趙桂金，張 明，楊 興，董嘉良

(天津市寧河區(qū)醫(yī)院，天津 301500)

肝細(xì)胞癌是一種臨床常見的惡性腫瘤，且疾病發(fā)病率逐年升高，而肝細(xì)胞癌的發(fā)生發(fā)展為多因素作用結(jié)果，因此明確其發(fā)病機(jī)制可為其臨床診治提供依據(jù)。由于免疫微環(huán)境對(duì)肝細(xì)胞癌的發(fā)生發(fā)展有一定的影響，因此免疫學(xué)研究在肝細(xì)胞癌的臨床診治中受到極大的關(guān)注。Treg細(xì)胞和Breg細(xì)胞是機(jī)體中的重要免疫細(xì)胞，也是腫瘤微環(huán)境的關(guān)鍵組成部分，不僅能夠維持機(jī)體免疫功能穩(wěn)定，還在抗腫瘤的免疫過程中發(fā)揮著重要的作用。Treg細(xì)胞和Breg細(xì)胞通過多機(jī)制參與者肝細(xì)胞癌的發(fā)生、發(fā)展，因此本文對(duì)Treg細(xì)胞和Breg細(xì)胞在肝細(xì)胞癌中的作用研究進(jìn)展進(jìn)行綜述。

原發(fā)性肝癌是一種臨床常見的惡性腫瘤，其中肝細(xì)胞癌的占比達(dá)90%，且該疾病具有較高的復(fù)發(fā)率，患者預(yù)后差，進(jìn)而對(duì)患者的生命健康造成了嚴(yán)重的威脅。由于肝細(xì)胞癌腫瘤的惡性程度較高，故早期診斷難度較大，因此，應(yīng)尋找有效的早期診斷方法。由于腫瘤的發(fā)生與發(fā)展受到多因素的影響，而免疫微環(huán)境對(duì)腫瘤的發(fā)生發(fā)展的作用被臨床廣泛重視[1]。近年來，肝細(xì)胞癌的免疫治療成為研究熱點(diǎn)，腫瘤微環(huán)境概念認(rèn)為腫瘤、免疫和炎性反應(yīng)間存在一定的相關(guān)性。由于肝細(xì)胞癌存在腫瘤免疫微環(huán)境的抑制，會(huì)對(duì)肝細(xì)胞癌的免疫治療產(chǎn)生影響，因此肝細(xì)胞癌被常被作為研究腫瘤微環(huán)境與腫瘤的發(fā)生發(fā)展的模型[2]。由于T細(xì)胞存在于腫瘤免疫微環(huán)境中，因此免疫細(xì)胞亞群常被用于研究腫瘤的發(fā)生發(fā)展。

調(diào)節(jié)性B淋巴細(xì)胞(regulatory B cells,Breg)能夠與腫瘤細(xì)胞進(jìn)行相互作用，通過分泌白細(xì)胞介素10(interleukin10,IL-10)和轉(zhuǎn)化生長因子β(Transforming growth factor-β,TGF-β)等，在腫瘤的免疫系統(tǒng)中具有特殊的調(diào)節(jié)作用[3]。調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(regulatory T cell,Treg)是一種T細(xì)胞亞群，其具有免疫抑制的作用，可對(duì)機(jī)體的免疫應(yīng)答強(qiáng)度進(jìn)行調(diào)控，以減輕機(jī)體的免疫損傷。研究顯示，Treg及Breg細(xì)胞參與了肝細(xì)胞癌的發(fā)生和發(fā)展[4]?？寡椎腡reg細(xì)胞和Breg細(xì)胞能夠?qū)C(jī)體的免疫平衡進(jìn)行調(diào)控，免疫平衡與肝細(xì)胞癌的發(fā)生、進(jìn)展及預(yù)后均密切相關(guān)。因而，研究肝細(xì)胞癌發(fā)生發(fā)展中Treg細(xì)胞和Breg細(xì)胞的作用，可為肝細(xì)胞癌的診斷和治療提供指導(dǎo)，同時(shí)可為肝細(xì)胞癌的預(yù)防提供依據(jù)。鑒于此，本文對(duì)Treg及Breg在肝細(xì)胞癌中作用的研究進(jìn)展進(jìn)行綜述。

1 肝細(xì)胞癌免疫的研究進(jìn)展

目前，關(guān)于肝細(xì)胞癌免疫的研究多為T淋巴細(xì)胞所介導(dǎo)的細(xì)胞免疫，關(guān)于B細(xì)胞在肝細(xì)胞癌免疫中的研究相對(duì)較少。免疫學(xué)理論認(rèn)為，B細(xì)胞在機(jī)體受到抗原刺激后，分化成漿細(xì)胞，并分泌出免疫球蛋白的抗體，參與機(jī)體的體液免疫。臨床研究發(fā)現(xiàn)，腫瘤組織中存在浸潤性的B淋巴細(xì)胞。腫瘤浸潤的B淋巴細(xì)胞能夠分泌IgG抗體，對(duì)腫瘤組織中的特定抗原進(jìn)行識(shí)別，進(jìn)而抑制腫瘤的生長。B淋巴細(xì)胞同時(shí)也是一種抗原呈遞細(xì)胞，通過其表面的免疫球蛋白將抗原呈遞給T淋巴細(xì)胞。活化后的B淋巴細(xì)胞可替代樹突狀細(xì)胞，作為抗原提呈細(xì)胞來參與腫瘤的免疫應(yīng)答反應(yīng)。研究表明，在腫瘤的移植免疫中存在Treg和Breg細(xì)胞[5]。Treg及Breg細(xì)胞參與了腫瘤及移植免疫，且與腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。

2 Treg細(xì)胞和Breg細(xì)胞的免疫抑制作用概述

2.1Treg細(xì)胞的免疫抑制作用：Treg細(xì)胞是一種具有免疫負(fù)調(diào)控功能的T淋巴細(xì)胞，其按照來源進(jìn)行分組可分為天然型Treg細(xì)胞(natural Treg，nTreg)和外周誘導(dǎo)型Treg細(xì)胞(induced Treg，iTreg)兩種類。nTreg細(xì)胞在新生兒胸腺中進(jìn)行發(fā)育，然后進(jìn)入至外周組織中，通過細(xì)胞間接觸及分泌細(xì)胞因子的方式對(duì)自身反應(yīng)性T細(xì)胞活化過程產(chǎn)生抑制，進(jìn)而調(diào)節(jié)機(jī)體的免疫應(yīng)答反應(yīng)。nTreg細(xì)胞的特征性標(biāo)志物是CD4+CD25+FOXP3+，而肝臟腫瘤組織中的Foxp3表達(dá)水平與免疫球蛋白的表達(dá)水平正相關(guān)，F(xiàn)oxp3高表達(dá)與機(jī)體體液免疫系統(tǒng)出現(xiàn)異常激活現(xiàn)象相關(guān)，也是決定肝細(xì)胞癌患者抗腫瘤免疫反應(yīng)的因素。TGF-β是iTreg細(xì)胞分化和轉(zhuǎn)化的關(guān)鍵細(xì)胞因子，在腫瘤組織特異性抗原及外來抗原共同刺激下，經(jīng)TGF-β誘導(dǎo)后，初始T細(xì)胞向Treg細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)化，并參與腫瘤的免疫調(diào)節(jié)反應(yīng)[6]。因此，Treg細(xì)胞是外周CD4+CD25+T細(xì)胞經(jīng)慢性抗原刺激及細(xì)胞因子作用下轉(zhuǎn)化為iTreg細(xì)胞，促使IL-10、TGF-β等抑制因子的分泌，并介導(dǎo)免疫抑制的信號(hào)通路，進(jìn)而產(chǎn)生免疫抑制效果。

2.2Breg細(xì)胞的免疫抑制作用：最新研究[7]表明，腫瘤浸潤性B細(xì)胞可能是Breg細(xì)胞，在炎性腸炎動(dòng)物模型中發(fā)現(xiàn)了Breg細(xì)胞亞群，Breg細(xì)胞亞群在自身免疫病中具有一定的抑制作用。Breg細(xì)胞亞群不僅參與了自身免疫性疾病的發(fā)病，還與腫瘤的發(fā)生發(fā)展具有一定的相關(guān)性。在致癌物質(zhì)誘導(dǎo)引發(fā)的皮膚癌動(dòng)物模型中，Breg細(xì)胞參與了皮膚鱗癌的發(fā)生發(fā)展[8]。在慢性炎性反應(yīng)性疾病引發(fā)的致癌中，成熟淋巴細(xì)胞缺陷會(huì)對(duì)人類的乳頭瘤病毒-16(HPV-16)產(chǎn)生影響，并影響動(dòng)物模型的致瘤效應(yīng)，重新輸注Breg細(xì)胞后可促使免疫細(xì)胞浸潤至癌前病變中，進(jìn)而導(dǎo)致癌變發(fā)生，因此Breg細(xì)胞在慢性炎性反應(yīng)性疾病轉(zhuǎn)化為腫瘤癌變中的發(fā)揮著重要的作用。研究表明，Breg細(xì)胞通過刺激其細(xì)胞表面的分子，來誘導(dǎo)調(diào)節(jié)性細(xì)胞因子的釋放，多種免疫細(xì)胞都能夠作為Breg細(xì)胞作用的靶細(xì)胞[9]。以上研究說明，Breg細(xì)胞在炎性反應(yīng)性疾病、自身免疫性疾病及腫瘤免疫中具有一定的調(diào)節(jié)作用。

3 Treg細(xì)胞和Breg細(xì)胞與肝細(xì)胞癌發(fā)生發(fā)展的研究進(jìn)展

3.1Treg細(xì)胞與肝細(xì)胞癌發(fā)生發(fā)展的研究進(jìn)展：Treg細(xì)胞是一類CD4+T細(xì)胞亞群，具有一定的免疫抑制功能，在自身免疫疾病的預(yù)防、維持機(jī)體免疫穩(wěn)定及抗腫瘤免疫應(yīng)答抑制中具有重要的作用。較多學(xué)者認(rèn)為，肝細(xì)胞癌的發(fā)生發(fā)展與炎性反應(yīng)及腫瘤免疫抑制等密切相關(guān)。研究表明，Treg細(xì)胞的抗腫瘤免疫調(diào)節(jié)機(jī)制為通過對(duì)抗腫瘤免疫應(yīng)答反應(yīng)產(chǎn)生抑制，促使腫瘤免疫發(fā)生逃逸，最終導(dǎo)致惡性腫瘤的發(fā)生[10]。因此，在肝細(xì)胞癌的發(fā)生發(fā)展中，免疫應(yīng)答和炎性反應(yīng)均具有重要的作用。丁洪基等研究中顯示，采集50例肝細(xì)胞癌合并HBV感染患者未治療前的血清，對(duì)肝細(xì)胞癌進(jìn)行分期，結(jié)果顯示出肝細(xì)胞癌患者的外周血CD4+CD25+FOXP3+Treg細(xì)胞頻率明顯高于正常對(duì)照組[11]。Treg細(xì)胞頻率的升高與肝細(xì)胞癌的臨床分期和腫瘤大小正相關(guān)，Treg細(xì)胞可通過多機(jī)制聚集在機(jī)體腫瘤部位。肝細(xì)胞癌腫瘤細(xì)胞能夠分泌出TGF-β、IL-10等細(xì)胞因子，并對(duì)樹突狀細(xì)胞的成熟產(chǎn)生阻斷，促使初始CD4+T細(xì)胞向Treg細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)化和擴(kuò)增，腫瘤細(xì)胞還能夠通過分泌趨化因子來招募Treg細(xì)胞至機(jī)體腫瘤部位。史安臣等的研究中指出，荷瘤小鼠體內(nèi)的Treg細(xì)胞通過樹突狀細(xì)胞的功能，下調(diào)CD80/CD86共刺激分子表達(dá)，對(duì)TNF-α、IL-12的分泌產(chǎn)生抑制[12]，進(jìn)而對(duì)機(jī)體的免疫應(yīng)答反應(yīng)產(chǎn)生抑制。因此，臨床認(rèn)為Treg細(xì)胞與肝細(xì)胞癌的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)，消除Treg細(xì)胞或使其功能失活均能夠促使抗腫瘤免疫反應(yīng)發(fā)生，并提高免疫治療的有效性，有可能成為肝細(xì)胞癌腫瘤靶向治療的新靶點(diǎn)。

3.2Breg細(xì)胞與肝細(xì)胞癌發(fā)生發(fā)展的研究進(jìn)展：李銳等研究中報(bào)道，發(fā)現(xiàn)Breg細(xì)胞的表達(dá)與肝細(xì)胞癌的腫瘤大小、單發(fā)、多發(fā)、門脈侵犯及肝臟腫瘤等密切相關(guān)[13]。Breg細(xì)胞在B細(xì)胞上的表達(dá)量較低，但Breg細(xì)胞通過與T細(xì)胞、Treg細(xì)胞等免疫細(xì)胞發(fā)生相互作用后，引起機(jī)體出現(xiàn)免疫抑制，并且影響肝細(xì)胞癌的進(jìn)展。說明Breg細(xì)胞在肝癌的進(jìn)展中具有一定的免疫抑制作用。彭程等研究中顯示，將腫瘤細(xì)胞和無B淋巴細(xì)胞浸潤的小鼠脾臟細(xì)胞共同培養(yǎng)，CD8+T細(xì)胞、NK細(xì)胞會(huì)分泌干擾素-γ(interferon-γ,IFN-γ)，在共培養(yǎng)時(shí)會(huì)將純化的IL-10加入其中，則能夠明顯降低IFN-γ的分泌量，說明B淋巴細(xì)胞產(chǎn)生的IL-10能夠?qū)α馨图?xì)胞的腫瘤細(xì)胞殺傷能力產(chǎn)生抑制[14]。也有模型顯示，B細(xì)胞分泌的IL-10可能與體外IFN-γ的反應(yīng)性降低具有一定的關(guān)系。Breg細(xì)胞在肝細(xì)胞癌腫瘤中產(chǎn)生免疫抑制的途徑有多種。駱春艷等的研究中發(fā)現(xiàn)[15]，將Breg細(xì)胞注射于負(fù)瘤小鼠身上，小鼠體內(nèi)的腫瘤生長速度明顯加快，為了證明CD40/CD154信號(hào)參與了Breg細(xì)胞的免疫抑制，給予小鼠抗CD154抗體，治療后腫瘤的生長情況和無Breg細(xì)胞組的結(jié)果相同，在體外細(xì)胞培養(yǎng)中也能夠看到類似的結(jié)果。若對(duì)CD40+CD154的交互作用產(chǎn)生阻斷，與Breg細(xì)胞共培養(yǎng)后能夠使腫瘤細(xì)胞的擴(kuò)增現(xiàn)象迅速消失。因此，Breg細(xì)胞可能通過作用CD40/CD154信號(hào)引起腫瘤發(fā)生免疫抑制，有可能成為肝細(xì)胞免疫治療的新手段。

4 小結(jié)

肝細(xì)胞癌的生存期較短，原因?yàn)榘l(fā)病隱匿、侵襲性強(qiáng)、病情進(jìn)展快、易發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移及局部復(fù)發(fā)率高等，且缺乏有效的早期診斷。肝癌細(xì)胞能夠逃避免疫監(jiān)視，進(jìn)而導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生及發(fā)展。近年來，由于腫瘤微環(huán)境及炎性反應(yīng)在肝細(xì)胞癌發(fā)生發(fā)展發(fā)揮著重要的作用，因此免疫調(diào)節(jié)機(jī)制成為肝細(xì)胞癌發(fā)生發(fā)展的研究熱點(diǎn)。Treg細(xì)胞和Breg細(xì)胞在肝細(xì)胞癌腫瘤免疫中發(fā)揮了重要的免疫抑制作用，可幫助理解Treg細(xì)胞和Breg細(xì)胞對(duì)肝細(xì)胞癌的免疫抑制作用。Treg細(xì)胞能夠與腫瘤細(xì)胞進(jìn)行相互作用，通過分泌IL-10和TGF-β等，在腫瘤的免疫系統(tǒng)中具有特殊的調(diào)節(jié)作用。Breg細(xì)胞可調(diào)控機(jī)體的免疫應(yīng)答強(qiáng)度，減輕機(jī)體的免疫損傷。Treg細(xì)胞消除及Treg功能失活均能夠促進(jìn)抗腫瘤免疫，Breg細(xì)胞可能通過刺激CD40/CD154信號(hào)引發(fā)腫瘤免疫抑制，可為肝細(xì)胞癌的進(jìn)一步研究治療提供依據(jù)。