張 倩，楊懷瑾，周 悅，余亦婷，莊欣雅，毛春芹，謝 輝，李 林，陸兔林，嚴(yán)國(guó)俊*

基于傳統(tǒng)煎藥工藝的黃芪藥材HPLC指紋圖譜及化學(xué)計(jì)量學(xué)質(zhì)量評(píng)價(jià)研究

張 倩1，楊懷瑾2，周 悅1，余亦婷1，莊欣雅1，毛春芹1，謝 輝1，李 林1，陸兔林1，嚴(yán)國(guó)俊1*

1. 南京中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，江蘇 南京 210023 2. 南京市莫愁中等專業(yè)學(xué)校，江蘇 南京 210017

基于傳統(tǒng)煎藥工藝建立不同產(chǎn)地黃芪的HPLC指紋圖譜，用于黃芪藥材質(zhì)量的評(píng)價(jià)。采用中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)（2004A版）對(duì)15批不同產(chǎn)地的黃芪藥材的HPLC指紋圖譜進(jìn)行相似度評(píng)價(jià)，并使用SPSS22.0軟件進(jìn)行聚類分析和主成分分析。選取了12個(gè)色譜峰作為指紋圖譜共有峰，15批樣品的相似度計(jì)算結(jié)果均大于0.990，說明各產(chǎn)地黃芪藥材具有較好的一致性；通過聚類分析可將15批樣品聚為4類；主成分分析采用3個(gè)主成分對(duì)黃芪藥材進(jìn)行綜合評(píng)價(jià)，綜合得分結(jié)果顯示，甘肅民樂縣所產(chǎn)批號(hào)為HQ-18001（S1）、HQ-18002（S2）和甘肅岷縣所產(chǎn)批號(hào)為HQ-18007（S7）、HQ-18006（S6）的黃芪藥材在所有樣品中的綜合得分位于前4名。建立基于傳統(tǒng)煎藥工藝的黃芪藥材質(zhì)量評(píng)價(jià)方法操作簡(jiǎn)單，重復(fù)性好，結(jié)果可靠，可以用于黃芪藥材的質(zhì)量控制和評(píng)價(jià)。

黃芪；HPLC；指紋圖譜；質(zhì)量評(píng)價(jià)；化學(xué)計(jì)量學(xué)

黃芪為豆科植物蒙古黃芪(Fisch.) Bge. var.(Bge.) Hsiao或膜莢黃芪(Fisch.) Bge.的干燥根[1]。作為常用傳統(tǒng)中藥之一，黃芪味甘、性平，具有補(bǔ)氣固表、利尿托毒、排膿、斂瘡生肌等功效?，F(xiàn)代化學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，黃芪中含有皂苷、黃酮、多糖以及氨基酸、亞油酸、生物堿、膽堿等多種化學(xué)成分[2-4]，其中黃芪多糖、皂苷、黃酮[5]等化合物具有較強(qiáng)的生物活性?，F(xiàn)代藥理研究表明黃芪具有增強(qiáng)免疫力、抗疲勞、降糖、抗病毒、調(diào)脂、改善神經(jīng)內(nèi)分泌因子分泌、利尿、強(qiáng)心、降壓等多種作用[6]，臨床主要用于氣虛乏力、食少便溏、中氣下陷、久瀉脫肛、血虛萎黃、內(nèi)熱消渴等病的治療[7]。

目前國(guó)內(nèi)外報(bào)道的關(guān)于黃芪藥材指紋圖譜研究的文獻(xiàn)較多[8-13]，但是指紋圖譜研究所用的樣品處理方法是采用有機(jī)溶劑提取，對(duì)基于傳統(tǒng)煎藥工藝提取所制的黃芪樣品指紋圖譜的研究尚屬空白。本實(shí)驗(yàn)將沿用傳統(tǒng)煎藥工藝，以水為溶劑提取黃芪樣品，結(jié)合高效液相色譜-蒸發(fā)光散射法（HPLC-ELSD）建立黃芪藥材的指紋圖譜，并運(yùn)用化學(xué)模式識(shí)別技術(shù)如聚類分析和主成分分析[9,14]，對(duì)黃芪指紋圖譜進(jìn)行模式識(shí)別，對(duì)不同來源的黃芪藥材進(jìn)行有效直觀地鑒別和質(zhì)量評(píng)價(jià)，深度挖掘黃芪水提取物指紋圖譜所蘊(yùn)含的藥效成分信息，合理評(píng)價(jià)黃芪藥材指紋圖譜的整體特征，為采用傳統(tǒng)煎藥工藝制備的制劑，如經(jīng)典名方制劑的質(zhì)量評(píng)價(jià)提供參考。

1 儀器與材料

1.1 儀器

Waters e2695型高效液相色譜儀，包括四元泵、柱溫箱、自動(dòng)進(jìn)樣器和Empower工作站（美國(guó)Waters公司）；ELSD 2000ES型蒸發(fā)光散射檢測(cè)器；XWK-III型空氣發(fā)生器（天津市津分分析儀器制造有限公司）；MS-105D型電子分析天平（瑞士梅特勒-托利多公司）；KQ-500E型數(shù)控超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）；RE-52A型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器（上海亞榮生化儀器廠）；X-30R型高速冷凍離心機(jī)（美國(guó)貝克曼庫爾特公司）。

1.2 材料

黃芪甲苷（批號(hào)110781-201717）和毛蕊異黃酮葡萄糖苷（批號(hào)111920-201606）均購(gòu)自中國(guó)食品藥品檢定研究院；黃芪皂苷I（批號(hào)H-038-181121）和黃芪皂苷II（批號(hào)H-037-171121）均購(gòu)自成都瑞芬思生物有限公司；黃芪皂苷III（批號(hào)180419）購(gòu)自南京森貝伽生物科技有限公司；毛蕊異黃酮（批號(hào)20120111）購(gòu)自上海源葉生物科技有限公司；芒柄花苷（批號(hào)JBZ-0778）購(gòu)自南京金益柏生物科技有限公司；刺芒柄花素（批號(hào)P1415345）購(gòu)自上海泰坦科技股份有限公司。所有對(duì)照品質(zhì)量分?jǐn)?shù)均大于98%。冰乙酸（批號(hào)D1918059，上海阿拉丁生化科技股份有限公司）；乙腈（HPLC級(jí)，德國(guó)Merck公司）；實(shí)驗(yàn)用水為雙蒸水；其他試劑均為分析純。

本研究收集了甘肅省民樂縣、岷縣及渭源縣3個(gè)產(chǎn)地的黃芪藥材，共15批，見表1。經(jīng)筆者鑒定為蒙古黃芪(Fisch.) Bge. var.(Bge.) Hsiao或膜莢黃芪(Fisch.) Bge.的干燥根，具體見表1。

表1 黃芪藥材信息

2 方法與結(jié)果

2.1 溶液的制備

2.1.1 對(duì)照品溶液的制備 取黃芪甲苷、毛蕊異黃酮葡萄糖苷、毛蕊異黃酮、芒柄花苷、刺芒柄花素、黃芪皂苷I、黃芪皂苷II、黃芪皂苷III對(duì)照品適量，精密稱定，加甲醇溶解定容，制得質(zhì)量濃度分別為1.024、1.960、1.019、1.034、1.241、1.068、0.999 0、1.058 mg/mL的混合對(duì)照品溶液。

2.1.2 供試品溶液的制備 取黃芪藥材粉末（過10號(hào)篩）約30 g，精密稱定，加8倍量水浸泡30 min，加熱回流60 min，趁熱200目濾布濾過；藥渣再加8倍量水，加熱回流60 min，趁熱濾過，合并2次濾液，待濾液冷卻至室溫后8000 r/min低溫25 ℃離心10 min，全部上清液濃縮至30 mL，濃縮液加甲醇120 mL，混勻后靜置30 min，離心（參數(shù)同上），上清液濃縮至10 mL，濃縮液加甲醇40 mL，混勻后靜置30 min，離心（參數(shù)同上），上清液減壓回收溶劑，殘?jiān)芗尤?0%甲醇5 mL，超聲使溶解，0.45 μm微孔濾膜濾過，即得。

2.1.3 色譜條件 色譜柱：Hedera ODS-2柱（200 mm×4.6 mm，5 μm，江蘇漢邦科技有限公司）；流動(dòng)相：乙腈（A）-0.2%的冰乙酸水溶液（B），梯度洗脫（0～16 min，15%～23% A；16～20 min，23%～28% A；20～25 min，28%～30% A；25～30 min，30% A；30～35 min，30%～32% A；35～45 min，32% A；45～50 min，32%～40% A；50～55 min，40%～45% A；55～60 min，45%～65% A；60～65 min，65%～95% A）；體積流量1 mL/min；柱溫30 ℃；進(jìn)樣量20 μL；載氣體積流量2.7 L/min；漂移管溫度102 ℃。

2.2 方法學(xué)考察

2.2.1 精密度試驗(yàn) 精密吸取同一供試品（S1）各20 μL，按“2.1.3”項(xiàng)下色譜條件，連續(xù)進(jìn)樣6次測(cè)定，記錄譜圖。以毛蕊異黃酮葡萄糖苷為參照峰，考察共有峰相似度的一致性。結(jié)果顯示，各特征共有峰相對(duì)保留時(shí)間RSD均小于1%，相對(duì)峰面積的RSD均小于5%，表明所用儀器精密度良好。

2.2.2 重復(fù)性試驗(yàn) 取同一批號(hào)（S1）的黃芪藥材粉末6份，按“2.1.2”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，按“2.1.3”項(xiàng)下色譜條件測(cè)定，記錄色譜峰。以毛蕊異黃酮葡萄糖苷為參照峰，計(jì)算各共有峰的相對(duì)保留時(shí)間和相對(duì)峰面積。結(jié)果顯示，各共有峰的相對(duì)保留時(shí)間的RSD均小于2%，相對(duì)峰面積的RSD均小于5%。

2.2.3 穩(wěn)定性試驗(yàn) 將供試品溶液室溫保存，分別于0、2、4、6、8、12、20、24 h測(cè)定HPLC色譜圖，以毛蕊異黃酮葡萄糖苷為參照峰，計(jì)算各共有峰的相對(duì)保留時(shí)間和相對(duì)峰面積。結(jié)果顯示，各共有峰相對(duì)保留時(shí)間的RSD均小于2%，相對(duì)峰面積的RSD均小于5%。

2.3 HPLC指紋圖譜的建立

2.3.1 黃芪藥材HPLC指紋圖譜的測(cè)定 分別取15批來源不同的黃芪藥材30 g，按照“2.1.2”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，按照“2.1.3”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)行測(cè)定，記錄色譜峰（圖1）。

將15批黃芪藥材的HPLC色譜圖導(dǎo)入“中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)”2004A版進(jìn)行色譜峰匹配，對(duì)獲得的的指紋圖譜進(jìn)行處理后共標(biāo)定并指認(rèn)12個(gè)共有峰，經(jīng)過與對(duì)照品溶液色譜圖比對(duì)后，確認(rèn)樣品圖譜中1號(hào)峰為毛蕊異黃酮葡萄糖苷，6號(hào)峰為黃芪黃芪皂苷Ⅱ，9號(hào)峰為黃芪皂苷Ⅲ，見圖2。

圖1 15批黃芪藥材的HPLC指紋圖譜

1-毛蕊異黃酮葡萄糖苷 6-黃芪皂苷Ⅱ 9-黃芪皂苷Ⅲ

2.3.2 相似度評(píng)價(jià) 將15批黃芪藥材樣品指紋圖譜數(shù)據(jù)導(dǎo)入中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)（2004A），利用中位數(shù)法，以S1號(hào)樣品色譜圖為參照譜圖，采用多點(diǎn)校正后進(jìn)行自動(dòng)匹配，生成對(duì)照譜圖，以此作為黃芪藥材的對(duì)照指紋圖譜，進(jìn)行相似度評(píng)價(jià)，S1～S15的相似度分別為0.996、0.995、0.999、0.998、0.999、0.996、0.999、0.999、0.991、0.999、0.993、0.998、0.998、0.997、0.998。15批黃芪藥材的相似度計(jì)算結(jié)果均大于0.99，說明各產(chǎn)地的藥材具有較好的一致性，可以用于綜合評(píng)價(jià)黃芪藥材的整體質(zhì)量。

2.4 聚類分析

將不同產(chǎn)地的黃芪藥材HPLC指紋圖譜的12個(gè)共有峰的峰面積為特征，得到15×12階原始數(shù)據(jù)矩陣，運(yùn)用SPSS22.0分析軟件對(duì)其進(jìn)行聚類分析，采用組間連接法，以歐氏平方距離為測(cè)度，Z標(biāo)準(zhǔn)化，對(duì)樣品進(jìn)行聚類分析，結(jié)果見圖3。15個(gè)黃芪藥材樣品總共可以聚為4類，批號(hào)為S1、S2、S3、S4聚為第1類；批號(hào)為S7、S10、S5、S13、S15、S11、S12、S8聚為第2類；批號(hào)為S6、S9為第3類，批號(hào)為S14單獨(dú)成一類為第4類。從聚類分析的結(jié)果來看，黃芪藥材的指紋圖譜與其地理位置、外界環(huán)境具有一定的相關(guān)性，但不絕對(duì)相關(guān)。

圖3 15批黃芪藥材指紋圖譜的聚類分析樹狀圖

2.5 主成分分析

主成分分析是最常用的多指標(biāo)線性降維壓縮和多變量分析方法。它可將原有眾多具有一定相關(guān)性的變量，重新組合成一組新的、相互無關(guān)的綜合指標(biāo)來代替原有的變量，從而實(shí)現(xiàn)以最少的主成分盡可能多的體現(xiàn)原變量的信息，以揭示數(shù)據(jù)結(jié)構(gòu)特征，提取化學(xué)信息，已廣泛應(yīng)用于中藥材的品質(zhì)綜合評(píng)價(jià)與分類。

采用SPSS22.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)15批的黃芪藥材的指紋圖譜數(shù)據(jù)進(jìn)行主成分分析，將15批樣品12個(gè)共有峰峰面積導(dǎo)入SPSS22.0軟件，進(jìn)行主成分分析。對(duì)于黃芪藥材共有峰峰面積Z標(biāo)準(zhǔn)化處理后，計(jì)算相關(guān)系數(shù)矩陣，主成分特征值、累積貢獻(xiàn)率及主成分綜合得分等。

2.5.1 相關(guān)性分析 相關(guān)系數(shù)矩陣見表2。1號(hào)峰為毛蕊異黃酮葡萄糖苷，6號(hào)峰為黃芪皂苷II、9號(hào)峰為黃芪皂苷III。峰1（毛蕊異黃酮葡萄糖苷）與色譜峰3具有較大的正相關(guān)性；峰2、4、5具有較大的正相關(guān)性；峰6和峰7具有較大的正相關(guān)性；峰9（黃芪皂苷III）、峰10、11和色譜峰12相互之間均有較大的正相關(guān)性。

2.5.2 特征值、方差貢獻(xiàn)率 相關(guān)系數(shù)的特征值和方差貢獻(xiàn)率見表3和圖4。以特征值＞1為提取標(biāo)準(zhǔn)，得到前3個(gè)主成分的累積方差貢獻(xiàn)率為90.268%＞85%，故選取前3個(gè)主成分即可進(jìn)行評(píng)價(jià)，它代表了黃芪藥材中12個(gè)成分量的90.268%的信息量，具有很好的代表性，足以評(píng)價(jià)黃芪藥材的品質(zhì)。

表2 相關(guān)系數(shù)矩陣

表3 特征值和方差貢獻(xiàn)率

圖4 公共因子碎石圖

根據(jù)因子荷載矩陣，推測(cè)影響黃芪藥材質(zhì)量差異的并不是單一成分，而是多成分的協(xié)同作用的結(jié)果。從表4和圖5中可以看出，第1主成分的信息主要來自于色譜峰5、6、7、9、10、11、12；第2主成分的信息主要來自色譜峰1、2、3、4；第3主成分主要來自色譜峰8的信息。

2.5.3 不同產(chǎn)地黃芪藥材的綜合評(píng)價(jià) 用3個(gè)主成分對(duì)黃芪藥材進(jìn)行綜合評(píng)價(jià)，將得到的特征向量與標(biāo)準(zhǔn)化后的數(shù)據(jù)相乘，得到主成分表達(dá)式，再以每個(gè)主成分所對(duì)應(yīng)的特征值占提取主成分的特征值之和的比例作為權(quán)重得到了主成分綜合模型，根據(jù)主成分綜合模型計(jì)算15批黃芪藥材的主成分得分及綜合得分值，見表5。綜合得分越高，表明質(zhì)量越好。綜合得分顯示，甘肅民樂縣所產(chǎn)S1、S2和甘肅岷縣所產(chǎn)S7、S6的黃芪藥材在所有樣品中的綜合得分位于前4名，表明該4個(gè)批號(hào)的黃芪藥材質(zhì)量較好，對(duì)應(yīng)藥材指紋圖譜信息，該4個(gè)批號(hào)的黃芪藥材的指紋圖譜中主要成分1、2、3、4、5、6、7、8的峰面積值均較大，結(jié)果也證明了主成分分析時(shí)提取的3個(gè)主成分能夠基本體現(xiàn)指紋圖譜的所有信息。綜合聚類分析結(jié)果分析，第2類黃芪藥材質(zhì)量較差，其余批號(hào)的黃芪藥材質(zhì)量較好，且甘肅省民樂縣所產(chǎn)S1的黃芪藥材質(zhì)量最好。主成分綜合分析結(jié)果與聚類分析的結(jié)果相互得以印證。15個(gè)不同產(chǎn)地的黃芪藥材的質(zhì)量的差異，分析原因可能是不同的生態(tài)環(huán)境（包括土壤、氣候、水分、礦物質(zhì)分布情況等）對(duì)中藥材的質(zhì)量產(chǎn)生一定的影響。自然生態(tài)環(huán)境與中藥資源的質(zhì)量（有效成分的形成和積累）、數(shù)量密切相關(guān)，是其生態(tài)適宜性評(píng)價(jià)的客觀基礎(chǔ)，也是藥材生產(chǎn)區(qū)劃分的關(guān)鍵所在。不同批號(hào)的黃芪藥材再按綜合主成分得分值進(jìn)行聚類分析，聚類結(jié)果見圖6。15批黃芪藥材分為3類，綜合得分排名第1、2名的甘肅民樂縣所產(chǎn)S1和S2的黃芪聚為第1類；S8、S9、S11的黃芪藥材聚為第2類；其他批號(hào)的黃芪藥材具為第3類，其中S7和S6批號(hào)的黃芪綜合得分排名第3、4名，與上述聚類分析結(jié)果基本一致，略有不同。

表4 初始因子荷載矩陣

圖5 樣本在3個(gè)主成分的平面分布圖

表5 主成分得分、綜合得分排序

圖6 15批黃芪藥材指紋圖譜主成分聚類圖

3 討論

本實(shí)驗(yàn)采用HPLC-ELSD法對(duì)黃芪藥材指紋圖譜的色譜條件進(jìn)行深入摸索，獲得的HPLC圖譜重現(xiàn)性及精密度、穩(wěn)定性均較好，有利于指紋圖譜的進(jìn)一步分析。

在流動(dòng)相系統(tǒng)的選擇中，分別以乙腈-水、乙腈-甲酸、乙腈-磷酸、乙腈-0.1%冰乙酸、乙腈-0.2%冰乙酸等不同體積分?jǐn)?shù)、不同比例的流動(dòng)相系統(tǒng)進(jìn)行梯度洗脫實(shí)驗(yàn)。結(jié)果表明，乙腈-0.2%冰乙酸進(jìn)行梯度洗脫為最佳，基線相對(duì)平穩(wěn)，各主要峰之間能夠基本實(shí)現(xiàn)基線分離，且峰形良好，在調(diào)整好流動(dòng)相的不同時(shí)間洗脫比例之后，各峰的保留時(shí)間適中，重復(fù)性和精密度較好，有助于指紋圖譜的分析。

本實(shí)驗(yàn)分別考察了柱溫在25、30、35 ℃時(shí)對(duì)色譜峰的分離影響。結(jié)果表明，隨著柱溫的升高，各色譜峰的保留時(shí)間稍有遷移；當(dāng)柱溫為25、30 ℃時(shí)，部分保留時(shí)間段內(nèi)的色譜峰出峰比較接近，未能完全分離；當(dāng)柱溫為30 ℃時(shí)，各色譜峰的分離效果比柱溫在25、30 ℃較好，且整體保留時(shí)間較為適中。綜合考慮，故最終選擇30 ℃作為黃芪藥材HPLC指紋圖譜的檢測(cè)溫度。

本實(shí)驗(yàn)對(duì)黃芪藥材的指紋圖譜進(jìn)行了相似度評(píng)價(jià)、聚類分析及主成分分析。根據(jù)15個(gè)不同產(chǎn)地的黃芪藥材指紋圖譜的分析結(jié)果可以看出，15批藥材的相似度計(jì)算結(jié)果均大于0.990，說明各產(chǎn)地的藥材有較好的一致性。聚類分析將15批黃芪藥材的指紋圖譜聚為4類，聚類結(jié)果表明黃芪藥材的指紋圖譜與其地理位置、外界環(huán)境具有一定的相關(guān)性，但是不絕對(duì)相關(guān)。用提取的3個(gè)主成分對(duì)黃芪藥材進(jìn)行綜合評(píng)價(jià)，綜合得分結(jié)果顯示，甘肅民樂縣所產(chǎn)批號(hào)為S1、S2和甘肅岷縣所產(chǎn)批號(hào)為S6、S7的黃芪藥材在所有樣品中的綜合得分位于前4名；綜合聚類分析，第2類黃芪藥材的質(zhì)量較差，其余批號(hào)的黃芪藥材質(zhì)量較好，且甘肅省民樂縣產(chǎn)S1的黃芪藥材質(zhì)量最好。

本實(shí)驗(yàn)運(yùn)用指紋圖譜結(jié)合化學(xué)計(jì)量學(xué)對(duì)不同產(chǎn)地的黃芪藥材質(zhì)量進(jìn)行評(píng)價(jià)，并采用傳統(tǒng)煎藥工藝進(jìn)行黃芪藥材樣品的處理，較單一的含量測(cè)定更為全面準(zhǔn)確，對(duì)綜合評(píng)價(jià)和控制黃芪藥材質(zhì)量具有一定的參考意義，尤其是對(duì)以黃芪為原料采用傳統(tǒng)水煎煮工藝制備的制劑質(zhì)量評(píng)價(jià)具有很好的指導(dǎo)意義。

[1] 中國(guó)藥典 [S]. 一部. 2015: 302.

[2] 楊玲. 黃芪的化學(xué)成分及其質(zhì)量研究 [D]. 北京: 首都師范大學(xué), 2008.

[3] 牟佳佳, 陳芳, 陳黨輝, 等. 黃芪中5種黃酮類成分的含量測(cè)定及其指紋圖譜研究 [J]. 藥物評(píng)價(jià)研究, 2019, 42(5): 900-906.

[4] 史鑫波, 唐志書, 劉妍如, 等. HPLC-UV-ELSD法同時(shí)測(cè)定黃芪中黃芪皂苷和黃酮類成分 [J]. 天然產(chǎn)物研究與開發(fā), 2019, 31(3): 434-440.

[5] 劉靖麗, 于海東, 梁艷妮. 中藥黃芪中黃酮類化合物抗氧化活性的DFT研究 [J]. 化學(xué)與生物工程, 2019, 36(1): 36-40.

[6] 劉焰東, 蔡小麗, 張偉安. 中藥黃芪的藥理作用及臨床應(yīng)用效果研究 [J]. 心電圖雜志: 電子版, 2019, 8(3): 37-39.

[7] 王青, 趙林華, 邸莎. 黃芪的臨床應(yīng)用及其用量探究 [J]. 吉林中醫(yī)藥, 2018, 38(12): 1450-1454.

[8] 汪海斌, 石巖, 李芳, 等. 中藥黃芪指紋圖譜的研究進(jìn)展 [J]. 中國(guó)藥房, 2017, 28(33): 4749-4752.

[9] 蘇碧茹, 鄧慧敏, 馬宏亮, 等. HPLC-DAD-ELSD指紋圖譜的化學(xué)模式識(shí)別用于黃芪質(zhì)量評(píng)價(jià) [J]. 中國(guó)中藥雜志, 2013, 38(19): 3319-3323.

[10] 李婷婷, 舒志恒, 于良, 等. 不同產(chǎn)地黃芪HPLC/DAD指紋圖譜及主要黃酮成分含量測(cè)定 [J]. 中國(guó)醫(yī)院藥學(xué)雜志, 2015, 35(13): 1182-1187.

[11] 芮雯, 馮毅凡, 石忠峰, 等. 不同產(chǎn)地黃芪藥材的UPLC/Q-TOF-MS指紋圖譜研究 [J]. 藥物分析雜志, 2012, 32(4): 607-611.

[12] 嚴(yán)治學(xué), 何永志, 王穎. 黃芪HPLC-ELSD指紋圖譜的建立及分析 [J]. 天津中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào), 2017, 36(2): 142-145.

[13] 王迪, 劉磊, 李科, 等. 基于內(nèi)切-1,3-β-葡聚糖酶水解的黃芪糖指紋圖譜的建立及不同種質(zhì)資源黃芪鑒別[J]. 中草藥, 2018, 49(10): 2320-2327.

[14] 聶韡, 朱培林, 房海靈, 等. HPLC指紋圖譜結(jié)合化學(xué)計(jì)量學(xué)評(píng)價(jià)不同產(chǎn)地廣東紫珠藥材的質(zhì)量 [J]. 中草藥, 2017, 48(1): 185-191.

Fingerprints and quality evaluation ofby HPLC coupled with chemometrics based on traditional decoction process

ZHANG Qian1, YANG Huai-jin2, ZHOU Yue1, YU Yi-ting1, ZHUANG Xin-ya1, Mao Chun-qin1, XIE Hui1, LI Lin1, LU Tu-ling1, YAN Guo-jun1

1. School of Pharmacy, Nanjing University of Chinese Medicine, Nanjing 210023, China 2. Nan jing MoChou Vocational School, Nanjing 210017, China

To establish a HPLC fingerprints evaluation method for the quality evaluation ofbased on traditional decoction process taking water as solvent.The fingerprints of 15 batches ofwere further evaluated by chemometrics methods. The similarity analyzed with “Similarity Evaluation System for Chromatographic Fingerprint of Chinese Materia Medica 2004A”, and hierarchical clustering analysis (HCA) and principal component analysis (PCA) were performed by SPSS 22.0.There were 12 common peaks, and the similarity degrees of 15 batches of samples were more than 0.990, which showed that all the samples from different origins were of good consistency. The samples were divided into four clusters by HCA. The result of PCA showed that the three factors were chosen, the quality of samples could be evaluated basically. According to the composite score, the quality of the batches of HQ-18001 (S1) and HQ-18002 (S2) ofproduced in Minle County of Gansu Province and the batches of HQ-18007 (S7) and HQ-18006 (S6) produced in Minle County of Gansu Province, were the top four in all the samples.The method is simple, reproducible, and reliable, which can be used for quality control and evaluation offrom different origins.

; HPLC; fingerprint; quality evaluation; chemical metrology

R286.2

A

0253 - 2670(2021)04 - 1128 -08

10.7501/j.issn.0253-2670.2021.04.026

2020-04-06

國(guó)家重點(diǎn)研發(fā)計(jì)劃資助（2019YFC1710603）；國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目（81773910，82074004）；江蘇高?！扒嗨{(lán)工程”項(xiàng)目（2020）

張 倩（1995—），女，碩士研究生,研究方向?yàn)橹兴幩巹W(xué)。Tel: 18260027862 E-mail: 1422943829@qq.com

嚴(yán)國(guó)俊，教授，主要從事中藥新型劑型及質(zhì)量評(píng)價(jià)方法研究。E-mail: yanguojun@njucm.edu.cn

[責(zé)任編輯 時(shí)圣明]