楊仕群，陽 剛

（宜賓職業(yè)技術(shù)學(xué)院，四川宜賓 644003）

當(dāng)今養(yǎng)豬業(yè)面臨的最嚴(yán)重的兩種疾病為豬繁殖和呼吸綜合征病毒（PRRS）和豬流行性腹瀉病毒（PED）。據(jù)Holtkamp 等（2013）報道，每年僅PRRS 病毒就給美國養(yǎng)豬業(yè)造成6.64 億美元的損失，而PED 會造成數(shù)百萬頭的仔豬損失。李明波等（2018）報道，在仔豬中，PRRS 病毒會降低生長性能和飼料效率，并且會損害腸道健康。由于PRRS 抑制免疫反應(yīng)能力，這些豬也有增加繼發(fā)性病毒和細(xì)菌感染的可能性。與PRRS 病毒不同，PED 病毒定位于豬的胃腸道，引起水樣腹瀉并伴有嚴(yán)重的絨毛萎縮，導(dǎo)致營養(yǎng)物質(zhì)消化吸收不良（楊云喬，2017）。健康受到挑戰(zhàn)的豬通常表現(xiàn)出食欲和采食量下降，并以組織特異性的方式改變營養(yǎng)利用（Johnson，2002）。因此，本研究旨在評估PRRS 和PED 及其聯(lián)合感染對豬生長性能和養(yǎng)分表觀消化率的影響。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動物飼養(yǎng)與病毒感染 試驗(yàn)將平均體重為（16±0.96）kg 的84 頭青年母豬隨機(jī)分為4組，每組7 個重復(fù)，每個重復(fù)3 頭豬。各組分別做如下處理：對照組、PRRS 組（感染PRRS 病毒）、PED 組（感染PED 病毒）、PRP 組（同時感染PRRS 和PED 病毒）。試驗(yàn)期間豬采食的日糧組成及營養(yǎng)水平見表1。經(jīng)過4 d 適應(yīng)時期后，在接種第0 天，PRRS 和PRP 組豬進(jìn)鼻接種500 個基因組單位的PRRS 病毒，對照組和PED 組在第0天接種生理煙酸。接種第14 天PED 和PRP 組通過胃灌服100 個基因組單位的PED 病毒，而對照組和PRRS 組接種生理鹽水。

表1 日糧組成及營養(yǎng)水平

1.2 樣品采集與分析 分別在接種后的0、7、14和21 d 記錄采食量和稱量體重，數(shù)據(jù)用于計(jì)算平均日增重、平均日采食量和飼料報酬。分別在接種后9、14 和21 d 收集10 mL 血液樣品和采集糞便樣品，凝血后分離血清，-80℃保存。樣品用于實(shí)時定量PCR（PRRS 病毒和PED 病毒）和血清學(xué)分析（ELISA 試劑盒分析PRRS X3 抗體，結(jié)果用樣本總數(shù)/ 陽性樣本數(shù)表示）。接種后21 d，血清樣品用試劑盒法測定尿素氮、胰島素、胰高血糖素、葡萄糖和非酯化脂肪酸含量。

1.3 消化試驗(yàn) 收集接種后18 ～20 d 的糞便樣品，同時收集回腸遠(yuǎn)端最后100 cm 處的回腸消化液約100 mL，冷凍干燥后進(jìn)行分析。混合糞便和飼料樣本用于分析氮、干物質(zhì)、總能和有機(jī)物含量，以確定消化道表觀消化率。參考Oresanya 等（2008）的方法分析氨基酸、干物質(zhì)、氮有機(jī)物和總能的回腸表觀消化率。

1.4 數(shù)據(jù)分析 采用SPSS 軟件多因素方差分析模型對數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，同時研究兩個因素的交互效應(yīng)，采用Duncan’s 法進(jìn)行多重比較，P ＜0.05表示差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 對抗體滴度的影響 由表2 可知，在整個研究過程中只有對照組和PED 組母豬PRRS 為陰性，而所有組的PED 抗體滴度為陰性。PRP 組PRRSX3 的樣本總數(shù)/ 陽性樣品數(shù)較PRRS 組顯著提高了36.36%（P ＜0.05）。

表2 PRRS 和PED 對病毒血癥和抗體滴度的影響

2.2 對生長性能和養(yǎng)分表觀消化率的影響 由表3 可知，在21 d 試驗(yàn)期間，PRRS 組日增重和日采食量分別顯著降低30% 和26%（P ＜0.05）。PRRS 和PED 共感染組使平均日增重、平均日采食量和飼料報酬分別顯著降低46%、30% 和23%（P ＜0.05）。感染PRRS 和PED 病毒的豬（PRP 組）較單獨(dú)感染PRRS 和PED 的豬對生長性能造成的負(fù)面影響更大。和感染PED 病毒對PRP 豬整體性能的影響更大。PRRS 對分析的養(yǎng)分表觀消化率均無顯著影響（P ＞0.05），但PED 組使干物質(zhì)赫爾總能消化率分別顯著降低7.8% 和11.4%（P ＜0.05）。PRRS 和PED 聯(lián)合感染使干物質(zhì)、氮、總能和有機(jī)物消化率分別顯著降低9.0%、12.8%、11.9% 和3.5%（P ＜0.05）。

表3 PRRS 和PED 對豬生長性能和養(yǎng)分表觀消化率的影響

2.3 對回腸養(yǎng)分表觀消化率及血清代謝物的影響 由表4 可知，除了PED 對賴氨酸表觀消化率具有顯著影響外（P ＜0.05），各組對其他氨基酸回腸表觀消化率及養(yǎng)分表觀消化率均無顯著影響（P ＞0.05）。血清葡萄糖、胰島素濃度在組間無顯著差異（P ＞0.05），PED 和PRP 組血清尿氮氮濃度較對照組和PRRS 組分別顯著提高84.64%、96.11% 和89.53%、111.28%（P ＜0.05），胰 高血糖素濃度分別顯著提高276.30%、137.99% 和353.90%、187.06%（P ＜0.05）。PRP 組 血 清 非酯化脂肪酸濃度較其他組均顯著提高30.77%（P＜0.05）。

3 討論

PRP 豬與PRRS 豬相比，在感染后21 d 時抗體滴度增加，這可能是由于并發(fā)的PED 病毒感染導(dǎo)致后期抗體反應(yīng)達(dá)到峰值，當(dāng)PRRS 陽性豬受到其他病毒挑戰(zhàn)時可以看到這一點(diǎn)（Zhang 等，2012）。在整個研究過程中，PRRS 病毒感染的豬的日增重和采食量顯著降低，但飼料報酬未受到顯著負(fù)面影響。但PRRS 病毒感染在養(yǎng)分表觀消化率無顯著影響，此外出乎意料的是，PED 并沒有降低氮和有機(jī)物表觀消化率。

處理間的回腸養(yǎng)分表觀消化率存在明顯差異，但有趣的是，在干物質(zhì)、氮和有機(jī)物上只有數(shù)值上的差異。特異性氨基酸的表觀回腸消化率也不受處理的影響，只有PED 攻毒豬的賴氨酸回腸表觀消化率有下降趨勢。同樣在接受脂多糖刺激的豬中，感染與未接受脂多糖刺激的豬對氨基酸表觀消化率的影響無顯著差異（Rakhshandeh 等，2010）。Lee（2012）研究發(fā)現(xiàn)，所有氨基酸的內(nèi)源性損失在感染后24 h 內(nèi)增加了4 ～9 倍，但在感染后72 h，內(nèi)源性損失無差異，這可能表明本研究的采集時間并沒有達(dá)到峰值感染差異。

表4 PRRS 和PED 對豬回腸養(yǎng)分表觀消化及血清代謝物的影響

飼料攝入量的減少導(dǎo)致分解代謝狀態(tài)提高，可能導(dǎo)致PED 和PRP 處理中血糖濃度和尿素氮濃度的升高。有趣的是，在對照組、PRRS 和PED處理豬中并未觀察到血清非酯化脂肪酸濃度的差異，而在PRP 組有所增加，這表明PRRS 和PED的附加作用以及免疫刺激引起的代謝變化增加，這可能導(dǎo)致脂肪分解代謝增加，為免疫細(xì)胞提供底物ATP（Doughty 等，2006），因?yàn)楦腥竞筘i的采食量降低，能量攝入量可能受限。在免疫應(yīng)答過程中組織和免疫細(xì)胞對葡萄糖的利用增加，導(dǎo)致低血糖（Jonasson 等，2007）。但在本研究中沒有發(fā)現(xiàn)血糖濃度的差異，表明這些豬可能通過糖異生來滿足對葡萄糖需求。

4 結(jié)論

綜上所述，單獨(dú)或聯(lián)合應(yīng)用PRRS 和PED 病毒可抑制豬的生長速度和采食量。豬的養(yǎng)分表觀消化率在PED 和PRRS 的共同感染下降低，但單獨(dú)的PRRS 感染對其無顯著影響。