葫蘆島市衛(wèi)生健康事業(yè)服務(wù)中心 （遼寧 葫蘆島 125000）

內(nèi)容提要：目的：探討酶聯(lián)免疫吸附法及電化學(xué)發(fā)光免疫分析法兩種手段應(yīng)用于人類免疫缺陷病毒抗體檢測中的效果及價值。方法：以本中心的8148份血清標(biāo)本為研究對象，嚴(yán)格依據(jù)其檢測標(biāo)準(zhǔn)和操作說明對標(biāo)本分別施行酶聯(lián)免疫吸附法及電化學(xué)發(fā)光免疫分析法檢測，比較兩種檢測手段的所得結(jié)果。結(jié)果：酶聯(lián)免疫吸附法的特異性為88.46%，相對低于電化學(xué)發(fā)光免疫分析法的100%；兩種檢測手段的臨界值或OD/CO值與陽性診斷符合率呈現(xiàn)正相關(guān)。結(jié)論：電化學(xué)發(fā)光免疫分析法在人類免疫缺陷病毒抗體檢測中的開展應(yīng)用，能獲得較高的特異性，加之具備分析時間短和自動化程度高等優(yōu)勢，能有效彌補酶聯(lián)免疫吸附法的不足。

研究表明，臨床中尚未有任何治療手段能徹底消滅人類免疫缺陷病毒，但是抗病毒治療能讓該病毒維持在較低水平，幫助人體免疫系統(tǒng)的正常運作，從而起到延長患者生命周期的作用。為此，人們在發(fā)現(xiàn)人類免疫缺陷病毒暴露后，應(yīng)立即入院實施病毒抗體篩檢[1]。目前，對人類免疫缺陷病毒抗體檢測常使用的手段為酶聯(lián)免疫吸附法及電化學(xué)發(fā)光免疫分析法，且經(jīng)研究顯示，兩者各有其應(yīng)用優(yōu)勢。本文選擇8148份送檢的血清標(biāo)本為分析對象，探討這兩種檢測手段的應(yīng)用價值，體會如下。

1.資料與方法

1.1 一般資料

于本中心采集并送檢的血清標(biāo)本中選擇8148份為此次實驗的分析樣本，其時間集中分布在2017年1月～2019年12月，且均在無菌條件下采集的合格標(biāo)本，放置在低溫冰箱中備檢。

1.2 檢測方式

所有標(biāo)本均分別實施酶聯(lián)免疫吸附法及電化學(xué)發(fā)光免疫分析法兩種手段的檢測，并嚴(yán)格依據(jù)其檢測標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行各項檢測操作，每一種檢測方法的執(zhí)行在檢測實驗室、檢測員及試劑使用批號等方面均要保持一致。其中，電化學(xué)發(fā)光免疫分析法的檢測方式如下：（1）檢測儀器：選擇羅氏電化學(xué)發(fā)光全自動免疫分析系統(tǒng)，型號為cobas e 411，試劑盒為儀器自配套的e pack試劑盒；（2）檢測步驟：主要實施“三明治”手法。首先，組合形成“三明治”樣抗原-抗體復(fù)合體，其組成元素為生物素抗人類免疫缺陷病毒標(biāo)單克隆抗體一份、待檢樣本一份及三聯(lián)吡啶釕符合標(biāo)記人類免疫缺陷病毒特異性抗體一份；其次，借助磁微粒對“三明治”樣抗原-抗體復(fù)合體實施孵育，其磁微粒是由鏈條和素標(biāo)記所形成，依據(jù)生物素發(fā)揮的效果將“三明治”樣抗原-抗體復(fù)合體形成固相復(fù)合體；隨后，利用蠕動泵的效應(yīng)將反應(yīng)液置入流動室中，并借助磁鐵的吸附能力將磁微粒置入到電極表面；最后，加入三丙胺并實施電極加壓，開啟電化學(xué)發(fā)光反應(yīng)，借助光電倍增管測量光的強度。注意，復(fù)合體濃度與光強度兩者呈現(xiàn)線性關(guān)系，可從此邏輯中獲取樣品人類免疫缺陷病毒的Cutoff指標(biāo)[2]。酶聯(lián)免疫吸附法的檢測方式如下：（1）儀器選擇：應(yīng)用JX210672酶標(biāo)儀WD-9417B，及JX210694自動洗板機WD-2103A（生產(chǎn)企業(yè)：河北潤聯(lián)科技開發(fā)有限公司）；（2）檢測步驟：在無菌的條件下對乙二胺四乙酸抗凝全血實施采集，并在800轉(zhuǎn)/min的速度下對其進(jìn)行離心處理。隨后，依據(jù)人類免疫缺陷病毒的抗體診斷試劑盒說明書的操作步驟實施抗體篩查與試驗。

1.3 診斷標(biāo)準(zhǔn)

以過夜孵育法WB的最終結(jié)果作為評價兩種檢測手段所得數(shù)據(jù)的評價標(biāo)準(zhǔn)，比較分析兩類檢測手段的檢測結(jié)果。

1.4 統(tǒng)計學(xué)分析

將統(tǒng)計學(xué)軟件SPSS20.0作為本次實驗的分析軟件，將所得數(shù)據(jù)置于其中實施處理；其中，計數(shù)資料的表達(dá)應(yīng)用%，且實施χ2檢驗的分析。P＜0.05表示差異顯著，具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2.結(jié)果

2.1 兩組檢測手段的特異性分析

經(jīng)結(jié)果顯示，WB檢測結(jié)果顯示標(biāo)本呈陽性的有23份。電化學(xué)發(fā)光免疫分析法中初篩的陽性標(biāo)本數(shù)有23例，其特異性為100%；酶聯(lián)免疫吸附法的特異性為88.46%，與電化學(xué)發(fā)光免疫分析法相比較，差異未有統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），見表1。

表1.兩組檢測手段的敏感性分析

2.2 兩組檢測手段的陽性結(jié)果研究

數(shù)據(jù)得知，在電化學(xué)發(fā)光免疫分析法中，臨界值越大，其陽性診斷的符合率越高；在臨界值范圍為150～220中，陽性標(biāo)本數(shù)最多，于總陽性率中所占比例達(dá)73.91%（17/23）。在酶聯(lián)免疫吸附法中，其OD/CO值越大，陽性診斷的符合率也越高，其中，OD/CO值為1.3～1.8的陽性標(biāo)本數(shù)最多，共有16例為陽性，占比為69.57%；在兩種檢測手段的臨界或OD/CO值最低時，其電化學(xué)發(fā)光免疫分析法（臨界值0.9～80）的2例送檢的標(biāo)本均被診斷為陽性，而在酶聯(lián)免疫吸附法（OD/CO值0.1～0.5）中共送檢2份標(biāo)本，僅1份被檢出陽性，結(jié)果見表2。

表2.兩組檢測手段的陽性結(jié)果研究

3.討論

艾滋病是一種因艾滋病病毒即人類免疫缺陷病毒而導(dǎo)致的惡性傳染病，當(dāng)此類病毒侵入人體后，會殺傷人體中一種名為CD4+T的淋巴細(xì)胞，嚴(yán)重降低人體的抵抗力，誘發(fā)各類并發(fā)癥的出現(xiàn)，從而導(dǎo)致患者死亡。臨床中，對人類免疫缺陷病毒抗體檢測的常見手段為酶聯(lián)免疫吸附試驗法，此類方式的操作實施為手工，耗時較長、誤差較大的同時，也會在一定程度上降低檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性，給臨床醫(yī)師診斷和制定疾病治療方案形成了一定阻礙[3]。而電化學(xué)發(fā)光免疫分析法作為一種自動化程度高、靈敏性高及檢測速度較快的篩檢手段，通過封閉系統(tǒng)中的化學(xué)發(fā)光檢測，能顯著縮短傳染病的窗口期，在弱陽性樣本的檢出方面，檢出率較高，能讓醫(yī)護(hù)人員及早發(fā)現(xiàn)傳染病的早期患者，相比酶聯(lián)免疫吸附試驗法而言，其在分析時間和檢測結(jié)果準(zhǔn)確性方面，優(yōu)勢更為明顯，是目前較為先進(jìn)的免疫檢驗手段。有數(shù)據(jù)顯示，在入院患者八項傳染病采用電化學(xué)發(fā)光免疫分析法的篩檢結(jié)果顯示，在人類免疫缺陷病毒抗體測定陽性率提升至29.5%，且特異性抗體存在顯著增多的趨勢[4]。同時，某研究表明，在人類免疫缺陷病毒抗體檢測中，使用定性且定量的電化學(xué)發(fā)光免疫分析法，能在提升檢測結(jié)果準(zhǔn)確性方面發(fā)揮積極作用[4]。本文結(jié)果表明，電化學(xué)發(fā)光免疫分析法的特異性為100%，略高于酶聯(lián)免疫吸附試驗法的88.46%。

綜上所述，電化學(xué)發(fā)光免疫分析法較于酶聯(lián)免疫吸附試驗法而言，其特異性相對較高，且能在一定程度上彌補酶聯(lián)免疫吸附試驗法分析時間長的不足。