張玉梅，李俊，何鈺,2，廖朝選,2*

（1.貴州健安德科技有限公司，貴州貴陽 550014；2.貴州省分析測試研究院，貴州貴陽 550014）

蛞蝓、蝸牛、福壽螺等軟體動物常見于甘藍(lán)、辣椒、水稻等作物，繁殖力強(qiáng)而天敵較少，防治主要依靠化學(xué)藥劑。四聚乙醛的化學(xué)名稱為2,4,6,8-四甲基-1,3,5,7-四氧雜環(huán)辛烷，可促使螺體內(nèi)乙酰膽堿酯酶大量釋放，破壞螺體內(nèi)特殊的黏液，使螺體迅速脫水，神經(jīng)麻痹，并分泌黏液而中毒死亡，常用于甘藍(lán)、水稻等作物的軟體動物防治[1]。大量的四聚乙醛在田間施用后，可能隨田水流動、雨水沖刷等進(jìn)入水體，對水生態(tài)環(huán)境產(chǎn)生破壞，建立水中的殘留分析方法很有必要[2]。對于四聚乙醛的分析，早期的滴定法由于操作煩瑣，重現(xiàn)性差，現(xiàn)已不再使用[3]。黃志芳[4]、鮑群[5]采用氣相色譜儀建立了四聚乙醛產(chǎn)品中有效成分的分析方法，張雪燕等[6]采用氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀建立了煙草中、土壤中的殘留分析方法。但由于水體基質(zhì)特殊，采用氣相色譜法需要萃取、凈化等煩瑣的操作，也會使用三氯甲烷等毒性較高的有機(jī)試劑，液相色譜或液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法可直接對水樣進(jìn)行測定，具有明顯的優(yōu)勢。當(dāng)前，Brown P等[7]已建立了四聚乙醛的高效液相色譜分析方法，馬琳等[8]建立了復(fù)雜基質(zhì)中四聚乙醛殘留量的QuEChERS-液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法分析方法，但四聚乙醛在水中的檢測方法較少。本研究旨在建立水中四聚乙醛的快速、準(zhǔn)確的檢測方法，用于水環(huán)境中四聚乙醛殘留量的測定。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

Agilent 1260-6460C液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜儀器（ LCMS/MS）；TLE204E/02電子天平，METTLER TOLEDO。

四聚乙醛標(biāo)樣，質(zhì)量分?jǐn)?shù)為97.2%，Dr.Ehrenstorfe；80%四聚乙醛可濕性粉劑，徐州諾特化工有限公司；乙腈，色譜純，默克股份有限公司；甲酸，色譜純，賽默飛世爾科技（中國）有限公司；去離子水，實驗室自制，電阻率為18.2 MΩ×cm。

1.2 樣品制備

1.2.1 標(biāo)準(zhǔn)樣品制備

稱取0.010 4 g四聚乙醛標(biāo)樣置于100 mL容量瓶中，用乙腈溶解并定容至刻度，得濃度為101.09 mg/L的四聚乙醛標(biāo)樣儲備液。分別吸取適當(dāng)體積的標(biāo)樣儲備液，用乙腈稀釋配制成濃度為2.0 μg/L、5.0 μg/L、10.0 μg/L、20.0 μg/L、50.0 μg/L 和100.0 μg/L的系列標(biāo)準(zhǔn)樣品溶液，備用。

1.2.2 已知樣品制備

稱取0.012 6 g 80%四聚乙醛可濕性粉劑于稱量瓶中，然后用1 000 mL去離子水溶解，得到10.08 mg a.i./L的試驗液，用乙腈稀釋500倍待測。

1.2.3 加標(biāo)樣品制備

分別取101.09 mg/L的四聚乙醛標(biāo)準(zhǔn)儲備液20 μL、200 μL于1 L容量瓶中，用去離子水稀釋至刻度，得到添加質(zhì)量為2.02 μg、10.11 μg的基質(zhì)加標(biāo)樣品。

1.3 儀器條件

1.3.1 液相色譜條件

Agilent Extend-C18 RRHD色譜柱（2.1 mm×100 mm，1.8 μm），流動相為A（乙腈）-B（0.1%甲酸水），進(jìn)樣體積 3.0 μL，流速 0.4 mL/min，柱溫 40 ℃，運(yùn)行時間1.5 min。梯度洗脫程序：A相（0～1.0 min，60%；1.0～1.1 min，60%～95%；1.1～1.2 min，60%～95%；1.2～1.3 min，95%～60%；1.4～1.5 min，60%），B相自動補(bǔ)充。

1.3.2 MS操作條件

離子源為AJS ESI源，正離子模式。離子源參數(shù)：干燥氣為N2；干燥氣溫度300 ℃；干燥氣流速11 L/min；鞘氣N2；鞘氣溫度200 ℃；鞘氣流速12 L/min；霧化器壓力413.68 kPa；噴嘴電壓0 V；毛細(xì)管電壓3 500 V；監(jiān)測模式MRM，監(jiān)測參數(shù)見表1。

1.4 測定

待儀器基線平穩(wěn)后，在“1.3”儀器操作條件選擇2.0 μg/L的標(biāo)準(zhǔn)溶液連續(xù)測定，在前后兩次測定保留時間（Time）和峰面積（Area）的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）均低于1.5%時，進(jìn)行樣品測定。

2 結(jié)果與討論

2.1 流動相選擇與優(yōu)化

參照Brown等[7]和馬琳等[8]分析方法的流動相，選擇乙腈-水作為流動相，在水中添加甲酸顯著增強(qiáng)吸收。在乙腈為60%、0.1%甲酸水為40%條件下，四聚乙醛在0.46 min出峰，在1.5 min后測定另一樣品出現(xiàn)一定干擾，調(diào)整乙腈比例進(jìn)行沖洗后，干擾降低，故流動相程序設(shè)置為梯度洗脫。在該條件下，四聚乙醛有很好的響應(yīng)與峰形，對下一次進(jìn)樣無干擾，標(biāo)準(zhǔn)譜圖見圖1。

圖1 四聚乙醛的LC-MS/MS標(biāo)準(zhǔn)圖譜

表1 MRM監(jiān)測離子參數(shù)

2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線制作

以上述系列標(biāo)準(zhǔn)樣品溶液濃度為橫坐標(biāo)，對應(yīng)的峰面積為縱坐標(biāo)，制作校正曲線，線性方程為Y=142.254 6X+82.032 9，R2=0.999 5。結(jié)果表明，該方法中四聚乙醛在2.0～100.0 μg/L濃度范圍內(nèi)具有良好的線性關(guān)系。校準(zhǔn)曲線見圖2。

圖2 四聚乙醛的校正曲線

2.3 檢測限（LOD）和定量限（LOQ）

取2.0 μg/L的四聚乙醛標(biāo)準(zhǔn)溶液，按“1.3”儀器分析條件重復(fù)測定6次，根據(jù)S/N≥3，確定檢出限，根據(jù)S/N≥10，確定定量限。結(jié)果表明，在該條件下，四聚乙醛的檢出限為0.027 μg/L，定量限為0.090 μg/L。

2.4 分析方法的精密度

從同一產(chǎn)品中稱取6份試樣，分別在上述樣品處理與儀器操作條件下測定。四聚乙醛的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.30，變異系數(shù)為2.96%，表明其精密度高。

表2 精密度試驗

2.5 加標(biāo)回收試驗

取2.02 μg、10.1 μg的基質(zhì)加標(biāo)樣品各3份，在上述儀器操作條件下測定，四聚乙醛在水中的回收率為99.61%～102.96%，平均回收率為100.26%。詳細(xì)見表3。

表3 回收率測定

3 結(jié)論

采用高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀，以乙腈-0.1%甲酸水為流動相，建立了水中四聚乙醛殘留量的檢測方法。結(jié)果顯示，在2.0～100.0 μg/L的濃度范圍內(nèi)，四聚乙醛具有良好的線性關(guān)系，檢出限和定量限分別為 0.027 μg/L、0.090 μg/L，在添加濃度為 2.0 μg/L、10.0 μg/L時，平均回收率為100.26%。該方法操作簡單、快捷、準(zhǔn)確度高，可用于水中四聚乙醛殘留量的定量分析。