陳煉，閆廣鵬，李軍#

1新疆醫(yī)科大學(xué)研究生學(xué)院，烏魯木齊830000

2新疆維吾爾自治區(qū)人民醫(yī)院口腔頜面外科，烏魯木齊830000

據(jù)統(tǒng)計(jì)，2018年全球惡性腫瘤新發(fā)病例數(shù)約為1810萬(wàn)人，死亡病例數(shù)約為960萬(wàn)人，已成為威脅人類健康的重要疾病[1]。惡性腫瘤的發(fā)病機(jī)制較為復(fù)雜，臨床中通常以手術(shù)、放療及化療等綜合治療為主。雖然近年來(lái)臨床中對(duì)各種惡性腫瘤的診斷、治療取得了很大的進(jìn)展，但患者預(yù)后仍不理想。鑒于此，尋找合適的生物靶標(biāo)，采取生物靶向療法治療惡性腫瘤并預(yù)測(cè)其發(fā)展及預(yù)后已成為目前研究的熱點(diǎn)。微小RNA（microRNA，miRNA）是目前研究的熱點(diǎn)，相關(guān)研究表明，人類基因組中已確認(rèn)的miRNA有800多個(gè)，其中至少200多個(gè)miRNA參與腫瘤的發(fā)生發(fā)展，在各種惡性腫瘤中發(fā)揮著癌基因或抑癌基因的作用[2]。過(guò)去認(rèn)為miRNA隨從鏈最終會(huì)被降解，因此其潛在的作用易被忽略，但已有研究證實(shí)其異常表達(dá)在惡性腫瘤的發(fā)病機(jī)制中具有至關(guān)重要的作用[3]。miRNA在不同惡性腫瘤組織中的表達(dá)具有特異性，且其表達(dá)水平與腫瘤的發(fā)生發(fā)展及預(yù)后具有密切關(guān)系。因此，可通過(guò)檢測(cè)并分析不同惡性腫瘤中miRNA的表達(dá)情況，確定腫瘤的組織來(lái)源，還可以直接反映基因表達(dá)水平的高低。miRNA-125b或許能夠成為診斷某些惡性腫瘤的生物學(xué)標(biāo)志物，為腫瘤的診斷、治療及預(yù)后評(píng)估提供依據(jù)。隨著研究的進(jìn)一步深入，研究者發(fā)現(xiàn)miRNA-125b在多種惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中扮演了重要角色，與惡性腫瘤的增殖、侵襲和遷移、凋亡等生物學(xué)行為息息相關(guān)。本文就miRNA-125b在惡性腫瘤發(fā)生發(fā)展中的研究進(jìn)展作一綜述。

1 miRNA-125 b概述

miRNA-125b是目前研究較為廣泛和深入的一種miRNA。miRNA-125b具有miRNA-125b-1和miRNA-125b-2兩個(gè)前體，它們擁有同樣成熟的miRNA-125b序列，其不同之處在于成熟序列的兩側(cè)序列以及它們各自編碼基因的位點(diǎn)[4]。miRNA-125b-1位于染色體的11q23脆性位點(diǎn)，而miRNA-125b-2位于染色體的21q21位點(diǎn)[5]。研究發(fā)現(xiàn)，miRNA-125b在多種惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中均具有重要作用，其可作為癌基因抑制抑癌蛋白的表達(dá)，也可作為抑癌基因抑制癌蛋白的表達(dá)。So等[6]研究表明，miRNA-125b在髓系及B細(xì)胞白血病中過(guò)表達(dá)，進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，miRNA-125b通過(guò)抑制干擾素調(diào)節(jié)因子4（interferon regulator factor 4，IRF4）的表達(dá)誘導(dǎo)髓系及B細(xì)胞白血病的發(fā)生。Wang等[7]研究表明，miRNA-125b在骨肉瘤組織中的表達(dá)水平低于癌旁組織，miRNA-125b在骨肉瘤U2OS和MG-63細(xì)胞系中具有抑癌基因的作用。研究表明，miRNA-125b與腫瘤細(xì)胞的增殖和凋亡密切相關(guān)，在腫瘤細(xì)胞的侵襲和遷移過(guò)程中也發(fā)揮著相當(dāng)重要的作用，可以在轉(zhuǎn)錄水平調(diào)控基因的表達(dá)[8]。

2 miRNA-125 b在腫瘤中的研究進(jìn)展

2.1 miRNA-125 b與腫瘤細(xì)胞增殖的關(guān)系

細(xì)胞的增殖能力是評(píng)價(jià)細(xì)胞活性的重要指標(biāo)，細(xì)胞增殖一般分為G0/G1期、S期、G2/M期，其中S期腫瘤細(xì)胞越少，表明細(xì)胞的增殖能力越弱[9]。miRNA-125b可以抑制細(xì)胞周期G1/S期停滯，從而持續(xù)促進(jìn)細(xì)胞增殖，這一機(jī)制的關(guān)鍵點(diǎn)在于miRNA-125b可以下調(diào)p53蛋白的表達(dá)。Zhang等[10]研究證實(shí)，p53mRNA的3'端非翻譯區(qū)能夠與miRNA-125b結(jié)合，下調(diào)p53蛋白表達(dá)，阻止G1/S期細(xì)胞周期停滯，使細(xì)胞持續(xù)增殖。雖然miRNA-125b在細(xì)胞周期中能夠促進(jìn)細(xì)胞增殖，但是其通過(guò)與某些癌基因的靶向結(jié)合抑制腫瘤細(xì)胞的增殖卻更為常見(jiàn)。相關(guān)研究顯示，miRNA-125b可靶向抑制人表皮生長(zhǎng)因子受體2（human epidermal growth factor receptor 2，HER2）/人表皮生長(zhǎng)因子受體 3（human epidermal growth factor receptor 3，HER3），使腫瘤細(xì)胞的增殖被限制，其中磷脂酰肌醇3-激酶（phosphatidylinositol 3-kinase，PI3K）/蛋白激酶B（protein kinase B，PKB，也稱AKT）信號(hào)通路在此過(guò)程中具有重要作用[11]。Shiiba等[12]將miRNA-125b轉(zhuǎn)染至口腔鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞中并使其過(guò)表達(dá)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，腫瘤細(xì)胞的增殖率明顯下降，表明miRNA-125b具有明顯抑制腫瘤細(xì)胞增殖的能力。Wu等[13]研究發(fā)現(xiàn)，胃癌中miRNA-125b的表達(dá)量較低，且miRNA-125b的表達(dá)上調(diào)可以抑制胃癌細(xì)胞的增殖。Liang等[14]研究證實(shí)，miRNA-125b能夠與下游致癌基因LIN28B的3'端非翻譯區(qū)靶向結(jié)合，使其mRNA和蛋白表達(dá)水平降低，從而抑制肝癌細(xì)胞的增殖。Sun等[15]研究表明，miRNA-125b表達(dá)下調(diào)可抑制SW756和C4-1細(xì)胞的增殖和集落形成，miRNA-125b能夠直接與染色質(zhì)相關(guān)蛋白高遷移率族蛋白A1（high mobility group protein A1，HMGA1）mRNA的3'端非翻譯區(qū)靶向結(jié)合，進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，miRNA-125b通過(guò)抑制HMGA1的表達(dá)調(diào)控PI3K/AKT通路。Yu等[16]研究證實(shí)，在食管鱗狀細(xì)胞癌組織及細(xì)胞系中，miRNA-125b過(guò)表達(dá)可抑制食管鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞的增殖。由于miRNA-125b可顯著降低HAX-1的表達(dá)水平和轉(zhuǎn)錄活性，HAX-1表達(dá)升高可逆轉(zhuǎn)miRNA-125b對(duì)細(xì)胞增殖的抑制作用，因此miRNA-125b可以通過(guò)調(diào)節(jié)HAX-1的表達(dá)抑制食管鱗狀細(xì)胞癌的增殖。有關(guān)研究表明，miRNA-125b能夠與SPHK1的3'端非翻譯區(qū)靶向結(jié)合，該研究采用實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)（quantitative real-time polymerase chain reaction，qRT-PCR）和蛋白質(zhì)印跡法（Western blot）等技術(shù)，發(fā)現(xiàn)過(guò)表達(dá)的miRNA-125b可使膀胱癌細(xì)胞中鞘氨醇激酶1（sphingosine kinase 1，SPHK1）的mRNA及蛋白表達(dá)水平降低，證實(shí)SPHK1下調(diào)可使膀胱癌T24細(xì)胞增殖受到抑制[17]。

2.2 miRNA-125 b與腫瘤細(xì)胞侵襲及遷移的關(guān)系

侵襲及遷移是惡性腫瘤的特征性生物學(xué)表現(xiàn)，miRNA-125b可通過(guò)調(diào)控某些基因的表達(dá)影響腫瘤細(xì)胞的侵襲及遷移。腫瘤細(xì)胞的侵襲及遷移主要通過(guò)上皮-間充質(zhì)的轉(zhuǎn)化機(jī)制完成，miRNA-125b可參與此機(jī)制進(jìn)而調(diào)控上皮-間充質(zhì)轉(zhuǎn)化[18]。Li等[19]研究發(fā)現(xiàn)，轉(zhuǎn)錄共激活因子PDZ結(jié)合基序（transcriptional coactivator with PDZ-binding motif，TAZ）是miRNA-125b的下游靶點(diǎn)，過(guò)表達(dá)的TAZ可抑制miRNA-125b在人肝癌細(xì)胞中的侵襲抑制作用。Zhou等[20]研究表明，miRNA-125b通過(guò)轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β（transforming growth factor-β，TGF-β）/SMAD信號(hào)通路介導(dǎo)上皮-間充質(zhì)轉(zhuǎn)化。Bu等[21]通過(guò)熒光素酶分析發(fā)現(xiàn)磷脂酰肌醇-4，5-二磷酸3-激酶催化亞基δ（phosphatidylinositol-4，5-bisphosphate 3-kinase catalytic subunit delta，PIK3CD）是 miRNA-125b在甲狀腺未分化癌中的直接靶點(diǎn)，miRNA-125b可下調(diào)甲狀腺未分化癌細(xì)胞中PIK3CD的表達(dá)水平，并抑制甲狀腺未分化癌細(xì)胞的增殖和侵襲。Zhang等[22]研究表明，原發(fā)性黑色素瘤中miRNA-125b的表達(dá)顯著下調(diào)，且在轉(zhuǎn)移及侵襲性黑色素瘤中表達(dá)水平更低，上調(diào)miRNA-125b的表達(dá)可通過(guò)抑制整合素α9（integrin subunit alpha 9，ITGA9）的表達(dá)顯著抑制惡性表型；miRNA-125b表達(dá)降低及ITGA9表達(dá)上調(diào)是導(dǎo)致黑色素瘤細(xì)胞侵襲和遷移的原因。Lee等[23]研究發(fā)現(xiàn)，在卵巢癌SKOV3細(xì)胞株中miRNA-125b表達(dá)下調(diào)，真核翻譯起始因子4E結(jié)合蛋白1（eukaryotic translation initiation factor 4E binding protein 1，EIF4EBP1）mRNA 表達(dá)上調(diào)，而該蛋白在腫瘤的發(fā)生發(fā)展中具有重要作用，進(jìn)一步研究證實(shí)，miRNA-125b可通過(guò)靶向結(jié)合EIF4EBP1降低其mRNA表達(dá)水平，從而抑制卵巢癌細(xì)胞的侵襲及遷移。Tang等[24]研究發(fā)現(xiàn)，在MCF-7乳腺癌細(xì)胞系中miRNA-125b能夠通過(guò)誘導(dǎo)上皮細(xì)胞轉(zhuǎn)化為間質(zhì)細(xì)胞，促進(jìn)乳腺癌細(xì)胞的侵襲及遷移。Cortez等[25]研究表明，在膠質(zhì)瘤細(xì)胞中miRNA-125b可以通過(guò)下調(diào)整合膜蛋白平足蛋白（podoplanin）的表達(dá)抑制腫瘤細(xì)胞的侵襲。有研究表明，GRB2相關(guān)結(jié)合蛋白2（GRB2 associated binding protein 2，GAB2）是 miRNA-125b的靶蛋白，與蛋白酶激活受體2（protease activated receptor 2，PAR2）誘導(dǎo)的細(xì)胞侵襲和遷移密切相關(guān)，且PAR2在多種惡性腫瘤細(xì)胞中呈高表達(dá)。Yang等[26]研究表明，激活PAR2可抑制miRNA-125b的表達(dá)，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞遷移，而上調(diào)miRNA-125b的表達(dá)則可抑制PAR2誘導(dǎo)的腫瘤細(xì)胞遷移。

2.3 miRNA-125 b與腫瘤細(xì)胞凋亡的關(guān)系

細(xì)胞凋亡是腫瘤發(fā)生發(fā)展過(guò)程中的重要組成部分，其中miRNA-125b可通過(guò)調(diào)控p53、Bcl-2拮抗/殺傷因子 1（Bcl-2 antagonist/killer 1，BAK1）、Bcl-2修飾因子（Bcl-2 modifying factor，BMF）等靶基因參與細(xì)胞凋亡過(guò)程。Fan等[27]對(duì)食管癌細(xì)胞進(jìn)行研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，過(guò)表達(dá)的miRNA-125b可顯著抑制食管癌細(xì)胞增殖，其中BMF被認(rèn)為是miRNA-125b潛在的候選靶點(diǎn)，在食管癌細(xì)胞中，BMF表達(dá)上調(diào)，其表達(dá)水平與miRNA-125b呈負(fù)相關(guān)，具有明顯的促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡的作用。

Pearson等[28]研究表明，Bax作為促凋亡蛋白在腫瘤細(xì)胞的凋亡中發(fā)揮作用，但是當(dāng)p53發(fā)生突變時(shí)，Bax就無(wú)法發(fā)揮作用，這是由于p53與bcl-xl結(jié)合后會(huì)將Bax釋放，導(dǎo)致細(xì)胞凋亡的發(fā)生。然而，當(dāng)miRNA-125b調(diào)控p53使其表達(dá)下調(diào)時(shí)，bcl-xl會(huì)對(duì)Bax產(chǎn)生持續(xù)抑制，從而抑制細(xì)胞凋亡。Shi等[29]通過(guò)研究前列腺癌細(xì)胞內(nèi)是否表達(dá)雄激素受體時(shí)發(fā)現(xiàn)，在表達(dá)雄激素受體的前列腺癌細(xì)胞中miRNA-125b的表達(dá)水平上調(diào)，其上調(diào)的程度與前列腺癌細(xì)胞的凋亡速率呈負(fù)相關(guān)。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，前列腺癌細(xì)胞中的雄激素可激活miRNA-125b，其與BAK1mRNA結(jié)合后可抑制p53下游靶蛋白BAK1的表達(dá)，進(jìn)一步抑制BAK1介導(dǎo)的腫瘤細(xì)胞凋亡。miRNA-125b也可以通過(guò)抑制抗凋亡蛋白的表達(dá)促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡。Gong等[30]研究表明，B細(xì)胞淋巴瘤/白血病-2（B cell lymphoma/leukemia-2，Bcl-2）家族中的BCL-W和Mcl-1是可被miRNA-125b抑制的抗凋亡蛋白，其mRNA可直接與miRNA-125b結(jié)合導(dǎo)致蛋白表達(dá)水平下降，從而促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡。Xia等[31]研究發(fā)現(xiàn)，miRNA-125b通過(guò)下調(diào)BMF的表達(dá)促進(jìn)神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞株U343的增殖，并且通過(guò)抑制全反式維甲酸（all-trans retinoic acid，ATRA）的表達(dá)誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡，BMF是Bcl-2促凋亡家族成員之一，當(dāng)BMF表達(dá)下調(diào)時(shí)可明顯促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡。Liu等[32]研究發(fā)現(xiàn)，膀胱癌細(xì)胞凋亡與PI3K/AKT信號(hào)通路有關(guān)，miRNA-125b可通過(guò)抑制該信號(hào)通路，靶向結(jié)合己糖激酶2（hexokinase 2，HK2），從而發(fā)揮抑制膀胱癌的作用，為膀胱癌的治療提供了潛在的治療靶點(diǎn)。Wang等[33]對(duì)非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞的凋亡機(jī)制進(jìn)行研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn) ，miRNA-125b也 可 以 通 過(guò) 抑 制 PI3K/AKT、WNT/β-聯(lián)蛋白（β-catenin）信號(hào)通路影響非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞的凋亡。

3 小結(jié)與展望

惡性腫瘤的發(fā)病原因復(fù)雜，尋找最佳的治療方法仍是目前臨床研究的熱點(diǎn)。隨著分子生物學(xué)的發(fā)展，越來(lái)越多的學(xué)者從基因?qū)用嫜芯磕[瘤的發(fā)生發(fā)展機(jī)制并尋求突破。研究發(fā)現(xiàn)，miRNA-125b與腫瘤細(xì)胞的增殖、侵襲、遷移、凋亡等生物學(xué)行為息息相關(guān)，但在不同惡性腫瘤中的表達(dá)可為低表達(dá)或高表達(dá)，表明miRNA-125b具有組織特異性，可作為癌基因或抑癌基因，可能與其上游的調(diào)節(jié)機(jī)制及下游的靶標(biāo)有關(guān)。當(dāng)其與細(xì)胞的增殖或侵襲信號(hào)通路產(chǎn)生關(guān)聯(lián)時(shí)，就會(huì)影響細(xì)胞的增殖或侵襲；當(dāng)其與細(xì)胞的轉(zhuǎn)移及凋亡信號(hào)通路產(chǎn)生關(guān)聯(lián)時(shí)，就會(huì)影響細(xì)胞的轉(zhuǎn)移及凋亡。由于多種因素參與對(duì)miRNA-125b的調(diào)節(jié)，因此其對(duì)細(xì)胞生物學(xué)功能的影響也各不相同。miRNA-125b在惡性腫瘤中的作用機(jī)制及差異表達(dá)或許能夠成為一個(gè)潛在的治療惡性腫瘤的新靶點(diǎn)，但其具體的作用機(jī)制目前還未完全闡明，而且miRNA-125b在同一惡性腫瘤中可能調(diào)控多個(gè)信號(hào)通路，因此僅對(duì)miRNA-125b調(diào)控的一條信號(hào)通路進(jìn)行靶向治療，或許不能完全阻斷惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展，甚至?xí)斐烧；虻膿p傷，因此在保證靶向藥物特異性的同時(shí)，應(yīng)該首要考慮治療方法的安全性。在臨床中，miRNA-125b可作為一個(gè)穩(wěn)定而可靠的腫瘤標(biāo)志物，未來(lái)可對(duì)惡性腫瘤的早期診斷、病理分型、預(yù)后評(píng)估、臨床治療和靶向藥物的研制提供理論基礎(chǔ)。因此，更加深入地研究miRNA-125b在惡性腫瘤中的作用機(jī)制具有重要意義。