含量。結(jié)果，芥子堿硫氰酸鹽的平均含量為0.221 2 mg/g，RSD為1.15%（n=6），表明該方法的中間精密度良好。

2.4.10 穩(wěn)定性試驗 取“2.4.8”項下的供試品溶液（批號：190501），分別于室溫下放置0、1、2、4、8、12、16、20、24 h時按照“2.4.1”項下色譜條件進(jìn)樣測定，記錄峰面積。結(jié)果，芥子堿硫氰酸鹽峰面積的RSD為0.57%（n=9），表明該溶液在24 h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

2.4.11 加樣回收率試驗 精密稱取批號為190501的十味益脾顆粒粉末2.5 g，共9份，置于具塞錐形瓶中，分別精密加入質(zhì)量濃度為304.73 μg/mL的芥子堿硫氰酸鹽對照品溶液1、2、3 mL，每個量3份，然后按照“2.4.3”項下方法制成供試品溶液，再按照“2.4.1”項下色譜條件進(jìn)樣測定，記錄峰面積并計算加樣回收率，結(jié)果見表1。

2.4.12 系統(tǒng)耐用性考察 取“2.4.3”項下的供試品溶液（批號：190501），按“2.4.1”項下色譜條件進(jìn)樣測定，分別考察不同檢測波長（324、326、328 nm）、不同流速（0.8、1.0、1.2 mL/min）、不同柱溫（20、30、40 ℃）、不同色譜柱（Waters XTERRA? RP、Agilent Eclipse XDB、CAPCELL PAK MG Ⅱ、Shimadzu Shim-pack GIS和Welch Ultimate? XB-C18）對芥子堿硫氰酸鹽含量的影響。結(jié)果，芥子堿硫氰酸鹽含量的RSD分別為0.92%、0.93%、1.05%、1.22%（n=3或n=5），表明該方法耐用性良好。

2.4.13 樣品含量測定 取3個批次的十味益脾顆粒樣品，按照“2.4.3”項下方法制成供試品溶液，每批平行制備2份，再按照“2.4.1”項下色譜條件進(jìn)樣測定，記錄峰面積并按標(biāo)準(zhǔn)曲線法計算含量，結(jié)果見表2。3批樣品中芥子堿硫氰酸鹽的平均含量為0.168 4 mg/g。

3 討論

3.1 顯微鑒別的藥材選擇

在十味益脾顆粒的生產(chǎn)工藝中，有3味藥材是經(jīng)粉碎后入藥，分別是麥芽、六神曲和雞內(nèi)金，現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)[1]中僅對麥芽藥材進(jìn)行了顯微鑒別。顯微鑒別是中藥粉末的專屬性鑒別方法，具有操作簡單、專屬性強(qiáng)的優(yōu)點(diǎn)，常用于處方工藝中藥材的粉末鑒別控制，同時也有助于研究者優(yōu)化其生產(chǎn)工藝，因此筆者在現(xiàn)行質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的基礎(chǔ)上增加了六神曲和雞內(nèi)金藥材的顯微鑒別，從而保證藥品的質(zhì)量。

3.2 TLC鑒別的藥材選擇

由于十味益脾顆粒的現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)[1]中僅有山藥和蓮子的TLC鑒別，同時除了方中對麥芽進(jìn)行顯微鑒別以外，其余藥材均未有質(zhì)量控制的方法，因此本課題組在前期的預(yù)試驗中分別對茯苓、薏苡仁、山楂、雞內(nèi)金、大棗、萊菔子等藥材進(jìn)行了TLC鑒別考察。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，茯苓、薏苡仁、大棗等藥材的TLC鑒別陰性樣品均有較大的干擾，且無法通過調(diào)整展開劑、顯色劑和供試品的制備方法等予以排除，故未列入正文;本課題組只發(fā)現(xiàn)山楂、萊菔子藥材的TLC鑒別具有專屬性強(qiáng)、斑點(diǎn)顯色清晰、分離良好的特點(diǎn)，故增加了山楂和萊菔子藥材的TLC鑒別進(jìn)行質(zhì)量控制，從而完善十味益脾顆粒的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。

3.3 色譜條件的選擇

芥子堿硫氰酸鹽是萊菔子藥材中的主要活性成分，具有下氣、降壓和消食的作用，2015年版《中國藥典》（一部）對其測定主要是采用苯基柱進(jìn)行測定[4]。由于苯基柱的適用范圍較窄，且耐用性較差，因此選擇通用的C18柱進(jìn)行分析測定具有更廣泛的適用性。在色譜條件的選擇時，本課題組分別對流動相的組成及比例進(jìn)行了考察，曾采用乙腈-3%冰醋酸溶液（15 ∶ 85，V/V）、甲醇-1%冰醋酸溶液（30 ∶ 70，V/V）、乙腈-0.08 mol/L磷酸二氫鉀溶液（10 ∶ 90，V/V）進(jìn)行洗脫。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，以乙腈-0.08 mol/L磷酸二氫鉀溶液（10 ∶ 90，V/V）為流動相時，芥子堿硫氰酸鹽的色譜峰峰形良好且對稱，基線噪音小。同時，還采用正交法對提取溶劑（甲醇、70%甲醇、20%甲醇）、提取時間（20、30、40 min）及超聲功率（150、250、500 W）進(jìn)行篩選。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，提取時間和超聲功率對芥子堿硫氰酸鹽的測定無顯著影響，而提取溶劑影響較大;最終選擇最優(yōu)提取條件：75%甲醇作為提取溶劑、超聲功率為500 W、提取時間為30 min。

3.4 芥子堿硫氰酸鹽溶劑的選擇

2015年版《中國藥典》（一部）萊菔子項下中芥子堿硫氰酸鹽對照品的溶劑為甲醇[4]。但是本課題組在前期的預(yù)試驗中發(fā)現(xiàn)，如果采用甲醇作為提取溶劑，芥子堿硫氰酸鹽對照品會出現(xiàn)雙色譜峰，且有干擾峰出現(xiàn)，推測可能是由于芥子堿硫氰酸鹽存在兩種形式，即芥子堿和硫氰酸鹽形式;也可能是由于對照品溶劑的pH值不同所導(dǎo)致。因此，改用流動相溶解對照品，發(fā)現(xiàn)對照品色譜峰峰形改善，無拖尾，無干擾峰出現(xiàn)，因此本文采用流動相作為芥子堿硫氰酸鹽對照品的稀釋溶劑。

3.5 萊菔子藥材驗證

2015年版《中國藥典》（一部）萊菔子藥材中規(guī)定，按照干燥品計算，含芥子堿以芥子堿硫氰酸鹽計，不得少于0.40%[4]。取萊菔子藥材按照本文所建立的方法進(jìn)行測定，結(jié)果按干燥品計算，芥子堿硫氰酸鹽的含量為0.432 6%，結(jié)果符合《中國藥典》規(guī)定。

3.6 限度確定

本研究結(jié)果表明，3批十味益脾顆粒中芥子堿硫氰酸鹽的含量分別為0.220 6、0.086 4、0.198 1 mg/g，平均含量為0.168 4 mg/g。根據(jù)芥子堿硫氰酸鹽轉(zhuǎn)移率=成藥中芥子堿硫氰酸鹽的含量/（萊菔子中芥子堿硫氰酸鹽的含量×萊菔子的處方量）×100%計算得芥子堿硫氰酸鹽的轉(zhuǎn)移率最低為25.12%，最高為64.14%，平均值為48.95%。為了保證藥品質(zhì)量，本研究暫將芥子堿硫氰酸鹽的限度定為萊菔子最低含量×處方量×平均轉(zhuǎn)移率=0.155 6 mg/g;綜合考慮，十味益脾顆粒含萊菔子以芥子堿硫氰酸鹽（C16H24NO5·SCN）計不得少于0.16 mg/g。由于本次研究樣品量偏少，后期會進(jìn)一步探索研究多批次樣品的含量測定，從而保證限度制定的合理性。

綜上所述，本研究成功建立了十味益脾顆粒中六神曲、雞內(nèi)金、山楂、萊菔子藥材的鑒別方法和萊菔子中芥子堿硫氰酸鹽的含量測定方法。該品含萊菔子以芥子堿硫氰酸鹽（C16H24NO5·SCN）計不得少于0.16 mg/g。

參考文獻(xiàn)

[ 1 ] 國家食品藥品監(jiān)督管理局.國家藥品標(biāo)準(zhǔn)：YBZ00382008? [S].2008-02-04.

[ 2 ] 于蓓蓓，閆雪生，孫丹丹.山楂藥理作用及其機(jī)制研究進(jìn)展[J].中南藥學(xué)，2015，13（7）：79-82.

[ 3 ] 李毅，楊敏，王穎，等.消食藥三仙用法初探[J].華西醫(yī)學(xué)，2010，25（8）：1574-1576.

[ 4 ] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典：一部[S]. 2015年版.北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2015：193、272、1096.

[ 5 ] 唐莉.神曲消食口服液聯(lián)合甘草鋅顆粒治療小兒厭食癥的臨床研究[J].現(xiàn)代藥物與臨床，2019，34（11）：3310- 3313.

[ 6 ] 唐健元，張磊，彭成，等.萊菔子行氣消食的機(jī)制研究[J].中國中西醫(yī)結(jié)合消化雜志，2003，11（5）：287-289.

[ 7 ] 葛亞如，郭煒，董文亮，等.萊菔子降壓機(jī)制研究與臨床應(yīng)用進(jìn)展[C]//中華中醫(yī)藥學(xué)會第14次中醫(yī)方劑學(xué)學(xué)術(shù)年會.北京：中華中醫(yī)藥學(xué)會，2014.

[ 8 ] 張茜，周洪雷，李民，等.萊菔子化學(xué)成分研究[J].山東中醫(yī)雜志，2018，37（8）：684-687.

[ 9 ] 馬東.中藥萊菔子的化學(xué)成分及藥理作用研究進(jìn)展[J].中國社區(qū)醫(yī)師，2014，30（20）：5-6.

[10] 張茜，趙冉，周洪雷，等.萊菔子化學(xué)成分研究進(jìn)展[J].遼寧中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報，2018，20（4）：137-140.

[11] 王國青，趙云麗，王晶晶，等. HPLC法測定十味益脾顆粒中綠原酸和芥子堿硫氰酸鹽的含量[J].沈陽藥科大學(xué)學(xué)報，2012，29（4）：280-283.

[12] 王曉梅，張建，陳英，等.十味益脾顆粒矯味的模糊數(shù)學(xué)綜合評價[J].世界中醫(yī)藥，2019，14（1）：83-85、91.

[13] 王曉梅，單娜，陳英，等.十味益脾顆粒矯味研究及處方研究[J].海峽藥學(xué)，2018，30（2）：1-3.

[14] 田其學(xué)，陳玲瓏，張艷.復(fù)方血脂片中山楂、麥芽與萊菔子的薄層色譜鑒別[J].湖南中醫(yī)雜志，2016，32（6）：179- 181.

[15] 劉起華，張萱，文謹(jǐn).白芥子不同炮制品中芥子堿硫氰酸鹽含量測定[J].中國中醫(yī)藥信息雜志，2007，14（11）：46-47.

[16] 蔣海強(qiáng)，丁臻，周洪雷.高效液相色譜測定萊菔子總堿中芥子堿硫氰酸鹽含量[J].中國實(shí)驗方劑學(xué)雜志，2012，18（17）：78-80.

[17] 陜西省食品藥品監(jiān)督管理局.陜西省中藥飲片標(biāo)準(zhǔn)：2冊[S]. 2009年版.西安：陜西科學(xué)技術(shù)出版社，2009：135.

[18] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典：四部[S]. 2015年版.北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2015：57.

（收稿日期：2020-06-30 修回日期：2020-08-03）

（編輯：鄒麗娟）