黃威，王芝濤

肺癌是最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，是導(dǎo)致男性癌癥患者死亡的最主要原因[1]。非小細(xì)胞肺癌（NSCLC）是最常見(jiàn)的肺癌亞型，約占所有肺癌的85%。多數(shù)NSCLC 患者被確診時(shí)常已經(jīng)處于腫瘤晚期，并伴有肺部以外器官轉(zhuǎn)移[2]。對(duì)于此類患者，往往缺乏有效的治療手段，治療效果極差。目前，國(guó)內(nèi)外有關(guān)NSCLC的病因及發(fā)病機(jī)制尚缺乏統(tǒng)一觀點(diǎn)。因此，深入研究NSCLC患者的發(fā)病機(jī)制及尋找一種有效、可靠的治療靶點(diǎn)具有重要的醫(yī)學(xué)價(jià)值。髓系來(lái)源抑制性細(xì)胞（MDSC）是一群新近發(fā)現(xiàn)并具有免疫抑制功能的髓系細(xì)胞亞群[3]。已有多項(xiàng)研究表明，MDSC 通過(guò)抑制宿主的先天和獲得性免疫功能來(lái)減弱宿主的抗腫瘤免疫反應(yīng)[4]。前期研究表明，MDSC 在膀胱癌[5]、乳腺癌[6]、胰腺癌[7]等患者中數(shù)量異常增多，并且與疾病的進(jìn)展及預(yù)后密切相關(guān)。然而，MDSC在NSCLC患者中的作用研究，目前鮮有報(bào)道。本研究旨在探討MDSC在NSCLC 中的表達(dá)情況及其與臨床病理特征和預(yù)后的關(guān)系，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集2015 年9 月至2019 年9 月于寧波大學(xué)附屬人民醫(yī)院胸外科初次確診的62 例NSCLC 患者（實(shí)驗(yàn)組）為研究對(duì)象，其中男38 例，女24 例；平均年齡（52.8±10.4）歲；且均無(wú)傳染性疾病及自身免疫性疾病等。TNM分期按照美國(guó)癌癥聯(lián)合會(huì)（AJCC）第七版癌癥分期標(biāo)準(zhǔn)[8]，其中Ⅰ期9 例，Ⅱ期16例，Ⅲ期18 例，Ⅳ期19 例；腺癌29 例，鱗癌20 例，其他13 例。總生存期（OS）定義為患者從確診開(kāi)始至發(fā)生任何原因死亡或隨訪結(jié)束的時(shí)間。其中，20 例初診Ⅰ～Ⅱ和Ⅲa 期NSCLC 患者于本院行外科手術(shù)治療，術(shù)后輔助化療，并定期隨診，資料保存完整。選取本院體檢中心健康成年人30 例為對(duì)照組（HC組），男20 例，女10 例；平均年齡（50.5±9.6）歲。兩組一般資料差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ＞0.05）。所有受試者均取得書面知情同意，該研究方案經(jīng)本院倫理委員會(huì)審查后予以批準(zhǔn)。

1.2 方法 記錄NSCLC 患者的性別、年齡、TNM分期、病理類型、乳酸脫氫酶（LDH）水平、有無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及OS 等臨床資料。所有研究對(duì)象均采集肝素抗凝血2 ml，取CD14-FTTC、HLA-DRPE、CD45-PC5 單克隆抗體各10 l（Beckman Coulter 公司，USA），與上述抗凝血100 l 混勻。25 ℃孵育15 min 后，采用流式細(xì)胞儀（FC500 MPL，Beckman Coulter 公司，USA）收集檢測(cè)數(shù)據(jù)，采用Flowjo 軟件分析數(shù)據(jù)。本研究以CD14+HLA-DRlow/－作為MDSC的免疫表型。

1.3 統(tǒng)計(jì)方法 采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，采用t 檢驗(yàn)或方差分析；采用Pearson 法分析相關(guān)性；采用Kaplain-Meier 法繪制生存曲線，Log-Rank檢驗(yàn)進(jìn)行分析；采用Cox回歸模型分析影響NSCLC 患者生存時(shí)間的因素。P ＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組外周血中MDSC 表達(dá)水平比較 實(shí)驗(yàn)組外周血中MDSC 占CD14+細(xì)胞比例為（29.33±9.21）%，高于對(duì)照組的（11.53±3.73）%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=10.663，P ＜0.05）。

2.2 MDSC與NSCLC臨床及病理特征的關(guān)系 TNM 分期增加、LDH 升高及有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的NSCLC 患者外周血中MDSC 表達(dá)水平明顯升高（均P ＜0.05），見(jiàn)表1。

2.3 初診NSCLC患者手術(shù)前后外周血中MDSC 表達(dá)水平比較 20 例初診Ⅰ～Ⅱ和Ⅲa 期NSCLC 患者于本院行外科手術(shù)治療，術(shù)后2 ～3 周復(fù)查外周血中MDSC 水平。NSCLC 患者手術(shù)前MDSC 為（28.18±7.88）%，手術(shù)后為（15.18±5.98）%，手術(shù)前后差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=10.358，P ＜0.05）。

2.4 初診NSCLC患者總生存期與MDSC的相關(guān)性 所有患者均隨訪至死亡或失去隨訪，隨訪時(shí)間為8 ～51個(gè)月，中位生存時(shí)間為32個(gè)月。NSCLC患者外周血MDSC水平與OS呈負(fù)相關(guān)（r=－0.43，P＜0.01）。選取NSCLC 患者外周血MDSC 的平均值29.33%為臨界值（cut-off 值），將患者分為高表達(dá)MDSC 組和低表達(dá)MDSC 組。高表達(dá)和低表達(dá)組NSCLC 患者中位生存時(shí)間分別為21 個(gè)月和39.5 個(gè)月。高表達(dá)組較低表達(dá)組OS 明顯縮短（2=21.3，P ＜0.01）。見(jiàn)封二彩圖7。

2.5 初診NSCLC 患者預(yù)后因素的Cox回歸分析 單因素分析顯示TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和MDSC 是影響NSCLC 患者預(yù)后的不良因素（均P ＜0.05）；多因素分析顯示TNM 分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和MDSC 水平均是影響NSCLC 患者預(yù)后的獨(dú)立危險(xiǎn)因素（均P ＜0.05）。見(jiàn)表2。

3 討論

本研究發(fā)現(xiàn)：（1）與健康對(duì)照組相比，MDSC在初診NSCLC中呈高表達(dá)狀態(tài)，這與Huang 等[9]的研究結(jié)果一致。越來(lái)越多的研究發(fā)現(xiàn)，在腫瘤微環(huán)境中，腫瘤細(xì)胞通過(guò)分泌多種免疫抑制性細(xì)胞因子、生長(zhǎng)因子及炎癥因子誘導(dǎo)生成并擴(kuò)增MDSC[10]。此外，MDSC 又可以通過(guò)多種途徑來(lái)抑制宿主的免疫功能[11]，腫瘤細(xì)胞和MDSC 成為互相促進(jìn)的細(xì)胞群體。在NSCLC 患者中，高表達(dá)狀態(tài)的MDSC 可能參與抑制了NSCLC患者的抗腫瘤免疫反應(yīng)，尤其是抑制了T、B 和NK 等細(xì)胞的免疫功能，從而促進(jìn)了腫瘤細(xì)胞的免疫逃逸。（2）MDSC 表達(dá)水平與NSCLC 患者腫瘤TNM 分期、LDH 水平及有無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，但是與NSCLC 患者性別、年齡及病理分型未見(jiàn)明顯相關(guān)性。前期研究表明，MDSC的表達(dá)與腫瘤的進(jìn)展及病情嚴(yán)重程度密切相關(guān)[12]。本研究亦表明MDSC與NSCLC 的疾病進(jìn)展與遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，MDSC 可以作為評(píng)估MDSC 疾病進(jìn)展的新指標(biāo)。（3）經(jīng)外科手術(shù)后，NSCLC 患者外周血MDSC 水平較手術(shù)前明顯下降，隨著NSCLC 患者腫瘤負(fù)荷的減輕，MDSC 的表達(dá)水平亦明顯下降。因此，MDSC 可以作為評(píng)估NSCLC 患者療效的新指標(biāo)。

表1 MDSC 與NSCLC 臨床及病理特征的關(guān)系

表2 初診NSCLC 患者預(yù)后因素的Cox 回歸分析

有研究表明MDSC 在肝細(xì)胞癌、彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤中可以作為評(píng)估患者預(yù)后的指標(biāo)[13-14]。為了進(jìn)一步探討MDSC與NSCLC 患者預(yù)后的關(guān)系，本研究進(jìn)一步分析了MDSC 與NSCLC 患者OS 的相關(guān)性及作為預(yù)后指標(biāo)的可行性。在本研究中，通過(guò)相關(guān)性分析和生存分析發(fā)現(xiàn)，NSCLC患者外周血MDSC 水平與患者的OS 呈負(fù)相關(guān)；MDSC 高表達(dá)的NSCLC 患者的OS明顯縮短。其次，通過(guò)單因素和多因素Cox回歸分析發(fā)現(xiàn)，TNM 分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及MDSC 水平是NSCLC 患者的獨(dú)立預(yù)后標(biāo)志物。因此，MDSC 對(duì)于NSCLC 患者的不良預(yù)后具有獨(dú)立的預(yù)測(cè)價(jià)值，MDSC可以作為評(píng)估NSCLC 患者預(yù)后的新指標(biāo)。

綜上所述，NSCLC患者的發(fā)病可能與宿主體內(nèi)存在的抑制性腫瘤微環(huán)境有關(guān)。MDSC在NSCLC患者中處于高表達(dá)狀態(tài)，并且與疾病進(jìn)展和療效密切相關(guān)。此外，MDSC還可以作為評(píng)估NSCLC患者預(yù)后的新指標(biāo)。