馮凡凡 黎世杰 陳錦艷 謝桂蕓 鄧學(xué)成 吳 蕾 鄧陽凡 汪傳喜

廣州血液中心，廣州市醫(yī)學(xué)重點實驗室(血液安全重點實驗室)(廣州 510095)

機采血小板具有濃度高、純度高、同種免疫發(fā)生率低輸血成功率高等優(yōu)點[1]，臨床需求大。因此，解決機采血小板供需矛盾一直是采供血機構(gòu)面臨的挑戰(zhàn)。為應(yīng)對這一挑戰(zhàn)，國家衛(wèi)健委在2012 年 7 月起實施的《獻血者健康檢查要求(GB1846-2011)》[2]將連續(xù)2次機采血小板獻血間隔期從不少于4周縮短為不少于2周，總獻血次數(shù)則從不超過12次/年調(diào)整為不超過24次/年,且總采血量不超過10 L/年。這在一定程度上緩解了機采血小板供需矛盾，但該措施對于長期多次捐獻血小板的獻血者健康的影響也逐漸成為業(yè)內(nèi)人士關(guān)注的焦點[3]。目前已有很多相關(guān)的研究，然而其結(jié)果并不一致，這可能與研究對象較少，不具有代表性，或獻血次數(shù)較少與獻血次數(shù)較多的人群出現(xiàn)不同的結(jié)果或未對獻血量進行討論或?qū)ρ芯扛櫟臅r間較短，無法獲得多次連續(xù)捐獻機采血小板對獻血者外周血血細胞計數(shù)的影響。本研究在綜合已有文獻的基礎(chǔ)上延長獻血者獻血跟蹤時間，達32個月；增加研究對象，達849名；且將研究期間內(nèi)的血小板捐獻量和調(diào)查期間第一次與最后一次獻血間隔時間考慮在內(nèi)。為了解血小板捐獻量和獻血間隔期對長期多次捐獻血小板者外周血細胞水平的影響，本研究對849名長期多次捐獻機采血小板的獻血者外周血血細胞計數(shù)的變化進行了分析。

1 資料與方法

1.1 一般資料

回顧性分析了廣州地區(qū)在2016年1月1日—2018年9月30日期間內(nèi)捐獻血小板量≥10 U的849名獻血者。所有研究對象均符合《獻血者健康檢查要求(GB1846-2011) 》，均無全血獻血經(jīng)歷，每次獻血前血細胞計數(shù)均符合要求即于150×109/L≤PLT≤450×109/L、4.0×109/L≤WBC≤10.0×109/L和3.5×1012/L≤RBC≤5.5×1012/L，且每次均成功捐獻1 U或者2 U機采血小板。其中男性778例(91.6%)，女性71例(8.4%)；年齡18～55歲，平均年齡為(27.94±8.48)歲；采集量10～112 U，平均采血量(30.06±18.31)U；第一次到最后一次獻血間隔時間(以下簡稱間隔期)為(14.85～143.27)周平均間隔期為(76.80±33.57)周。

1.2 儀器與設(shè)備

主要儀器設(shè)備：Amicus血細胞分離機(美國Fenwal股份有限公司)、Trima血細胞分離機(美國Terumo BCT股份有限公司)、MCS+血細胞分離機(美國Haemonetics公司)及各自單采系統(tǒng)配套應(yīng)用的一次性血小板采集管路；采用CIS-F820(日本Sysmex公司)、邁瑞、Beckman等血細胞計數(shù)儀檢測獻血者的外周血細胞計數(shù)。

1.3 獻血前外周血血細胞計數(shù)

獻血者每次獻血前抽取靜脈血5 mL，使用EDTA-K2 抗凝管存放混勻，按本中心操作規(guī)程嚴格操作，并將結(jié)果輸入中心采供血系統(tǒng)。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

采用同一群體的配對t檢驗來評估第一次與最后一次血小板捐獻時血小板、紅細胞及白細胞計數(shù)的變化情況。血細胞的變化值是指調(diào)查期間最后一次獻血時的血細胞計數(shù)減去第一次獻血時的血細胞計數(shù)。將采用有序多分類Logistic回歸檢驗調(diào)查期間的血小板捐獻量對獻血者外周血細胞計數(shù)的影響。采用SPSS 25.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計分析，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 獻血者的基本結(jié)構(gòu)

本研究一共納入849名符合條件的機采血小板獻血者，其人口統(tǒng)計學(xué)特征(性別、年齡)和獻血情況(血小板捐獻量和獻血間隔時間)見表1。其中年齡是指獻血者在調(diào)查期間第一次捐獻血小板時的年齡；血小板捐獻量是指調(diào)查期間獻血者總的血小板捐獻量；間隔時間是指調(diào)查期間獻血者第一次至最后一次捐獻血小板的時間。

表1 獻血者的基本特點及獻血情況

2.2 各獻血量的頻率分布

研究對象在調(diào)查期間血小板捐獻量的頻率分布情況，見圖1。血小板捐獻量多集中在10～30 U。

圖1 總獻血量頻率分布情況

2.3 外周血血細胞計數(shù)在第一次至最后一次捐獻血小板的變化情況

配對t檢驗外周血血細胞計數(shù)在第一次獻血時與最后一次獻血時的變化情況。結(jié)果顯示血小板計數(shù)增加，白細胞計數(shù)減少，二者的變化差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；紅細胞計數(shù)的變化差異沒有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.607)。見表2。

表2 外周血血細胞計數(shù)在第一次獻血至最后一次獻血的變化值*

2.4 連續(xù)捐獻血小板后血小板計數(shù)變化情況的影響因素的有序多分類Logistic回歸分析

表3 影響連續(xù)捐獻血小板后血小板、白細胞和紅細胞計數(shù)變化值的因素名稱及賦值表*

表4 影響連續(xù)捐獻血小板后血小板變化值的因素的有序多分類Logistic回歸分析結(jié)果*

2.5 連續(xù)捐獻血小板后白細胞計數(shù)變化情況的影響因素有序多分類Logistic回歸分析

女性的WBC增加的可能性是男性的0.635倍，(95%CI：0.381～1.057),χ2=3.050，P=0.081；年齡每增加一歲，WBC增加的可能性為原來的0.988倍，(95%CI：0.972～1.004),χ2=2.222，P=0.136；間隔時間每增加一周，WBC增加的可能性為原來的1.002倍，(95%CI：0.997～1.006)，χ2= 0.437，P=0.509；以血小板捐獻量為41 U組為對照組，血小板捐獻量為10～20 U的組WBC增加的可能性是對照組的1.720倍，(95%CI：1.136～2.605)，χ2=13.737，P=0.010；血小板捐獻量為21～30 U的組WBC增加的可能性是對照組的1.504倍，(95%CI：0.987～2.293),χ2=3.603，P=0.058；血小板捐獻量為31-40 U的組WBC增加的可能性是對照組的0.955倍，(95%CI：0.584～1.563)，χ2=0.033，P=0.227；見表5。

表5 影響連續(xù)捐獻血小板后白細胞變化值的因素的有序多分類Logistic回歸分析結(jié)果*

2.6 連續(xù)捐獻血小板后紅細胞計數(shù)變化情況的影響因素有序多分類Logistic回歸分析

女性的RBC增加的可能性是男性的0.791倍，(95%CI：0.488～1.280),χ2=0.912，P=0.339；年齡每增加一歲，RBC增加的可能性為原來的0.993倍，(95%CI：0.977～1.008),χ2=0.868，P=0.352；間隔時間每增加一周，RBC增加的可能性為原來的1.005倍，(95%CI：1.000～1.009)，χ2=4.730，P=0.030；以血小板捐獻量為41 U組為對照組，血小板捐獻量為10～20 U的組RBC增加的可能性是對照組的1.091倍，(95%CI：0.734～1.621)，χ2=0.185，P=0.667；血小板捐獻量為21～30 U組的RBC增加的可能性是對照組的1.140倍，(95%CI：0.762～1.706)，χ2=0.408，P=0.523；血小板捐獻量為31～40 U組的RBC增加的可能性是對照組的1.004倍，(95%CI：0.634～1.592)，χ2<0.000 1，P=0.985；見表6。

表6 影響連續(xù)捐獻血小板后紅細胞變化值的因素的有序多分類Logistic回歸分析結(jié)果*

3 討 論

從2012年7月最新實施獻血者健康檢查要求以來，國內(nèi)外不少采供血機構(gòu)開展了針對多次頻繁機采血小板對獻血者健康影響的研究。來祝檁等[4]對70名獻血者為期5個月的研究發(fā)現(xiàn)血小板捐獻間隔期在14天的情況下，血小板、白細胞及紅細胞計數(shù)與獻血前比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義；吳次寧等[5]在2012年機采血小板獻血者獻血間隔期改變后,外周靜脈血血小板計數(shù)仍在正常范圍內(nèi)，但趨于降低，但參數(shù)的變化不會影響捐獻血小板；鄭翠萍等[6]通過1年內(nèi)捐獻血小板多次獻血者的首次和末次采集外周血常規(guī)發(fā)現(xiàn)WBC比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義，Plt和RBC無統(tǒng)計學(xué)差異；林綺文等[7]2015年對發(fā)現(xiàn)498名相隔兩周捐獻機采血小板的獻血者，最后一次機采血小板之前外周血小板計數(shù)與第一次機采前、正常參考范圍相比差異在統(tǒng)計學(xué)上無意義，外周血紅細胞數(shù)和白細胞數(shù)無顯著變化；本研究結(jié)果與上述研究結(jié)果基本相符，即連續(xù)捐獻機采血小板后獻血者外周血血細胞計數(shù)會有一定的波動，但均在正常范圍內(nèi)波動。謝桂蕓等[8]發(fā)現(xiàn)不少于2周間隔期1年內(nèi)獻血小板20次以內(nèi)獻血者，引入年齡、性別及獻血治療量因素，血小板計數(shù)在正常范圍內(nèi)波動，但未納入紅細胞和白細胞計數(shù)的波動情況。有的研究甚至可能出現(xiàn)與本研究結(jié)果不一致的情況，如Lazarus等[9]發(fā)現(xiàn)持續(xù)的捐獻血小板的獻血者會表現(xiàn)出血小板計數(shù)的持續(xù)下降，但這種下降并不會有臨床表現(xiàn)。由上可以得出，已有的研究結(jié)果并不一致，這可能與研究對象較少，不具有代表性，或獻血次數(shù)較少與獻血次數(shù)較多的人群出現(xiàn)不同的結(jié)果或未對獻血量進行討論或?qū)ρ芯扛櫟臅r間較短，無法獲得多次連續(xù)捐獻機采血小板對獻血者外周血血細胞計數(shù)的影響。

本研究跟蹤時間較長，達32個月；研究對象有849名之多；且將研究期間內(nèi)的血小板捐獻量和調(diào)查期間第一次與最后一次獻血間隔時間考慮在內(nèi)。本研究結(jié)果顯示，連續(xù)多次血小板獻血者血細胞計數(shù)均在正常范圍內(nèi)波動，但部分獻血者的波動情況較大，可能受獻血者個體差異或偶然因素影響而造成較大的差異。本研究結(jié)果顯示：總體來說研究期間連續(xù)血小板獻血者外周血PLt有明顯增加趨勢(t=-8.58，P<0.001)；白細胞總體來說有明顯減少趨勢(t=5.348，P<0.001)；紅細胞無明顯改變趨勢(t=0.515，P=0.607)；從有序多分類Logistic回歸分析結(jié)果來看，PLt的變化值與獻血者年齡、性別以及第一次與最后一次獻血的間隔期無明顯關(guān)系，P>0.05；有研究結(jié)果表明[10]，連續(xù)二次捐獻血小板的間隔期在7～14天，血小板計數(shù)基本能恢復(fù)正常，這個結(jié)果可以支持本研究，本研究的所有獻血者獻血間隔期均在≥14天，間隔期對血小板的計數(shù)無明顯影響；但是與血小板捐獻量41U及以上比起來，血小板捐獻量在≤30U的獻血者，血小板計數(shù)增加的可能性相對較少，換言之，血小板捐獻量越大，血小板計數(shù)增加的可能性就越大(血小板捐獻量為10～20 U，χ2=13.737，P<0.001；血小板捐獻量為21～30 U，χ2=7.491，P=0.006)。任素玲等[11]發(fā)現(xiàn)獻血者多次(捐獻時間間隔大于等于1個月)適量的捐獻血小板,對骨髓紅細胞造血功能有刺激的作用，而這與本研究結(jié)果部分獻血者的血小板計數(shù)是減少不符；這可能是因為血小板捐獻量也影響著造血刺激強度以及血細胞的再生速度。本研究表明，獻血者年齡、性別及獻血間隔期對白細胞計數(shù)的改變無關(guān)，P>0.05，但是與血小板捐獻量41 U及以上比起來，血小板捐獻量在10～20 U的獻血者，白細胞計數(shù)增加相對較大，OR=1.720，95%CI=1.136～2.605，P=0.010；獻血者年齡、性別對紅細胞計數(shù)的改變無關(guān)，P>0.05，第一次與最后一次獻血間隔期越長，紅細胞計數(shù)增加的越多，OR=1.005，95%CI=1.000～1.009，P=0.030；但是與血小板捐獻量并無明顯關(guān)系。

綜上所述，本研究認為在一定時期內(nèi)，血小板捐獻量與外周血細胞計數(shù)的變化值相關(guān)，而如何采用適當?shù)姆椒ㄕ业綄ρ毎嫈?shù)有影響的血小板捐獻量閾值，將有可能會為我們未來針對不同獻血者采用不同的血液檢測標準提供更精確的要求。但是血細胞計數(shù)的波動情況是一直存在的，而不論其是否為獻血者，本研究發(fā)現(xiàn)獻血者外周血的波動是在正常范圍內(nèi)呈一定趨勢的，而這種波動趨勢是由于獻血者生理原因波動還是捐獻血小板導(dǎo)致的，尚待進一步研究。隨機對照試驗?zāi)軌蜉^好地消除研究對象本身因素對因變量的影響，因此下一步，我們將采用此方法對一年內(nèi)血小板捐獻量達國家標準最大量且獻血間隔期均為14天的獻血者進行長時間跟蹤，以了解血小板捐獻量以及獻血間隔期對獻血者外周血血細胞計數(shù)的影響。我們認為連續(xù)捐獻機采血小板獻血者外周血血細胞計數(shù)的影響因素，是多方面，多層次和多維度的，甚至是動態(tài)的，而現(xiàn)有的很多研究能納入的數(shù)據(jù)卻是保留在不同的橫切面上，未來的研究可更加深入的針對不同間隔期、不同血小板捐獻量對獻血者外周血血細胞計數(shù)變化情況進行研究，甚至更應(yīng)該要納入那些因為檢測不合格而被延遲的獻血者。

綜上所述，多次長期捐獻血小板對獻血者外周血細胞計數(shù)無明顯影響，但可能會受到不同血小板捐獻量的影響。這提示在未來對于不同血小板捐獻量的獻血者在血細胞計數(shù)波動較大的情況下應(yīng)給予有針對性的指導(dǎo)與健康檢查要求。