羅 永 周世強(qiáng) 何勝山 韋 華 孫萌萌 黃 炎 張和民

(中國大熊貓保護(hù)研究中心，大熊貓國家公園珍稀動(dòng)物保護(hù)生物學(xué)國家林業(yè)和草原局重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，都江堰，611830)

育幼行為是動(dòng)物為了延續(xù)自身基因和拓展種群規(guī)模的一種必要手段，親代的照顧對幼仔的生存和行為發(fā)育有著重要作用[1]。大熊貓(Ailuropodamelanoleuca)是我國特有的珍稀瀕危物種。在繁育方面，雄性大熊貓只參加交配，而育幼工作全部由雌性負(fù)責(zé)，是典型的單親育幼物種[2]。由于大熊貓初生幼仔十分脆弱，身體質(zhì)量是母獸質(zhì)量的一千分之一左右[3]，除能發(fā)出洪亮的叫聲外，視覺、聽覺、嗅覺和運(yùn)動(dòng)能力都十分低下，因此出生幼獸完全依賴于母獸的照顧[4]。從出生到4月齡，幼仔除了必要的進(jìn)食、飲水和排泄外，大部分時(shí)間會(huì)一直和母獸呆在巢穴內(nèi)，這段時(shí)間被稱為巢穴期[5]。在1月齡內(nèi)，母獸每日離開巢穴時(shí)間不會(huì)超過1 h；1月齡后，離開時(shí)間不會(huì)超過6 h[5]。這一時(shí)期是觀察母獸育幼行為，評(píng)價(jià)其育幼能力的絕佳時(shí)段。

隨著“三難”問題的攻克，大熊貓的圈養(yǎng)種群已能自我維持[6]。為了復(fù)壯野外小種群和避免圈養(yǎng)種群的退化，中國大熊貓保護(hù)研究中心先后開始了大熊貓野化放歸和野外引種項(xiàng)目[7]。母獸帶仔野化培訓(xùn)是大熊貓野化項(xiàng)目的核心內(nèi)容，挑選帶仔母獸又是這核心內(nèi)容的關(guān)鍵一步。在行為生態(tài)學(xué)上，大熊貓母獸育幼能刺激幼仔的社會(huì)行為發(fā)育[8]，并且很多生存技能都會(huì)在育幼期間由母獸傳授給幼仔[9]。因此，挑選合適的母獸對放歸后的亞成體在野外的生存與繁衍尤為重要。從野化培訓(xùn)項(xiàng)目開展至今，對圈養(yǎng)母獸的挑選都是根據(jù)飼養(yǎng)繁育經(jīng)驗(yàn)進(jìn)行的定性挑選，缺乏科學(xué)的定量標(biāo)準(zhǔn)。目前，還未見到對不同來源大熊貓母獸育幼能力比較的相關(guān)研究報(bào)道。“草草”是于2002年野外救助回來的亞成體。其后代“淘淘”已在野外生存了5年[10]，并且2019年“草草”在野外成功引種并產(chǎn)仔[11]。本研究旨在巢穴期將 “草草”和參加野化培訓(xùn)項(xiàng)目的圈養(yǎng)出生母獸的育幼能力進(jìn)行比較，揭示兩者之間的差異性，意在為培訓(xùn)母獸定量選擇標(biāo)準(zhǔn)的建立累積研究資料，也為今后在培訓(xùn)圈養(yǎng)出生母獸育幼能力方面提供一定的參考。

1 研究方法

1.1 研究對象和研究地點(diǎn)

研究對象為2018年參加野化培訓(xùn)的圈養(yǎng)出生大熊貓母獸“博斯”“平平”“翠翠”以及當(dāng)年野外引種成功的大熊貓“草草”(表1)。

研究地點(diǎn)位于四川省臥龍國家級(jí)自然保護(hù)區(qū)內(nèi)的中國大熊貓保護(hù)研究中心核桃坪野化放歸培訓(xùn)基地。在2018年7月—2019年1月整個(gè)研究期間，所有研究對象都在一期培訓(xùn)圈內(nèi)。每個(gè)培訓(xùn)圈由兩個(gè)內(nèi)室(3 m×6 m)和1個(gè)活動(dòng)場(40 m×60 m)組成，內(nèi)室為水泥圈舍，活動(dòng)場依自然環(huán)境圍建而起，除水泥投食地、木棲架外都為野生環(huán)境。4只大熊貓都選擇內(nèi)室為巢穴，除60日齡以后“翠翠”將幼仔叼出到離內(nèi)室不遠(yuǎn)的活動(dòng)場一隅繼續(xù)育幼。

1.2 數(shù)據(jù)采集

所有培訓(xùn)圈都安裝有浙江海康威視公司的“高清網(wǎng)絡(luò)攝像機(jī)監(jiān)視系統(tǒng)”，能全面監(jiān)視內(nèi)室和外室，并能進(jìn)行高清錄像和高質(zhì)量錄音。在研究對象產(chǎn)仔的次日我們選擇每天8：00—9：00、16：00—17：00以及20：00—21：00這3個(gè)時(shí)段進(jìn)行高清錄像和錄音。選擇1 d中的這3個(gè)時(shí)段是為了避開飼養(yǎng)人員對圈舍的打掃和獸醫(yī)對大熊貓的例行檢查，確保研究期間無人打擾。用移動(dòng)硬盤從監(jiān)視系統(tǒng)內(nèi)保存并收集了4個(gè)研究對象110 d共計(jì)1 320 h的影像資料。

1.3 行為觀測和行為譜

提取影像資料數(shù)據(jù)采用的是焦點(diǎn)動(dòng)物取樣法和連續(xù)記錄法。將1 h的錄像資料分為60 min，觀察記錄研究對象在每1 min內(nèi)各種行為的持續(xù)時(shí)間和發(fā)生的次數(shù)。1個(gè)狀態(tài)行為至少持續(xù)5 s以上，而2個(gè)獨(dú)立的行為間隔時(shí)間也必須持續(xù)5 s以上。參照《圈養(yǎng)大熊貓行為研究及其方法》[12]，重點(diǎn)對以下行為進(jìn)行記錄(表2)。

表1 研究對象的基本信息

表2 重點(diǎn)觀察的行為類型和描述

1.4 數(shù)據(jù)分析

所有數(shù)據(jù)應(yīng)用SPSS 19.0軟件進(jìn)行處理，以“無響應(yīng)”“滯后安撫”“舔仔”這3個(gè)行為再加上“幼仔完全暴露”的時(shí)間作為育幼能力的指標(biāo)進(jìn)行分析。用單個(gè)樣本K-S檢驗(yàn)法對所有樣本進(jìn)行正態(tài)性檢驗(yàn)，結(jié)果為數(shù)據(jù)不符合正態(tài)分布。于是運(yùn)用非參數(shù)檢驗(yàn)Kruskal-Waillis檢驗(yàn)(后文簡寫為K-W)對4只大熊貓?jiān)谏鲜鲇啄芰χ笜?biāo)下的差異性進(jìn)行分析，有顯著差異性就用Mann-WhitneyU比較方法(后文簡寫為M-W)進(jìn)行兩兩比較。以P<0.050 作為顯著拒絕H0假設(shè)的標(biāo)準(zhǔn)說明具有顯著差異，P<0.010作為極顯著拒絕H0假設(shè)說明具有極顯著差異。

2 結(jié)果與分析

2.1 “無響應(yīng)”行為

結(jié)果表明(圖1)：“草草”“博斯”“翠翠”和“平平”的“無響應(yīng)”行為分別共計(jì)88次、104次、94次及64次。4只大熊貓?jiān)凇盁o響應(yīng)”行為上沒有顯著性差異(K-W：H=6.569，P=0.087)。

2.2 “滯后安撫”行為

“草草”“博斯”“翠翠”和“平平”的“滯后安撫”行為分別共計(jì)10次、43次、18次及28次。4只大熊貓?jiān)凇皽蟀矒帷毙袨樯嫌袠O顯著性差異(K-W：H=13.185，P=0.004)(圖2)。經(jīng)過兩兩比較，“草草”與“博斯”在“滯后安撫”行為上有極顯著性差異(M-W：P=0.001)，與“翠翠”(M-W：P=0.127)無顯著性差異，和“平平”(M-W：P=0.009)有極顯著性差異。“博斯”的“滯后安撫”行為與“翠翠”有顯著性差異(M-W：P=0.038)，和“平平”沒有差異(M-W：P=0.363)?！按浯洹焙汀捌狡健痹凇皽蟀矒帷毙袨樯蠜]有顯著性差異(M-W：P=0.233)。

圖1 “無響應(yīng)”行為對比圖Fig.1 “No response” behavior comparison 注：標(biāo)有不同大寫字母表示組間差異極顯著，標(biāo)有不同小寫字母表示組間差異顯著，標(biāo)有相同小寫字母表示組間差異不顯著，按字母表順序來比較，下同 Note：Different uppercase letters indicate very significant differences between groups，different lowercase letters indicate significant differences between groups，and the same lowercase letters indicate no significant differences between groups.Compare in alphabetical order，the same below

圖2 “滯后安撫”行為對比圖Fig.2 Comparison of “l(fā)agging appeasement”

2.3 “舔仔”行為

“草草”“博斯”“翠翠”和“平平”的“舔仔”行為分別共計(jì)1 733次、1 399次、1 643次及1 070次。4只大熊貓?jiān)凇疤蜃小毙袨樯弦灿袠O顯著性差異(K-W：H=25.046，P=0.00)(圖3)。其中，“草草”的“舔仔”行為極顯著不同于“平平”(M-W：P=0.000)，“草草”與“博斯”(M-W：P=0.050)，以及“翠翠”(M-W：P=0.653)在“舔仔”行為上沒有顯著差異?！安┧埂焙汀按浯洹痹凇疤蜃小毙袨樯蠜]有差異(M-W：P=0.102)，與“平平”有極顯著性差異(M-W：P=0.008)。“翠翠”的“舔仔”行為極顯著不同于“平平”(M-W：P=0.000)。

2.4 “幼仔完全暴露”時(shí)間

“草草”“博斯”“翠翠”和“平平”的“幼仔完全暴露”持續(xù)時(shí)間分別共計(jì)2 322 min、7 261 min、7 153 min及6 524 min。如圖4，4只大熊貓?jiān)凇坝鬃型耆┞丁睍r(shí)間上有極顯著性差異(K-W：H=31.043，P=0.000)。其中，“草草”在“幼仔完全暴露”的每日3 h內(nèi)持續(xù)時(shí)間上都極顯著地不同于“博斯”(M-W：P=0.005)、“翠翠”(M-W：P=0.000)和“平平”(M-W：P=0.000)?！安┧埂焙汀按浯洹?M-W：P=0.640)，“博斯”和“平平”(M-W：P=0.974)在“幼仔完全暴露”時(shí)間上沒有顯著性差異?！按浯洹焙汀捌狡健痹凇坝鬃型耆┞丁睍r(shí)間上也沒有顯著性差異(M-W：P=0.531)。

圖3 “舔仔”行為對比圖Fig.3 “Licking”behavior comparison

圖4 “幼仔完全暴露”時(shí)間對比圖Fig.4 “Cup completely exposed” time comparison

3 討論

除了在“無響應(yīng)”行為這一指標(biāo)上，4只大熊貓沒有顯著性差異。在其他3項(xiàng)指標(biāo)上，4只大熊貓都表現(xiàn)出了顯著性差異。大熊貓幼仔在巢穴期，特別是在前1個(gè)月，身體十分脆弱。這段時(shí)間的幼仔缺乏視力和行動(dòng)能力，只能依靠叫聲同母獸進(jìn)行交流[13-14]。幼仔為了引起母獸的注意，它們叫聲的基礎(chǔ)頻率都很高甚至能達(dá)到1 000 Hz[15]，并且聲音洪亮[16]。幼仔叫聲內(nèi)包含有自身覺醒程度和生理狀態(tài)的信息[17-18]，能夠讓母獸作出正確的育幼行為如調(diào)姿、舔仔等[19]。作為研究對象的4只大熊貓都具有多年的育幼經(jīng)驗(yàn)，對幼仔的叫聲都非常敏感。因此，4只母獸在“無響應(yīng)”行為這一指標(biāo)上沒有差異性。并且，它們的偏離值很少，絕大多數(shù)每日無響應(yīng)次數(shù)不會(huì)超過3次，這符合我們選擇大熊貓母獸參加野化培訓(xùn)的基本要求。

在“滯后安撫”行為和“舔仔”行為上，4只大熊貓表現(xiàn)出了極顯著差異性?！皽蟀矒帷毙袨槭悄斧F對幼仔叫聲反應(yīng)速度的一種體現(xiàn)。母獸表現(xiàn)出了“滯后安撫”說明母獸的注意力沒有完全放在幼仔身上，在第一時(shí)間沒有作出應(yīng)有的育幼反應(yīng)。4只大熊貓的“滯后安撫”行為箱型圖都呈線條狀，其中“草草”的最大值在零點(diǎn)上，其他3只大熊貓的最大值在1左右。這說明對于有育幼經(jīng)驗(yàn)的母獸，“滯后安撫”發(fā)生的次數(shù)很少。但“博斯”在“滯后安撫”上是4只母獸中“滯后安撫行為”發(fā)生次數(shù)最多的，表現(xiàn)稍遜于其他3只母獸?！疤蜃小笔谴笮茇埬斧F在育幼行為中最為主動(dòng)的育幼行為之一，“舔仔”能幫助幼仔清潔身體濕潤毛發(fā)，為幼仔提供健康的生存環(huán)境[20]?！安莶荨钡奶蜃行袨樵谥形粩?shù)、最大值以及總數(shù)上都高于其他3只母獸，而“平平”的“舔仔”行為是4只大熊貓中表現(xiàn)得最差的。在巢穴期的第1個(gè)月，幼仔胎毛還未脫盡，沒有完整的被毛[21]，保暖完全靠母獸來維持。母獸身體對幼仔的遮蓋能很好地為幼仔保暖。此時(shí)，“幼仔完全暴露時(shí)間”可以作為母獸為幼仔提供保暖能力的指標(biāo)。2個(gè)月以后，幼仔具備一定的攀爬能力，且已發(fā)育出完整的被毛，御寒能力大大增強(qiáng)[21]，對母獸來為其提供外環(huán)境的溫度和濕度的需求已降低了很多。母獸離開幼仔的時(shí)間會(huì)逐漸增加。在自然環(huán)境中，大熊貓亞成體會(huì)受到諸如云豹(Neofelisnebulosa)、豺(Cuonalpinus)等天敵的威脅[22]?！坝鬃型耆┞丁睍r(shí)間越長遭受天敵危害的可能性就越大。2月齡以后，“幼仔完全暴露”時(shí)間能反應(yīng)出母獸對幼仔的看顧程度。因此，對幼仔的生存和發(fā)育來說這是一項(xiàng)非常重要的育幼能力指標(biāo)?！安莶荨痹谶@一指標(biāo)上有別于前3項(xiàng)指標(biāo)，“幼仔完全暴露”時(shí)間是極顯著地不同于另外3只圈養(yǎng)母獸。并且，3只圈養(yǎng)母獸之間在這一指標(biāo)上沒有顯著差異，而在前3項(xiàng)指標(biāo)上都有與“草草”育幼能力沒有明顯差別的圈養(yǎng)母獸存在。圈養(yǎng)母獸在“幼仔完全暴露”每日3 h內(nèi)的持續(xù)時(shí)間的中位數(shù)和最大值都是“草草”的3倍左右，圈養(yǎng)母獸的中位數(shù)和最大值彼此相差不大。以上，顯然說明了圈養(yǎng)母獸育幼能力的短板就是在“幼仔完全暴露”時(shí)間上?！安莶荨笔菑囊巴饩戎貋淼膩喅审w，它的這種育幼能力可能是來自野外母獸的傳授[9]。野生大熊貓對幼仔的保護(hù)和關(guān)懷能力很強(qiáng)[23]。圈養(yǎng)母獸對幼仔的看顧能力低下可能是因?yàn)闆]在野外生存過，對亞成體的天敵動(dòng)物沒有形成危機(jī)感，無法促使它們表現(xiàn)出對幼仔應(yīng)有的敏感性。

綜上所述，“草草”的育幼能力強(qiáng)于3只圈養(yǎng)母獸，特別是在“幼仔完全暴露”時(shí)間這一育幼能力指標(biāo)上表現(xiàn)得尤其突出。這為我們以后提高野化培訓(xùn)圈養(yǎng)大熊貓母獸育幼能力指明了方向，需要加強(qiáng)圈養(yǎng)母獸對幼仔的看顧能力?？梢钥紤]通過大熊貓?zhí)鞌车臍馕逗吐曇魜泶碳つ斧F，激發(fā)它們潛在的本能來提高圈養(yǎng)母獸對幼仔的看顧能力。我們會(huì)在今后的實(shí)際飼養(yǎng)和科研工作中進(jìn)行探索，以期能提高圈養(yǎng)母獸的育幼能力。這次研究的樣本數(shù)量還是較少，隨著大熊貓野化培訓(xùn)工作的開展，我們會(huì)不斷積累更多的數(shù)據(jù)資料，希望能在未來建立起科學(xué)定量的培訓(xùn)母獸選擇標(biāo)準(zhǔn)。