霍炳鑫 李常青 楊春俠 許 楠 劉麗靜

高質(zhì)量根管預(yù)備是根管治療成功與否的關(guān)鍵[1]，但由于根管間峽區(qū)、根尖三角區(qū)等部位的存在，根管預(yù)備器械無法有效清理其中的感染組織，必須輔以沖洗液清理根管[2]。本研究比較不同濃度次氯酸鈉對根管壁的不同作用時(shí)間，觀察對樹脂型根管充填糊劑的根管充填微滲漏的影響，以期為臨床提高根管治療的成功率，降低次氯酸鈉沖洗液造成的不良影響，提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

資料和方法

一、實(shí)驗(yàn)對象

1.標(biāo)本來源料：收集我院因正畸治療需要或牙周病無法保留的、完整的單根管18～55 歲成人恒牙96 顆。

2.納入標(biāo)準(zhǔn)：①牙根發(fā)育完全，根尖孔無破壞；②未經(jīng)充填治療和牙髓治療；③牙根形態(tài)及數(shù)目要求：直的單根、單根管牙齒。

3.排除標(biāo)準(zhǔn)：①過大牙（解剖牙根長度＞14mm，牙頸部頰舌頸＞6mm）或過小牙（解剖牙根長度＜11mm，牙頸部頰舌頸＜4mm）；②根管彎曲（＞20°）、鈣化、內(nèi)外吸收、畸形；③12.5 倍根管顯微鏡觀察，存在隱裂紋；④雙根管；⑤根尖孔≥25 號K 型銼。

4.標(biāo)本的儲存方法：用超聲潔牙機(jī)和手術(shù)刀片去除附著于牙根表面的肉芽組織、牙周膜和牙石。浸泡于10%福爾馬林溶液中備用。

二、實(shí)驗(yàn)分組

將離體牙96 顆，隨機(jī)分為12 組，每組8 顆，用0.9%生理鹽水作為對照組，如表1。

三、實(shí)驗(yàn)材料

主要材料與儀器：10%次氯酸鈉（分析純）、葡萄糖粉（分析純）、疊氮化鈉（NaN3）、機(jī)用Protaper 鎳鈦銼、AH-Plus 根管充填糊劑、全自動(dòng)生化分析儀、恒溫箱配置0.5%、2.5%、5.25%次氯酸鈉，1mol/L 的葡萄糖溶液（含0.2% NaN3抑菌作用），常溫避光密封保存。

表1 實(shí)驗(yàn)分組

四、試驗(yàn)方法

1.離體牙預(yù)處理：用金剛砂切片，水冷卻下，將離體牙在距根尖13mm 處截?cái)?，保留牙根?/p>

2.根管預(yù)備：10 號K 型銼暢通根管，拔髓針拔髓后，5ml 0.9%生理鹽水連續(xù)沖洗根管，再放入10號K 型銼，當(dāng)根尖孔剛能見到銼尖時(shí)，將止動(dòng)片移至與根管口平齊，緩慢取出K 型銼，測量長度，精確至0.5mm，將所測長度減去1mm，定為工作長度。機(jī)用Protaper 鎳鈦根管銼，冠向下法進(jìn)行根管預(yù)備，由同一名能夠熟練掌握此器械的醫(yī)生嚴(yán)格按廠家使用說明書進(jìn)行根管預(yù)備，要求各組均預(yù)備到F3。預(yù)備過程嚴(yán)格控制更換器械次數(shù)，每換一次器械，均用口腔根管沖洗針，以5ml 0.9%生理鹽水連續(xù)沖洗，清除碎屑，以達(dá)到操作的同一性。用不同濃度次氯酸鈉（0.5%、2.5%、5.25%）、0.9%生理鹽水各50ml 浸泡至相應(yīng)分組時(shí)間（1min、5min、10min），取出并用紙尖干燥根管。冷側(cè)壓法采用AH-plus 樹脂根充材料和牙膠尖進(jìn)行根管充填，燙除多余牙膠尖，根尖孔1mm 以上和根管口1mm 以下的牙根表面均勻涂布2 層指甲油，間隔1 小時(shí)，靜置24 小時(shí)。用無菌生理鹽水紗布包裹密封于消毒過的玻璃瓶中，于100%濕度環(huán)境，37℃恒溫箱內(nèi)保存7 天備用。所有實(shí)驗(yàn)操作均由同一人獨(dú)立完成，以減少系統(tǒng)誤差。

3.微滲漏的測定：將所有乳膠管的上端剪一小口，離體牙根根尖向下插入管內(nèi)，將其推至乳膠滴管尖端，測量牙根斷面與滴管上端開口最低點(diǎn)的距離，限定最小為11cm，無法達(dá)到者，舍棄，沿牙根斷面下方4mm 處用刀片切開，去除滴管尖端，粘蠟封閉牙根與滴管連接處，并安裝于根尖微滲漏檢測裝置內(nèi)，如圖1，滴管通過上端開口與大氣相通，乳膠管固定在一個(gè)密封的玻璃瓶蓋上，滴管與蓋子間用粘蠟封閉，玻璃瓶加入5ml 的無菌蒸餾水，離體牙根尖孔沒入蒸餾水，乳膠管內(nèi)注入1mol/L 的葡萄糖溶液（含0.2% NaN3），乳膠管內(nèi)液體高于根管充填材料11cm。瓶蓋上插入一個(gè)27#注射針頭與外界相通，調(diào)節(jié)瓶內(nèi)外壓力。實(shí)驗(yàn)過程中，每天定時(shí)加入葡萄糖溶液，使液面高度不變。于1、3、7、14、21 和30 天時(shí)在各玻璃瓶內(nèi)取50μl 樣本，并向玻璃瓶內(nèi)回注50μl 無菌蒸餾水，采用葡萄糖氧化酶比色測定法（glucose oxidase-peroxidase，GOD-POD）測量其中葡萄糖的濃度，以反映通過根管的微滲漏情況。

4.統(tǒng)計(jì)分析：采用SPSS17.0 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。采用重復(fù)測量的方差分析，兩兩比較采用LSD法（Least-significant Difference，最小顯著差值法），當(dāng)P＜0.05 時(shí)，認(rèn)為有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

圖1 實(shí)驗(yàn)裝置

結(jié) 果

5.25%次氯酸鈉10min 組的微滲漏較其它各組有差異（P＜0.05），有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。其余各組間均無差異（P＞0.05）。實(shí)驗(yàn)組和對照組在各個(gè)時(shí)間點(diǎn)的葡萄糖滲出濃度（mmoL/L），如表2，圖2。

圖2 實(shí)驗(yàn)組與對照組隨時(shí)間延長微滲漏值的變化

表2 各組在各時(shí)間點(diǎn)葡萄糖濃度測量值（mmol/L）（n＝8，χ±s）

討 論

葡萄糖定量法[3，4]是通過葡萄糖氧化酶比色法（GOD-POD）檢測冠方滲入，由根方滲出的葡萄糖濃度值，反映根管微滲漏情況，其原理是：葡萄糖在葡萄糖氧化酶作用下，氧化生成葡萄糖酸和過氧化氫，過氧化氫在過氧化氫酶和色原性受體4-氨基安替比林偶聯(lián)劑的作用下生成有色物質(zhì)，根據(jù)分光光度儀測得有色物質(zhì)的波長，計(jì)算出葡萄糖濃度。該方法的優(yōu)點(diǎn)在于不破壞牙體組織完整性，通過微滲漏實(shí)驗(yàn)裝置，不需要其他特殊儀器，操作方法簡單、靈敏；且葡萄糖分子量小（MW＝180000），容易通過間隙，能夠在一定時(shí)間內(nèi)對樣本進(jìn)行連續(xù)測量和動(dòng)態(tài)觀察[5，6]，具有特異性好和干擾因素較少[7]等特點(diǎn)。有研究者[8]認(rèn)為與線性測量值或是定性檢測方法比較，這個(gè)實(shí)驗(yàn)方法檢測到的微滲漏定量數(shù)據(jù)更有臨床價(jià)值，已被大多數(shù)學(xué)者認(rèn)可。

AH-Plus 封閉劑性能穩(wěn)定，且易操作，流動(dòng)性好和滲透性強(qiáng)，能夠很地適應(yīng)根管壁形態(tài)，有效地滲入牙本質(zhì)小管，凝固后沒有明顯體積收縮，穩(wěn)定性和密封性均較好，X 線高阻射性，不會(huì)造成牙齒染色等優(yōu)點(diǎn)[9]，所以廣泛應(yīng)用于臨床，所以本研究選用AH-plus糊劑作為研究對象。

本實(shí)驗(yàn)通過采用葡萄糖定量法檢測根尖滲出的葡萄糖濃度，通過所得數(shù)據(jù)發(fā)現(xiàn)，在2.5%次氯酸鈉10min 組作為終末沖洗液時(shí)時(shí)微滲漏最小，可能與其可以較好的去除玷污層有關(guān)，但是無論那種濃度的次氯酸鈉，單獨(dú)使用均無法完全去除玷污層，對比對照組以及其他實(shí)驗(yàn)組并未達(dá)到統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，而5.25%次氯酸鈉10min 組，作為終末沖洗液時(shí)時(shí)微滲漏最大，可能是其對玷污層的清除效果比2.5%次氯酸鈉10min 組并沒有明顯增加，但是對根管壁的腐蝕卻明顯出現(xiàn)有關(guān)，Sanches Borges 等[10]比較第一乳磨牙與第三磨牙使用次氯酸鈉沖洗后，應(yīng)用傅里葉變換拉曼光譜分析與掃描電子顯微鏡觀察，認(rèn)為無論乳牙恒牙，次氯酸鈉都可以改變其牙本質(zhì)無機(jī)成分。Zhang 等[11]將牙本質(zhì)粉末浸泡于次氯酸鈉或EDTA 中，結(jié)果表明無論是否聯(lián)合應(yīng)用EDTA，次氯酸鈉都不可逆的導(dǎo)致牙本質(zhì)脫礦，導(dǎo)致根管內(nèi)壁牙本質(zhì)的微硬度降低[12]，并且降低牙本質(zhì)與樹脂間的粘接強(qiáng)度[13]。通過對2.5%作用15min 后的牙本質(zhì)觀察，Dogan Buzoglu H 等[14]發(fā)現(xiàn)牙本質(zhì)的礦物含量發(fā)生了改變，使牙本質(zhì)微硬度降低。降低牙本質(zhì)微硬度，有利于根管預(yù)備，提高了根管預(yù)備的效率，但同時(shí)也造成根管充填材料、修復(fù)體不能與牙體組織緊密貼合，增加微滲漏的發(fā)生。這是由于次氯酸鈉使膠原纖維溶解，導(dǎo)致雜交層無法形成，降低了牙本質(zhì)表面自由能，進(jìn)而影響牙本質(zhì)的粘結(jié)。隨著NaClO濃度和沖洗時(shí)間的增加，牙本質(zhì)所受到的影響也增大。導(dǎo)致5.25%次氯酸鈉10min 組對樹脂型根管充填糊劑AH-Plus 的充填微滲漏產(chǎn)生影響。