趙國志

摘要：目的：探討外周血循環(huán)腫瘤細胞與乳腺癌臨床病理特征的關系。方法：選擇2019年1月至2020年12月南方醫(yī)科大學附屬小欖醫(yī)院收治的60例原發(fā)性乳腺癌患者作為研究對象，統(tǒng)計患者外周血循環(huán)腫瘤細胞檢測結(jié)果，并收集患者術(shù)后病理組織學檢測信息，統(tǒng)計影響患者外周血循環(huán)腫瘤細胞陽性的臨床病理因素及免疫組織學相關因素。結(jié)果：60例乳腺癌患者外周血循環(huán)腫瘤細胞檢測顯示，陽性32例（53.33%），陰性28例（46.67%）。乳腺癌臨床分期Ⅳ期者外周血循環(huán)腫瘤細胞陽性率（80.00%）最高，顯著高于Ⅰ～Ⅱ期（41.18%）和Ⅲ期者（62.50%），差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。乳腺癌M分期M1者外周血循環(huán)腫瘤細胞陽性率（63.64%）最高，顯著高于M0者（47.37%），差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者外周血循環(huán)腫瘤細胞陽性率（82.61%）顯著高于未轉(zhuǎn)移者（35.14%），差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。經(jīng)非條件Logistic回歸分析顯示，影響外周血循環(huán)腫瘤細胞陽性的乳腺癌臨床病理因素為臨床分期、M分期和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移（P<0.05）。ER狀態(tài)、RR狀態(tài)、CerbB-2狀態(tài)不是影響乳腺癌患者外周血循環(huán)腫瘤細胞陽性的免疫組化因素（P>0.05）。結(jié)論：外周血循環(huán)腫瘤細胞水平與患者臨床分期、M分期和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等病理狀態(tài)存在一定相關性，陽性者存在一定臨床病理特征，可為乳腺癌診療提供一定的參考依據(jù)。

關鍵詞：乳腺癌;外周血循環(huán)腫瘤細胞;臨床病理特征;臨床分期;免疫組化

乳腺癌是發(fā)生在乳腺腺上皮組織的惡性腫瘤，女性發(fā)病率較高，是威脅女性健康和生活質(zhì)量的重要危險因素，臨床防控形勢嚴峻。近年來，乳腺癌的臨床研究逐漸深入，但是尚未完全清楚其病因及病機，需積極提升其診斷水平，尤其應提高其早期診斷率，以改善患者預后[1～2]。外周血循環(huán)腫瘤細胞是指進入人體外周血的腫瘤細胞，可發(fā)生于腫瘤的各階段及時期，是導致惡性腫瘤遠處轉(zhuǎn)移及復發(fā)的重要原因，因而外周血循環(huán)腫瘤細胞是乳腺癌生存期的獨立預后因素，積極監(jiān)測其指標水平，有助于合理評估患者病情，但是其與乳腺癌臨床病理特征的關系尚有待明確[3]。本研究選擇60例原發(fā)性乳腺癌患者作為研究對象，分析了影響患者外周血循環(huán)腫瘤細胞與乳腺癌臨床病理特征的關系。現(xiàn)報道如下：

1資料與方法

1.1 一般資料

選擇2019年1月至2020年12月南方醫(yī)科大學附屬小欖醫(yī)院行手術(shù)治療及術(shù)后病理組織學檢查的60例原發(fā)性乳腺癌患者作為研究對象，均為女性，年齡29～78歲，平均（53.46±24.35）歲。

1.2 納入與排除標準

納入標準：經(jīng)乳腺超聲、乳腺鉬靶X線攝影及術(shù)后病理學檢查確診為原發(fā)性乳腺癌;預計生存期>3個月;無手術(shù)禁忌證;臨床資料完整;患者和家屬均簽署知情同意書。排除標準：術(shù)前接受放化療治療者;重要臟器功能不全者;合并內(nèi)分泌疾病、自身免疫性疾病者;基礎疾病控制不佳者;妊娠及哺乳期婦女。

1.3 研究方法

抽取患者空腹靜脈血5 ml（ACD抗凝管）進行陰性富集法檢測（白細胞去除試劑盒購于萊爾生物醫(yī)藥科技），采用采血管混勻后，常溫離心8 min，棄上清液，倒入50 ml離心管A中，經(jīng)1×hCTC Buffer洗滌2次，轉(zhuǎn)入A管，實施白細胞疊加至分離介質(zhì)，再次洗滌（同上），注入含有hCTC SePae-anon Matrix的B管，離心后取上清液，移至離心管C中，采用磁珠分離液體，磁珠混懸液疊加至分離介質(zhì)上，再次離心，沉淀后液體，待用。經(jīng)免疫熒光原位雜交技術(shù)，處理陰性富集處理的液體，采用磷酸鹽緩沖液2號固定樣品，隨后置入預熱的染色缸里，將標本置于染色缸中并脫水處理，樣品區(qū)加入10 μl閃探針，置于雜交儀（美國賽默飛世爾科技），變性、雜交處理后，使用白細胞表面抗原標記的CD45-Alexa594進行免疫熒光染色。

1.4 觀察指標

統(tǒng)計患者外周血循環(huán)腫瘤細胞檢測結(jié)果，并收集患者術(shù)后病理組織學檢查信息，統(tǒng)計影響患者外周血循環(huán)腫瘤細胞陽性的臨床病理因素及免疫組織學相關因素。

1.5 統(tǒng)計學方法

采用SPSS20統(tǒng)計學軟件分析數(shù)據(jù)，計量資料以（±s）表示，采用t檢驗，計數(shù)資料用率表示，采用χ2檢驗，多因素采用非條件Logistic回歸分析，P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2結(jié)果

2.1 外周血循環(huán)腫瘤細胞檢測結(jié)果

60例乳腺癌患者外周血循環(huán)腫瘤細胞檢測顯示，陽性32例（53.33%），陰性28例（46.67%）。

2.2 外周血循環(huán)腫瘤細胞與乳腺癌臨床病理特征的單因素分析

乳腺癌臨床分期Ⅳ期者外周血循環(huán)腫瘤細胞陽性率（80.00%）最高，顯著高于Ⅰ～Ⅱ期（41.18%）和Ⅲ期者（62.50%），差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。乳腺癌M分期M1者外周血循環(huán)腫瘤細胞陽性率（63.64%）最高，顯著高于M0者（47.37%），差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者外周血循環(huán)腫瘤細胞陽性率（82.61%）顯著高于未轉(zhuǎn)移者（35.14%），差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。見表1。

2.3 外周血循環(huán)腫瘤細胞與乳腺癌臨床病理特征的Logistic回歸分析

以外周血循環(huán)腫瘤細胞陽性為因變量，單因素分析中差異有統(tǒng)計學意義的3項因素為自變量，經(jīng)非條件Logistic回歸分析顯示，影響外周血循環(huán)腫瘤細胞陽性的乳腺癌臨床病理因素為臨床分期、M分期和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移（P<0.05）。見表2。

2.4 外周血循環(huán)腫瘤細胞陽性的乳腺癌免疫組化因素分析

ER狀態(tài)、RR狀態(tài)、CerbB-2狀態(tài)不是影響乳腺癌患者外周血循環(huán)腫瘤細胞陽性的免疫組化因素（P>0.05）。見表3。

3討論

乳腺癌是威脅女性健康的高發(fā)惡性腫瘤，近年來這類惡性腫瘤的臨床診療技術(shù)發(fā)展迅速，患者生存期得到了有效提升，但是仍存在較高的遠處轉(zhuǎn)移及復發(fā)風險，需進一步提升其診療水平。手術(shù)病理組織學檢查是確診乳腺癌的最終依據(jù)，但是存在較大局限性，實施率受限;組織活檢也是乳腺癌診斷的主要依據(jù)，但是作為一類有創(chuàng)性檢查，仍存在較多限制因素[4]。近年來，影像學檢查技術(shù)發(fā)展迅速，乳腺超聲、鉬靶X線攝影檢查、磁共振檢查技術(shù)得到了明顯優(yōu)化，成為乳腺癌篩查的重要手段，但是存在一定誤診和漏診風險，診斷準確率有待提升[5]。

乳腺癌發(fā)生早期，腫瘤細胞即可進入外周血并發(fā)生全身擴散，而乳腺癌微轉(zhuǎn)移、預后評估相關臨床研究發(fā)現(xiàn)，外周血循環(huán)腫瘤細胞是導致患者全身擴散和遠處轉(zhuǎn)移的主要原因，因而檢查患者外周血循環(huán)腫瘤細胞水平對患者病情和預后評估具有重要意義[6]。但是，其變化情況與乳腺癌臨床病理特征的關系尚不明確，亟待分析探明，從而為乳腺癌診療提供更為豐富的參考資料[7～8]。乳腺癌患者外周血循環(huán)腫瘤細胞研究顯示，外周血循環(huán)腫瘤細胞水平升高是乳腺癌遠處轉(zhuǎn)移的重要前提，乳腺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者外周血循環(huán)腫瘤細胞陽性率高達60%～90%[9]。本研究經(jīng)非條件Logistic回歸分析顯示，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移是影響外周血循環(huán)腫瘤細胞陽性的乳腺癌臨床病理因素，提示外周血循環(huán)腫瘤細胞水平陽性患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移風險較高，不利于患者預后改善。分析其主要原因為：外周血循環(huán)腫瘤細胞陽性患者，機體中大量腫瘤細胞從原發(fā)部位或者轉(zhuǎn)移灶脫落進入外周循環(huán)系統(tǒng)，在與機體淋巴組織微環(huán)境的雙向動態(tài)作用過程中，容易出現(xiàn)轉(zhuǎn)移，同時淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移后，腫瘤細胞易脫落進入外周循環(huán)系統(tǒng)，兩者相互促進，不良預后風險較高。此外，本研究結(jié)果還發(fā)現(xiàn)，非條件Logistic回歸分析也顯示，臨床分期、M分期也是影響乳腺癌患者外周血循環(huán)腫瘤細胞陽性的臨床病理影響因素。進一步分析發(fā)現(xiàn)，臨床分期Ⅳ者外周血循環(huán)腫瘤細胞陽性率（80.00%）最高，且乳腺癌M分期M1者外周血循環(huán)腫瘤細胞陽性率（63.64%）最高，可知隨臨床分期升高，患者外周血循環(huán)腫瘤細胞陽性率逐漸升高，且M分期M1者，外周血循環(huán)腫瘤細胞陽性相對較高。分析其原因主要為：臨床分期Ⅳ者和M分期M1者腫瘤增殖活性較強，侵襲能力也相對較強，較多腫瘤細胞進入外周循環(huán)，導致外周血循環(huán)腫瘤細胞水平，提示不同臨床分期和M分期患者存在外周血循環(huán)腫瘤細胞水平的差異性。而血標本的獲得相對簡單，可通過外周血循環(huán)腫瘤細胞監(jiān)測進行早期篩查與評估，及時采取抗腫瘤治療措施。單因素分析顯示，乳腺癌患者臨床病理T分期、N分期、病理類型、腫瘤直徑、分子分型和免疫組化因素（ER狀態(tài)、RR狀態(tài)、CerbB-2狀態(tài)）并非影響外周血循環(huán)腫瘤細胞陽性的臨床病理影響因素，提示上述臨床病理因素、免疫組化因素和分子分型與外周血循環(huán)腫瘤細胞陽性并無明顯相關性。

綜上所述，外周血循環(huán)腫瘤細胞水平與患者臨床分期、M分期和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等病理狀態(tài)存在一定相關性，陽性者存在一定臨床病理特征，可為乳腺癌診療提供一定的參考依據(jù)。

參考文獻

[1]李振芬，付茹俊，方丹丹.乳腺癌骨轉(zhuǎn)移與外周血循環(huán)腫瘤細胞上皮-間充質(zhì)轉(zhuǎn)化表型的關系[J].癌癥進展，2019，17（3）：331-334.

[2]黎秀月，何艷，蘇珍，等.外周血循環(huán)腫瘤細胞數(shù)與乳腺癌患者臨床病理特征的相關性研究[J].腫瘤研究與臨床，2021，33（6）：414-418.

[3]張超，李良.乳腺癌患者外周血循環(huán)腫瘤細胞檢測的應用現(xiàn)狀[J].臨床醫(yī)藥文獻電子雜志，2016，3（46）：9262-9263.

[4]單海琳，邵清，蘇瑛，等.乳腺癌術(shù)前外周血循環(huán)腫瘤細胞計數(shù)的臨床應用價值研究[J].東南大學學報（醫(yī)學版），2018，37（2）：272-276.

[5]馬友龍，延靖蕾，馬立輝.外周血循環(huán)腫瘤細胞聯(lián)合程序性細胞死亡蛋白-1/及其配體在中晚期乳腺癌化療患者預后判斷中的價值[J].中華實驗外科雜志，2021，38（2）：370-370.

[6]王瑞娟，肖雪明，曾煥紅，等.乳腺癌患者外周血循環(huán)腫瘤細胞檢測的臨床價值[J].福建醫(yī)藥雜志，2020，42（5）：42-45.

[7]張娜賢，孫新超，丁旭萌，等.外周血循環(huán)腫瘤細胞在乳腺癌中的表達意義[J].實用癌癥雜志，2020，35（7）：1170-1173.

[8]邱曉陽，吳璇，劉君，等.外周血循環(huán)腫瘤細胞聯(lián)合CA153檢測在乳腺癌篩查及分期預測中的應用價值[J].華中科技大學學報（醫(yī)學版），2020，49（3）：331-337.

[9]李辰，張?zhí)熹h，聞愚.早期乳腺癌保乳手術(shù)前外周血循環(huán)腫瘤細胞計數(shù)對遠期預后的影響[J].中國現(xiàn)代普通外科進展，2019，22（9）：714-716.