李愛(ài)民李曉娟李瑞生

(1.青島市第五人民醫(yī)院,風(fēng)濕病科,山東 青島 266002； 2.中國(guó)人民解放軍總醫(yī)院第五醫(yī)學(xué)中心,臨床研究管理中心,北京 100039)

類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(rheumatoid arthritis,RA)是一種慢性自身免疫性疾病,主要以炎性滑膜炎為主,多見(jiàn)于多關(guān)節(jié)性和對(duì)稱性地侵襲手足小關(guān)節(jié),可造成關(guān)節(jié)結(jié)構(gòu)的破壞,出現(xiàn)關(guān)節(jié)畸形及功能喪失[1]。同時(shí)RA 還常累及關(guān)節(jié)外其他器官,血清中類風(fēng)濕因子呈陽(yáng)性及各種細(xì)胞因子和抗體均會(huì)發(fā)生變化,還會(huì)出現(xiàn)滑膜細(xì)胞增生及纖維化、血翳形成、骨和軟骨損害等一系列病理?yè)p傷過(guò)程[2]。 國(guó)內(nèi)RA 其成人的患病率為0.32%～0.36%,女性患者為男性患者的2～4 倍[3]。 該病程較長(zhǎng),如不及時(shí)治療,致殘率也較高,將會(huì)嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量。 目前,對(duì)于RA 的發(fā)病原因和發(fā)病機(jī)制尚未完全明確,還沒(méi)有十分有效地靶向治療藥物。 為了能夠更好地了解RA 的發(fā)病機(jī)制,來(lái)建立與人類相似的RA 動(dòng)物模型進(jìn)行藥物篩選研究是非常關(guān)鍵的。 因此許多學(xué)者對(duì)RA 的動(dòng)物模型進(jìn)行了不斷地探討和研究,本文就目前比較成熟和穩(wěn)定的RA 大小鼠動(dòng)物模型作以簡(jiǎn)介,為今后進(jìn)一步研究RA 疾病提供新的思路。

1 小鼠

1.1 誘導(dǎo)型小鼠模型

1.1.1 膠原誘導(dǎo)性關(guān)節(jié)炎(collagen-induced arthritis,CIA)

CIA 模型是最廣泛使用的RA 小鼠模型之一。膠原蛋白是一類具有活躍生物功能的細(xì)胞外間質(zhì)成分,其中Ⅱ型膠原(CⅡ)可誘導(dǎo)體內(nèi)產(chǎn)生關(guān)節(jié)炎性質(zhì)的自身免疫性反應(yīng)[4]。 建模方法是將牛CⅡ和完全弗氏佐劑(CFA)乳化后,在小鼠尾根部進(jìn)行免疫注射后會(huì)出現(xiàn)關(guān)節(jié)腫脹現(xiàn)象,一個(gè)多月后會(huì)達(dá)到高峰。 最常用的小鼠為DBA/1,張引紅等[5]采用DBA/1J 小鼠,利用牛CⅡ誘導(dǎo)構(gòu)建RA 模型,發(fā)現(xiàn)補(bǔ)骨脂素通過(guò)調(diào)節(jié)Th1/Th2 細(xì)胞平衡及抑制TNFα、IL-6 和IL-1β 起到免疫調(diào)節(jié)作用,從而緩解RA進(jìn)程。 而C57BL/6 小鼠對(duì)牛CⅡ誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎具有抵抗性,如果改用雞的膠原蛋白即可。 王寧等[6]利用雞CⅡ誘導(dǎo)構(gòu)建RA 模型,便證實(shí)了濾泡輔助T細(xì)胞(Tfh 細(xì)胞)與RA 的發(fā)生和病情進(jìn)展有密切關(guān)系。 但此類模型與RA 之間最顯著的差異是不存在類風(fēng)濕因子。

1.1.2 抗原誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎( antigen-induced arthritis,AIA)

AIA 模型首次在1977 年構(gòu)建,以研究誘導(dǎo)和持續(xù)性疾病中的體液和細(xì)胞免疫應(yīng)答[7]。 目前基本是在此基礎(chǔ)上進(jìn)行了適當(dāng)?shù)母牧肌?其造模方法是在股骨頭對(duì)應(yīng)的外部皮膚皮內(nèi)注射100 μg 甲基化牛血清白蛋白(mBSA)和CFA 混合液,并注入小鼠尾部和膝關(guān)節(jié)腔內(nèi),從第1 天開(kāi)始就會(huì)出現(xiàn)嚴(yán)重的關(guān)節(jié)炎癥狀,但持續(xù)3 d 后癥狀會(huì)逐漸減輕。 范凱健等[8]利用C57BL/6 小鼠將CIA 和AIA 造模情況進(jìn)行了比較,發(fā)現(xiàn)CIA 造模成功率不高且嚴(yán)重程度差異較大,AIA 造模成功率高但維持時(shí)間較短。

1.1.3 膠原抗體誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎(collagen antibody induced arthritis,CAIA)

CAIA 模型是給予內(nèi)毒素(LPS)和單克隆抗體混合物誘導(dǎo)而成,廣泛用于研究自身免疫性關(guān)節(jié)炎的發(fā)病機(jī)制和評(píng)估治療[9]。 采用的單克隆抗體混合物主要是由3 個(gè)IgG2a(A2-10、F10-21、D8-6)和IgG2b(D1-2G)組成,通過(guò)識(shí)別位于CⅡ的CB11 片段(CⅡ124-402)來(lái)誘導(dǎo)CAIA 的產(chǎn)生[10]。 研究表明CAIA 的易感性與MHC 不相關(guān),但其發(fā)病率和嚴(yán)重程度均較低[11]。 此模型易感品系為C57BL/6 小鼠,需用濃度為10 mg/mL 的小鼠抗CⅡ誘導(dǎo),可以在幾天內(nèi)誘導(dǎo)持續(xù)嚴(yán)重的關(guān)節(jié)炎[12]。 Hutamekalin等[13]發(fā)現(xiàn),LPS 劑量降低,既能引發(fā)關(guān)節(jié)炎,又能降低LPS 的毒性作用。 該模型成模時(shí)間短且發(fā)病率高而被研究者廣泛應(yīng)用。

1.1.4 蛋白聚糖誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎(proteoglycaninduced arthritis,PGIA)

PGIA 模型是將蛋白聚糖(PG)腹腔注射于遺傳易感性小鼠誘導(dǎo)產(chǎn)生嚴(yán)重的慢性關(guān)節(jié)炎[14]。 造模方法：采用佐劑將軟骨蛋白多糖乳化后,分別在0 d,21 d,42 d 對(duì)小鼠進(jìn)行腹腔注射,4 周以后可誘導(dǎo)糜爛性關(guān)節(jié)炎[14]。 對(duì)于人PG 易感的小鼠有BALB/c、C3H 和C57BL/6J 小鼠,雌性更敏感。 雖然首選人PG,但其提取和純化過(guò)程比較復(fù)雜,還涉及倫理問(wèn)題。 因此Ishikawa 等[15]采用牛PG 評(píng)估發(fā)現(xiàn)在雌性BALB/c 小鼠中的關(guān)節(jié)炎發(fā)生率最高,但其發(fā)生率仍然低于人PG 誘導(dǎo)的RA 模型。

1.1.5 遲發(fā)性過(guò)敏性關(guān)節(jié)炎( delayed-type hypersensitivity arthritis,DTHA)

DTHA 為近年來(lái)發(fā)展的關(guān)節(jié)炎模型,在C57BL/6 小 鼠 中 其發(fā) 病率 為100%。 Atkinson 等[16]將mBSA 與CFA 的混合物和CⅡ抗體注射C57BL/6小鼠尾部,在第4 天靜脈注射CⅡ抗體和第7 天皮下注射含有mBSA 的PBS 于右腳底部,再過(guò)3～7 d,小鼠足爪迅速出現(xiàn)嚴(yán)重關(guān)節(jié)炎癥狀,約14 d 后炎癥消退。 Tanaka 等[17]將mBSA 與低劑量的CⅡ聯(lián)合皮下注射于BALB/c 小鼠尾部,再用mBSA 在足爪局部加強(qiáng)。 具有發(fā)病率高和差異性小等優(yōu)點(diǎn),但DTHA 模型屬于自限性,與RA 的慢性進(jìn)展性特點(diǎn)不相符。

1.1.6 葡萄糖-6-磷酸異構(gòu)酶(glucose-6-phosphate isomerase,GPI)誘導(dǎo)關(guān)節(jié)炎

2001 年SchaHer 等[18]首次報(bào)道了GPI 與RA有關(guān)。 韓曉芳等[19]在DBA/1 小鼠體內(nèi)使用GPI 誘導(dǎo)RA 模型,從第35 天開(kāi)始,足趾出現(xiàn)輕微的腫脹,關(guān)節(jié)紅腫、畸形,并伴有活動(dòng)障礙,為深入研究GPI在RA 發(fā)生發(fā)展中的作用機(jī)制提供了實(shí)驗(yàn)平臺(tái)。

1.1.7 萊姆病螺旋體誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎

研究者從萊姆病螺旋體中分離出來(lái)的細(xì)菌經(jīng)背部皮下注射于敏感的C3H、C57BL/6 和BALB/c小鼠背部給予免疫,也可以建立RA 小鼠動(dòng)物模型。

1.1.8 鏈球菌細(xì)胞壁誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎(streptococcal cell wall-induced arthritis,SCWA)

SCW 可誘導(dǎo)急性的小鼠關(guān)節(jié)炎模型,一般注射幾小時(shí)后,炎性因子就會(huì)出現(xiàn)高表達(dá)。 在此基礎(chǔ)上,研究者通過(guò)改進(jìn)在小鼠關(guān)節(jié)腔進(jìn)行一次或多次注射SCW 片段(n≥3),可誘導(dǎo)出慢性小鼠的關(guān)節(jié)炎[20]。 易感品系有：BALB/c、DBA/1 和C3H 小鼠。而C57BL/6 是抵抗品系。

1.2 轉(zhuǎn)基因型小鼠

研究報(bào)道白介素和TNF(腫瘤壞死因子)家族中的部分成員在RA 炎癥因子中發(fā)揮著重要的作用。 因此除了誘導(dǎo)型小鼠RA 模型,轉(zhuǎn)基因型小鼠RA 模型也多有報(bào)道。

1.2.1 K/BxN 小鼠(K/BxN TCR-tg)模型

K/BxN 小鼠是一種自發(fā)性關(guān)節(jié)炎,該小鼠在出生后3～5 周即能自發(fā)產(chǎn)生關(guān)節(jié)炎[20]。 由于該小鼠具有與人類RA 相似性高、發(fā)病率高和重復(fù)性好的特點(diǎn),有望成為研究RA 發(fā)病機(jī)制很好的動(dòng)物模型[21]。 近年來(lái)研究者利用K/BxN 小鼠誘導(dǎo)出K/BxN STA 模型以研究RA 發(fā)生的免疫機(jī)制。 建模方法：在正常小鼠體內(nèi)可注射K/BxN 小鼠血清,就會(huì)出現(xiàn)一過(guò)性的關(guān)節(jié)炎臨床癥狀,一般在10 ～14 d 后會(huì)達(dá)到峰值,隨后在幾周內(nèi)逐漸減退,可重復(fù)注射血清來(lái)維持模型的持久性和穩(wěn)定性[21]。

1.2.2 TNF-α 轉(zhuǎn)基因小鼠模型

TNF-α 轉(zhuǎn)基因小鼠是植入人的TNF-α 的動(dòng)物模型,在正常小鼠體內(nèi)如植入從轉(zhuǎn)基因小鼠提取的成纖維樣滑膜,可高表達(dá)出人的TNF-α,呈現(xiàn)關(guān)節(jié)炎的臨床特征。 該小鼠模型開(kāi)始先用C57BL/6×CBA雜交,再與DBA/1 回交,呈現(xiàn)出更明顯的臨床特征,說(shuō)明DBA/1 與TNF-α 聯(lián)合作用可加重RA[22-23]。該模型從3 ～4 周齡開(kāi)始便伴有踝關(guān)節(jié)腫脹,9 周左右出現(xiàn)關(guān)節(jié)破壞。 該小鼠優(yōu)點(diǎn)：具有遺傳因素、病程進(jìn)展呈慢性炎癥、病情穩(wěn)定。 研究者利用本小鼠開(kāi)展了中醫(yī)藥對(duì)關(guān)節(jié)炎的治療以及比較本小鼠與CIA 模型之間的差異等研究[24-25]。

1.2.3 SKG 小鼠模型

SKG 小鼠依賴于BALB/c 背景,其ZAP-70 基因位點(diǎn)發(fā)生突變而培育出來(lái)的,是高度依賴IL-17 及其它細(xì)胞因子的表達(dá)、具有隱形突變基因的自發(fā)性關(guān)節(jié)炎模型[26]。 模型特點(diǎn)：與人類的RA 相似、小關(guān)節(jié)對(duì)稱性炎癥、類風(fēng)濕性因子升高和進(jìn)行性關(guān)節(jié)破壞等特點(diǎn)。 該模型還呈現(xiàn)關(guān)節(jié)外病變?nèi)绶窝?、皮炎?而被廣泛用來(lái)評(píng)估藥物對(duì)RA 中骨骼變化的作用。

1.2.4 IL-1 受體拮抗劑敲除小鼠模型

該小鼠一般在出生后5 ～8 周會(huì)自發(fā)發(fā)展為關(guān)節(jié)炎。 臨床上常出現(xiàn)炎性浸潤(rùn)和生成血管翳等特點(diǎn)。 該模型動(dòng)物必須選用BALB/c 小鼠,對(duì)于其他品系的小鼠復(fù)制不出來(lái)。

2 大鼠

RA 大鼠動(dòng)物模型分為西醫(yī)大鼠疾病動(dòng)物模型和中醫(yī)病證結(jié)合模型兩大類。

2.1 RA 西醫(yī)大鼠疾病動(dòng)物模型

2.1.1 膠原誘導(dǎo)性關(guān)節(jié)炎(CIA)CIA 是構(gòu)建大鼠RA 模型中最常用的方法之一。 造模方法：先用異種或同種CⅡ與IFA 多部位皮內(nèi)注射,1 周后腹腔注射加強(qiáng)免疫[27]。 在致敏7 d 后,踝關(guān)節(jié)會(huì)輕度腫脹和皮膚發(fā)紅,3 周后癥狀加重,甚至皮膚發(fā)生潰瘍；5 ～6 周后病理改變進(jìn)一步加重,關(guān)節(jié)軟骨及軟骨下骨質(zhì)均受血管翳的侵蝕和破壞[28]。 易感動(dòng)物有BB、DA、DR 和LEW 大鼠。關(guān)麗等[29]通過(guò)不同劑量阿司匹林預(yù)處理后再使用牛CⅡ誘導(dǎo)RA,發(fā)現(xiàn)高劑量阿司匹林處理后的大鼠腸道通透性比低劑量的高,且高劑量處理后更能誘發(fā)形成RA。 吳菁等[30]同樣使用牛CⅡ建立的CIA模型,驗(yàn)證了無(wú)論在體內(nèi)還是體外DMY 均對(duì)脾臟中免疫相關(guān)T 淋巴細(xì)胞具有免疫調(diào)節(jié)作用,進(jìn)而對(duì)全身性炎癥反應(yīng)起到抑制作用。

2.1.2 佐劑誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎(adjuvant Arthritis,AA)AA 模型是最廣泛使用的大鼠RA 模型,有IFA和CFA 兩種類型。 首先對(duì)液體石蠟與無(wú)水羊毛脂按一定比例混合成的混合液進(jìn)行高壓滅菌,如果不加卡介苗的即為IFA,加卡介苗的為CFA[31]。 模型特點(diǎn)：造模方法簡(jiǎn)單易行,模型一般于致炎后10～20 d 出現(xiàn)續(xù)發(fā)炎性癥狀,約在20 d 達(dá)到高峰。 炎癥表現(xiàn)以踝關(guān)節(jié)為重,可侵及足墊和全足。 該模型的關(guān)節(jié)腫脹癥狀與臨床RA 患者具有相似性,但會(huì)出現(xiàn)免疫功能紊亂現(xiàn)象。 AA 大鼠模型在我國(guó)被廣泛用于RA 的臨床藥物和治療研究。 田時(shí)志等[32]用Wistar 大鼠構(gòu)建AA 模型,驗(yàn)證了溫針灸可有效減輕炎性反應(yīng),緩解大鼠后肢腫脹,可能與IL-1、TNF-α和血清免疫球蛋白水平下降有關(guān)。 王建等[33]建立SD 大鼠AA 模型,驗(yàn)證了蓍草總倍半萜內(nèi)酯具有較好的治療大鼠RA 作用,這可能與下調(diào)炎癥因子IL-6、IL-1β 和TNF-α 水平有關(guān)。

2.1.3 二甲基雙十八烷基銨(DDA)誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎(DDA induced arthritis,DIA)

該模型多采用Lewis 和DA 大鼠,皮下注射2 mg 溶于磷酸緩沖液的DDA 溴化物時(shí),可誘導(dǎo)輕度多關(guān)節(jié)炎；如混合IFA 后注射,可復(fù)制重癥關(guān)節(jié)炎。主要表現(xiàn)為發(fā)病關(guān)節(jié)滑膜充血、細(xì)胞浸潤(rùn)和軟骨破壞等癥狀[28]。 此模型具有發(fā)病率低和炎癥較輕的特點(diǎn)。

2.1.4 鏈球菌細(xì)胞壁誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎(SCWA)

SCWA 是將A 群鏈球菌與其他細(xì)菌的肽聚糖-多聚糖混合液,注射于大鼠腹腔內(nèi),24 h 后即可出現(xiàn)明顯的急性關(guān)節(jié)炎癥狀[34]。 常用雌性的Lewis(LEW/N)大鼠,誘導(dǎo)后期可演變成長(zhǎng)期慢性關(guān)節(jié)炎[34]。

2.1.5 礦物油誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎(oil induced arthritis,OIA)

OIA 是一種基因限制性、獨(dú)特的大鼠關(guān)節(jié)炎。選擇較敏感的DA 大鼠于尾部皮下注射IFA 形成的動(dòng)物模型。 一般于注射后14 d 出現(xiàn)關(guān)節(jié)炎癥狀,關(guān)節(jié)腫脹較其他類型的關(guān)節(jié)炎輕[35]。 OIA 與CIA 表現(xiàn)幾乎相同,但不產(chǎn)生CII 的抗體。 同時(shí)還出現(xiàn)IL-2、IFN-γ 及TNF-α 高表達(dá)[36]。

2.1.6 輔劑誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎

誘導(dǎo)方法：將IFA 結(jié)合滅活Mtb 進(jìn)行敏感大鼠尾部皮下注射,連續(xù)14 d,一般在免疫后8 ～12 d 出現(xiàn)關(guān)節(jié)炎癥狀,幾周后疾病進(jìn)展迅速,可發(fā)展為破壞性關(guān)節(jié)炎。 最易感大鼠品系為DA 或LEW 大鼠。該模型與人類的RA 比較相似。

2.1.7 Avridine 誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎

研究者是將Avridine 注射于LEW 大鼠尾部所建立的大鼠關(guān)節(jié)炎模型。 雌性大鼠較雄性的癥狀更明顯更嚴(yán)重。 研究表明裸鼠對(duì)Avridine 誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎有所抵抗[37]。 該模型主要用于輔劑或先天免疫方面的研究。

2.1.8 軟骨低聚體基質(zhì)蛋白(COMP)誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎

COMP 可誘導(dǎo)嚴(yán)重的關(guān)節(jié)炎并出現(xiàn)對(duì)稱性外周關(guān)節(jié)受累。 造模方式：主要將等體積的COMP 溶液與完全佐劑混合乳化后,皮內(nèi)注射于敏感大鼠尾巴根部。 易感品系有DA 和LEW 大鼠。 但該模型缺點(diǎn)是穩(wěn)定性差[38]。

2.1.9 樸日斯烷誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎(pristante-induced arthritis,PIA)

該模型是將樸日斯烷(pristane)300 μL 皮下單獨(dú)注射于敏感大鼠尾部,注射2 ～3 周后,產(chǎn)生關(guān)節(jié)炎癥狀,該模型可持續(xù)數(shù)個(gè)月。 易感大鼠為DA 和LEW 大鼠。 疾病的發(fā)展可通過(guò)大體觀察每個(gè)關(guān)節(jié)的腫脹程度來(lái)監(jiān)測(cè)分析[39]。

2.2 中醫(yī)病證結(jié)合RA 動(dòng)物模型

中醫(yī)稱RA 為“痹證”“歷節(jié)”或“鶴膝風(fēng)”[40]。隨著國(guó)內(nèi)中醫(yī)中藥研究的不斷發(fā)展,單純西醫(yī)疾病動(dòng)物模型不能很好地模擬RA 與中醫(yī)證候間的關(guān)系,因此研究者在CIA 和AA 模型的基礎(chǔ)上,加入中醫(yī)致病因素,模擬RA 的中醫(yī)證候進(jìn)行模型復(fù)制[41]。 這樣可以彌補(bǔ)單純西醫(yī)疾病動(dòng)物模型不能模擬中醫(yī)證候與RA 之間關(guān)系的缺點(diǎn)。

2.2.1 風(fēng)濕熱郁和風(fēng)寒濕痹RA 動(dòng)物模型

中醫(yī)認(rèn)為RA 發(fā)病的主要原因是外邪(風(fēng)熱與風(fēng)寒),而易侵襲人體。 熊艷杰等[42]通過(guò)冷水冷風(fēng)外加注射CFA 建立風(fēng)濕寒癥型RA 動(dòng)物模型,發(fā)現(xiàn)滑膜區(qū)域有T 淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞浸潤(rùn),其中T 淋巴細(xì)胞是主要免疫細(xì)胞,淋巴細(xì)胞與RA 局部滑膜組織的損傷無(wú)關(guān)。

2.2.2 瘀血痹阻RA 動(dòng)物模型

瘀血痹阻是臨床上RA 患者的常見(jiàn)中醫(yī)證型之一,血瘀常貫穿于RA 發(fā)生發(fā)展的整個(gè)過(guò)程,患者常因血脈瘀阻、血行不暢而表現(xiàn)出疼痛位置固定、疼痛如針刺狀、皮下見(jiàn)瘀點(diǎn)瘀斑,舌下絡(luò)脈曲張等特點(diǎn)。 研究者通過(guò)改變外在環(huán)境因素構(gòu)建出血瘀證動(dòng)物模型。 李茜等[43]選取Wistar 大鼠經(jīng)5℃～7℃水中游泳處理,同時(shí)在大鼠不同部位皮下注射CⅡ醋酸和弗氏完全佐劑混合液,可建立血瘀證大鼠RA 模型。 李征等[44]的大鼠模型實(shí)驗(yàn)證實(shí)了加CPP的佐劑混合組比不加CPP 單純組其自身抗體的含量會(huì)更高。

2.2.3 腎虛RA 大鼠模型

該大鼠模型在臨床上主要表現(xiàn)為骨骼和關(guān)節(jié)的損傷,該模型主要應(yīng)用于以中醫(yī)為主方式來(lái)探討RA 疾病的藥物評(píng)價(jià)。 王燕等[45]通過(guò)實(shí)驗(yàn)證實(shí)了SD 大鼠是最適合來(lái)制作腎虛型RA 大鼠模型的動(dòng)物。 陶黎等[46]采用去卵巢和CII 免疫誘導(dǎo)的方法也建立了腎虛關(guān)節(jié)炎模型,證明了腎虛可加重關(guān)節(jié)炎從而引起骨質(zhì)疏松,使用中藥益腎蠲痹丸可相應(yīng)減輕關(guān)節(jié)炎及骨質(zhì)破壞程度。

2.2.4 脾虛RA 大鼠模型

脾是人體中非常重要的器官之一,脾虛則會(huì)出現(xiàn)氣血不足,加重體內(nèi)濕氣,建立脾虛RA 大鼠模型模擬人的脾虛癥侯來(lái)研究探討其發(fā)病機(jī)制。 杜中平等[47]利用利血平和CII 混合物所復(fù)制的脾虛RA大鼠模型,結(jié)果證實(shí)該模型可反映出脾虛證RA 病人的發(fā)病特點(diǎn),具有一定的可行性。

以上不同證型的RA 中醫(yī)動(dòng)物模型是病證結(jié)合動(dòng)物模型的探索和進(jìn)步,既考慮了西醫(yī)病因又具有中醫(yī)癥候和臨床表現(xiàn),在RA 中西醫(yī)結(jié)合研究和治療過(guò)程中發(fā)揮著重要的作用[48]。

3 總結(jié)與展望

近年來(lái)所建立的各種大小鼠RA 動(dòng)物模型,通過(guò)不斷地優(yōu)化和篩選也趨于穩(wěn)定,其中以CIA 小鼠模型和AA 大鼠模型應(yīng)用最為廣泛。 CIA 小鼠模型主要應(yīng)用于RA 治療機(jī)制及免疫反應(yīng)方面的研究,但縱觀上述介紹的RA 動(dòng)物模型,均存在一定局限性,不能完全模擬人類的臨床癥狀。 中醫(yī)病證結(jié)合動(dòng)物模型也僅僅實(shí)現(xiàn)了“病”與“證”的簡(jiǎn)單疊加,無(wú)法復(fù)制出中醫(yī)證候的復(fù)雜程度和具體特點(diǎn),模型的可靠性和成功率極其不穩(wěn)定[49]。 因此到目前為止還未有一種動(dòng)物模型可以囊括人類RA 發(fā)病的所有特征。

理想的RA 模型應(yīng)具有易操作性、穩(wěn)定性、創(chuàng)傷性小、病死率低、模型成功率高以及術(shù)后不影響動(dòng)物的運(yùn)動(dòng)功能等優(yōu)點(diǎn)[50]。 研究者在探究RA 發(fā)病相關(guān)機(jī)制和臨床癥狀的同時(shí),更需對(duì)RA 模型從病理和免疫學(xué)方面進(jìn)行全方位的評(píng)估,同時(shí)還應(yīng)借助現(xiàn)代醫(yī)學(xué)影像技術(shù),提高觀察的準(zhǔn)確性和可靠性,為今后的RA 動(dòng)物模型的進(jìn)一步探討以及RA 的臨床治療藥物研究提供堅(jiān)實(shí)的理論依據(jù)。