王艷華,池景良
(遼寧省微生物科學(xué)研究院,遼寧 朝陽 12200)
賀新生等[1]表述,栽培食(藥)用菌的段木上常發(fā)生一種稱為紅菌子、血紅密孔菌、紅栓菌小孔變種、朱血菌等的雜菌即為紅栓菌(Trametes cinnabarina)。吳林息園《旲蕈譜》記載,橘皮蕈,紅如橘皮,味亦帶辣,即指多孔菌科(Polyporaceae) 栓菌屬(Trametes) 紅栓菌,而其變種血紅栓菌(Trametes sanguinea) 外形及生境分布與正種基本相同,因此也應(yīng)當(dāng)包括其變種血紅栓菌;因此,多孔菌科真菌紅栓菌及血紅栓菌的子實體統(tǒng)稱朱砂菌[2]。有解毒除濕、止血、抗腫瘤等功效;用于痢疾、咽喉腫痛、跌打損傷、癰疽瘡癤、癢疹、傷口出血等[3]。
紅栓菌也是一種能有效降解木質(zhì)素、纖維素和半纖維素的白腐真菌,分布于世界各地,在我國分布于20個省[4-6]。生長于棟、樺、鍛等闊葉木上,有時也生長于松木上,引起木材的腐朽[4-6]。試驗證明該真菌造成楊木的腐朽率為68.14%,松木為47.16%,可作為降解秸稈的優(yōu)良菌株,在環(huán)境治理方面應(yīng)用前景廣闊[7]。通過總結(jié)紅栓菌的研究應(yīng)用現(xiàn)狀,對其發(fā)展前景進行探討和展望。
紅栓菌是分布較廣的一類藥用真菌,隸屬于擔(dān)子菌門 (Basidiomycota) 傘菌綱 (Agaricomycetes)多孔菌目 (Polyporales) 多孔菌科 (Polyporaceae)栓菌屬 (Trametes)[8-10]。
朱砂菌子實體單生、群生或疊生,扁半圓形至腎形,腎形,新鮮時肉質(zhì),表面呈艷麗的橙色至橘紅色,干后木栓質(zhì)[11]。
1.2.1 紅栓菌
紅栓菌,又名朱紅栓菌、鮮紅密孔菌、米紅密孔菌、朱血菌、朱砂菌、胭脂栓菌、枯皮蕈、胭脂菰等。子實體一般較小,扁半球形,扁平,無柄,新鮮時肉質(zhì),干后木栓質(zhì)[1-3]。側(cè)生無柄,木栓質(zhì),單生至覆瓦狀疊生,偶有半平伏而反卷。菌蓋半圓形至扇形,(4~10) cm × (4~15) cm,厚 0.5 cm~0.2 cm,干后變硬,蓋面朱紅色,有細(xì)軟短絨毛或無毛,粗糙,無環(huán)紋,后期稍平滑,橙紅色、污紅色漸褪至淡紅色或淡紅褐色[2];蓋緣薄或稍鈍,全緣。菌肉淡紅色至橙紅色,木栓質(zhì),菌管與菌肉同色,菌管長4 mm~9 mm;管口面朱紅色、橙紅色或暗紅色,后期呈黑色,管口圓形至多角形,每毫米間2個~4個。孢子圓筒形,無色至淡黃色,平滑,(5~7)μm × (2~4) μm[2]。
1.2.2 血紅栓菌
血紅栓菌又名血紅密孔菌、紅栓菌小孔變種、朱血菌、血朱栓菌、楓菌等。子實體側(cè)生無柄,木栓質(zhì),單生至疊瓦狀疊生,偶有半平伏而反卷[1]。子實體木栓質(zhì),與紅栓菌極相似。唯菌蓋厚度在5 mm以下,蓋面血紅色,后褪至蒼白色,常有濃淡相間的環(huán)紋。管口面暗紅色,管口小,圓形,每毫米間6個~8個。孢子無色,長橢圓形,稍彎曲,(7~8)μm × (2.5~3.0) μm[2]。
1.3.1 生長環(huán)境
紅栓菌及血紅栓菌均生長在多種闊葉樹的倒木、樹樁和腐朽木上,尤其以林邊或陽光充分照射的地方最為常見。偶生于針葉樹上[3]。
1.3.2 分布范圍
分布于全國大部分地區(qū),其中紅栓菌分布于江蘇、安徽、浙江、江西、福建等地。血紅栓菌分布于吉林、河北、山西、陜西等地[2]。
紅栓菌為偶見種類,血紅栓菌為常見種類,二者均在夏季和秋季出現(xiàn),其子實體木質(zhì),不易腐爛,與基物著生緊密,采集時需用刀割取[3]。
紅栓菌含朱紅菌酸(cinnabarinic acid)、朱紅菌素 (cirmabarine)、朱紅栓菌素 (trflmesangiiin)[2]。具有抑制腫瘤、鎮(zhèn)痛、清熱除濕、消炎解毒功效,可治療癰疽瘡癤、咽喉腫痛、跌打損傷、風(fēng)濕諸癥[1]。
血紅栓菌含血紅栓菌素(pycnosanguine)、朱紅菌素 (cinnabarine) 和 4個吩噁-3酮類 (phenoxazin-3-ones)、4-羥甲基喹啉 (4-hydroxymethylquinoline)、游離糖、糖醇及有機酸等[1-2]。具有抗菌、抑腫瘤、解毒、袪風(fēng)除濕、清熱解毒、止血、止癢等功效,用于消炎、痢疾、咽喉腫痛、跌打損傷、癰疽瘡癤、癢疹、咳嗦痰喘、風(fēng)濕痹癥、外傷出血等[3,10]。
2.1.1 抗腫瘤作用
紅栓菌和血紅栓菌均具有抗腫瘤的功效。研究表明朱紅栓菌子實體、菌絲體和胞外多糖均具有抑制腫瘤生長和免疫調(diào)節(jié)等作用,其子實體的水提物具有抑腫瘤等功效,其中對小鼠肉瘤細(xì)胞S180和艾氏癌細(xì)胞的抑制率均達(dá)90%[12-16]。抑制腫瘤細(xì)胞存活率試驗結(jié)果顯示,對乳癌(MCF-7)、纖維肉瘤(HT-1080)、子宮頸癌等細(xì)胞降低存活率達(dá)70%或以上;對肝癌(Hep G2) 細(xì)胞降低存活率達(dá)40%或以上;抗氧化試驗方面也顯示其具有明顯清除自由基的能力[1]。
對健康小鼠注射S180肉瘤細(xì)胞懸液,建立荷瘤小鼠模型。將紅栓菌多糖按高劑量、中劑量、低劑量給藥,結(jié)果顯示紅栓菌粗多糖對小鼠S180肉瘤有抑制作用,能明顯提高荷瘤小鼠的腹腔巨噬細(xì)胞吞噬指數(shù)與吞噬率。結(jié)果表明紅栓菌粗多糖具有抗腫瘤以及增強荷瘤小鼠免疫功能的作用[12]。
陳俊威等[13]考察了紅栓菌胞外多糖PPS2的抗腫瘤及免疫藥理作用,結(jié)果表明PPS2具有較理想的抗腫瘤作用,其抑瘤機制可能與免疫調(diào)節(jié)作用相關(guān)。
2.1.2 免疫增強效應(yīng)
紅栓菌粗多糖能明顯提高荷瘤小鼠的腹腔巨噬細(xì)胞吞噬指數(shù)與吞噬率,外周血淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率及血清溶血素水平,并能提高血清中細(xì)胞因子TNF-a含量,明顯增加小鼠免疫器官胸腺和脾臟重量,促進其T細(xì)胞體外增殖及接觸性皮炎反應(yīng),提高小鼠血清凝集素滴度,對小鼠非特異性免疫功能具有明顯促進作用[13,18]。
2.1.3 消炎解毒、清熱除濕作用
抗菌活性試驗顯示,紅栓菌對大腸桿菌、李斯特菌等具有抑制生長作用,能抑制串珠鏈球菌的產(chǎn)孢能力;抗炎方面研究表明,以乙醇萃取效果最佳,濃度越高抑制一氧化氮(NO)產(chǎn)生的能力越強;可治口腔炎和菌痢[10]。血紅栓菌子實體含有對革蘭氏陰性菌、革蘭氏陽性菌有抑制作用的多孔蕈素(polyporin),民間多用于消炎,火燒研粉敷于瘡傷處即可[10]。
2.1.4 止血、止痛作用
紅栓菌具有解表除濕,止血功效。附方治傷口出血將朱砂菌焙干,研末,過篩,敷于傷口上[2]。朱紅栓菌可以轉(zhuǎn)化產(chǎn)生蒂巴因堿(theoine),一種罌粟堿,這是一種新型止痛藥[10]。
對紅栓菌采用硅膠和凝膠等柱色譜方法,結(jié)合核磁、波譜和質(zhì)譜等技術(shù)對乙酸乙酯提取物的化學(xué)組分及菌絲體進行分析,共分離純化出1,3-二油酰甘油酯等11種化合物[19]。
體外抗菌試驗顯示,野生紅栓菌甲醇粗提物對大腸桿菌、沙門氏菌、鏈球菌和金黃色葡萄球菌表現(xiàn)出明顯的抗菌活性,從該粗提物分離獲得2個吩噁嗪酮類生物堿,通過波譜分析分別鑒定為朱紅菌素和朱紅栓菌素,由于這兩個化合物難溶于一般有機溶劑,因而其生物活性還未得到有效研究[20]。有研究通過對其結(jié)構(gòu)進行修飾而增強其溶解性,從而深入研究其生物活性,以開發(fā)其潛在的藥用價值[20]。
3.2.1 人工栽培現(xiàn)狀
90年代對紅栓菌進行了以木屑和棉籽殼為主料栽培的研究,其菌絲體及子實體均生長較好,頭茬子實體生物轉(zhuǎn)化率可達(dá)24.88%,具有較好的栽培效果[21]。
3.2.2 深層發(fā)酵工藝研究
朱紅栓菌液體發(fā)酵試驗研究了其最適碳源、氮源及濃度和最佳發(fā)酵條件,確定了最適液體搖瓶發(fā)酵培養(yǎng)基為蛋白胨0.4%、葡萄糖2.0%,磷酸二氫鉀0.20%、硫酸鎂0.15%;最適培養(yǎng)條件為培養(yǎng)基初始pH6.5,搖瓶裝量100 mL(250 mL三角瓶),轉(zhuǎn)速140 r·min-1,搖瓶培養(yǎng)溫度為26℃,培養(yǎng)時間為10 d,為大規(guī)模生產(chǎn)提供了技術(shù)支持[22]。
通過對紅栓菌胞外多糖的分離純化和理化性質(zhì)方面的研究,從紅栓菌中獲得的多糖由木糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖等單糖組成[15]。通過色譜和紅外光譜分析紅栓菌發(fā)酵液獲得了3個多糖組分特征,并以羥自由基清除率為指標(biāo)評價抗氧化能力,結(jié)果表明紅栓菌胞外多糖均含甘露糖和葡萄糖,還含有少量半乳糖;紅外光譜分析表明3個組分均含有吡喃糖環(huán)的β構(gòu)型多糖;清除羥自由基的半最大效應(yīng)濃度 EC50值分別為 0.508 mg·mL-1、1.051 mg·mL-1和 1.527 mg·mL-1[23]。
通過測定紅栓菌多糖灌胃給藥對小鼠肉瘤S180的抑制率,結(jié)果表明,紅栓菌多糖具有明顯的生理活性,能抑制腫瘤生長,提高機體免疫能力,延長小鼠生命,并且安全無毒[24]。
通常可將色素分為人工合成色素和天然色素2類[25]。部分合成色素存在人體致癌等潛在危害,而天然色素安全可靠,色澤自然鮮艷,具有很高的營養(yǎng)價值和藥理活性等功能,有取代合成色素的趨勢[26]。天然色素來自動植物材料和微生物,前者由于受到氣候、季節(jié)等因素的影響,原料不足,使其應(yīng)用受到局限;利用微生物資源生產(chǎn)天然色素,能克服前者的諸多缺點,并易于工業(yè)化[27]。
血紅栓菌是自然界中廣泛存在的一類白腐真菌,其在生長過程中會產(chǎn)生一類紅色色素,有報道稱其色素具有一定的抑制細(xì)菌生長作用[28],可作為功能性的天然色素使用,因此研究這類真菌發(fā)酵色素產(chǎn)生、提取條件和其理化性質(zhì)具有一定的理論和應(yīng)用價值。
色素提取研究主要集中于血紅栓菌色素的提取工藝研究,重點探討其固體基質(zhì)發(fā)酵及色素提取、子實體色素提取工藝、液態(tài)發(fā)酵及色素提取工藝[29-31],結(jié)果表明該色素具有較好的穩(wěn)定性,在食品工業(yè)中具有較大的應(yīng)用價值。
3.5.1 木質(zhì)素降解
木質(zhì)纖維素是植物體的主要成分,主要包括纖維素、木質(zhì)素和半纖維素,是地球上數(shù)量最大的可再生能源物質(zhì)[32]。木質(zhì)素以一種物理屏障形式存在,其包圍在纖維素外部,保護纖維素免受降解酶分解,木質(zhì)素的降解在植物纖維素材料有效利用中占有非常重要的位置[33]。
在木質(zhì)素的生物降解中,木質(zhì)素過氧化物酶、錳依賴過氧化物酶、漆酶是3種主要的木質(zhì)素降解酶類[34]。白腐菌是降解木質(zhì)素的最有效微生物,其降解主要通過分泌木質(zhì)素降解酶實現(xiàn)[35]。選育能在較寬泛條件下降解木質(zhì)素及其類似物的白腐菌菌種具有重要的現(xiàn)實意義[36]。
研究表明白腐菌中的血紅栓菌能夠產(chǎn)生2類木質(zhì)素降解酶,且酶的熱穩(wěn)定性較好,且不同溫度、碳氮源、pH和表面活性劑對產(chǎn)酶的影響較大[37]。
3.5.2 漆酶的降解作用、脫色漂白作用
漆酶是血紅栓菌分泌的多種胞外酶的一種,具有重要的工業(yè)應(yīng)用價值,對偶氮、三苯甲烷和蒽醌素都有很好的降解作用[38]。漆酶可廣泛用于紙漿漂白、污染物降解、食品工業(yè)、有機合成等領(lǐng)域[39-43]。
研究了紅栓菌的富硒富鍺轉(zhuǎn)化及硒鍺對菌體生長代謝過程的影響,結(jié)果表明紅栓菌具有較強的富硒能力,多糖對無機硒的轉(zhuǎn)化率為34.2%。菌絲體可富集鍺,而且可與所含活性成分多糖結(jié)合[44];酶活測定分析表明,富鍺菌絲體內(nèi)的抗衰老相關(guān)酶,如超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化物酶(PER)、過氧化氫酶(CAT)酶活均顯著提高,顯示了富鍺紅栓菌菌絲體或其多糖成分作為一種功能性醫(yī)藥保健品的應(yīng)用價值[45]。
紅栓菌活性物質(zhì)的提取及其抗菌活性研究試驗結(jié)果表明,朱紅栓菌粗提物在濃度為1 mg·mL-1和5 mg·mL-1時對大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、沙門氏菌和鏈球菌均具有明顯的抑制作用,其中,對大腸桿菌的抑菌作用最明顯,在濃度為5 mg·mL-1時達(dá)到高敏抑菌[46]。因此,紅栓菌粗提物在體外有抗菌活性,在抑菌藥用方面具有一定的開發(fā)前景和價值。
由于紅栓菌野生子實體產(chǎn)量稀少,導(dǎo)致后續(xù)的藥用活性物質(zhì)研究與開發(fā)不能深入開展,未有成型的相關(guān)研發(fā)產(chǎn)品投入市場;紅栓菌子實體的人工栽培技術(shù)尚未完全展開,栽培技術(shù)未做到商業(yè)化規(guī)模生產(chǎn),因此其研究與開發(fā)進展并不迅速。而作為一種具有較高藥理活性及經(jīng)濟價值的藥用菌,紅栓菌的市場宣傳推廣力度不夠,還需加強。紅栓菌有巨大的研究與發(fā)展空間,值得科研工作者加強研究力度和水平,使紅栓菌的研究應(yīng)用得到提高和發(fā)展。