曾堅(jiān)鋒 李 鋼 劉仲海 王 輝

垂體腺瘤是一種顱內(nèi)常見(jiàn)的良性腫瘤，部分垂體腺瘤因侵襲性生長(zhǎng)等原因，全切除困難，易導(dǎo)致術(shù)后復(fù)發(fā)[1]。近年來(lái)，研究發(fā)現(xiàn)lncRNA 與腫瘤發(fā)生有關(guān)，多種腫瘤存在lncRNA 異常表達(dá)，但作用機(jī)制尚不明確[2～4]。本文探討lncRNA-POU3F3 表達(dá)水平與垂體腺瘤術(shù)后復(fù)發(fā)的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 標(biāo)本來(lái)源 收集2016 年10 月至2019 年10 月手術(shù)切除的垂體腺瘤組織110 例，其中男68 例，女42例；平均年齡（50.84±12.16）歲；功能性垂體腺瘤38例；腫瘤最大徑8～28 mm，平均（18.5±5.41）mm；侵襲性垂體腺瘤49 例。選擇同期顱腦損傷內(nèi)減壓術(shù)切除的正常腦組織40例作為對(duì)照。

1.2 納入與排除標(biāo)準(zhǔn)

1.2.1 納入標(biāo)準(zhǔn)①接受手術(shù)治療，術(shù)后病理檢查證實(shí)為垂體腺瘤；②首次入院就診；③臨床資料、影像學(xué)資料完善；④能正常交流，溝通良好；⑤知情同意。1.2.2 排除標(biāo)準(zhǔn) 術(shù)前有放、化；伴其他腫瘤；肝、腎、心等臟器損害；患血液系統(tǒng)疾病；既往有精神病史。

1.3 檢測(cè)方法 采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR 測(cè)定lncRNA-POU3F3 表達(dá)水平。Trizol 試劑盒提取總RNA，逆轉(zhuǎn)錄成cDNA：預(yù)變性，95 ℃、30 s；擴(kuò)增，95 ℃、10 s，60 ℃、30 s，40 個(gè)循環(huán)。熔解曲線條件：95 ℃、15 s，60 ℃、60 s、95 ℃15 s。以U6 為內(nèi)參，引物序列：POU3F3 上游5'-AATCACTGCAATTGAAG GAAAAA- 3'，下 游 5'- CCTTGTTTTCCAACCCTTAGACT-3'。U6 上 游5'-CTGGGCTACACTGAGCACC-3'，下游5'-AAGTGGTCGTTGAGGGCAATG-3'。2-△△Ct法量化分析lncRNA-POU3F3表達(dá)水平。

1.4 隨訪 所有垂體腺瘤病人術(shù)后隨訪12個(gè)月。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法SPSS 20.0 軟件分析；計(jì)數(shù)資料用χ2檢驗(yàn)；計(jì)量資料以±s表示，行t檢驗(yàn)；采用多因素logistic 回歸分析檢驗(yàn)術(shù)后復(fù)發(fā)的影響因素；P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 垂體腺瘤術(shù)后復(fù)發(fā)率110 例中，術(shù)后1 年復(fù)發(fā)16例，復(fù)發(fā)率為14.55%；94例無(wú)復(fù)發(fā)。

2.2 垂體腺瘤組織lncRNA-POU3F3 表達(dá)變化 垂體腺瘤組織lncRNA-POU3F3 表達(dá)水平（2.80±0.87）明顯高于對(duì)照組（1.08±0.23；P＜0.05）。

2.3 垂體腺瘤lncRNA-POU3F3 水平與術(shù)后復(fù)發(fā)的關(guān)系 以lncRNA-POU3F3 平均值2.80 為界，分為高表達(dá)與低表達(dá)。110 例中，lncRNA-POU3F3 高表達(dá)69 例，低表達(dá)41 例；高表達(dá)組復(fù)發(fā)率（20.29%，14/69）明顯高于低表達(dá)組（4.88%，2/41；P＜0.05）。

2.4 垂體腺瘤術(shù)后復(fù)發(fā)的影響因素 單因素分析結(jié)果顯示，腫瘤侵襲性、腫瘤切除程度、頸內(nèi)動(dòng)脈包繞程度、術(shù)后顱內(nèi)出血、lncRNA-POU3F3 水平與術(shù)后復(fù)發(fā)有關(guān)（P＜0.05，表1）。多因素logistic回歸性分析結(jié)果顯示，腫瘤侵襲性生長(zhǎng)、腫瘤未全切除、腫瘤完全包繞頸內(nèi)動(dòng)脈、lncRNA-POU3F3高表達(dá)是術(shù)后復(fù)發(fā)的獨(dú)立危險(xiǎn)因素（P＜0.05，表2）。

3 討論

近年來(lái)，研究報(bào)道POU3F3 基因參與腫瘤細(xì)胞增殖過(guò)程[5]。本文發(fā)現(xiàn)，垂體腺瘤組織lncRNAPOU3F3 表達(dá)水平較對(duì)照組明顯增高。lncRNAPOU3F3 是一種致癌lncRNA，可能通過(guò)上調(diào)轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β，促進(jìn)Smad2/3磷酸化，導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞增殖，促使腫瘤進(jìn)展[6]。研究表明，抑制POU3F3表達(dá)能有效抑制結(jié)腸癌病人的癌細(xì)胞增殖[7]。此外，POU3F3還與多梳蛋白EZH2具有親和作用，這類多梳蛋白在多種惡性腫瘤中呈過(guò)表達(dá)，提示POU3F3 參與腫瘤的發(fā)生過(guò)程[8]。

表1 垂體腺瘤術(shù)后復(fù)發(fā)危險(xiǎn)因素的單因素分析

表2 垂體腺瘤術(shù)后復(fù)發(fā)危險(xiǎn)因素的多因素logistic回歸分析

垂體腺瘤術(shù)后復(fù)發(fā)與多種因素有關(guān)。本文結(jié)果顯示，垂體腺瘤術(shù)后復(fù)發(fā)與腫瘤侵襲性、切除程度、頸內(nèi)動(dòng)脈包繞程度有關(guān)。原因可能是侵襲性垂體腺瘤呈侵襲性生長(zhǎng)，可累及海綿竇，難以完全切除，術(shù)后復(fù)發(fā)率高[9]。包繞頸內(nèi)動(dòng)脈的垂體腺瘤全切除難度也較大，易造成腫瘤殘留，導(dǎo)致復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)增高[10]。

本文結(jié)果還顯示，lncRNA-POU3F3高表達(dá)增加垂體腺瘤術(shù)后復(fù)發(fā)率。研究發(fā)現(xiàn)POU3F3促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖，抑制細(xì)胞凋亡，促進(jìn)腫瘤進(jìn)展。此外，lncRNA-POU3F3高表達(dá)加速腫瘤生長(zhǎng)，導(dǎo)致海綿竇組織受累，嚴(yán)重情況下，甚至可累及下丘腦底部，破壞垂體柄，即lncRNA-POU3F3高表達(dá)病人病灶累及范圍更廣，更易造成腫瘤殘留，導(dǎo)致腫瘤復(fù)發(fā)。

綜上所述，垂體腺瘤組織lncRNA-POU3F3呈高表達(dá)，表達(dá)水平越高，術(shù)后復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)越高。