陳祥，蔣最明，顧敏，肖鵬程，胡衛(wèi)，李娟，易婷，唐滿(mǎn)玲

（株洲市中心醫(yī)院，湖南 株洲 412007）

特應(yīng)性皮炎（Atopic dermatitis，AD）是一種慢性復(fù)發(fā)性、炎癥性皮膚病，以反復(fù)發(fā)生的劇烈瘙癢及皮膚干燥為基本特征[1-2]。臨床上可分為嬰兒期（出生～2歲）、兒童期（2～12歲）、青少年和成人期（＞12歲）。本病初發(fā)于嬰兒期[3]，多見(jiàn)于兒童和青少年期，在世界范圍內(nèi)，15%～30%的兒童及2%～10%的成人受到AD的影響，是兒童最常見(jiàn)的慢性皮膚疾病[4]。在我國(guó)，最新的門(mén)診研究數(shù)據(jù)顯示，1～7歲兒童AD的總體發(fā)病率為12.94%[5]。近年來(lái)，AD在世界范圍內(nèi)的發(fā)病率逐年增加，已成為日益嚴(yán)重的公眾健康問(wèn)題。

目前，AD的發(fā)病機(jī)制尚未明確，但已認(rèn)識(shí)到皮膚屏障功能障礙、異常免疫應(yīng)答是發(fā)病機(jī)制中的重要環(huán)節(jié)。比如有研究表明，脂類(lèi)相關(guān)物質(zhì)在維持皮膚正常屏障功能中發(fā)揮了重要的作用，其代謝的異常將破壞正常的皮膚屏障功能，并可能通過(guò)誘導(dǎo)皮膚固有免疫失調(diào)誘發(fā)過(guò)敏性疾病的發(fā)生[6-7]。在Yamane等[8]的研究中，通過(guò)對(duì)AD患者的皮膚組織進(jìn)行活檢，發(fā)現(xiàn)在炎性病變中apo A1的表達(dá)水平顯著升高，并伴隨一些脂類(lèi)相關(guān)物資的代謝異常，如apo A2、FABP-5、α-enolase等。另外，apo A1在其他過(guò)敏性疾病中也存在同樣的高濃度的情況[9]。這些研究表明脂類(lèi)相關(guān)蛋白比如apo A1可能在維持皮膚的正常免疫應(yīng)答中發(fā)揮重要作用，可能參與過(guò)敏性疾病的發(fā)生。目前，還沒(méi)有關(guān)于血液中apo含量與AD發(fā)生之間相關(guān)性的研究報(bào)道。因此，本研究以2～7歲兒童AD為研究對(duì)象，探討血液中脂類(lèi)相關(guān)蛋白如apo A1、apo B、apo E與AD發(fā)生之間是否存在關(guān)聯(lián)，旨在初步闡明apo A1、apo B、apo E與AD發(fā)生之間的關(guān)系，并且分析這些apo與患者血清IgE水平之間的相關(guān)性。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象 本研究采用病例對(duì)照研究的方法，于2016年1月—2017年6月在中南大學(xué)湘雅醫(yī)學(xué)院附屬株洲醫(yī)院皮膚科門(mén)診診斷為AD的患者中選擇進(jìn)行過(guò)敏原檢測(cè)的血液標(biāo)本，參照適合我國(guó)臨床和流行病學(xué)調(diào)查的Williams診斷準(zhǔn)則，以有經(jīng)驗(yàn)的皮膚科醫(yī)生的臨床診斷為金標(biāo)準(zhǔn)，選取300例2～7歲AD患者為病例組。Williams診斷準(zhǔn)則如下：必須有皮膚瘙癢史加上以下標(biāo)準(zhǔn)中的3條或以上：①屈側(cè)皮膚受累史，包括肘窩、腘窩、踝前或頸周（10歲以下兒童包括頰部）；②個(gè)人哮喘或過(guò)敏性鼻炎史（或4歲以下兒童的一級(jí)親屬特應(yīng)性疾病史）；③全身皮膚干燥史；④可見(jiàn)的屈側(cè)濕疹；⑤2歲前發(fā)病。另選擇同期來(lái)源于本院健康體檢中心和門(mén)診的健康兒童100例（通過(guò)醫(yī)師詢(xún)問(wèn)排除過(guò)敏性疾病史，并排除近2個(gè)月服用皮質(zhì)類(lèi)固醇激素、抗組胺藥患者或者近2周內(nèi)無(wú)外用皮質(zhì)類(lèi)固醇激素的健康體檢者）作為對(duì)照組，其中男38例，女62例，年齡（4.0±1.7）歲。所有采集的血清標(biāo)本，置于-20℃凍存。本研究通過(guò)中南大學(xué)湘雅醫(yī)學(xué)院附屬株洲醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 血清 apo A1、apo B、apo E 檢測(cè) apo A1、apo B、apoE檢測(cè)采用免疫比濁法，檢測(cè)儀器為羅氏cobas C501全自動(dòng)生化分析儀。apo A1和apo B試劑與質(zhì)控品均購(gòu)自羅氏診斷產(chǎn)品有限公司，apo E試劑和質(zhì)控品購(gòu)自寧波普瑞柏生物技術(shù)股份有限公司。檢測(cè)儀器的檢測(cè)器件性能良好，在校準(zhǔn)周期內(nèi)。

1.3 過(guò)敏原與總IgE水平檢測(cè) 采用德國(guó)AllergyScreen過(guò)敏原特異性IgE抗體檢測(cè)試劑盒（免疫印跡法），操作步驟嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。特異性IgE（sIgE）結(jié)果為定量資料；總IgE結(jié)果為分類(lèi)資料，以＜100 kU/L、100～200 kU/L、＞200 kU/L 表示。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用SPSS 22.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，2組間比較采用兩獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)。分類(lèi)型數(shù)據(jù)采用Logistic向前逐步法回歸模型進(jìn)行分析。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 血清apo A1、apo B、apo E在2組中的含量 利用羅氏cobas C501全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)AD組和對(duì)照組中血清apo A1、apo B、apo E的含量，結(jié)果顯示，AD組apo A1濃度顯著高于對(duì)照組，對(duì)照組apo E濃度顯著高于AD組，而apo B在2組中的含量差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 apo A1、apo B、apo E在AD組以及對(duì)照組中的含量

2.2 AD患者血清總IgE水平和sIgE陽(yáng)性率的分布 300例AD患者中有266例（88.7%）sIgE陽(yáng)性，其中男 108例（36.0%）、女 192例（64.0%）；有 175例（58.3%）總IgE＞200 kU/L，其中男 71例（40.6%）、女104例（59.4%）。sIgE陽(yáng)性者的男女比例與總IgE＞200 kU/L者比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

2.3 血清apo A1、apo B、apo E與AD患病風(fēng)險(xiǎn)的關(guān)系 Logistic回歸分析顯示，未校正混雜因素時(shí)，apo A1每升高1 g/L，AD的患病風(fēng)險(xiǎn)增加4.716倍（95%CI：1.636～13.596，P=0.004）；apo E 每升高 1 g/L，AD的患病風(fēng)險(xiǎn)是原來(lái)的 0.967倍（95%CI：0.946～0.989，P=0.003），進(jìn)一步校正年齡、性別后，apo A1每升高1 g/L，AD的患病風(fēng)險(xiǎn)增加7.415倍（95%CI：2.549～22.763，P=0.002）；apo E 每升高 1 g/L，AD 的患病風(fēng)險(xiǎn)是原來(lái)的 0.958倍（95%CI：0.936～0.980，P＜0.001）；apo B校正前和校正年齡、性別后都不與AD患病風(fēng)險(xiǎn)顯著相關(guān)；年齡每增加1歲，AD的患病風(fēng)險(xiǎn)是原來(lái)的 0.968 倍（95%CI：0.921～0.983，P＜0.001）；性別與AD的患病風(fēng)險(xiǎn)沒(méi)有顯著相關(guān)性。

2.4 血清 apo A1、apo B、apo E與總IgE及特異性IgE濃度的關(guān)系 無(wú)論校正年齡、性別混雜因素與否，apo B、apo E均不與總IgE的濃度有相關(guān)性，而在未校正混雜因素時(shí)，apo A1每升高1 g/L，總IgE＞200 IU/mL的風(fēng)險(xiǎn)增加 6.069倍（95%CI：1.759～22.156，P=0.004）；校正年齡、性別后，apo A1 每升高1 g/L，總IgE＞200 IU/mL的風(fēng)險(xiǎn)仍然增加7.018倍（95%CI：1.746～20.762，P=0.005）。無(wú)論校正年齡、性別混雜因素與否，3種apo均與特異性IgE濃度增加無(wú)顯著相關(guān)性。

3 討論

AD是一種以皮膚干燥、瘙癢和炎性反應(yīng)為主要特征的慢性、復(fù)發(fā)性疾病，發(fā)病與年齡高度有關(guān)，雖可發(fā)生于任何年齡，但多見(jiàn)于嬰幼兒時(shí)期。因此本研究選取2～7歲兒童AD為研究對(duì)象，符合該疾病的發(fā)病特征?，F(xiàn)有研究表明，AD的發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，與遺傳、環(huán)境、免疫等多方面因素有關(guān)[10]，其機(jī)制至今還沒(méi)完全闡明清楚。近年來(lái)，隨著研究的不斷深入，已經(jīng)證實(shí)皮膚屏障功能障礙、異常免疫應(yīng)答是AD發(fā)病過(guò)程中的重要環(huán)節(jié)，表皮中的一些載脂蛋白參與維持正常的皮膚屏障功能，其代謝的異常將破壞正常的皮膚屏障功能，并可能通過(guò)誘導(dǎo)皮膚固有免疫失調(diào)誘發(fā)過(guò)敏性疾病的發(fā)生，比如apo A1在AD等過(guò)敏性疾病的病變皮膚中表達(dá)上調(diào)[8-9]，另外也有文獻(xiàn)表明，apo C1也參與AD的發(fā)生[11]，因此諸多證據(jù)提示筆者，脂類(lèi)相關(guān)蛋白在維持人體正常的固有免疫中扮演了重要的角色，脂類(lèi)蛋白比如apoA1、B和E代謝異?？赡芘c過(guò)敏性疾病的發(fā)生有關(guān)。

在本研究中，筆者選取2～7歲兒童為研究對(duì)象，初步探討了apo A1、B和E與一種常見(jiàn)的過(guò)敏性疾病即AD之間的相關(guān)性，并且對(duì)3種apo與患者血清總IgE及特異性IgE濃度的關(guān)系進(jìn)行了分析。研究結(jié)果顯示，AD組比對(duì)照組血清中有更高濃度的apo A1，且無(wú)論校正年齡、性別與否，apo A1與AD的患病風(fēng)險(xiǎn)呈顯著的正相關(guān)關(guān)系，這與有學(xué)者報(bào)道apo A1在過(guò)敏性疾病病變組織中高表達(dá)的結(jié)論一致，這為apo A1與過(guò)敏性疾病的關(guān)系提供了新的證據(jù)，表明apo A1可能是兒童AD發(fā)生的危險(xiǎn)因子[11]。另外，研究還發(fā)現(xiàn)對(duì)照組血清中有更高含量的apo E，且無(wú)論校正年齡、性別與否，apo E與AD的患病風(fēng)險(xiǎn)呈顯著的負(fù)相關(guān)關(guān)系，這與Kim等[12]的研究結(jié)論一致，這表明apo E可能是兒童AD發(fā)生的保護(hù)因子。而本研究并沒(méi)有發(fā)現(xiàn)apo B與AD的發(fā)生有顯著相關(guān)性。此外，研究還發(fā)現(xiàn)，隨著年齡的增加，AD的患病風(fēng)險(xiǎn)呈逐年遞減的趨勢(shì)，性別與AD并無(wú)顯著相關(guān)性，這些結(jié)論與國(guó)內(nèi)其他的研究結(jié)果一致[13-14]。另一方面，多項(xiàng)研究表明AD的發(fā)生與總IgE及特異性IgE存在相關(guān)性，二者被認(rèn)為是輔助診斷AD常用的實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)，并且有些研究認(rèn)為總IgE濃度隨著疾病的嚴(yán)重程度而改變[15]，因此，本研究也探討了 apo A1、B、E與總IgE、sIgE之間的關(guān)系。筆者的研究結(jié)果顯示，無(wú)論校正年齡、性別與否，apo A1能增加總IgE＞200 IU/mL的風(fēng)險(xiǎn)，apo B、apoE無(wú)論校正年齡、性別與否均與總IgE＞200IU/mL的風(fēng)險(xiǎn)增加無(wú)顯著相關(guān)性，這表明，apo A1可能通過(guò)IgE介導(dǎo)途徑參與AD的發(fā)生，apo E可能通過(guò)非IgE介導(dǎo)途徑參與AD的發(fā)生。另外，無(wú)論校正年齡、性別混雜因素與否，3種apo均與sIgE濃度增加無(wú)顯著相關(guān)性，這可能是由于這可能是由于本研究檢測(cè)的過(guò)敏原并不覆蓋所有過(guò)敏原種類(lèi)，有些特異性IgE濃度很低的標(biāo)本會(huì)出現(xiàn)總IgE濃度高水平的情況，導(dǎo)致特異性IgE濃度與總IgE濃度并不平行變化。

綜上所述，本研究發(fā)現(xiàn)，apo A1可能是通過(guò)IgE介導(dǎo)途徑參與AD發(fā)生的危險(xiǎn)因子，apo E可能是獨(dú)立于IgE介導(dǎo)途徑AD的保護(hù)因子，apo B與AD的發(fā)生無(wú)顯著相關(guān)性?？傊?，這些研究結(jié)果初步闡明了apo A1、B、E與AD的關(guān)系，豐富了脂質(zhì)相關(guān)蛋白與AD發(fā)生之間的關(guān)系，為AD與宿主脂質(zhì)相關(guān)免疫機(jī)制的深入研究提供了新的證據(jù)。