李杰輝 盧 維 劉雪琴 陳壯麗

糖尿病潰瘍是糖尿病的嚴(yán)重并發(fā)癥之一, 具有高截肢率和高死亡率等特點(diǎn)［1］。 研究數(shù)據(jù)顯示, 糖尿病足的發(fā)病率高達(dá)19% ～34%［2］, 其中20%的患者可最終發(fā)展至截肢, 而截肢患者的死亡率又高達(dá)22%［3-4］, 因此, 給予糖尿病潰瘍患者科學(xué)有效的治療具有重要意義。 目前, 糖尿病潰瘍的難愈機(jī)制尚不完全明確, 近年來部分研究學(xué)者指出糖尿病患者晚期糖基化終末產(chǎn)物(advanced glycation end products, AGEs) 異常蓄積及炎癥反應(yīng)紊亂與糖尿病潰瘍的發(fā)生及發(fā)展密切相關(guān), 且基質(zhì)金屬蛋白酶(matrix metalloproteinases, MMP) 與基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑 (tissue inhibitors of metalloproteinase,TIMP) 的動(dòng)態(tài)平衡在糖尿病潰瘍創(chuàng)面的修復(fù)中發(fā)揮了重要作用［5-7］。 濕潤燒傷膏 (moist exposed burn ointment, MEBO) 為內(nèi)含黃芩、 黃柏、 黃連等成分的純中藥制劑, 在諸類慢性難愈合創(chuàng)面的治療中取得了較為顯著的臨床療效, 且其促創(chuàng)面愈合作用機(jī)制的相關(guān)研究也日漸深入［8-9］, 但其與MMP-9、 MMP-2、 TIMP-1、 TIMP-2 的相關(guān)性研究卻鮮見報(bào)道。 鑒于此, 筆者于本研究中觀察了糖尿病潰瘍大鼠創(chuàng)面組織中MMP-9、 MMP-2、 TIMP-1、TIMP-2 的動(dòng)態(tài)表達(dá)水平, 并深入探討了MEBO 對(duì)其表達(dá)水平的影響。

1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

健康SPF 級(jí)雄性SD 大鼠160 只, 12 周齡, 體質(zhì)量(200 ±20) g, 廣西醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供, 許可證號(hào)SCXK (桂) 2009-0002。 將大鼠單籠適應(yīng)性飼養(yǎng)于溫度20 ～25 ℃、 相對(duì)濕度(60 ±10)%的環(huán)境中, 2 周后用于實(shí)驗(yàn)研究。 本研究經(jīng)廣西壯族自治區(qū)中醫(yī)藥研究院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 主要試劑與設(shè)備

MEBO： 汕頭市美寶制藥有限公司生產(chǎn), 批號(hào)1902403G； 重組牛堿性成纖維細(xì)胞生長因子(recombinant bovine basic fibroblast growth factor,rb-bFGF) 外用溶液： 珠海億勝生物制藥有限公司生產(chǎn), 批號(hào)04191007； 鏈脲佐菌素(streptozotocin,STZ)： 美國Sigma 公司生產(chǎn), 批號(hào)WXBC8740V；MiniBEST Universal RNA Extraction Kit、 Prime-ScriptTMRT Master Mix (Perfect Real Time)、 TB Green?Premix Ex TaqTMⅡ(Tli RNaseH Plus)： 日本TaKaRa 公司生產(chǎn)； 引物設(shè)計(jì)及合成： 寶生物工程(大連) 有限公司完成； 超微量核酸蛋白測(cè)定儀(型號(hào)NanoDrop)： 美國Thermo Fisher 公司生產(chǎn)； 實(shí)時(shí)熒光定量PCR 儀(型號(hào)LightCycler 480Ⅱ)： 瑞士Roche 公司生產(chǎn)； 高速冷凍離心機(jī)(型號(hào)HC-3018R)： 安徽中科中佳科學(xué)儀器有限公司生產(chǎn)； 美迪信血糖儀及配套血糖試紙： 天津億朋醫(yī)療器械有限公司生產(chǎn)。

2 方法

2.1 模型制備與分組

隨機(jī)選取120 只大鼠用高脂高糖飼料(60.4%基礎(chǔ)飼料+10.0%豬油+8.0%蛋黃粉+1.5%膽固醇+20.0%蔗糖+0.1%膽酸鈉) 喂養(yǎng)4 周后禁食不禁水12 h, 并予以STZ (40 mg/kg) 腹腔注射,制備糖尿病大鼠模型(剪尾法采血, 血糖儀測(cè)定隨機(jī)血糖≥16.7 mmol/L, 且體重明顯下降, 病理組織學(xué)檢查結(jié)果顯示胰島細(xì)胞被破壞, 即視為糖尿病大鼠模型制備成功［10］)； 繼而正常進(jìn)食進(jìn)水喂養(yǎng)4周后, 共97 只大鼠糖尿病模型維持良好, 剔除血糖＞29.5 mmol/L、 體重＞340 g 的大鼠后, 隨機(jī)選取90 只大鼠并隨機(jī)分為模型組、 MEBO 組與bFGF組, 每組30 只, 同時(shí)隨機(jī)選取未予特殊處理的30只大鼠作為空白組。 各組大鼠均腹腔注射3.5%水合氯醛(10 mL/kg) 麻醉后, 腹臥位固定, 背部剃毛, 于脊柱正中肩胛骨下緣水平線下2.0 cm 處做直徑1.8 cm 深達(dá)筋膜層的全層皮膚缺損創(chuàng)面。

2.2 創(chuàng)面處理

空白組與模型組大鼠創(chuàng)面依次覆蓋2 層凡士林油紗及無菌干紗布包扎固定, MEBO 組大鼠創(chuàng)面依次覆蓋2 層MEBO 藥紗(藥物含量約0.2 g/cm2)及無菌干紗布包扎固定, bFGF 組大鼠創(chuàng)面依次覆蓋2 層重組牛堿性成纖維細(xì)胞生長因子(recombinant bovine basic fibroblast growth factor, rb-bFGF)藥紗(藥物含量約60 U/cm2) 及無菌干紗布包扎固定, 每天換藥1 次, 連續(xù)處理12 d。

2.3 觀察創(chuàng)面愈合情況

分別于藥物干預(yù)第4、 6、 12 天, 每組隨機(jī)選取10 只大鼠測(cè)量創(chuàng)面面積, 計(jì)算創(chuàng)面愈合率。 創(chuàng)面愈合率＝ (創(chuàng)面初始面積-時(shí)相點(diǎn)創(chuàng)面面積) /創(chuàng)面初始面積×100%。

2.4 qRT-PCR 法檢測(cè)創(chuàng)面組織中MMP-9、 MMP-2、TIMP-1 及TIMP-2 mRNA 水平

分別于藥物干預(yù)第4、 6、 12 天, 每組隨機(jī)選取10 只大鼠麻醉后采集相同位點(diǎn)創(chuàng)面組織置于液氮中冷凍保存。 待所有標(biāo)本收集完畢后, 取出液氮中凍存的創(chuàng)面組織, 根據(jù)試劑盒說明書采用Trizol法提取總RNA, 并在10 μL 反轉(zhuǎn)錄體系中反轉(zhuǎn)錄合成cDNA 后進(jìn)行PCR 擴(kuò)增, 以GAPDH 作為內(nèi)參基因, 實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析Ct 值, 采用2-△△Ct法計(jì)算mRNA相對(duì)表達(dá)量。 MMP-9 引物序列為F： 5′-CCAGAGC GTTACTCGCTTGGA-3′, R： 5′-CTTAGTTCAAGGGC ACTGCAGGA-3′； MMP-2 引物序列為F： 5′-TCCCG AGATC TGCAAGCAAG-3′, R： 5′-AGAATGTGGCC ACCAGCAAG-3′； TIMP-1 引物序列為F： 5′-CATCT C TGGCCTCTG GCATC-3′, R： 5′-CATAACGCTGGT ATAAGGTGGTCTC-3′； TIMP-2 引物序列為F： 5′-GACACGCTTAGCATCACCCAGA-3′, R： 5′-CTGTGA CCCAG TCCATCCAGAG-3′； GAPDH 引物序列為F：5′-GGCACAGTCAAGGCTGAGAATG-3′, R： 5′-ATG GTGGTGAAGACGCCAGTA-3′。

2.5 酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)創(chuàng)面組織中膠原蛋白水平

分別于藥物干預(yù)第4、 6、 12 天, 每組隨機(jī)選取10 只大鼠麻醉后采集相同位點(diǎn)創(chuàng)面組織, 常規(guī)予以組織脫水、 石蠟包埋、 切片、 脫蠟, 并進(jìn)行Masson 復(fù)合染色后予以脫水、 透明、 封片； 100 倍顯微鏡下隨機(jī)選擇5 個(gè)視野, 采用Image Proplus 圖像分析軟件進(jìn)行圖像分析, 測(cè)量并計(jì)算膠原蛋白水平。 膠原蛋白水平＝膠原蛋白面積/總面積×100%［11］。

2.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS 22.0 統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)所得數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析, 結(jié)果數(shù)據(jù)符合正態(tài)分布以均數(shù)± 標(biāo)準(zhǔn)差表示, 多組間比較采用單因素方差分析,兩組間比較采用q 檢驗(yàn), 均以P ＜0.05 為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 結(jié)果

3.1 各組大鼠創(chuàng)面愈合率對(duì)比

干預(yù)第4、 6、 12 天, 模型組大鼠創(chuàng)面愈合率均明顯低于其他各組(P 均＜0.05), 空白組大鼠創(chuàng)面愈合率均明顯高于其他各組(P 均＜0.05),而MEBO 組與bFGF 組間無明顯差異 (P 均＞0.05), 詳見表1。

3.2 各組大鼠創(chuàng)面組織中MMP-9、 MMP-2、 TIMP-1及TIMP-2 mRNA 表達(dá)水平對(duì)比

干預(yù)第4、 6、 12 天, 模型組大鼠創(chuàng)面組織中MMP-9 及MMP-2 mRNA 表達(dá)水平均明顯高于其他各組(P 均＜0.05), TIMP-1 及TIMP-2 mRNA 表達(dá)水平均明顯低于其他各組(P 均＜0.05)； 除干預(yù)第6 天MEBO 組大鼠創(chuàng)面組織中TIMP-1 mRNA表達(dá)水平明顯高于bFGF 組(P ＜0.05) 外, 其余各時(shí)間點(diǎn)MEBO 組與bFGF 組大鼠創(chuàng)面組織中MMP-9、 MMP-2、 TIMP-1 及TIMP-2 mRNA 表達(dá)水平均無明顯差異(P 均＞0.05), 詳見表2。

表1 各組大鼠創(chuàng)面愈合率對(duì)比Table 1 Comparison of wound healing rate amongthe four groups

表1 各組大鼠創(chuàng)面愈合率對(duì)比Table 1 Comparison of wound healing rate amongthe four groups

注： MEBO 為濕潤燒傷膏, bFGF 為堿性成纖維細(xì)胞生長因子；空白組與模型組采用凡士林油紗換藥處理, MEBO 組采用MEBO 藥紗換藥處理, bFGF 組采用rb-bFGF 藥紗換藥處理。 各組大鼠創(chuàng)面愈合率組間兩兩對(duì)比, 其中與空白組對(duì)比, aP ＜0.05, 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義； 與模型組對(duì)比, bP ＜0.05, 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義Note： MEBO stands for Moist Exposed Burn Ointment, bFGF stands for basic fibroblast growth factor； dressing change with Vaseline gauze was performed on rats in the blank group and model group, dressing change with MEBO gauze in the MEBO group,and dressing change with rb-bFGF gauze in the bFGF group.Pairwise comparison of the wound healing rate of rats was made among the four groups,among which comparison with the blank group showed statistically significant difference (aP ＜0.05), and comparison with the model group showed statistically significant difference(bP ＜0.05)

表2 各組大鼠創(chuàng)面組織中MMP-9、 MMP-2、 TIMP-1 及TIMP-2 mRNA 表達(dá)水平對(duì)比Table 2 Comparison of mRNA expression levels of MMP-9， MMP-2， TIMP-1 and TIMP-2 in the wound tissue of rats among the four groups

注： MEBO 為濕潤燒傷膏, bFGF 為重組牛堿性成纖維細(xì)胞生長因子, MMP-9 為基質(zhì)金屬蛋白酶-9, MMP-2 為基質(zhì)金屬蛋白酶-2,TIMP-1為基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑-1, TIMP-2 為基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑-2； 空白組與模型組采用凡士林油紗換藥處理, MEBO 組采用MEBO 藥紗換藥處理, bFGF 組采用rb-bFGF 藥紗換藥處理。 各組大鼠創(chuàng)面組織中MMP-9、 MMP-2、 TIMP-1 及TIMP-2 mRNA 表達(dá)水平組間兩兩對(duì)比,其中與空白組對(duì)比, aP ＜0.05, 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義； 與模型組對(duì)比, bP ＜0.05, 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義； 與MEBO 組對(duì)比, cP ＜0.05, 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義Note： MEBO stands for Moist Exposed Burn Ointment, bFGF stands for basic fibroblast growth factor, MMP-9 stands for matrix metalloproteinase-9,MMP-2 stands for matrix metalloproteinase-2, TIMP-1 stands for tissue inhibitor of metalloproteinase-1, and TIMP-2 stands for tissue inhibitor of metalloproteinase-2； dressing change with Vaseline gauze was performed on rats in the blank group and model group,dressing change with MEBO gauze in the MEBO group, and dressing change with rb-bFGF gauze in the bFGF group.Pairwise comparison of mRNA expression levels of MMP-9, MMP-2,TIMP-1 and TIMP-2 in the wound tissues of rats was performed among the four groups, of which comparison with the blank group showed statistically significant difference (aP ＜0.05),comparison with the model group showed statistically significant difference (bP ＜0.05), and also comparison with the MEBO group showed statistically significant difference (cP ＜0.05)

組別Group只數(shù)Number of rats MMP-9 mRNA MMP-2 mRNA TIMP-1 mRNA TIMP-2 mRNA第4 天Day 4第6 天Day 6第12 天Day 12第4 天Day 4第6 天Day 6第12 天Day 12第4 天Day 4第6 天Day 6第12 天Day 12第4 天Day 4第6 天Day 6第12 天Day 12 Blank group 10 1.00 ±0.31空白組1.00 ±0.33 1.00 ±0.05 1.00 ±0.33 1.00 ±0.36 1.00 ±0.05 1.00 ±0.19 1.00 ±0.15 1.00 ±0.23 1.00 ±0.24 1.00 ±0.21 1.00 ±0.23 Model group 10 1.87 ±0.36a 0.39 ±0.16a MEBO 組模型組9.61 ±1.93a 8.65 ±0.78a 4.86 ±1.15a 6.02 ±1.56a 2.61 ±0.29a 0.14 ±0.02a 0.41 ±0.09a 0.39 ±0.16a 0.21 ±0.04a 0.36 ±0.05a MEBO group 10 1.43 ±0.17ab 0.70 ±0.04ab bFGF 組5.90 ±0.53ab 1.88 ±0.17ab 3.56 ±0.69ab 2.22 ±0.65ab 1.10 ±0.32b 0.33 ±0.07ab 0.89 ±0.17b 0.71 ±0.06ab 0.40 ±0.07ab 0.51 ±0.08ab bFGF group 10 1.44 ±0.40ab 0.66 ±0.05ab F 值F value 12.170 93.190 381.320 35.330 44.270 42.400 141.800 19.270 36.630 70.240 58.640 33.800 6.05 ±1.12ab 2.11 ±0.64ab 3.50 ±1.02ab 2.19 ±1.15b 1.33 ±0.58b 0.27 ±0.02ab 0.52 ±0.32abc 0.69 ±0.05ab 0.36 ±0.07ab 0.46 ±0.08ab P 值P value ＜0.001 ＜0.001 ＜0.001 ＜0.001 ＜0.001 ＜0.001 ＜0.001 ＜0.001 ＜0.001 ＜0.001 ＜0.001 ＜0.001

3.3 各組大鼠創(chuàng)面組織中膠原蛋白水平對(duì)比

干預(yù)第4、 6、 12 天, 模型組大鼠創(chuàng)面組織中膠原蛋白水平明顯低于其他各組(P 均＜0.05)；除干預(yù)第4 天MEBO 組大鼠創(chuàng)面組織中膠原蛋白水平明顯高于bFGF 組(P ＜0.05) 外, 其余各時(shí)間點(diǎn)MEBO 組與bFGF 組大鼠創(chuàng)面組織中膠原蛋白水平均無明顯差異(P 均＞0.05), 詳見表3、 圖1。

表3 各組大鼠創(chuàng)面組織中膠原蛋白水平對(duì)比Table 3 Comparison of collagen levels in wound tissues of rats among the four groups

表3 各組大鼠創(chuàng)面組織中膠原蛋白水平對(duì)比Table 3 Comparison of collagen levels in wound tissues of rats among the four groups

注： MEBO 為濕潤燒傷膏, bFGF 為堿性成纖維細(xì)胞生長因子；空白組與模型組采用凡士林油紗換藥處理, MEBO 組采用MEBO 藥紗換藥處理, bFGF 組采用rb-bFGF 藥紗換藥處理。 各組大鼠創(chuàng)面組織中膠原蛋白水平組間兩兩對(duì)比, 其中與空白組對(duì)比, aP ＜0.05, 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義； 與模型組對(duì)比, bP ＜0.05, 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義； 與MEBO 組對(duì)比, cP ＜0.05, 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義Note： MEBO stands for Moist Exposed Burn Ointment, bFGF stands for basic fibroblast growth factor；dressing change with Vaseline gauze was performed on rats in the blank group and model group, dressing change with MEBO gauze in the MEBO group,and dressing change with rb-bFGF gauze in the bFGF group.Pairwise comparison of the collagen level in the wound tissues of rats was made among the four groups, of which comparison with the blank group showed statistically significant difference (aP ＜0.05), comparison with the model group showed statistically significant difference ( bP ＜0.05), and comparison with the MEBO group also showed statistically significant difference (cP ＜0.05)

組別Group只數(shù)Number of rats第4 天Day 4第6 天Day 6第12 天Day 12空白組Blank group 10 37.00 ±2.98 44.88 ±2.30 61.88 ±2.36模型組Model group 10 16.88 ±1.36a 23.38 ±2.20a 36.38 ±2.14a MEBO 組MEBO group 10 29.25 ±2.55ab 38.50 ±2.39ab 61.25 ±2.12b bFGF 組bFGF group 10 25.00 ±1.60abc 35.88 ±2.95ab 59.00 ±2.62ab F 值F value 142.500 132.500 278.100 P 值P value ＜0.001 ＜0.001 ＜0.001

4 討論

創(chuàng)面修復(fù)是多因素、 多細(xì)胞共同參與的復(fù)雜過程, 包括炎癥期、 增殖期、 組織重塑期及其相互重疊的多個(gè)修復(fù)階段, 涉及成纖維細(xì)胞、 內(nèi)皮細(xì)胞、角質(zhì)形成細(xì)胞及炎性細(xì)胞等多種細(xì)胞以及細(xì)胞外基質(zhì)(extracellular matrix, ECM) 蛋白降解等多個(gè)環(huán)節(jié)。 近年來部分研究顯示, MMP 及TIMP 可參與調(diào)節(jié)ECM 的合成與降解平衡［12］。 MMP 是zn2+依賴性內(nèi)肽酶, 可通過參與ECM 的降解而影響創(chuàng)面組織的修復(fù)、 重塑及瘢痕形成； TIMP 是MMP 內(nèi)源性抑制劑, 可通過與MMP 催化區(qū)進(jìn)行可逆性結(jié)合而抑制MMP 的活性［13］。 因此, 部分研究學(xué)者推測(cè)MMP/TIMP 失衡可能是糖尿病潰瘍創(chuàng)面延遲愈合的重要機(jī)制之一［14-15］。

MMP-2 又稱明膠酶A, 主要由成纖維細(xì)胞、 內(nèi)皮細(xì)胞分泌產(chǎn)生； MMP-9 又稱明膠酶B, 主要由白細(xì)胞和角質(zhì)細(xì)胞分泌產(chǎn)生, 兩者均可通過降解ECM 中的Ⅳ、 Ⅴ、 Ⅹ型等膠原及基底膜成分參與創(chuàng)面修復(fù)中角質(zhì)細(xì)胞與基底膜的分離、 細(xì)胞遷移及基質(zhì)重塑等環(huán)節(jié)。 TIMP-1 是MMP-9 的特異性抑制劑, 能夠與MMP-9 前體及活性MMP-9 形成非共價(jià)復(fù)合物, 特異性抑制MMP-9 的活性。 TIMP-2 是MMP-2 的內(nèi)源性特異性抑制因子, 能夠通過抑制MMP-2 的表達(dá)調(diào)節(jié)ECM 的正常代謝。 正常創(chuàng)傷狀態(tài)下, TIMP-1、 TIMP-2 會(huì)隨著MMP-9、 MMP-2 的表達(dá)水平而動(dòng)態(tài)變化, 以維持ECM 的降解平衡［16］。 部分研究顯示, 糖尿病潰瘍患者創(chuàng)面組織中MMP-9、 MMP-2 活性 顯著 增 強(qiáng), 而TIMP-1、TIMP-2 表達(dá)水平相對(duì)缺乏, 不足以抑制MMP-9、MMP-2 的活性, MMP/TIMP 的動(dòng)態(tài)平衡被打破,從而使蛋白過度水解, ECM 降解持續(xù)增強(qiáng), 導(dǎo)致創(chuàng)面遷延難愈［17-18］。 本研究結(jié)果亦顯示, 創(chuàng)面損傷第4 天, 糖尿病潰瘍大鼠創(chuàng)面組織中MMP-9、MMP-2 mRNA 表達(dá)水平均顯著高于空白組, 而TIMP-1、 TIMP-2 mRNA 表達(dá)水平均顯著低于空白組, 兩者比例明顯失衡, 且創(chuàng)面組織中膠原蛋白水平的顯著降低也再次證實(shí)了MMP/TIMP 失衡理論。

相關(guān)研究顯示, MEBO 作為一種純中藥制劑,主要通過液化排除創(chuàng)面壞死組織、 再生創(chuàng)面各層組織等作用在糖尿病潰瘍等創(chuàng)面的修復(fù)中取得了較為滿意的臨床療效［19-20］。 本研究筆者為進(jìn)一步探究MEBO 促進(jìn)糖尿病潰瘍創(chuàng)面愈合的作用機(jī)制, 研究分析了MEBO 對(duì)糖尿病潰瘍大鼠創(chuàng)面組織中MMP-9、MMP-2、 TIMP-1 及TIMP-2 mRNA 表達(dá)水平的影響,并將已證實(shí)具有調(diào)節(jié)MMP/TIMP 平衡作用的rb-bFGF作為了陽性對(duì)照。 結(jié)果顯示, 干預(yù)第4、 6、 12 天,MEBO 組與bFGF 組大鼠創(chuàng)面組織中MMP-9 及MMP-2 mRNA 表達(dá)水平均明顯低于模型組, TIMP-1、TIMP-2 mRNA 與膠原蛋白水平以及創(chuàng)面愈合率均明顯高于模型組, 且MEBO 組與bFGF 組間無明顯差異。 可見, MEBO 能夠顯著降低糖尿病潰瘍大鼠創(chuàng)面組織中MMP-9、 MMP-2 mRNA 表達(dá)水平, 提升TIMP-1、 TIMP-2 mRNA 表達(dá)水平, 增加膠原蛋白含量, 進(jìn)而促進(jìn)創(chuàng)面愈合。

圖1 干預(yù)第4、 6、 12 天, 各組大鼠創(chuàng)面組織中膠原蛋白Masson 染色圖( ×100)Fig.1 Masson staining of collagen in wound tissues of rats in each group on day 4,6 and 12 of treatment ( ×100)

綜上所述, MEBO 可顯著降低糖尿病潰瘍大鼠創(chuàng)面組織中MMP-9、 MMP-2 mRNA 表達(dá)水平, 提升TIMP-1、 TIMP-2 mRNA 表達(dá)水平, 增加膠原蛋白含量, 調(diào)節(jié)MMP/TIMP 平衡可能是其促進(jìn)糖尿病潰瘍創(chuàng)面愈合的作用靶點(diǎn), 但其是否對(duì)MMP/TIMP 系統(tǒng)中的其他類型基因蛋白具有干預(yù)作用有待進(jìn)一步深入研究探討。