杜 強(qiáng)， 趙譜遠(yuǎn)， 楊昌齊，， 李道友， 徐 飛， 周 路， 李正友

(1. 貴州省農(nóng)業(yè)科學(xué)院水產(chǎn)研究所，貴州貴陽(yáng)550025； 2. 貴州省特種水產(chǎn)工程技術(shù)中心，貴州貴陽(yáng)550025； 3. 遵義市水產(chǎn)繁殖場(chǎng)，貴州遵義563102； 4. 貴州黔源北盤江魚類增殖放流站，貴州晴隆561405)

中華倒刺鲃(Spinibarbussinensis)又稱青波、巖鯽，屬于鯉形目，鯉科，鲃亞科，主要分布于我國(guó)長(zhǎng)江水系流域，是長(zhǎng)江流域增殖放流的重要魚種。該魚肉質(zhì)肥美，細(xì)嫩多脂，肌肉中常規(guī)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)粗蛋白質(zhì)(CP)、粗脂肪(CF)、粗灰分(CA)分別為19.22%、1.96%、1.62%，氨基酸總量(EAA)高達(dá)73.61%，脂肪酸(FA)中二十碳五烯酸(EPA)與二十二碳六烯酸(DHA)質(zhì)量分?jǐn)?shù)分別為0.87%、3.08%，均高于其他大多數(shù)淡水經(jīng)濟(jì)魚類[1]。中華倒刺鲃生長(zhǎng)快、個(gè)體大、食性雜，飼料來(lái)源廣，已成為1種優(yōu)良的池塘、大水面養(yǎng)殖推廣品種，經(jīng)濟(jì)效益較高。目前關(guān)于該魚涉及人工繁殖及胚胎發(fā)育研究方面的報(bào)道較多[2～4]。中華倒刺鲃自2000年在貴州省內(nèi)人工馴化飼養(yǎng)成功以來(lái)，已列為省內(nèi)主要經(jīng)濟(jì)魚種類，但整體養(yǎng)殖數(shù)量有限，自繁苗種多用于長(zhǎng)江上游增殖放流[5，6]。以往貴州省內(nèi)中華倒刺鲃人工繁殖多為簡(jiǎn)單的生產(chǎn)實(shí)踐，催產(chǎn)效應(yīng)及繁殖孵化方式等未作相關(guān)對(duì)比總結(jié)，催產(chǎn)繁殖效果不穩(wěn)定[7]。本項(xiàng)目結(jié)合近年的人工繁殖情況，采用混合催產(chǎn)劑對(duì)中華倒刺鲃進(jìn)行人工繁殖試驗(yàn)，以期為增產(chǎn)養(yǎng)殖和推廣應(yīng)用提供幫助。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 試驗(yàn)環(huán)境人工繁殖主要地點(diǎn)為貴州黔源北盤江魚類增殖放流站，位于N 105°15′28.25″，S 25°57′43.75″。所用水源為光照庫(kù)區(qū)中上層水，池塘溶氧5 mg/L，pH值6.8～8.5，水體透明度40 cm以上，生產(chǎn)及試驗(yàn)水溫22～27 ℃。

1.1.2 親魚以芙蓉江(遵義)和北盤江(晴隆)流域內(nèi)捕獲的野生魚或自育的成魚作為親魚，體重1～2 kg。池塘培育期間主要以人工顆粒飼料飼喂。

1.1.3 催產(chǎn)藥物馬來(lái)酸地歐酮(DOM)、絨毛膜促性腺激素(HCG)(南京動(dòng)物激素廠)，促黃體激素釋放激素類似物(LRH-A2)(哈爾濱三馬獸藥業(yè)有限公司)。

1.2 方法

1.2.1 親魚培育使用光照增殖站水深1.5 m左右的池塘4口(總面積1 334 m2)作為親魚培育池。親魚飼料以粗蛋白含量30%的顆料飼料為主，每天投喂量約為魚體重的2%；每日補(bǔ)充投喂一些菜葉、浮萍等青飼料。催產(chǎn)前20～30 d，每3～5 d添加LRH-A225 μg飼喂催熟，同時(shí)抽取同一池塘池水沖水約4 h，促進(jìn)水體流動(dòng)，滿足親魚性腺成熟的條件。培育過(guò)程中保持水質(zhì)清新，定期清除沉底的腐草。親魚池搭建藤蔓或遮蔭網(wǎng)遮擋約30%。

1.2.2 親魚選擇選擇體質(zhì)壯健、2～5年齡、平均個(gè)體1 kg以上的雌性30尾和雄性40尾作為后備親魚，經(jīng)消毒處理后放入親魚池塘中進(jìn)行培育，并配養(yǎng)150 g/尾左右的白鰱100尾、花鰱30尾。雌雄親魚的判定：雄魚體形較瘦長(zhǎng)，體背顏色為較深的青灰色，在臀鰭和頭部的上頜前緣及鰓蓋兩側(cè)肉眼可見(jiàn)“珠星”狀突起；腹部不膨大，生殖突略凸起，長(zhǎng)約0.5 cm。雌魚體型較肥胖，體背顏色為較淺的青黃色，臀鰭和頭部的上頜前緣及鰓蓋兩側(cè)沒(méi)有“珠星”狀突起；腹部膨大、松軟，卵巢輪廓明顯，生殖突凸起呈圓柱狀，長(zhǎng)約1.5 cm。雌雄放養(yǎng)比例為1∶2。

1.2.3 藥物催產(chǎn)選取面積4 m2(2 m×2 m)，深1.6 m 的方形池作為催產(chǎn)產(chǎn)卵用。池內(nèi)鋪設(shè)60目聚酯纖維網(wǎng)1張，便于檢查親魚催產(chǎn)狀況。參考以往研究和前期經(jīng)驗(yàn)，結(jié)合實(shí)地生產(chǎn)情況分別于5月28日(規(guī)?；a(chǎn))、6月19日、6月26日、8月14日按不同配比(見(jiàn)表1)混合HCG、LRH-A2、DOM后進(jìn)行4批次人工注射催產(chǎn)。注射方法：雌魚采用2次注射，第1次注射藥量為總劑量的1/8～1/10，第2次注射剩余量。2次注射的間隔時(shí)間隨水溫高低而定：水溫20～22 ℃間隔12～14 h，23～25 ℃間隔10～12 h，26～28 ℃間隔8～10 h。雄魚只注射1次，注射時(shí)間在雌魚第2次注射時(shí)進(jìn)行。注射部位均為胸鰭基部肌肉。

1.2.4 采卵授精

1.2.4.1 人工采卵授精前的準(zhǔn)備中華倒刺鲃適宜的授精水溫為24 ℃左右[8]，因此采卵授精時(shí)準(zhǔn)備24 ℃左右的清潔水用作受精卵沖洗液。用生理鹽水將受精卵沖洗液配制成含鹽量0.15%～0.2%的精子稀釋液，配制好后放入盆中保溫待用。

1.2.4.2 采卵授精使用半干法進(jìn)行人工授精，即人工擠壓雌、雄魚腹部先后進(jìn)行采卵和采精于接卵盆中(卵粒︰精液=6萬(wàn)～8萬(wàn)枚︰1～2 mL)，搖動(dòng)接卵盆讓精液與卵粒充分混合。然后倒入精子稀釋液，混合攪拌，至所有的卵粒都散開(kāi)。待盆中泡沫基本消散后，逐漸添加孵化池的水，反復(fù)多次，以降低溫差使盆中水溫逐漸與孵化池水溫一致，減少受精卵應(yīng)激。最后將受精卵倒入孵化箱中孵化，同樣輕輕搖動(dòng)使受精卵在箱中均勻分布。中華倒刺鲃的卵粒直徑為1.1～1.3 mm，略具黏性，吸水較慢，吸水后卵粒直徑為1.8～2 mm。

1.2.5 苗種培育

1.2.5.1 魚苗孵化孵化水體酸堿度(pH值)為7～8.5，溶氧(DO)>6 mg/L，水溫保持在22～25 ℃，溫度過(guò)高可通過(guò)添加井水等方式降溫。孵化開(kāi)始后的1 h，用羽毛翻動(dòng)卵粒避免粘連。孵化8 h后，注意剔除箱中白色空卵(未受精卵)。為防止孵化時(shí)產(chǎn)生水霉病，開(kāi)始孵化的前40 h內(nèi)，每10 h把卵粒從孵化箱中吸入40目的濾網(wǎng)中，用3%食鹽水浸泡30 s。經(jīng)過(guò)56～60 h的孵化，幼魚相繼出膜。幼魚出膜3～4 d，其卵黃囊逐漸消失，顏色逐漸變黑，開(kāi)始平游，處于混合營(yíng)養(yǎng)期，此時(shí)投喂少量的蛋黃水等微型餌料。出膜約7 d，魚苗身體變黑，卵黃囊完全消失，處于外源營(yíng)養(yǎng)期，投喂足夠數(shù)量的水蚤等浮游生物，讓幼魚自由攝食。

1.2.5.2 魚苗培育階段管理要點(diǎn)(1)保持池水大流量、小流速的水體交換量，保證水質(zhì)清新。(2)水溫穩(wěn)定在23～28 ℃。(3)水體保持6 mg/L以上的充沛溶氧，避免魚苗堆積缺氧而死亡。(4)每天早上用3%食鹽水對(duì)水體進(jìn)行流水消毒處理，避免水霉病等魚病的發(fā)生。

2 結(jié)果與分析

2.1 催產(chǎn)效果由表1可見(jiàn)：6月19日、8月14日使用的催產(chǎn)劑量(DOM 8 mg+LRH-A230 μg+HCG 2 000 IU)得到的效應(yīng)時(shí)間最短為15～16 h，產(chǎn)卵率100%，產(chǎn)卵0.4萬(wàn)～0.5萬(wàn)粒/尾。

2.2 孵化效果由表2可見(jiàn)：平均受精率為92.33%，在25 ℃條件下，8月15使用的水泥池流水孵化率最高達(dá)到96%，其次是微流水孵化箱方式達(dá)到92%，22 ℃靜水孵化率最低為10%。

表1 中華倒刺鲃人工繁殖催產(chǎn)記錄

表2 中華倒刺鲃人工繁殖孵化記錄

3 結(jié)論

采用DOM+LRH-A2+HCG進(jìn)行中華倒刺鲃人工催產(chǎn)孵化，注射效應(yīng)時(shí)間在15～20 h之間，平均產(chǎn)卵率為79.68%，平均受精率為92.33%，平均孵化率為69.5%。在水溫為25 ℃時(shí)，使用DOM 8 mg+LRH-A230 μg+HCG 2 000 IU混合催產(chǎn)劑進(jìn)行人工催產(chǎn)，產(chǎn)卵率為100%，產(chǎn)卵量0.4萬(wàn)～0.5萬(wàn)粒/尾，催產(chǎn)效果更好；采用微流水孵化箱和水泥池流水2種孵化方式的孵化率都能達(dá)到80%以上。

4 小結(jié)

結(jié)合以往貴州省內(nèi)相關(guān)區(qū)域生產(chǎn)實(shí)踐情況，在中華倒刺鲃?dòng)H魚培育及人工催產(chǎn)繁殖時(shí)應(yīng)注意以下幾點(diǎn)。

4.1親魚培育過(guò)程中除投喂精飼料外，必需適當(dāng)搭配一些青飼料。這樣不僅能防止雌魚因攝入過(guò)量營(yíng)養(yǎng)造成體內(nèi)脂肪儲(chǔ)積過(guò)高影響懷卵量及正常產(chǎn)卵，又能讓親魚通過(guò)攝食青飼料補(bǔ)充維生素，促進(jìn)親魚的性腺發(fā)育，在產(chǎn)卵前30 d左右注射一定量的激素(LRH-A2)催熟，是親魚順產(chǎn)、多產(chǎn)的有力保證。

4.2根據(jù)相關(guān)資料介紹，該魚的自然產(chǎn)卵季節(jié)為4—6月，個(gè)別可延長(zhǎng)至8月，在貴州省的自然繁殖高峰時(shí)期主要集中在6月中旬，故將人工繁殖的主要時(shí)間選定在6月中下旬。又考慮該魚是1年多次產(chǎn)卵性魚類，項(xiàng)目組在8月(黔西南區(qū)域)進(jìn)行催產(chǎn)繁殖，同樣獲得了成功。

4.3催產(chǎn)時(shí)選擇成熟的親魚是提高產(chǎn)卵率的關(guān)鍵。經(jīng)過(guò)觀察，親魚進(jìn)入成熟狀態(tài)時(shí)吃食量會(huì)顯著下降，拉網(wǎng)檢查時(shí)親魚特征比較明顯： 雄魚吻端布滿“珠星”，摸之有粗糙感，輕壓服腹部有精液流出；雌魚腹部飽滿，有明顯的卵巢輪廓，輕壓腹部有彈性，生殖孔發(fā)紅。

4.4中華倒刺鲃的卵黏性極弱，輕輕動(dòng)彈粘附物就全部脫落。在孵化試驗(yàn)時(shí)采取3種方式(微流水孵化箱、水泥池流水、水泥池靜水)對(duì)比，結(jié)果水泥池靜水孵化方式魚苗孵化率僅為10%，而水泥池流水孵化率達(dá)到80%以上，但管理和操作較不方便，相比而言流水孵化箱方式孵化效果較好。推測(cè)可能是因不同孵化方式造成孵化水溫變化或受精卵內(nèi)部的運(yùn)動(dòng)代謝等因素所致，還有待于進(jìn)一步研究。