王東俠，劉希贊，呂春穎，范 華，孫艷舫，楊淑蓮

(1.廊坊市中醫(yī)醫(yī)院，河北 廊坊 065000；2.中國(guó)中醫(yī)血液專(zhuān)病醫(yī)療中心，河北 廊坊 065000；3.楊淑蓮名中醫(yī)工作室，河北 廊坊 065000)

血小板雖沒(méi)有細(xì)胞核，但其復(fù)雜程度絲毫不遜色于任何有核細(xì)胞，近些年，隨著檢測(cè)儀器的發(fā)展，科研工作者可以很方便地對(duì)血小板相關(guān)參數(shù)進(jìn)行準(zhǔn)確測(cè)定，且血小板及其相關(guān)參數(shù)在心腦血管病[1-3]、糖尿病[4]、感染[5]、腫瘤[6]等諸多領(lǐng)域得到廣泛應(yīng)用。但血小板本身多形、多變，又易受外界因素影響，諸如儀器[7]、緩沖液、海拔、人種[8]、地域[9]、遺傳[10]等，需要深入研究血小板及其參數(shù)在參考人群中的分布情況，繼續(xù)沿用傳統(tǒng)的單一參考區(qū)間已不能滿(mǎn)足臨床實(shí)踐和研究的需求。為研究廊坊市漢族參考群體血小板參數(shù)的分布情況，同時(shí)建立本實(shí)驗(yàn)室血小板相關(guān)參數(shù)的參考范圍，我們采用多階段分層抽樣方法，隨機(jī)抽樣選取了289例參考個(gè)體的血常規(guī)數(shù)據(jù)，分析了血小板諸參數(shù)之間的關(guān)系以及隨增齡的變化模式，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

從2017-06—2018-08月間在廊坊市中醫(yī)院體檢的3 563例參考人群中隨機(jī)抽取298例作為研究對(duì)象，其中男142例，女156例；年齡10～95歲，中位年齡46歲；均為河北省廊坊市常住居民，漢族；排除有吸煙習(xí)慣、重度飲酒、高血脂、出凝血疾病、糖尿病、冠心病、高血壓、貧血、癌癥、慢性阻塞性肺病及慢性應(yīng)用藥物(服用苯妥英鈉，保泰松，磺胺類(lèi)，撲爾敏，氨基水楊酸，氯喹，維生素K，阿司匹林等藥物)、代謝綜合征、肝腎功能異常個(gè)體。

該研究于2017年1月獲得醫(yī)院倫理學(xué)委員會(huì)批準(zhǔn)，受試者或其親屬均簽署知情同意書(shū)。

1.2 實(shí)驗(yàn)儀器

采用Sysmex K-800i全自動(dòng)血液分析儀(西斯美康，日本)檢測(cè)血常規(guī)數(shù)據(jù)，由2名固定檢驗(yàn)技師操作，嚴(yán)格執(zhí)行質(zhì)控程序，保障實(shí)驗(yàn)批內(nèi)和批間精密度，污染物攜帶及重復(fù)性均在允許范圍內(nèi)。

1.3 方法

采用多階段分層方法抽取研究對(duì)象，每10歲為一層，10～90歲分8個(gè)層次，每層隨機(jī)抽取男、女各20例作為研究對(duì)象。抽取受試者清晨空腹、坐姿靜脈血1mL，EDTA-K2抗凝，18～20 ℃條件保存樣本，1～2 h內(nèi)完成檢測(cè)，Sysmex K-800i全自動(dòng)血液分析儀檢測(cè)血常規(guī)數(shù)據(jù)。應(yīng)用Epidata雙錄入建立數(shù)據(jù)庫(kù)，從血常規(guī)檢測(cè)結(jié)果中抽取白細(xì)胞、血紅蛋白、血小板計(jì)數(shù)(platelet count，PLT)、血小板壓積(plateletcrit，PCT)、血小板分布寬度(platelet distribution width，PDW)、平均血小板體積(mean platelet volume，MPV)、大血小板比例(large cell ratio，LCR)7項(xiàng)參數(shù)進(jìn)行分析。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

應(yīng)用SPSS 20.0完成統(tǒng)計(jì)分析，數(shù)據(jù)均進(jìn)行正態(tài)性檢驗(yàn)，定量數(shù)據(jù)采用均值和標(biāo)準(zhǔn)差描述，定性數(shù)據(jù)采用中位數(shù)和極差描述，參考范圍采用均值和95%CI表示，2組間定量數(shù)據(jù)比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，相關(guān)分析采用Pearson檢驗(yàn)，為排除性別和年齡影響，將性別和年齡納入相關(guān)模型采用偏相關(guān)分析控制混雜，顯著性水平選取α=0.05。

2 結(jié) 果

2.1 血常規(guī)一般情況

研究發(fā)現(xiàn)不同性別間白細(xì)胞[男：(6.50±1.51)×109/L & 女：(6.14±1.38)×109/L，P=0.036]和血紅蛋白(男：141.45±17.29 g·L-1& 女：131.64±12.04 g·L-1，P<0.001)含量不同，但不同性別間血小板計(jì)數(shù)[男：(45.97±214.61)×109/L & 女：(48.44±215.39)×109/L)]及其相關(guān)參數(shù)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

2.2 血小板參數(shù)間相關(guān)分析

血小板參數(shù)與年齡的單相關(guān)分析顯示，只有PLT和PCT與年齡存在負(fù)相關(guān)(PLT，r=-0.195，P=0.001；PCT，r=-0.174，P=0.003)，即隨著年齡增長(zhǎng)，PLT和PCT呈下降趨勢(shì)。

將年齡和性別作為控制因素，引入偏相關(guān)模型，進(jìn)行多因素分析，試圖剔除年齡和性別對(duì)分析結(jié)果的影響，進(jìn)一步計(jì)算血小板參數(shù)偏相關(guān)系數(shù)，發(fā)現(xiàn)PLT和PCT存在較強(qiáng)正相關(guān)(圖1A)，PDW、MPV和LCR存在較強(qiáng)正相關(guān)(圖1B)。PLT與PDW、MPV、LCR存在較弱負(fù)相關(guān)(P<0.05)，而PCT與PDW、MPV、LCR無(wú)相關(guān)性(P>0.05)。

圖1A PLT與PCT的相關(guān)性；圖1B PDW、MPV與LCR的相關(guān)性。

2.3 血小板相關(guān)參數(shù)與年齡的關(guān)系

數(shù)據(jù)顯示PLT和PCT隨年齡增長(zhǎng)逐漸降低，如圖2A、2B所示。因此，我們把受試者根據(jù)年齡分成8組，每組以10歲為限度。PLT和PCT隨增齡逐漸下降，基本趨勢(shì)符合線性關(guān)系(圖3A、3B)。PDW、MPV和LCR隨年齡增長(zhǎng)逐漸升高，但均在50～60年齡段達(dá)到峰值，隨后快速下降，呈現(xiàn)單峰分布(圖2C、2D、2E)，年齡和參數(shù)呈非線性關(guān)系。同期白細(xì)胞計(jì)數(shù)呈隨機(jī)性變化(圖2F)。

注：橫坐標(biāo)為年齡分組，縱坐標(biāo)以均值和95%可信區(qū)間CI表示。

3 討 論

血小板是骨髓內(nèi)巨核細(xì)胞脫落的胞質(zhì)片段，平均壽命約10 d，主要功能是參與血液凝固。近年來(lái)，血小板衍生參數(shù)的臨床探索逐漸開(kāi)展，越來(lái)越多的內(nèi)科醫(yī)生認(rèn)識(shí)到衍生參數(shù)的重要意義，了解血小板參數(shù)在參考人群的分布特點(diǎn)，并逐步建立參數(shù)的參考范圍以輔助臨床進(jìn)行診療決策。

我們首先研究了血小板各參數(shù)間的相關(guān)關(guān)系，發(fā)現(xiàn)在平衡了性別和年齡后，各參數(shù)間依舊存在較強(qiáng)的偏相關(guān)關(guān)系，其中PLT和PCT呈高度正相關(guān)，PDW、MPV和LCR呈較強(qiáng)的正相關(guān)。通常儀器計(jì)算的總血小板計(jì)數(shù)是指3～30 fL的血小板計(jì)數(shù)，而大血小板比例中的巨大血小板指24～26 fL的血小板[11]。當(dāng)巨大血小板比例升高時(shí)，血小板平均體積就會(huì)增加，離散度也加大，從而導(dǎo)致PDW增加。

研究參考人群血小板計(jì)數(shù)的文獻(xiàn)[8]提示，諸多因素會(huì)影響其數(shù)值，其中年齡和性別是廣泛關(guān)注的2個(gè)因素。雖然近期研究[12]顯示不同性別的血小板計(jì)數(shù)不同，但同時(shí)也有學(xué)者提出質(zhì)疑[13]，認(rèn)為關(guān)于性別的報(bào)告結(jié)果互相矛盾，較大宗的病例報(bào)告也顯示兒童期不同性別的PLT沒(méi)有區(qū)別[14]。我們的研究結(jié)果也未發(fā)現(xiàn)性別差異，但是否與每個(gè)年齡組樣本含量不足有關(guān)，有待后續(xù)研究。

多數(shù)研究認(rèn)為PLT隨年齡增長(zhǎng)而降低[14-16]，一項(xiàng)納入4萬(wàn)多例健康者的大宗研究顯示，75歲以上老年人的PLT相對(duì)于5歲以下的兒童，男性PLT降低35%，女性降低25%。甚至有學(xué)者[16]提出，高齡老年人輕度的PLT降低也許是生理性改變。血小板計(jì)數(shù)下降速度是不均勻的，大約半數(shù)的PLT下降發(fā)生在0～10歲，15～50歲PLT下降緩慢，超過(guò)50歲以后速度加快，但要慢于兒童期[14]。我們的研究顯示，80歲以上的老年人較10～20歲的年輕人PLT平均降低15%，低于國(guó)外的報(bào)道[14]，可能是由于我們沒(méi)有納入血小板降低顯著的10歲以下的兒童群體。國(guó)外研究數(shù)據(jù)顯示[15-16]，每10年P(guān)LT平均下降9×109/L，我們的研究結(jié)果是每10年平均下降5×109/L。國(guó)外研究[14]顯示整體PLT隨年齡增長(zhǎng)而下降，在50歲時(shí)出現(xiàn)微弱的逆向升高表現(xiàn)，雖然尚不清楚具體原因，但該現(xiàn)象與我們的研究一致。

PLT、PCT與年齡呈線性負(fù)相關(guān)，但MPV隨年齡增長(zhǎng)逐漸增大[17]，很容易使有些學(xué)者將MPV增大與增齡導(dǎo)致的動(dòng)脈硬化關(guān)聯(lián)起來(lái)[18-19]，但如果試圖以此解釋MPV隨增齡而增加略顯牽強(qiáng)，MPV與年齡并非簡(jiǎn)單的線性正相關(guān)關(guān)系。本研究顯示MPV、LCR、PDW高度相關(guān)的3個(gè)參數(shù)隨增齡呈現(xiàn)一種典型的非線性分布特征，即在廊坊漢族參考人群中，上述參數(shù)隨受試者年齡增長(zhǎng)而緩慢增大，50～60歲時(shí)達(dá)到峰值，隨后迅速下降。國(guó)外研究[14]由于年齡覆蓋面不足(研究組最大年齡65歲)，所以只能看到MPV等隨年齡增加而增大的部分結(jié)果。本研究通過(guò)嚴(yán)格的對(duì)象篩選和科學(xué)抽樣，以最低限度的樣本量實(shí)現(xiàn)最大限度的年齡段覆蓋，最終報(bào)告MPV、LCR、PDW高度相關(guān)的3個(gè)血小板參數(shù)隨增齡呈現(xiàn)右側(cè)偏鋒分布，即MPV、LCR、PDW到60歲以后會(huì)下降，這種現(xiàn)象也是MPV與動(dòng)脈硬化關(guān)聯(lián)無(wú)法解釋的。

雖然我們通過(guò)前瞻性設(shè)計(jì)嚴(yán)格控制了多種混雜因素(如吸煙)[20]，但MPV總體水平仍略高于國(guó)外。新近研究顯示[21]肥胖會(huì)影響MPV，但研究中我們并未嚴(yán)格要求受試者的BMI，推測(cè)該原因可導(dǎo)致MPV數(shù)值略高。血小板參數(shù)表型分布特征是遺傳和環(huán)境共同作用的結(jié)果，MPV等隨年齡變化，具體原因尚待進(jìn)一步研究。

早期對(duì)血小板的分類(lèi)主要基于大小和密度，這種分類(lèi)方法一度被認(rèn)為與年齡相關(guān)?，F(xiàn)代研究人員提出了血小板亞群的理念，新的分類(lèi)理念不僅基于物理，更多基于化學(xué)、代謝功能層面的不同[22]。已有研究結(jié)果[23]表明，即使在最大限度激活的情況下，血小板依舊可以穩(wěn)定分成3群，而每群血小板體積不同，推測(cè)具有不同的功能，質(zhì)譜流式的加入使得分群工作更加順利[24]。不同大小的血小板可能具有完全不同的功能，血小板的體積和功能相關(guān)的這種假說(shuō)也為輸血醫(yī)學(xué)帶來(lái)了新的希望，或許在不久的將來(lái)，我們可以根據(jù)需要選擇體積大小適合的血小板亞群進(jìn)行輸注[25]。

通過(guò)對(duì)廊坊市漢族人群的血小板參數(shù)隨增齡分布特征的研究，建立了血小板相關(guān)參數(shù)不同年齡組的參考范圍，為血小板減少性疾病的臨床診斷、治療和病情監(jiān)測(cè)奠定了基礎(chǔ)，有助于提高臨床診治效率，對(duì)血小板參數(shù)的基礎(chǔ)研究及臨床實(shí)踐都具有積極意義。