田國賀，王保森，韓曉紅

（吉林省藥品檢驗所，吉林 長春 130033）

鹽酸坦索羅辛緩釋膠囊用于治療前列腺增生癥引起的排尿障礙。臨床應(yīng)用十分廣泛。該品種法定含量測定方法為帶內(nèi)標(biāo)物的高效液相法，樣品制備過程均較為復(fù)雜。同時緩釋制劑的生產(chǎn)工藝復(fù)雜，因此建立一種快速的定量分析方法有利于縮短生產(chǎn)企業(yè)工藝條件摸索的時間和經(jīng)濟(jì)成本，有望實現(xiàn)產(chǎn)品的在線的質(zhì)量監(jiān)控。

近紅外光譜分析利用光譜所包含的物質(zhì)信息與化學(xué)計量學(xué)結(jié)合，提取光譜中的有效信息建立模型，對物質(zhì)進(jìn)行定性、定量分析[1,2]。近紅外光譜分析（NIRS）技術(shù)具有操作簡便、準(zhǔn)確度高、無污染、分析時間短等特點。在藥品領(lǐng)域中，該技術(shù)廣泛應(yīng)用于產(chǎn)品質(zhì)量及批次工藝一致性的分析、中藥材鑒別、中藥生產(chǎn)檢驗、藥用植物品種鑒定等方面[3-5]。近年來近紅外定量分析是以建立模型為基礎(chǔ)，對未知樣品進(jìn)行預(yù)測的二次分析方法，由于光譜采集較為簡單，對于大量樣品的分析十分有效。

本文采用近紅外光纖漫反射光譜法，采用固體光纖探頭，對收集到得全國6家企業(yè)98批鹽酸坦索羅辛緩釋膠囊直接進(jìn)行快速、無損測定。建立的定量分析方法用于評價鹽酸坦索羅辛緩釋膠囊的產(chǎn)品質(zhì)量。

1 實驗方法

1.1 實驗儀器與試劑

Matrix-F型近紅外掃描儀, OPUS 7.8光譜采集和處理軟件（德國布魯克光學(xué)儀器公司）；Agilent1260全自動高效液相色譜儀；Alltech Apollo C18 250×4.6 mm，5 μm色譜柱；Sartorius BT25S電子天平，鹽酸坦索羅辛對照品購自中國食品藥品檢定研究院（批號：100688-20110），乙腈、甲醇均為色譜純，水為超純水，其他試劑均為國產(chǎn)分析純。

1.2 方法

1.2.1 HPLC法測定鹽酸坦索羅辛緩釋膠囊主成分含量

色譜條件：流動相為乙腈—高氯酸溶液（取高氯酸8.7 mL和氫氧化鈉3g，加水1900 mL溶解，用氫氧化鈉試液調(diào)pH值至2.0，加水至2000 mL）（3:7）；十八烷基硅烷鍵合硅膠色譜柱；檢測波長225 nm。

測定法：取對羥基苯甲酸丙酯適量，精密稱定，加流動相溶液溶解并稀釋制成每1 mL中含0.4 mg的內(nèi)標(biāo)溶液。取鹽酸坦索羅辛對照品，精密稱定，加流動相溶液溶解并稀釋成每1 mL中約含0.2 mg的對照品溶液；精密量取對照品溶液與內(nèi)標(biāo)溶液各5 mL，置50 mL量瓶中，用流動相稀釋至刻度，取10 μL，注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另取供試品內(nèi)容物，精密稱取約相當(dāng)于鹽酸坦索羅辛1.0 mg的內(nèi)容物，精密加入內(nèi)標(biāo)溶液5 mL，加入流動相定容至50ml，作為供試品溶液，同法測定，按內(nèi)標(biāo)法以峰面積計算，即得。

1.2.2 近紅外光譜的采集

采用漫反射模塊采集NIRS圖譜，采用無損傷測定，不破壞樣品的包裝，用漫反射光纖探頭壓住鋁塑包裝，以儀器內(nèi)置背景為參比，光譜掃描范圍12000～4000 cm-1，分辨率8 cm-1，掃描次數(shù)32次，對每批樣品進(jìn)行掃描6次，計算平均光譜，共采集6個企業(yè)的98批鋁塑包裝制劑的近紅外光譜圖，鹽酸坦索羅辛緩釋膠囊的代表光譜圖見圖1。

圖1 鹽酸坦索羅辛緩釋膠囊的代表光譜圖

2 結(jié) 果

2.1 定量分析模型的建立

在近紅外光譜測量過程中，由于多重因素影響，導(dǎo)致光譜中含有噪聲、基線漂移和波長漂移等不穩(wěn)定因素。因此對光譜信號進(jìn)行消除噪聲的預(yù)處理十分必要。Quant2定量分析軟件提供10種圖譜預(yù)處理方法。分別采用這十種預(yù)處理方法處理建模樣品的原始圖譜，結(jié)果表明在近紅外譜段11995～6097.8 cm-1、5453.7～4597.5 cm-1，Vector Normalization和Straight Line Substraction相結(jié)合的預(yù)處理方法模型的預(yù)測結(jié)果較好。

建模樣品的含量范圍（0.0904 mg/mg（%）～0.2957 mg/mg（%））已覆蓋了規(guī)格為0.2 mg的所有待測樣品濃度。以PLS法進(jìn)行化學(xué)計量學(xué)計算，選擇該軟件推薦的最佳因子數(shù)（Rank=8）建立NIR定量測定模型。

2.2 PLS模型的建立與驗證

可采用內(nèi)部交叉驗證和外部驗證兩種方式評價模型。其中對模型進(jìn)行內(nèi)部交叉法驗證，均方根誤差RMSECV和交叉驗證相關(guān)系數(shù)R；隨機(jī)選取70批樣品作為校正集，其他20批樣品作為驗證集，進(jìn)行外部驗證，得到外部驗證均方根誤差RMSEP 和校正相關(guān)系數(shù)R。驗證結(jié)果見表1.

表1 檢驗與校正的結(jié)果

R值表示校正集樣品中預(yù)測值與理論值的相關(guān)程度,其越接近100%，預(yù)測效果越好；RMSECV和RMSEP用于衡量校正集樣品預(yù)測結(jié)果的準(zhǔn)確性,當(dāng)RMSECV和RMSEP的差異越小，校正集樣品的預(yù)測結(jié)果越接近理論值[11],由此可確定該模型具有良好的預(yù)測能力。

3 討 論

近紅外技術(shù)可以減少采用高相液相法進(jìn)行含量測定中帶來的材料損耗大和時間長的問題，其是一種快速且較為準(zhǔn)確的定量分析方法。本文的近紅外定量分析的方法并非通用型方法，局限性在于只能對該品種該劑型適用。本文所涉及的樣品涉及到全國范圍內(nèi)所有生產(chǎn)鹽酸坦索羅辛緩釋膠囊品種，代表性較強(qiáng)，但仍需要在今后工作中不斷補(bǔ)充模型庫。