魏依蘭，申曉平，杜錄，呂英雷，高星，竇志杰

承德醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院，河北承德067000

腦卒中是一種發(fā)病率、致殘致死率和復(fù)發(fā)率均較高的疾病，居我國成年人導(dǎo)致殘疾和死亡疾病的首位。近年來，隨著社會老齡化和城市化進(jìn)程加快，居民不健康生活方式流行，腦卒中危險因素普遍突顯，我國腦卒中發(fā)病率呈持續(xù)增長狀態(tài)，疾病負(fù)擔(dān)暴漲，且呈現(xiàn)年輕化趨勢，因此對腦卒中的進(jìn)一步研究仍意義重大[1]。急性缺血性腦卒中是我國最常見的腦卒中類型，占腦卒中比例的69.6%～70.8%[2]，其損傷機(jī)制多種多樣，如血流動力學(xué)改變、氧化應(yīng)激反應(yīng)、炎癥反應(yīng)、興奮性氨基酸、血腦屏障破壞等[3]。成纖維細(xì)胞生長因子(FGF)是一組家族性結(jié)構(gòu)相關(guān)蛋白多肽，大部分家族成員與成纖維細(xì)胞生長因子受體(FGFR)特異性結(jié)合，參與細(xì)胞的增殖、遷移、存活和分化，在機(jī)體的生長發(fā)育、調(diào)整代謝、組織修復(fù)再生、炎癥反應(yīng)、神經(jīng)系統(tǒng)控制等方面發(fā)揮重大作用[4]。成纖維細(xì)胞生長因子4(FGF4)是屬于FGF家族典型旁分泌4亞科中的一員，可通過結(jié)合和激活FGFR1c、FGFR2c、FGFR3c、FGFR4來調(diào)節(jié)生物學(xué)效應(yīng)[5]，而目前該亞科研究較少。本研究觀察了急性缺血性腦卒中患者血清FGF4的表達(dá)水平，并分析其與患者病情嚴(yán)重程度和預(yù)后的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取2018年11月～2019年3月于承德醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科就診的急性缺血性腦卒中患者 152例作為實(shí)驗組，其中男102例、女50例，年齡(61.00±12.46)歲；另選取同期于體檢中心體檢的健康人108例作為對照組，其中男60例、女48例，年齡(62.11±10.93)歲。實(shí)驗組研究對象均于發(fā)病72 h內(nèi)入院，且符合最新急性缺血性腦卒中診斷標(biāo)準(zhǔn)[2]。實(shí)驗組納入標(biāo)準(zhǔn)：①急性起??；②局灶性神經(jīng)功能缺失(如一側(cè)肢體麻木或無力、口角歪斜等)，少數(shù)為全面性缺失；③影像學(xué)檢查出現(xiàn)責(zé)任病灶或癥狀持續(xù)24 h以上；④排除出血性卒中；⑤排除非血管性疾病(如低血糖反應(yīng))。排除標(biāo)準(zhǔn)：①年齡<18歲；②既往出血或癥狀性缺血性卒中史；③合并出血轉(zhuǎn)化、先天性心臟病、心肌梗死、嚴(yán)重心肝腎功能不全、嚴(yán)重感染或慢性炎癥、代謝或自身免疫性疾??；④近期外傷或手術(shù)史；⑤不配合治療或失訪者。兩組受檢對象年齡、性別、BMI、吸煙史、飲酒史、高血壓史、糖尿病史、冠心病史等一般資料具有可比性(P均>0.05)。兩組納入對象均簽署知情同意書。

1.2 兩組受檢對象血清FGF4檢測 入院后當(dāng)日或第二日晨起時，采集兩組受檢對象空腹肘靜脈血3 mL置于采血管中，室溫血液自然凝固10～20 min，離心分離血清，采用ELISA法檢測血清FGF4。

1.3 血清FGF4水平與急性缺血性腦卒中患者病情嚴(yán)重程度的關(guān)系分析 急性缺血性腦卒中患者都在入院時經(jīng)由2名及以上專業(yè)培訓(xùn)的神經(jīng)內(nèi)科人員按照美國國立衛(wèi)生研究院卒中量表(NIHSS)評分，將實(shí)驗組患者分為輕型腦卒中組(NIHSS≤3分，111例)和非輕型腦卒中組(NIHSS>3分，41例)，分析血清FGF4表達(dá)水平與急性缺血性腦卒中患者疾病嚴(yán)重程度的關(guān)系。NIHSS評分越高提示神經(jīng)系統(tǒng)功能缺損程度越嚴(yán)重。

1.4 血清FGF4水平與急性缺血性腦卒中患者預(yù)后的關(guān)系分析 實(shí)驗組患者持續(xù)治療后14 d后，通過電話或門診隨訪的形式按照改良Rankin量表(mRS)評估患者預(yù)后狀況，根據(jù)預(yù)后狀況將實(shí)驗組患者分為預(yù)后良好組(mRS評分≤2分，118例)和預(yù)后不良組(mRS評分>2分，34例)，分析血清FGF4表達(dá)水平與患者預(yù)后的關(guān)系。mRS評分越高提示預(yù)后不良。

2 結(jié)果

2.1 兩組受檢對象血清FGF4水平比較 實(shí)驗組血清FGF4表達(dá)水平為(257.83±37.11)pg/mL，對照組血清FGF4表達(dá)水平為(143.02±47.29)pg/mL，兩組相比，P<0.01。

2.2 血清FGF4水平與急性缺血性腦卒中患者病情嚴(yán)重程度的關(guān)系 輕型腦卒中組患者血清FGF4表達(dá)水平為(244.13±28.43)pg/mL，非輕型腦卒中組患者血清FGF4表達(dá)水平為(294.90±32.35)pg/mL，兩組相比，P<0.01。Spearman相關(guān)性分析結(jié)果顯示，血清FGF4表達(dá)水平與急性缺血性腦卒中患者NIHSS評分呈正相關(guān)關(guān)系(r=0.816，P<0.01)。

2.3 血清FGF4水平與急性缺血性腦卒中患者預(yù)后的關(guān)系 預(yù)后良好組患者血清FGF4表達(dá)水平為(245.62±29.32)pg/mL，預(yù)后不良組患者血清FGF4表達(dá)水平為(300.19±29.48)pg/mL，兩組相比，P<0.01。Spearman相關(guān)性分析結(jié)果顯示，血清FGF4表達(dá)水平與急性缺血性腦卒中患者mRs評分呈正相關(guān)關(guān)系(r=0.647，P<0.01)。

3 討論

成纖維細(xì)胞生長因子家族(FGFs)是一類具有多種生物學(xué)活性的多肽生長因子，具有促有絲分裂和細(xì)胞存活特性，由22種不同的FGF組成，分子量為17～34 kDa不等，且結(jié)構(gòu)氨基酸之間存在高度同源性[6]，需要與FGFR結(jié)合后發(fā)揮作用。人體內(nèi)FGFR分為五大類，即由四種高度保守的跨膜受體酪氨酸激酶(FGFR1、FGFR2、FGFR3、FGFR4)和一種能結(jié)合FGF配體但缺乏細(xì)胞內(nèi)激酶結(jié)構(gòu)域的受體(FGFR5/FGFRL1)組成[7]，其中據(jù)不同結(jié)構(gòu)域又細(xì)劃分為FGFR1b、FGFR1c、FGFR2b、FGFR2c、FGFR3b、FGFR3c、FGFR4、FGFR5[6]。受體和配體結(jié)合后，F(xiàn)GFRs二聚化并觸發(fā)一系列下游信號通路，包括促分裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路、信號傳導(dǎo)及轉(zhuǎn)錄激活子(STAT)通路、磷酸肌醇-3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)通路及通過磷酸脂酶C-γ激活二酯酰甘油-蛋白激酶C(DAG-PKC)和三磷酸肌醇(IP3)-Ca2+信號分支，發(fā)揮胚胎發(fā)育、組織恢復(fù)、血管生成、細(xì)胞存活和凋亡等作用[8]。

FGF4隸屬于FGF家族中FGF4亞家族(FGF4、FGF5、FGF6)，其基因位于染色體11q13.3位置，分子量較小，可與受體FGFR1c、FGFR2c、FGFR3c、FGFR4相結(jié)合，且與前兩者結(jié)合能力高于后兩者[9，10]。FGFR1、FGFR4主要在神經(jīng)元中表達(dá)。FGFR1為大腦中含量較豐富的受體，也可在放射狀膠質(zhì)細(xì)胞上表達(dá)，是海馬和錐體神經(jīng)細(xì)胞生長所必需的。FGFR2位于在少突膠質(zhì)細(xì)胞上，參與祖細(xì)胞增殖、學(xué)習(xí)和記憶。FGFR3于星形膠質(zhì)細(xì)胞中表達(dá)，與形成正常的大腦皮層有關(guān)[11]。有研究[13]表明，F(xiàn)GF4通過激活PI3K/Akt/p21信號級聯(lián)反應(yīng)，促進(jìn)中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷后星形膠質(zhì)細(xì)胞向神經(jīng)干/祖細(xì)胞去分化[12]。FGF4可提高神經(jīng)元分化效率，F(xiàn)GF4聯(lián)合VEGF-A的基因治療，可加快血液動力學(xué)恢復(fù)，增加血管密度，改善缺血組織損傷[14]。

目前腦血管病是造成我國期望壽命損失的首位原因，且呈持續(xù)性增長及年輕化趨勢。急性缺血性腦卒中的主要治療方式為一定時間內(nèi)溶栓治療，但由于地域等因素限制，大部分患者會錯過最佳治療時機(jī)，故開發(fā)急性缺血性腦卒中新治療靶點(diǎn)是一項艱巨的任務(wù)。FGFs各成員在多種生理過程中發(fā)揮重要作用，但FGF4在腦血管病方面研究較少，本研究旨在探討FGF4與急性缺血性腦血管病間的關(guān)系。本研究結(jié)果顯示，實(shí)驗組和對照組基線資料無顯著統(tǒng)計學(xué)差異，有可比性；血清FGF4在急性缺血性腦卒中患者中高表達(dá)，而在健康患者體內(nèi)低表達(dá)，說明FGF4與腦血管病存在一定關(guān)系。我們將急性缺血性腦卒中患者入院時按NIHSS劃出輕型腦卒中組和非輕型腦卒中組，比較兩組血清FGF4表達(dá)水平，發(fā)現(xiàn)輕型腦卒中組明顯低于非輕型腦卒中組；同理，按治療后mRs評分分組比較，提示預(yù)后不良組血清FGF4表達(dá)水平高于預(yù)后良好組。進(jìn)一步應(yīng)用Spearman相關(guān)系數(shù)分析驗證，結(jié)果顯示血清FGF4表達(dá)水平與NIHSS、mRS評分都有正性相關(guān)的關(guān)系，即FGF4隨神經(jīng)缺損程度、預(yù)后等級的升高而升高。

綜上所述，血清FGF4水平在急性缺血性卒中患者和健康體檢者中不同，前者明顯高于后者，且疾病越嚴(yán)重、預(yù)后越不良，血清FGF4表達(dá)水平越高，這說明FGF4與急性缺血性腦血管病存在相關(guān)性，參與疾病的發(fā)生發(fā)展。但關(guān)于FGF4的具體作用機(jī)制還有待進(jìn)一步研究。