飼料禁用抗生素的歷程，從1986年瑞典開始實施，到2018年中國實施。如何實現(xiàn)綠色健康養(yǎng)殖可以從五個方面出發(fā)：1）優(yōu)良的畜禽品種。套用中國的一句古話“先天不足，后天難補(bǔ)”，如果我們的品種不好，那在后期會有很多的問題。2）生物安全體系。我們一定要有一個非常良好的生物安全體系，防止病原體的入侵。3）科學(xué)全價、營養(yǎng)合理的飼料配方。這也是改善和提高我們健康養(yǎng)殖的關(guān)鍵。4）提高飼養(yǎng)管理水平同樣非常重要。5）一定要有一個合理的替抗產(chǎn)品，才能保證替抗，減少抗生素的使用。

替抗產(chǎn)品目前比較熱門的有六大類：微生態(tài)制劑、中藥、噬菌體、天然提取物、抗菌肽以及酶制劑，其中微生態(tài)制劑是現(xiàn)在替抗產(chǎn)品中最火熱之一，本文就對微生態(tài)制劑進(jìn)行一個詳細(xì)的闡述。

微生物制劑的篩選與評估

腸道是人體中最大的免疫器官，含有700多種微生物，可以產(chǎn)生20種以上的激素，另外占機(jī)體能量消耗20%，所以說腸道在人體器官中有非常重要的意義。

微生態(tài)參與腸道黏膜免疫的幾大功能，生物屏障、化學(xué)屏障、機(jī)械屏障、免疫屏障都和微生態(tài)益生菌是息息相關(guān)的。

1963年在美國做了一個經(jīng)典的微生物學(xué)實驗，分為兩組，一組正常飼養(yǎng)，另外一組無菌飼養(yǎng)。飼養(yǎng)一個周期之后發(fā)現(xiàn)，正常飼養(yǎng)的雞茁壯成長，而無菌飼養(yǎng)的雞又瘦弱又小，這充分說明了腸道菌群具有非常重要的意義。

現(xiàn)在國內(nèi)微生態(tài)制劑生產(chǎn)企業(yè)非常多，但是都存在以下幾個問題：1）菌株功能性的問題。微生態(tài)益生菌，最常見的枯草芽孢桿菌，它的基因序列改變會導(dǎo)致它的功能是不一樣的。所以說我們一定研究到具體株，不僅僅只看一個活菌數(shù)，一個耐熱的活性，這并不是完全評價一個產(chǎn)品好壞的重要指標(biāo)，我們必須看具體的基因序列的功能。2）安全性、毒力基因、溶血性的問題。安全性研究我國非常欠缺，很多菌種在歐盟和中國臺灣被禁用，尤其是對毒力基因，我們的研究非常欠缺，所以安全使用益生菌的前提，是一定要保證不含毒力基因，不會導(dǎo)致溶血性。3）乳酸菌穩(wěn)定性的問題。以上三個問題，是我國微生態(tài)行業(yè)遇到最重要的問題。

歐洲食品安全局評估上市的流程主要含有八項：第一，最主要的就是菌種沒有毒性和病原性；第二，可以準(zhǔn)確的分類和鑒定，一定要具體到株；第三，菌株可以在消化道棲息；第四，可以產(chǎn)生抗菌物質(zhì)；第五，可以調(diào)節(jié)免疫；第六，遺傳基因的定性；第七，至少要有一個科學(xué)的依據(jù)證明它是有用的；第八就是安全性、穩(wěn)定性的問題。國際食品與法典委員會也在2002年建立了一套益生菌評估的方法，和歐洲的方法是類似的，包括以下幾個方面：不含有抗生素耐藥性基因轉(zhuǎn)移的風(fēng)險，不能有毒性，還必須要知道它特定的代謝活性是什么，另外包括溶血性不可以發(fā)生，最后評估產(chǎn)品在動物應(yīng)用中的毒副作用，這是現(xiàn)在歐洲和國際上比較成熟的一套評價益生菌安全性的體系。

益生菌篩選及運用

我們也建立了自己的益生菌篩選標(biāo)準(zhǔn)：1）菌株的篩選。要進(jìn)行特異性篩選，想得到什么樣的菌株，想要什么功能的菌株，這是我們特異性篩選的第一步，而并不是說隨便找個糞便，找個環(huán)境的土壤，隨便一分，分到哪個是哪個，那么這樣的分離是沒有意義的，我們要特異性靶向篩選。2）抗菌性實驗。也就是說是否可以產(chǎn)生一些抗菌物質(zhì)，主要是最常見的沙門氏桿菌、大腸桿菌等，進(jìn)行益菌性的實驗。3）抗逆性試驗。如何順利到達(dá)腸道發(fā)揮作用，評價的方法就是耐酸、耐膽鹽。4）安全性實驗。第一是不能引起溶血反應(yīng)，第二是不能含有耐藥基因，第三是無細(xì)胞毒性，這是必須進(jìn)行的評價，以保證安全性。5）效果驗證。我們在臨床中必須有大量的實驗數(shù)據(jù)支撐產(chǎn)品的有效性。

根據(jù)以上工作，我們研發(fā)了一個微生態(tài)復(fù)方制劑“益美樂”，主要有以下功能：抑制腸道菌群，提高機(jī)體免疫力，促進(jìn)生長，以及提高飼料的利用率。組成成分中有3個專利植物乳桿菌RP3和1個植物乳桿菌RP5，主要功能是提高免疫力。

健康動物和亞健康動物腸道菌群到底有什么差別？我們研究發(fā)現(xiàn)，健康動物和亞健康動物的主要差別在乳酸菌，亞健康動物與健康動物的腸道菌群組成大概差了15倍左右。我們定向篩選了3株乳桿菌，它的主要功能就是提高巨噬細(xì)胞的吞噬能力，提高機(jī)體的非特異性免疫功能。第二個就是植物乳桿菌RP5，可以顯著抑制有害菌的生長；RP21，可以改善應(yīng)激反應(yīng)，促成生長。所有的菌株都要保證安全性，不含有耐藥基因，包括基因結(jié)構(gòu)和一些代謝產(chǎn)物的關(guān)系。

1.植物乳桿菌RP3。我們做了一個巨噬細(xì)胞產(chǎn)一氧化碳能力的實驗，并且找了一些常見的植物乳桿菌素做了對比，RP3可以顯著提高巨噬細(xì)胞產(chǎn)一氧化碳能力。一氧化碳是一種非特異性效益因子，可以殺滅很多病原微生物，是免疫調(diào)節(jié)過程中重要的一個介質(zhì)，是提高免疫力一個非常重要的菌株。

2.植物乳桿菌RP5。我們也做了很多數(shù)據(jù)，RP5含有41組編碼基因，常規(guī)的乳酸菌只有10～25組，植物乳桿菌的益菌能力和編碼基因數(shù)呈一個正相關(guān)的關(guān)系。

3.植物乳桿菌RP21。它主要是改善應(yīng)激和不良情緒，尤其是蛋雞，經(jīng)常會受到外界的感染，或者是產(chǎn)蛋后的應(yīng)激反應(yīng)，所以我們補(bǔ)充它是有意義和作用的。

4.植物乳桿菌的穩(wěn)定問題。我們做過耐酸性和耐膽鹽能力試驗，以保證它可以順利進(jìn)入腸道發(fā)揮作用，通過這個實驗表明，我們的植物乳桿菌在膽鹽濃度2‰的時候，還有良好的耐受性，耐膽鹽為3‰的時候，4h能有60%，可以保證順利到達(dá)胃腸道發(fā)揮作用。

5.包被技術(shù)。通過微囊包被，菌株不會顯露在外，這樣可以提高菌株的穩(wěn)定、活性。我們也是做了一個穩(wěn)定性的實驗，發(fā)現(xiàn)常溫放置60d以后，未包被的活性下降了65%，而包被的只下降了16%，所以相對來講提高了4倍的穩(wěn)定性。

6.安全性實驗。為了保證使用的益生菌不含有耐藥基因，我們對常見的7種抗生素進(jìn)行敏感性實驗，證明不含有耐藥基因，可以安全使用。

7.細(xì)胞毒性實驗和溶血性實驗。我們采用了脾細(xì)胞和菌株進(jìn)行共培養(yǎng)，同化膿性鏈球菌進(jìn)行對照，可以發(fā)現(xiàn)化膿性鏈球菌和脾細(xì)胞進(jìn)行共培養(yǎng)一樣，脾細(xì)胞大量死亡，而我們的功能性植物乳桿菌它不僅沒有減少脾細(xì)胞的數(shù)量，反而對脾細(xì)胞有增殖和促進(jìn)的作用，所以不含有細(xì)胞毒性。通用化膿性鏈球菌作為對照組，可以發(fā)現(xiàn)化膿性鏈球菌可以發(fā)生溶血反應(yīng)，而我們的植物乳桿菌不會造成溶血現(xiàn)象。

8.丁酸梭菌。它主要有四大營養(yǎng)功能：1）專性厭氧芽孢桿菌，可以提高體內(nèi)雙歧桿菌和乳酸桿菌的數(shù)量，抑制有害菌，改善腸道的生態(tài)平衡。2）生產(chǎn)丁酸，我們都知道是腸上皮組織細(xì)胞再生和修復(fù)的主要營養(yǎng)物質(zhì)。3）抗逆性強(qiáng)，可以保證順利到達(dá)腸道發(fā)揮作用。4）提供營養(yǎng)，增強(qiáng)免疫，可以顯著提高飼料轉(zhuǎn)化利用率。

9.布拉酵母。它屬于釀酒酵母的一個亞種，最早分離自東南亞，雖然和釀酒酵母是同源，但是功能性比常規(guī)的釀酒酵母要好出很多，最主要的特點就是可以黏附致病菌，將毒素排出體外，減少對機(jī)體的傷害。

我們對“益美樂”做了大量的臨床實驗，第一個是白羽肉雞飼養(yǎng)實驗，死淘率相對于對照組有非常顯著的提高。第二個是在豬上的應(yīng)用，實驗結(jié)果表明，“益美樂”顯著提高性能，其中高劑量組日增長比對照組提高11.33%，料肉比降低5.56%，同時腹瀉率比對照組降低87.24%，死亡率同樣降低了76%。所以說在仔豬上的應(yīng)用效果是非常顯著的。

目前腸道菌群的研究，全球包括國內(nèi)都處于初級階段，還有很多工作需要開展，在以后的研究中可以運用分子生物學(xué)等先進(jìn)的技術(shù)和方法，深入研究腸道微生物與宿主之間代謝、免疫、生長、發(fā)育、疾病的關(guān)系和作用，微生態(tài)運用會有更美好的明天。（本文根據(jù)錄音整理，未經(jīng)本人審閱，如有出入，以專家本人意見為準(zhǔn)）