趙樂，楊海麗，李佳璐，楊永恒，張蓉，程文強，成磊，趙永聚

與細胞程序性死亡相關(guān)基因在山羊妊娠早期輸卵管及子宮角的表達

趙樂，楊海麗，李佳璐，楊永恒，張蓉，程文強，成磊，趙永聚

西南大學(xué)動物科學(xué)技術(shù)學(xué)院/重慶市牧草與草食家畜重點實驗室/重慶市草食動物資源保護與利用工程技術(shù)研究中心，重慶 400715

【】TET（ten-eleven translocation）家族蛋白在調(diào)控胚胎和胎盤發(fā)育等過程中具有重要作用，輸卵管與子宮內(nèi)膜細胞的死亡平衡會影響受精卵及早期胚胎的發(fā)育。因此探討、細胞程序性死亡相關(guān)基因和附植相關(guān)基因在妊娠早期山羊輸卵管及子宮角中的表達規(guī)律及其潛在調(diào)控作用，以期為研究胚胎發(fā)育及附植的分子機制奠定基礎(chǔ)。以合川白山羊為研究對象，采集妊娠19d（P19）山羊子宮角及輸卵管組織，以空配19d（C19）為對照，利用H.E染色觀察C19組和P19組山羊子宮角組織形態(tài)，利用qRT-PCR技術(shù)檢測了胚胎附植相關(guān)基因（、、）、（、、）、細胞程序性死亡相關(guān)基因（凋亡相關(guān)基因（、、）、焦亡相關(guān)基因（、、）和炎癥相關(guān)基因（、））的相對表達，并分析了及細胞程序性死亡相關(guān)基因在輸卵管和子宮角組織的表達相關(guān)性。H.E染色結(jié)果顯示，在P19組中山羊子宮角的腺體增多，形態(tài)多變。qRT-PCR結(jié)果顯示，在P19組山羊子宮角中的表達量極顯著高于C19組（＜0.01），/的表達量顯著增加（＜0.05），而和表達差異不顯著；、、在山羊子宮角及輸卵管中均有表達，在C19組和P19組山羊子宮角中及的表達量極顯著高于C19組和P19組中的表達（＜0.01）；在P19組山羊輸卵管中（＜0.01）、（＜0.01）、（＜0.01）、（＜0.05）顯著增高。相關(guān)性分析表明，輸卵管中與（＜0.01）、（＜0.01）、（＜0.05）顯著正相關(guān)；子宮角中，與（＜0.05）、（＜0.01）顯著負相關(guān)，胚胎附植關(guān)鍵基因與（＜0.01）、（＜0.05）、（＜0.05）顯著正相關(guān)，而細胞焦亡關(guān)鍵基因在輸卵管與子宮角中均與（＜0.05）、（＜0.01）、（＜0.05）呈顯著正相關(guān)。在妊娠早期山羊子宮角和輸卵管中表達與細胞程序性死亡部分基因表達具有一定的相關(guān)性，推測與細胞凋亡或焦亡的發(fā)生對輸卵管、受精卵、早期胚胎及子宮的發(fā)育具有一定的調(diào)控作用。胚胎附植關(guān)鍵基因與焦亡相關(guān)基因顯著相關(guān)暗示妊娠早期子宮角中細胞焦亡的發(fā)生可能參與胚胎附植。為研究通過細胞程序性死亡相關(guān)基因在妊娠早期輸卵管及子宮角中的表達規(guī)律提供了理論參考。

山羊；子宮角；輸卵管；細胞程序性死亡；基因表達

0 引言

【研究意義】輸卵管是受精卵及早期胚胎發(fā)育的起始點，山羊的胚胎附植發(fā)生在配種后的第16—19天[1-3]，子宮與胚胎發(fā)育的同步性是胚胎能否成功附植的前提，而輸卵管與子宮內(nèi)膜細胞死亡平衡在早期胚胎的發(fā)育過程中具有重要作用[4]。TET（ten-eleven translocation）家族蛋白在調(diào)控生殖細胞生長、胚胎及胎盤發(fā)育、子宮內(nèi)膜異位等過程中都具有重要的作用[5-7]。因此明確及細胞程序性死亡相關(guān)基因在妊娠早期山羊輸卵管及子宮角中的表達規(guī)律及相互關(guān)系，對于妊娠早期胚胎發(fā)育調(diào)控的研究具有一定的理論參考?！厩叭搜芯窟M展】譚強等通過分析不同妊娠階段與Wnt信號通路相關(guān)基因的表達，發(fā)現(xiàn)可能通過Wnt信號通路調(diào)控早期胎兒發(fā)育[8]。此外，大量研究發(fā)現(xiàn)TET家族蛋白與細胞凋亡密切相關(guān)[9-12]。細胞程序性死亡是細胞死亡的一種重要形式，主要由細胞凋亡、焦亡、自噬等形式組成。其中細胞凋亡主要由Caspase3、Caspase6、Caspase7、Caspase8、Caspase9等介導(dǎo)，通常伴隨細胞核固縮、核凝聚和核碎裂。細胞焦亡依賴于Caspase1、Caspase4、Caspase11作用于底物Gasdermin D（GSDMD）進而誘發(fā)焦亡，并伴隨大量炎性因子的釋放[13]。研究發(fā)現(xiàn)牛、羊、鼠等妊娠早期輸卵管及子宮凋亡基因顯著增高[14-16]，而且子宮內(nèi)膜細胞的凋亡在胚胎侵襲過程中具有重要作用[17]。細胞焦亡作為一種新的細胞程序性死亡方式，具有多種生理作用。研究表明由Caspase1引起的滋養(yǎng)層細胞、子宮內(nèi)膜細胞及羊水中的細胞焦亡可能誘發(fā)早產(chǎn)[18-20]。【本研究切入點】TET家族蛋白與妊娠早期輸卵管及子宮內(nèi)膜細胞程序性死亡相關(guān)基因是否具有相互關(guān)系尚不明確，而且對于細胞焦亡是否參與妊娠早期胚胎附植還不明晰，其在妊娠早期子宮角和輸卵管中的表達規(guī)律也不清楚。【擬解決的關(guān)鍵問題】選取繁殖力高的重慶地方山羊品種合川白山羊為研究對象，主要檢測了與細胞程序性死亡相關(guān)基因在山羊空配19 d和妊娠19 d輸卵管和子宮角中的表達規(guī)律及其相關(guān)性，以期為進一步研究調(diào)控妊娠早期胚胎發(fā)育及附植的分子機制奠定基礎(chǔ)。

1 材料與方法

試驗于 2019 年5 月至 2020 年1 月在西南大學(xué)、重慶市牧草與草食家畜重點實驗室及重慶市草食動物資源保護與利用工程技術(shù)研究中心完成。

1.1 試驗動物與樣品采集

選取1.5歲合川白山羊母羊6只，飼養(yǎng)于西南大學(xué)養(yǎng)殖場，全舍飼，每天給料兩次，自由采食和飲水。將其隨機分為兩組即空配19 d（C19）組和妊娠19d（P19）組。首先對合川白山羊進行同期發(fā)情處理，處理方式為放置陰道栓13d結(jié)合肌肉注射孕馬血清促性腺激素。發(fā)情后空配組用試情布擋住配種公羊生殖器，使其不能進行配種，妊娠組的發(fā)情母羊早、中、晚連續(xù)配種3次，以母羊最后一次接受交配的時間記為0 d，配種19 d后剖腹產(chǎn)摘除山羊整個子宮及卵巢。取一側(cè)子宮角，橫向取多個1 cm3大小樣品浸泡在4%多聚甲醛中，用于組織形態(tài)觀察，同時取另一側(cè)子宮角及輸卵管放于凍存管中，并迅速置于液氮中用于相關(guān)基因的表達檢測。

1.2 H.E染色試驗

用4%多聚甲醛固定子宮角組織，然后進行梯度脫水、透明及浸蠟，將浸好的組織，迅速放入含有部分融蠟的包埋底座中，進行包埋。將包埋好的組織固定于切片機上，連續(xù)切成厚度為8μm的薄片，貼片后進行蘇木精染色及伊紅染色，脫水后利用中性樹膠封片，室溫晾干后進行觀察拍照。

1.3 基因表達檢測

1.3.1 總RNA提取和cDNA第一條鏈合成 采用Trizol法提取總RNA，使用核酸測定儀檢測RNA濃度和OD260/280值，對RNA完整性進行瓊脂糖凝膠電泳檢測，選取濃度適中、完整性較好的RNA，將濃度調(diào)至500 ng·μL-1，使用ABM反轉(zhuǎn)錄試劑盒合成第一鏈cDNA，-20℃保存。多余的RNA樣品-80℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.3.2 qRT-PCR 利用Primer Premier 5.0設(shè)計、、、、、、、、、、、、、引物序列（表1），由華大公司合成。用qRT-PCR檢測妊娠早期輸卵管及子宮角中基因的相對表達量（表2）。

反應(yīng)條件為95℃變性10 min，95℃ 15 s，58℃退火1 min，39個循環(huán)，采用默認設(shè)置自動生成Ct值。每個樣品每組設(shè)置3個重復(fù)。

數(shù)據(jù)標(biāo)準化處理參考Pfaffl2-ΔΔt方法：

表1 qRT-PCR引物序列

表2 qRT-PCR反應(yīng)體系

ΔCt= Ct（參考樣品目的基因）- Ct（參考樣品β-actin基因）

ΔΔCt=Ct（目標(biāo)樣品中目的基因）- Ct（目標(biāo)樣品內(nèi)參基因）-ΔCt

根據(jù)上述公式計算基因的相對表達量，結(jié)果用平均值±標(biāo)準差表示。

1.4 數(shù)據(jù)分析

結(jié)果利用 SPSS 23.0軟件t-test進行基因差異表達分析，所得結(jié)果利用平均數(shù)±標(biāo)準差（Mean ± SD）的形式表示。<0.05 表示差異顯著，用“*”表示，<0.01表示差異極顯著，用“**”表示，用 Bivariate Correlations進行基因表達的相關(guān)性分析。

2 結(jié)果

2.1 子宮角的組織形態(tài)變化

剖腹產(chǎn)采集子宮角組織，H.E染色后觀察結(jié)果發(fā)現(xiàn)，與C19組相比（圖1-A, B），P19組山羊子宮角內(nèi)膜腺體增多、變大，形態(tài)多樣，子宮內(nèi)膜皺襞增多（圖1-C, D）。

2.2 胚胎附植標(biāo)志基因在子宮角中的表達

qRT-PCR研究結(jié)果表明在P19組山羊子宮角中的表達量極顯著高于C19組（＜0.01），但及基因無顯著變化（圖2）。

* P＜0.05；** P＜0.01。下同 The same as below

2.3 TETs在輸卵管及子宮角的表達

由圖3可知在山羊子宮角及輸卵管中均有表達，但在兩種組織中的表達量相對較低。和C19組相比，表達在P19組山羊的輸卵管中顯著升高，而且顯著高于兩組中（＜0.01）和（＜0.01）的表達（圖3-A）。在山羊C19組和P19組子宮角中及的表達量極顯著高于C19組和P19 組中的表達（＜0.01），但在C19組和P19組山羊子宮角中及間的表達量無顯著差異（圖3-B）。

圖3 TETs在輸卵管及子宮角的表達變化

2.4 細胞程序性死亡相關(guān)基因在輸卵管和子宮角中的表達

2.4.1 凋亡相關(guān)基因在輸卵管及子宮角中的表達 胚胎附植過程受到凋亡信號通路的影響，而細胞凋亡平衡對于胚胎侵襲至關(guān)重要。本研究發(fā)現(xiàn)，凋亡關(guān)鍵基因的表達量在P19組山羊輸卵管中顯著升高（＜0.05, 圖4-A）。而在山羊子宮角中，/的表達量在P19組顯著增加（＜0.05, 圖4-B），其它基因的表達量無顯著變化。

2.4.2 細胞焦亡相關(guān)基因在輸卵管及子宮角中的表達 細胞焦亡作為一種近幾年發(fā)現(xiàn)的細胞程序性死亡方式，它的發(fā)生是否對輸卵管、子宮及早期胚胎的發(fā)育具有調(diào)節(jié)作用還少有研究，因此筆者檢測了焦亡相關(guān)基因在輸卵管及子宮角中的表達，探究其是否在早期胚胎發(fā)育中具有作用。結(jié)果顯示，和C19組相比，P19組山羊輸卵管中細胞焦亡關(guān)鍵基因（＜0.01）和（＜0.05）都顯著增加，（=0.06）基因表達增加但不顯著（圖5-A）。在山羊子宮角組織中，細胞焦亡相關(guān)基因的表達無顯著差異（圖5-B）。

2.4.3 炎癥相關(guān)基因在輸卵管及子宮角中的表達 細胞焦亡的發(fā)生通常伴有大量促炎癥因子的表達。因此我們還檢測了兩組山羊子宮角和輸卵管中炎癥相關(guān)基因和TNF的表達。結(jié)果顯示，在山羊輸卵管中P19組的表達量極顯著增高（＜0.01）（圖6-A），但是在子宮角中這兩個炎癥相關(guān)基因的表達無顯著差異（圖6-B）。

2.5 TETs與細胞程序性死亡相關(guān)基因之間的相關(guān)性分析

2.5.1與細胞程序性死亡相關(guān)基因在輸卵管組織中的相關(guān)性分析 由表3可見，通過相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)，與呈負相關(guān)，而與其余細胞程序性死亡相關(guān)基因呈正相關(guān)，其中與（＜0.05）、（＜0.05）呈顯著正相關(guān)。與所有細胞程序性死亡相關(guān)基因呈正相關(guān)，其中與（＜0.01）、（＜0.05）顯著正相關(guān)。與所有基因均呈正相關(guān)，與極顯著正相關(guān)（＜0.01）。表明參與妊娠早期輸卵管中凋亡及炎癥相關(guān)基因的表達調(diào)控，而P19組中高表達的可能起主要作用。由于之間的表達補償作用，其表達量也具有一定的相關(guān)性，與的表達呈極顯著正相關(guān)（＜0.01）。而細胞程序性死亡相關(guān)基因之間的表達量也具有一定聯(lián)系。其中，與顯著正相關(guān)（＜0.05），與顯著正相關(guān)（＜0.05），與（＜0.05）、（＜0.05）、（＜0.01）、（＜0.01）顯著正相關(guān)，與（＜0.01）、（＜0.01）顯著正相關(guān)，與（＜0.05）顯著正相關(guān)，提示凋亡相關(guān)基因、焦亡相關(guān)基因和炎癥相關(guān)基因在妊娠早期輸卵管中的表達具有一定的相互關(guān)系。綜上結(jié)果表明，可能參與調(diào)控妊娠早期輸卵管中凋亡及炎癥相關(guān)基因的表達，而且提示妊娠早期輸卵管中細胞凋亡、焦亡及炎癥相關(guān)基因的表達通常伴有協(xié)同性。

同行數(shù)據(jù)肩標(biāo)*表示差異顯著（＜0.05），**表示差異極顯著(＜0.01）。下同

In the same row， values with * mean significant difference (＜0.05)，** mean highly

2.5.2與細胞程序性死亡相關(guān)基因在子宮角組織中的相關(guān)性分析 相關(guān)性分析表明（表4），、、均與呈現(xiàn)負相關(guān)，、與呈現(xiàn)負相關(guān)，其中與（＜0.05）、（＜0.01）顯著負相關(guān)。此外，與極顯著正相關(guān)（＜0.01），與極顯著正相關(guān)（＜0.01），而焦亡關(guān)鍵基因與（＜0.05）、（＜0.01）、（＜0.05）顯著正相關(guān)，表明在子宮角中細胞焦亡相關(guān)基因的表達具有一致性而且常伴隨細胞凋亡的發(fā)生。胚胎附植關(guān)鍵基因與（＜0.01）、（＜0.05）、（＜0.05）顯著正相關(guān)。妊娠早期子宮角中細胞焦亡的發(fā)生可能參與胚胎附植，但仍需進一步的研究證明。

表4 妊娠早期子宮角TETs、細胞程序性死亡基因及附植相關(guān)基因之間的相關(guān)性分析

3 討論

輸卵管及子宮作為重要的生殖組織，在胚胎早期發(fā)育、胚胎附植，胎盤發(fā)生等過程中具有十分重要的作用。研究發(fā)現(xiàn)牛、羊、鼠等在妊娠早期輸卵管及子宮凋亡基因顯著增高[14-16]，表明輸卵管及子宮內(nèi)膜細胞死亡可能在輸卵管及子宮內(nèi)膜生理形態(tài)結(jié)構(gòu)的形成、附植前的胚胎發(fā)育、附植發(fā)生及胎盤形成過程中具有重要作用。

本研究通過對C19組和P19組山羊子宮角組織進行H.E染色觀察，在P19組山羊子宮角H.E切片中觀察到子宮內(nèi)膜腺體增多、變大，形態(tài)多樣，與楊雪等的研究結(jié)果基一致[21]。

在胚胎附植及胎盤發(fā)育過程中具有重要作用，的表達異常通常會導(dǎo)致妊娠的失敗[22]，因此也經(jīng)常作為胚胎附植的標(biāo)記基因。本研究同樣發(fā)現(xiàn)在P19組山羊子宮角中的表達遠高于C19組，與前人研究結(jié)果一致[23]。此外，相關(guān)性分析表明胚胎附植關(guān)鍵基因與細胞焦亡相關(guān)基因、、顯著正相關(guān)，推測細胞焦亡可能對早期胚胎的附植具有一定的影響。

TETs作為主要的去甲基化酶，具有廣泛的生理調(diào)控作用。前期我們的研究也發(fā)現(xiàn)在山羊的胚胎及胎盤發(fā)育過程中具有重要作用，其中與Wnt 信號通路中的部分基因在胚胎發(fā)育過程中呈現(xiàn)顯著相關(guān)[8]，而且能夠通過影響Wnt信號通路及MMP家族中的相關(guān)基因進而影響胎盤滋養(yǎng)層細胞的遷移和侵襲能力[24-25]。O'Doherty等通過對牛胚胎附植前后子宮內(nèi)膜甲基化合成酶DNMT家族的研究，發(fā)現(xiàn)DNA甲基化可能與牛的胚胎附植相關(guān)[26]，而限飼同樣會改變豬胚胎附植期子宮內(nèi)膜基因的甲基化水平[27]，進而影響胚胎的發(fā)育。本研究通過對C19組及P19組山羊子宮角和輸卵管中去甲基化酶、、的表達進行分析，發(fā)現(xiàn)在P19組及C19組山羊子宮角和輸卵管中的表達較低，而在P19組山羊輸卵管中的表達量顯著高于和。哺乳動物有2次主要的甲基化波動，一次發(fā)生在配子發(fā)育過程中，另一次則在受精后[28]。受精卵及妊娠早期胚胎運行至輸卵管涉及到一波去甲基化過程，而本研究發(fā)現(xiàn)在P19組山羊輸卵管中顯著增高，基因的相關(guān)性分析表明，與、、具有顯著正相關(guān)，暗示可能通過影響DNA的甲基化，進而調(diào)控山羊輸卵管、受精卵及早期胚胎發(fā)育過程中的細胞凋亡。此外，胚胎發(fā)育早期處于一種低氧狀態(tài)，Bomfim等在體外利用常氧及低氧培養(yǎng)模式模擬體內(nèi)早期胚胎發(fā)育的內(nèi)環(huán)境，同樣發(fā)現(xiàn)低氧顯著抑制甲基化合成酶DNMT家族的表達水平[29]，進而使其處于低甲基化狀態(tài)。相比較而言，本研究發(fā)現(xiàn)子宮角中主要表達和，而對于胚胎附植期及在子宮角中的調(diào)控作用還有待于進一步研究。

細胞死亡對于維持輸卵管及子宮內(nèi)膜細胞死亡平衡至關(guān)重要。而細胞凋亡參與妊娠早期胚胎著床是目前研究較多也較為公認的重要因素之一[30]。本試驗同樣發(fā)現(xiàn)在C19組及P19組山羊子宮角和輸卵管中凋亡基因的表達量呈現(xiàn)增高趨勢。其中，在山羊P19組輸卵管中的表達量顯著高于C19組，山羊P19組子宮角中/的表達量顯著高于C19組，這也與Suzuki 等在牛子宮組織中的研究基本一致，進一步佐證了細胞凋亡參與妊娠早期子宮角的調(diào)控[4]。而細胞焦亡是一種近幾年發(fā)現(xiàn)的細胞程序性死亡方式，與細胞凋亡具有相同點，但細胞焦亡通常依賴于半胱天冬氨酸蛋白酶-1（caspase-1）的激活引起質(zhì)膜的破裂，而導(dǎo)致細胞內(nèi)容物的釋放，進而引起炎癥反應(yīng)[31]。本研究發(fā)現(xiàn)，山羊C19組及P19組子宮角和輸卵管中、、均有不同程度的增加，其表達趨勢也與Suzuki等在牛子宮組織中的研究結(jié)果相似[4]。通過對基因的相關(guān)性分析表明，細胞焦亡關(guān)鍵基因在輸卵管中與、、、顯著正相關(guān)，在子宮角中與、、顯著正相關(guān)，推測細胞凋亡與焦亡的發(fā)生對輸卵管、子宮及早期胚胎的發(fā)育可能具有協(xié)同性，其細胞焦亡可能對于早期胚胎的發(fā)育同樣具有調(diào)控作用。

TET家族蛋白作為主要的去甲基化酶分子，通過調(diào)控凋亡及炎癥相關(guān)基因的甲基化狀態(tài)，進而影響配子及胚胎的發(fā)育。Zhang等的研究表明TET可能通過影響卵母細胞及早期胚胎的凋亡，影響胚胎發(fā)育[32]。目前對于細胞焦亡是否參與早期胚胎的發(fā)育調(diào)控尚不可知。本研究檢測了及細胞程序性死亡相關(guān)基因（、、、等）在山羊子宮及輸卵管中的表達并對其進行了相關(guān)性分析，分析表明與細胞程序性死亡部分基因具有一定的相關(guān)性，可能參與調(diào)控妊娠早期輸卵管中凋亡及炎癥相關(guān)基因的表達，而基因間的相關(guān)性分析表明，其細胞凋亡與焦亡的發(fā)生對妊娠早期輸卵管及子宮角的發(fā)育可能具有協(xié)同性，本研究對早期胚胎發(fā)育的調(diào)控機制提供了一定的參考，而對于及細胞焦亡參與妊娠早期胚胎發(fā)育的具體分子機制仍需要進一步探索。

4 結(jié)論

本研究明確了與細胞程序性死亡相關(guān)基因在妊娠早期山羊輸卵管及子宮角的表達規(guī)律及相互關(guān)系，發(fā)現(xiàn)可能參與調(diào)控妊娠早期輸卵管中凋亡及炎癥相關(guān)基因的表達，為進一步研究在早期胚胎發(fā)育的調(diào)控機制提供了一定的參考，此外，細胞焦亡的發(fā)生在早期胚胎附植過程中具有重要作用。但對于是如何通過影響細胞凋亡或焦亡的發(fā)生，進而影響早期胚胎發(fā)育的調(diào)控機制將是下一步的研究的重點。

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Expression Patterns of TETs and Programmed Cell Death Related Genes in Oviduct and Uterus of Early Pregnancy Goats

ZHAO Le, YANG HaiLi, LI JiaLu, YANG YongHeng, ZHANG Rong, CHENG WenQiang, CHENG Lei, ZHAO YongJu

College of Animal Science and Technology, Southwest University/Chongqing Key Laboratory of Forage & Herbivore/Chongqing Engineering Research Center for Herbivores Resource Protection and Utilization, Chongqing 400715

【】The ten-eleven translocation (TET) protein family play crucial roles in embryo and placental development. The balance of cell death between oviduct and endometrial would affect the development of gametes and early embryos. In this study, the expression patterns and their potential regulatory role of, programmed cell death related genes and blastocyst implantation-related genes in oviduct and uterus of goats in early pregnancy were mainly explored, so as to provide a basis for studying development of gametes and early embryos.【】In this study, the uterus and oviduct of Hechuan white goats during non-pregnant 19 days (C19) and pregnant 19 days (P19) were collected, and then the morphology uterine horn was showed by HE staining. Then, the genes, including blastocyst implantation-related genes (,,),family genes (,,), programmed cell death-related genes,,,and) and inflammation-related genes (、) were detected by qRT-PCR. Finally, the correlation betweenand programmed cell death-related genes expression were analyzed.【】The results showed that the gland number increased, and its morphology varied in uterine horn in P19 group. Compared with C19 group,gene expression and/＜0.01), however, there was no significant difference betweenandfamily genes were expressed in both oviduct and uterus. The expression ofandwas significantly higher than＜0.01). TET2 (＜0.01),(＜0.01),(＜0.01), and(＜0.05) gene were significantly higher in P19 group of oviduct tissue. Correlation analysis showed that the relationship betweenand(＜0.01),(＜0.01) and(＜0.01) in oviduct tissue were positive correlation. Thewere negative correlated with(＜0.05) and(＜0.01). Blastocyst implantation-related geneswas positively correlated with(＜0.01),(＜0.05) and(＜0.05) in uterine horn. Thewas positively correlated with(＜0.05),(＜0.01) and(＜0.05) in oviduct and uterus horn.【】It was indicated that there was correlation betweenand programmed cell death related genes. So, it was speculated thatfamily genes and programmed cell death related genes played a key role in regulating the development of oviduct, zygote, early embryo and uterus. The key genes for embryo implantation ofwere significantly correlated with pyroptosis related genes, suggesting that proptosis had a certain influence on the attachment of early embryos. These finding provided heretical references for studying the effect of TETs family genes and programmed cell death related genes on oviduct and uterine horn of early pregnancy.

goat; uterine horn; oviduct; programmed cell death; gene expression

10.3864/j.issn.0578-1752.2021.04.015

2020-03-12；

2020-07-10

國家自然科學(xué)基金（31772564）、國家重點研發(fā)計劃（2018YFD0502000）、重慶市自然科學(xué)基金重點項目（cstc 2020 jcyj-zdxm X0015）、重慶市研究生科研創(chuàng)新項目（CYS19108）、重慶市現(xiàn)代山地特色高效農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系（草食牲畜，2020【11】）

趙樂，E-mail：zhaole0228@163.com。通信作者趙永聚，E-mail：zyongju@163.com

（責(zé)任編輯 林鑒非）