江紅英，黃 立

（1.南陽農(nóng)業(yè)職業(yè)學(xué)院，河南南陽 473003；2.信陽農(nóng)林學(xué)院，河南信陽 464000）

許多研究已對(duì)發(fā)情周期、妊娠期及圍產(chǎn)期外周血中雌激素水平的數(shù)據(jù)曲線模型進(jìn)行了研究，雌激素主要在胎盤合成，妊娠期間在母體和胎兒血液中循環(huán)（李康等，2018 ；夏青等，2017）。在牛和馬中，母體血液中雌激素硫酸鹽雌二醇濃度用來估計(jì)胎兒生長(zhǎng)指標(biāo)，同時(shí)這種胎兒監(jiān)護(hù)方法也被應(yīng)用于豬的早期妊娠診斷（趙樂等，2019）。Horne 等（1983）報(bào)道了授精后20 ～26 d 血漿雌激素硫酸鹽濃度與胎兒數(shù)呈正相關(guān)。牛和馬的母體血漿雌激素硫酸鹽濃度直接反映了胎兒的胎盤功能，因?yàn)檫@些動(dòng)物是單胎生的。相比之下，妊娠母豬血液中的雌激素硫酸鹽濃度是否可以反映胎盤功能還尚不明確。易宏波（2016）報(bào)道，雌激素會(huì)影響仔豬的生存能力，用雌二醇處理的新生仔豬可縮短從產(chǎn)出到開始哺乳的時(shí)間，減少出欄時(shí)間，提高飼養(yǎng)經(jīng)濟(jì)效益。但到目前為止，新生兒仔豬外周血類固醇激素濃度、產(chǎn)仔數(shù)與仔豬臨產(chǎn)后活力之間的關(guān)系尚不清楚。因此，本研究測(cè)量了新生仔豬血液中雌激素硫酸鹽、雌激素酮、雌二醇和孕酮濃度，以闡明類固醇激素濃度、胎盤重量、出生體重、產(chǎn)仔數(shù)和后代活力之間的關(guān)系。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物 試驗(yàn)檢測(cè)了實(shí)驗(yàn)室飼養(yǎng)的18 頭二元雜交母豬所產(chǎn)的178 頭仔豬。母豬被飼養(yǎng)在單獨(dú)的畜欄里，每天喂2.4 kg 商品飼料。人工授精110 d 后開始每日觀察分娩跡象。從妊娠第100 天（分娩前2 周）到分娩時(shí)，每隔2 d 從每頭母豬尾靜脈采集血樣，1700×g 離心15 min，分離血漿，置于-20℃，用于檢測(cè)激素濃度。

新生仔豬在分娩時(shí)自然臍帶破裂，用兩個(gè)夾子夾起臍帶。隨后，用剪刀將胎兒和胎盤剪掉。通過標(biāo)記無血管絨毛膜將每個(gè)胎兒胎盤分開，取足量胎液后測(cè)定胎盤重量。

對(duì)每只新生仔豬進(jìn)行稱重，在分娩后1 h 使用10 mL 的一次性注射器從顱腔靜脈收集3 mL血液。血液以1700×g 離心15 min，血漿保存于-20℃，用于激素測(cè)定。將仔豬分為正常、弱仔和死胎3 組。在178 頭新生仔豬中，有6 頭因?yàn)闊o法區(qū)分胎盤而被排除在胎盤重量計(jì)算之外。因?yàn)闊o法獲取樣本，7 頭新生仔豬的血液被排除在類固醇激素分析之外。因此我們對(duì)18 窩中的165 頭新生仔豬進(jìn)行分析。

1.2 激素分析 采用ELISA 試劑盒測(cè)定樣品中雌激素硫酸鹽、雌激素酮、雌二醇和孕酮濃度。

1.3 數(shù)據(jù)分析 采用SAS 軟件單因素方差分析（ANOVA）來檢驗(yàn)新生仔豬活力或產(chǎn)仔數(shù)對(duì)激素濃度的影響。此外，如果觀察到各組間激素濃度存在顯著差異，則使用Tukey-Kramer 進(jìn)行多重比較。用皮爾遜相關(guān)系數(shù)分析胎盤激素含量與仔豬出生體重、胎盤重量的關(guān)系。P ＜0.05 表示差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同活力仔豬的體重和血漿類固醇水平由表1 可知，比較正常組（152 頭）、弱仔組（6 頭）和死胎組（7 頭）的出生體重、胎盤重量和血漿類固醇激素水平，正常組仔豬出生重和胎盤重量顯著高于其他組（P ＜0.05），其中出生重分別提高41.22% 和39.23%，胎盤重量分別提高34.54% 和38.53%。正常組血漿雌激素硫酸鹽濃度較死胎組顯著提高221.57%（P ＜0.05），但與弱仔組無顯著差異（P ＞0.05）。死胎組血漿雌激素酮、雌二醇和孕酮濃度表現(xiàn)最高（P ＜0.05），其中雌激素銅濃度較正常組顯著提高80.49%（P ＜0.05），雌二醇濃度較正常組和弱仔組分別顯著提高1225%、2171.43%（P ＜0.05），孕酮濃度較正常和弱仔組分別顯著提高170.13%、121.28%（P＜0.05）。正常組和弱仔組雌激素硫酸鹽、雌激素酮、雌二醇和孕酮濃度無顯著差異（P ＞0.05）。

表1 不同活力仔豬的體重和血漿類固醇激素水平

2.2 不同窩產(chǎn)仔豬的仔豬體重和血漿類固醇水平 由表2 可知，產(chǎn)仔數(shù)少的組別較其他兩組顯著提高出生重和胎盤重（P ＜0.05），其中出生重分別提高11.95% 和26.72%，胎盤重分別提高27.07% 和24.28%。產(chǎn)仔數(shù)少的組別仔豬血漿雌激素硫酸鹽、雌激素酮、雌二醇和孕酮濃度分別為23.3、6.6、2.0 和10.7 ng/mL，其中雌激素硫酸鹽、雌激素酮和孕酮濃度顯著高于其他組（P＜0.05），而雌二醇濃度顯著高于高產(chǎn)仔數(shù)組（P＜0.05）。

表2 3 種同窩出生仔豬數(shù)的仔豬體重和血漿類固醇激素水平

2.3 不同產(chǎn)仔數(shù)母豬在分娩前兩周血漿類固醇激素水平 由表3 可知，不同產(chǎn)仔數(shù)的母豬在分娩前兩周血漿雌激素硫酸鹽、雌激素酮、雌二醇和孕酮濃度均無顯著差異（P ＞0.05）。

2.4 同窩生的正常仔豬中胎盤類固醇激素水平 由表4 可知，對(duì)50 頭正常仔豬每克或每個(gè)胎盤類固醇含量甾體激素含量與出生體重的相關(guān)性分析顯示，胎盤雌激素硫酸鹽總含量與出生體重呈顯著正相關(guān)（r=0.52，P ＜0.05），且每克胎盤中雌激素硫酸鹽含量及每個(gè)胎盤雌激素酮含量與出生體重呈顯著正相關(guān)（r=0.37，r=0.30，P ＜0.05）。但胎盤雌二醇和孕酮含量與出生體重均無顯著相關(guān)性（P ＞0.05）。同窩出生仔豬數(shù)小的組別每克及每個(gè)胎盤雌激素硫酸鹽含量較其他兩組顯著提 高107.47%、97.36% 和186.49%、134.46%（P＜0.05），而中等出生仔豬數(shù)的組別每克胎盤雌激素酮和雌二醇含量較高出生仔豬數(shù)組顯著提高108.85% 和95.35%（P ＜0.05）。各組對(duì)胎盤孕酮含量的影響無顯著差異（P ＞0.05）。

表3 不同產(chǎn)仔數(shù)母豬在分娩前兩周血漿類固醇激素水平

表4 同窩生的正常仔豬中胎盤類固醇激素水平

3 討論

研究發(fā)現(xiàn)，弱仔組和死胎組仔豬平均出生和胎盤重量顯著低于正常組，出生重與血液中雌激素硫酸鹽濃度低，雌二醇、雌激素酮和孕酮濃度高的結(jié)果一致。Ogata 等（1996）報(bào)道，虛弱或死亡的犢牛血液中雌激素硫酸鹽濃度較低。并且豬場(chǎng)生產(chǎn)力和經(jīng)濟(jì)效益主要受仔豬出生體重、活力和母豬產(chǎn)仔數(shù)等的影響，因此可假設(shè)新生仔豬的活力與血液類固醇激素濃度、出生體重和胎盤重量有關(guān)。雌激素硫酸鹽反映了胎盤活性，因?yàn)樗怯商ケP雌激素酮合成的，死胎組血漿雌激素硫酸鹽濃度低提示胎盤功能亢進(jìn)。此外，死胎組血雌激素酮、雌二醇和孕酮水平升高可能是胎盤功能退化的表現(xiàn)，因?yàn)樘ケP內(nèi)存在胎兒血液類固醇激素的代謝。但對(duì)于新生仔豬的活力和低出生體重，雌激素硫酸鹽減少的機(jī)制需要進(jìn)一步研究。

窩產(chǎn)仔數(shù)較小的組血漿中雌激素硫酸鹽濃度顯著高于其他組，同時(shí)其出生體重和胎盤重量也顯著高于其他組。Tamada 等（1998）報(bào)道，卵巢切除增加了妊娠大鼠子宮角切口的胎盤重量，因?yàn)樵诋a(chǎn)仔數(shù)較少的情況下，每個(gè)胎兒的宮內(nèi)生產(chǎn)能力更大，從而促進(jìn)了胎盤的發(fā)育。產(chǎn)仔數(shù)越少，血漿中雌激素酮、雌二醇和孕酮濃度越高，但3 種不同窩產(chǎn)仔數(shù)的母豬在妊娠前2 周血漿的類固醇激素水平無顯著差異。此外，窩產(chǎn)仔數(shù)小的組中胎盤中雌激素硫酸鹽濃度也顯著高于其他組。這些結(jié)果表明，雌激素硫酸鹽、雌激素酮、雌二醇和孕酮水平反映了胎兒胎盤合成和結(jié)合的功能水平。此外，當(dāng)分娩臨近時(shí)，母豬血液中的雌激素水平會(huì)急劇升高，這一現(xiàn)象有助于母豬分娩和新生仔豬的生長(zhǎng)發(fā)育，可提高豬場(chǎng)經(jīng)濟(jì)效益。關(guān)于母豬血漿中類固醇激素水平在產(chǎn)仔數(shù)上的差異可能是由于母豬血液樣本在分娩前2 周采集的，而新生仔豬是在出生后不久采集的。

4 結(jié)論

本研究結(jié)果表明，新生仔豬活力與仔豬血漿雌激素硫酸鹽、雌激素酮、雌二醇和孕酮濃度及仔豬出生重和胎盤重量有關(guān)，同時(shí)，同窩仔豬數(shù)對(duì)新生仔豬血漿類固醇激素水平具有很大的影響。