于迎春，趙 陽，梁素萍，鄭景輝

（廣西中醫(yī)藥大學(xué)附屬瑞康醫(yī)院，廣西南寧 530001）

帕金森?。≒arkinson’s disease,PD）是一種進(jìn)行性、多灶性神經(jīng)退行性疾病,約1% 的60歲以上人群受其影響［1］,其發(fā)病率隨年齡增長逐漸升高。目前,PD的病因未明,其具體發(fā)病機(jī)制尚不明確,主要認(rèn)為與神經(jīng)炎癥、氧化應(yīng)激、基因突變、免疫學(xué)異常、細(xì)胞凋亡、線粒體損傷等有關(guān)［2-4］。臨床上PD最常用的治療方案是多巴胺替代療法,但只控制臨床運(yùn)動癥狀,不能阻止疾病的進(jìn)展,且長期的藥物治療可能導(dǎo)致嚴(yán)重的、不可逆的運(yùn)動并發(fā)癥。其他治療方法主要包括外科治療,如毀損手術(shù)、腦深部剌激等,干細(xì)胞療法［5］,中醫(yī)針灸、運(yùn)動療法、音樂療法等輔助療法治療PD,但均不可以徹底治愈。

山茱萸-肉蓯蓉藥對來源于地黃飲子,出自于《黃帝內(nèi)經(jīng)·素問·宣明論方》,為補(bǔ)腎化痰名方,具有滋陰、補(bǔ)陽、開竅化痰之功效,山茱萸、肉蓯蓉陰陽并補(bǔ),共為君藥,兩藥相使為用,發(fā)揮功效,其中山茱萸具有補(bǔ)益肝腎、收澀固脫等功效,現(xiàn)代藥理學(xué)研究表明其具有明顯的抗氧化、抗炎殺菌、降血糖等功效。肉蓯蓉具有補(bǔ)腎陽、益精血、潤腸通便之功效,現(xiàn)代藥理學(xué)研究表明肉蓯蓉具有神經(jīng)細(xì)胞保護(hù)、抗氧化、抗衰老、調(diào)節(jié)免疫等作用。目前山茱萸-肉蓯蓉藥對在臨床治療帕金森病中廣泛應(yīng)用,但其治療帕金森的確切機(jī)制尚不明確,本研究采用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)的方法,通過相關(guān)數(shù)據(jù)庫對山茱萸-肉蓯蓉藥對所包含的有效成分及作用靶點(diǎn)進(jìn)行篩選,并將其靶點(diǎn)與帕金森疾病靶點(diǎn)進(jìn)行匹配,篩選出山茱萸-肉蓯蓉治療PD相關(guān)的關(guān)鍵作用靶點(diǎn),并進(jìn)一步分析其治療PD的物質(zhì)基礎(chǔ)和作用機(jī)制。

1 材料與方法

1.1 山茱萸與肉蓯蓉藥物成分信息獲取及整理 使用中藥系統(tǒng)藥理學(xué)數(shù)據(jù)庫和分析平臺（traditional Chinese medicine systems pharmacology database and analysis platform,TCMSP）收集中藥山茱萸、肉蓯蓉的化合物,并以口服生物利用度（oral bioavailability,OB）≥30%、類藥性（drug likeness,DL）≥0.18,因有研究發(fā)現(xiàn)帕金森病患者血腦屏障受損［6］,故設(shè)定血腦屏障通透性（BBB）≥-0.85,為限定條件對所收集到的化合物進(jìn)行篩選,將最終篩選出的化合物建立有效化合物數(shù)據(jù)庫。

1.2 山茱萸-肉蓯蓉藥對作用靶點(diǎn)的預(yù)測 運(yùn)用中藥分子機(jī)制生物信息學(xué)分析工具（a bioinformatics analysis tool for molecular mechanism of traditional Chinese medicine,BATMAN-TCM）（http：//bionet.ncpsb.org/batman-tcm/index.php/Home/Index/index）對運(yùn)用TCMSP篩選出的山茱萸-肉蓯蓉藥有效化合物作用靶點(diǎn)進(jìn)行預(yù)測。

1.3 有關(guān)帕金森病相關(guān)基因篩選 將 “Parkinson’ s disease” 作為檢索詞,通過GeneCards數(shù)據(jù)庫（https：//www.genecards.org/）檢索帕金森病相關(guān)靶點(diǎn)。GeneCards數(shù)據(jù)庫通過Gifts算法,能夠準(zhǔn)確計算靶點(diǎn)與疾病的相關(guān)度,并按照相關(guān)度進(jìn)行評分排序。本研究選取其中最低分超過20分的前237位靶點(diǎn)進(jìn)行研究,其中最高分146.47分,并摘錄相應(yīng)的靶點(diǎn)的標(biāo)準(zhǔn)基因名。

1.4 山茱萸-肉蓯蓉對帕金森病作用靶點(diǎn)的預(yù)測及PPI網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建 首先將預(yù)測所得的山茱萸-肉蓯蓉藥對作用靶點(diǎn)與篩選出的帕金森相關(guān)發(fā)病靶點(diǎn)導(dǎo)入VENNY2.1 （http：//bioinfogp.cnb.csic.es/tools/venny/index.html）,得出兩者共同靶點(diǎn),即可能作用于帕金森病的靶點(diǎn)。后將所得共同靶點(diǎn)與其化合物相對應(yīng),使用Cytoscape 3.6.1軟件做出化合物-靶點(diǎn)圖。并將山茱萸-肉蓯蓉藥對作用于帕金森病的靶點(diǎn)上傳至STRING 10.5數(shù)據(jù)庫中（https：//string-db.org）,選擇研究物種為“Homosapiens” （智人）,設(shè)定靶點(diǎn)間最低聯(lián)系分?jǐn)?shù)為0.4分,隱藏?zé)o相互關(guān)聯(lián)的靶點(diǎn),獲得靶點(diǎn)聯(lián)系網(wǎng)絡(luò)圖,最后將該圖導(dǎo)入Cytoscape 3.6.1軟件中構(gòu)建PPI網(wǎng)絡(luò)圖。

1.5 山茱萸-肉蓯蓉對帕金森病作用靶點(diǎn)的GO分析和KEGG分析 將山茱萸-肉蓯蓉對帕金森病作用靶點(diǎn)導(dǎo)入DAVID Bioinformatics Resources 6.8數(shù)據(jù)庫（https：//david.ncifcrf.gov/summary.jsp）,選擇其中分子功能（molecular function）、生物過程（biologica process）和細(xì)胞成分（cellular component）3項(xiàng)對山茱萸-肉蓯蓉作用于帕金森病的靶點(diǎn)進(jìn)行GO富集分析,篩選具有顯著差異的生物過程及可靠的靶點(diǎn)通路,并且使用GraphPad Prism 7軟件將GO富集分析滿足P＜0.05的結(jié)果做成可視化條形圖。選擇KEGG進(jìn)行靶點(diǎn)基因通路注釋分析,將得到的結(jié)果且滿足P＜0.05作為重要通路用 Omicshare （http：//www.omicshare.com/）制作成可視化氣泡圖。

2 結(jié)果

2.1 山茱萸-肉蓯蓉活性成分的篩選通過TCMSP數(shù)據(jù)庫檢索山茱萸及肉蓯蓉的所有化合物（截止時間至2018年12月）,并按照口服生物利用度（oral bioavailability,OB）≥30%、類藥性（drug likeness,DL）≥0.18和血腦屏障通透性（BBB）≥-0.85作為篩選條件,篩選獲得山茱萸的潛在活性成分16種,肉蓯蓉潛在活性成分6種,見表1。

2.2 山茱萸-肉蓯蓉化合物作用靶點(diǎn)的預(yù)測 將山茱萸-肉蓯蓉化合物的Pubchem Cid代碼上傳至BATMAN-TCM數(shù)據(jù)庫平臺,并設(shè)置相似性模型閥值為“Score cutoff=20”,得到各化合物所對應(yīng)的潛在靶點(diǎn),并按照返回靶點(diǎn)的得分順序排列,選各化合物取前20個靶點(diǎn),不足20全部納入,并去除重復(fù)靶點(diǎn)后,最終得到山茱萸化合物作用靶點(diǎn)164個,肉蓯蓉化合物作用靶點(diǎn)94個。

2.3 帕金森病發(fā)病靶點(diǎn)篩選 通過GeneCards數(shù)據(jù)庫共檢索“Parkinson’s disease”,共獲得5 597個可能引起帕金森病相關(guān)的靶點(diǎn),其中Synuclein Alpha類靶點(diǎn)相關(guān)度最高（146.47分）,本研究選取其中相關(guān)度得分≥20分的靶點(diǎn),共篩選獲得237個相關(guān)靶點(diǎn)。

2.4 山茱萸-肉蓯蓉作用于帕金森病靶點(diǎn)預(yù)測 將將預(yù)測的山茱萸-肉蓯蓉化合物靶點(diǎn)及篩選得出帕金森病相關(guān)基因靶點(diǎn),全部以基因名格式導(dǎo)入VENNY2.1軟件中,取兩者的交集,得出19個化合物與疾病共同靶點(diǎn),19個具體靶點(diǎn)信息見表2,得出的韋恩圖如圖1所示。

2.5 化合物-靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)圖的構(gòu)建 將山茱萸、肉蓯蓉藥對與其21種活性成分和19個關(guān)鍵靶點(diǎn)基因,導(dǎo)入Cytoscape

表1 山茱萸-肉蓯蓉藥對化合物

表2 山茱萸-肉蓯蓉治療帕金森病的關(guān)鍵靶點(diǎn)

3.5.1 軟件構(gòu)建山茱萸-肉蓯蓉治療帕金森病藥物-化合物-靶點(diǎn)相互作用的可視化網(wǎng)絡(luò)圖,結(jié)果見圖2。

結(jié)果顯示,有效化合物中diop （鄰苯二甲酸二異辛酯）、marckine （丁哌卡因）、quercetin （槲皮素）、yangambin （鵝掌楸樹脂醇b二甲醚）、ethyloleate （NF）（油酸乙酯）、cornudentanone （角豆酮）、3,4-dehydrolycopen-16-al上述7種成分能與2個及以上的疾病靶點(diǎn)基因聯(lián)系,可能是山茱萸-肉蓯蓉治療帕金森病的重要成分,可知山茱萸-肉蓯蓉治療帕金森病是多成分、多靶點(diǎn)共同作用。

2.6 關(guān)鍵靶點(diǎn)的PPI網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建及分析 將山茱萸-肉蓯蓉治療帕金森病的19個靶點(diǎn)基因?qū)隨tring數(shù)據(jù)庫獲取蛋白質(zhì)相互作用關(guān)系,由String數(shù)據(jù)庫得到靶點(diǎn)相互作用網(wǎng)絡(luò)圖,結(jié)果如圖3所示,其中“邊” 代表作用靶點(diǎn)之間的關(guān)聯(lián),節(jié)點(diǎn)代表作用靶點(diǎn)。圖中共19個節(jié)點(diǎn),70條邊,平均節(jié)點(diǎn)度為7.73,平均局部聚類系數(shù)0.661。靶標(biāo)均以圓形節(jié)點(diǎn)表示,靶標(biāo)之間連線越粗說明在治療帕金森病靶標(biāo)網(wǎng)絡(luò)中的該靶點(diǎn)越重要。

圖1 韋恩圖

圖2 藥物-化合物-靶點(diǎn)互作網(wǎng)絡(luò)圖

圖3 山茱萸-肉蓯蓉靶點(diǎn)的蛋白互作網(wǎng)絡(luò)圖

2.7 山茱萸-肉蓯蓉對帕金森病作用 靶點(diǎn)的GO富集分析和KEGG通路富集分對山茱萸-肉蓯蓉作用于帕金森的19個相關(guān)靶點(diǎn)通過David數(shù)據(jù)庫進(jìn)行分析,主要包括3方面,即生物過程、分子功能、細(xì)胞成分,取P（P＜0.05）值排列前15的條目所對應(yīng)靶點(diǎn)具有的功能信息,使用GraphPad Prism 7軟件將篩選的條目制作成可視化條形圖,見圖4。再對上述19個靶點(diǎn)進(jìn)行KEGG通路富集分析,得到P＜0.05的通路有9條,通過Omicshare軟件進(jìn)行可視化分析,結(jié)果見圖5。

圖4 GO富集分析

圖5 KEGG通路富集分析高級氣泡圖

4 討論

研究發(fā)現(xiàn)山茱萸中主要含有環(huán)烯醚萜苷類、鞣質(zhì)、黃酮、有機(jī)酸、多糖類等多種成分［7］。徐一達(dá)［8］最新研究發(fā)現(xiàn)山茱萸中的馬錢苷不僅抑制PD小鼠紋狀體內(nèi)多巴胺和TH表達(dá),也抑制小鼠黑質(zhì)內(nèi)小膠質(zhì)細(xì)胞和星形膠質(zhì)細(xì)胞的活性,使caspase-3、TNF-α 及其上游調(diào)控因子NF-κB、p38和c-Abl的表達(dá)下降,主要機(jī)制可能是馬錢苷抑制膠質(zhì)細(xì)胞的聚集及激活、抑制炎癥因子的表達(dá)、通過c-Abl-p38-NF-κB通路來抑制細(xì)胞死亡,同時可以影響細(xì)胞的自噬來增強(qiáng)神經(jīng)細(xì)胞的生存能力,進(jìn)而起到治療PD的作用。肉蓯蓉含有苯乙醇苷類、環(huán)烯醚萜苷、木質(zhì)素類等多種成分,其有效成分可以產(chǎn)生抑制神經(jīng)細(xì)胞凋亡、增強(qiáng)免疫、抗氧化、抗衰老等作用［9］。王虎等［10］研究肉蓯蓉提取物對帕金森病細(xì)胞損傷模型有保護(hù)作用,其作用機(jī)制為肉蓯蓉提取物通過降低GADD153 （生長抑制DNA損傷基因153）蛋白的表達(dá)來實(shí)現(xiàn)。也有研究發(fā)現(xiàn)肉蓯蓉提取物能抑制PD小鼠黑質(zhì)中多巴胺能神經(jīng)元的減少,并且減少細(xì)胞凋亡、降低Bax/Bcl-2 mRNA及蛋白的比例［11］,也可通過抑制PD大鼠紋狀體及海馬的細(xì)胞外液中單胺類神經(jīng)遞質(zhì)含有量減少,發(fā)揮治療PD作用［12］。其中β-sitosterol為2種中藥的共同有效成分,研究表明其可以影響凋亡、炎癥、血管生成等多種信號通路,有著治療PD的潛在作用［13］。

本研究使用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)研究方法,篩選山茱萸-肉蓯蓉有效化合物22種,并預(yù)測出這些化合物可能作用于帕金森病的19個靶點(diǎn),包括多巴胺受體 （DRD2、DRD3、DRD4）、多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)體（SLC18A2、SLC6A3）,乙酰膽堿酯酶（ACHE）、血管緊張素轉(zhuǎn)化酶 （ACE）、蛋白激酶（AKT1）、大麻素受體 1 （CNR1）、乙醇脫氫酶 1C（ADH1C）、5-羥色胺受體（HTR1A、HTR2A）、丁酰膽堿酯酶（BCHE）、超敏反應(yīng)蛋白（CRP）等,各靶點(diǎn)間有很強(qiáng)的相互作用,主要涉及多巴胺能神經(jīng)元功能、乙酰膽堿系統(tǒng)、炎癥反應(yīng)、神經(jīng)毒性等生理病理改變。

帕金森病主要病理改變?yōu)楹谫|(zhì)多巴胺能神經(jīng)元變性死亡,而多巴胺作為腦內(nèi)重要的神經(jīng)遞質(zhì),主要通過不同亞型的多巴胺受體調(diào)控人體運(yùn)動功能、認(rèn)知活動等生理或病理過程,其中DRD2表達(dá)神經(jīng)元通路,起到調(diào)節(jié)運(yùn)動的作用［14］；DR的含有量與樹突棘密度相關(guān),DA受體的激活可以調(diào)節(jié)軸突結(jié)構(gòu),維持大腦正常功能,DR通過調(diào)節(jié)神經(jīng)遞質(zhì)釋放、調(diào)節(jié)釋放頻率等調(diào)節(jié)神經(jīng)元的興奮性［15］；多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)體在多巴胺（DA）轉(zhuǎn)運(yùn)過程中發(fā)揮了關(guān)鍵作用,當(dāng)這些信號通路的功能紊亂時可引起帕金森病,因此多巴胺受體、多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)體靶點(diǎn)為治療帕金森病的主要靶點(diǎn)。SLC6A3基因編碼的多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)體（dopamine transporter,DAT）在多巴胺（DA）轉(zhuǎn)運(yùn)過程中發(fā)揮了關(guān)鍵作用。ACE主要與血壓調(diào)節(jié)有關(guān),但有研究表明ACE抑制劑可增加紋狀體多巴胺水平和減少神經(jīng)元壞死,對PD模型有保護(hù)作用,也是潛在的抑郁治療靶點(diǎn)［16］。最新研究表明血清BChE活性可作為PD生物標(biāo)志物,與帕金森病也有密切關(guān)系［17］。CRP主要與炎癥相關(guān),而炎癥反應(yīng)與帕金森病的發(fā)病和發(fā)展具有密切相關(guān)性［18］。HTR1A在抑郁癥及部分精神系統(tǒng)疾病的發(fā)病機(jī)制中起著重要的作用,可能是導(dǎo)致帕金森后期合并抑郁癥的重要原因［19］。由此可以看出上述靶標(biāo)主要與神經(jīng)元功能、多巴胺受體及轉(zhuǎn)運(yùn)體、炎癥等諸多因素相關(guān),既說明帕金森病的致病因素復(fù)雜,又說明山茱萸-肉蓯蓉藥對通過調(diào)節(jié)巴胺能神經(jīng)元功能和乙酰膽堿系統(tǒng)的功能、抑制炎癥、減輕神經(jīng)毒性等方面治療帕金森病。

為了詳細(xì)的探究山茱萸-肉蓯蓉有效化合物成分治療PD的生物學(xué)過程、分子功能、細(xì)胞成分和信號通路,將山茱萸-肉蓯蓉與PD相關(guān)的19個基因進(jìn)行GO分析和KEGG分析。

通過GO富集分析發(fā)現(xiàn)山茱萸-肉蓯蓉藥對治療帕金森病主要生物過程（BP）與多巴胺分泌的調(diào)節(jié)、多巴胺代謝過程的調(diào)節(jié)、化學(xué)性突觸傳遞、突觸傳遞負(fù)調(diào)控、5-羥色胺受體信號通路、G蛋白偶聯(lián)受體信號通路、細(xì)胞鈣離子穩(wěn)態(tài)、行為控制等主要生物過程相關(guān)。其中在多巴胺分泌的調(diào)節(jié)與多巴胺代謝過程的調(diào)節(jié)與治療帕金森的相關(guān)機(jī)制密切相關(guān),因帕金森病主要是多種原因?qū)е露喟桶纺苌窠?jīng)元損傷、凋亡,最終紋狀體內(nèi)多巴胺濃度下降,導(dǎo)致大腦反饋調(diào)節(jié)失衡而發(fā)病。因此作用于多巴胺能系統(tǒng)的藥物,可通過激動多巴胺受體、多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)體等可有效控制帕金森?。?0］。在G蛋白偶聯(lián)受體信號通路中,有研究發(fā)現(xiàn)在PD小鼠模型中,雷諾昔芬與G蛋白偶聯(lián)雌激素受體30結(jié)合發(fā)揮抑炎作用,可抑制炎癥通路,降低相關(guān)炎癥因子水平,從而抑制PD的慢性炎癥進(jìn)展。表明G蛋白偶聯(lián)雌激素受體（GPR30）參與雌激素在PD炎癥中具有抗炎、神經(jīng)保護(hù)等作用［21］。在5-羥色胺受體信號通路中,范玲玲等［22］研究發(fā)現(xiàn)5-HT7受體激動劑可能以多種方式調(diào)控著內(nèi)側(cè)前額葉皮層（mPFC）錐體神經(jīng)元的電活動,且黑質(zhì)紋狀體通路的退化易導(dǎo)致mPFC錐體和中間神經(jīng)元上5-HT7受體出現(xiàn)功能紊亂。這為5-HT7受體參與PD病人并發(fā)的抑郁、焦慮等癥狀提供了功能學(xué)和細(xì)胞學(xué)的解釋,也為PD治療開辟了新的研究方向。分析GO富集結(jié)果發(fā)現(xiàn)山茱萸-肉蓯蓉的生物過程中主要與 DRD2、DRD3、DRD4、SLC18A2、SLC6A3、HTR1A、HTR2A基因相關(guān),說明山茱萸-肉蓯蓉可能通過對多巴胺受體、5-羥色胺受體這兩個靶點(diǎn)來治療PD。相關(guān)研究表明,HTR2A受體的拮抗劑在帕金森病模型上能夠減輕左旋多巴所致藥物不良反應(yīng)［23］；部分DRD2激動劑不僅能改善PD的運(yùn)動癥狀,且引起運(yùn)動障礙和精神性疾病的副作用的概率較低［24］,說明中藥在防治PD中有很好應(yīng)用前景。

GO富集分析中分子功能涉及多巴胺的結(jié)合、多巴胺神經(jīng)遞質(zhì)受體活性,通過Gi/Go耦合、多巴胺神經(jīng)遞質(zhì)受體活性、酶的結(jié)合、乙酰膽堿酯酶活性、膽堿酯酶活性、膽堿結(jié)合等。GO富集分析中細(xì)胞成分主要涉及軸突、樹突、（神經(jīng)元的）突觸、突觸后膜、質(zhì)膜、薄膜、膜筏等,主要涉及神經(jīng)信號傳遞、神經(jīng)元的組成及功能等。

通過基因KEGG通路富集分析得出山茱萸-肉蓯蓉防治PD主要調(diào)控多巴胺能神經(jīng)突觸、神經(jīng)活性配體-受體相互作用、cAMP信號通路、縫隙連接、5-羥色胺能突觸、信號通路、帕金森疾病等9條相關(guān)信號通路發(fā)揮作用,表明山茱萸-肉蓯蓉化合物的作用靶點(diǎn)有多條通路,可通過各通路協(xié)調(diào)作用治療帕金森病。在多巴胺能神經(jīng)突觸、神經(jīng)活性配體-受體相互作用、信號通路這3條神經(jīng)遞質(zhì)相關(guān)通路中,可能通過作用于多巴胺受體［25］、多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)體、大麻素受體1、5-羥色胺受體來治療PD,也可能通過增加多巴胺神經(jīng)元的數(shù)量,減輕黑質(zhì)多-紋狀體巴胺能通路的變性,維持多巴胺水平的穩(wěn)定。

在cAMP信號通路中,環(huán)核苷酸（cAMP）作為中樞神經(jīng)系統(tǒng)細(xì)胞的第2信使,對神經(jīng)系統(tǒng)活動起調(diào)節(jié)作用,包括神經(jīng)元的存活、樹突和軸突的生長、神經(jīng)元的發(fā)育和認(rèn)知。Wu等［26］利用PD模型小鼠進(jìn)行細(xì)胞試驗(yàn)發(fā)現(xiàn),下調(diào)miR-200a可導(dǎo)致AKT、cAMP、PKA表達(dá)降低,而DRD2、CREB表達(dá)升高,說明下調(diào)miR-200a通過阻斷cAMP/PKA信號通路,可增加DRD2表達(dá),抑制紋狀體細(xì)胞凋亡進(jìn)而有效控制PD。韓雪峰等［27］研究發(fā)現(xiàn)上調(diào)cAMP信號通路可使列當(dāng)中Crenatoside （黃藥苷）對D-半乳糖誘導(dǎo)的PC12神經(jīng)細(xì)胞損傷有明顯的保護(hù)作用。山茱萸-肉蓯蓉的有效化合物可通過調(diào)節(jié)神經(jīng)元的發(fā)育、神經(jīng)元的存活、樹突和軸突的生長、保護(hù)受損神經(jīng)等生理過程發(fā)揮治療PD的功能。

在縫隙連接信號通路中,縫隙連接通道可通過對抗細(xì)胞間電阻,實(shí)現(xiàn)細(xì)胞間的興奮傳遞?？p隙連接蛋白43（Cx43）是中樞神經(jīng)系統(tǒng)（CNS）中含有量較多的連接蛋白,并以縫隙連接 （gap junction,GJ）和半通道（hemichannel,HC）的形式存在,并介導(dǎo)細(xì)胞內(nèi)外的信息交流與細(xì)胞間的信息交流。大量研究表明Cx43GJ和HC的改變推進(jìn)了神經(jīng)退變疾病進(jìn)程［28-29］；PD患者可因黑質(zhì)膠質(zhì)細(xì)胞激活,導(dǎo)致大量的促炎因子表達(dá)（如IL-1β、TNFα、INF-γ）,炎癥因子最終導(dǎo)致星形膠質(zhì)細(xì)胞Cx43GJ的改變加快PD患者病程進(jìn)展［30］。研究發(fā)現(xiàn)［31］在PD動物模型中,總Cx43 mRNA水平與星形膠質(zhì)細(xì)胞Cx43的免疫活性增加明顯,表明Cx43HC活性增加與PD的發(fā)病相關(guān)。山茱萸-肉蓯蓉藥對的有效成分對PD的治療可通過抑制促炎因子的表達(dá),減少星形膠質(zhì)細(xì)胞Cx43的改變而發(fā)揮作用。

綜上,本研究使用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)方法對山茱萸-肉蓯蓉藥對治療PD的主要化合物、靶點(diǎn)、通路等進(jìn)行詳細(xì)分析,初步驗(yàn)證了山茱萸-肉蓯蓉藥對治療PD的主要機(jī)制,為下一步進(jìn)行深入研究其作用機(jī)制提供理論基礎(chǔ)。本研究結(jié)論僅依靠網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)方法對相關(guān)數(shù)據(jù)庫進(jìn)行挖掘得出,雖然通過相關(guān)文獻(xiàn)驗(yàn)證了結(jié)論的可靠性,但下一步仍需通過動物實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證其主要作用機(jī)理,以期為臨床治療PD提供思路。