劉秀珠，李程豪，王燕如，周嘯天，李玲，武兵兵，鄧志強(qiáng)，張志明，靳曉杰，李佳蔚*，劉永琦*

(1.甘肅中醫(yī)藥大學(xué)，甘肅 蘭州 730000；2.甘肅省高校重大疾病分子醫(yī)學(xué)與中醫(yī)藥防治研究省級(jí)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，甘肅 蘭州 730000；3.甘肅中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院,甘肅 蘭州 730000)

0 引言

2019 年12 月以來(lái)，湖北省武漢市陸續(xù)發(fā)現(xiàn)多例不明原因肺炎患者，我國(guó)科學(xué)家通過(guò)對(duì)肺炎患者的樣本測(cè)序，確認(rèn)該肺炎是由一種新型冠狀病毒引起[1]。隨后的一個(gè)多月以來(lái)，病毒廣泛傳播，我國(guó)其他地區(qū)及境外也相繼發(fā)現(xiàn)了此類病例。2 月11日，國(guó)際病毒委員會(huì)將該病毒命名為SARS-CoV-2(Severe Acute Respiratory Syndrome Coronavirus 2)，其所引起的疾病被世界衛(wèi)生組織命名為COVID-19(Corona Virus Disease 2019)[2]。該病毒傳染性強(qiáng)，主要經(jīng)過(guò)感染患者或無(wú)癥狀感染者傳播，人群普遍易感，經(jīng)呼吸道飛沫和密切接觸傳播，氣溶膠和消化道傳播尚待明確[3]。冠狀病毒(CoV)是導(dǎo)致呼吸道傳播高致病性傳染病爆發(fā)的主要病原體，屬于巢狀病毒目、冠狀病毒科、冠狀病毒屬。冠狀病毒為單股正鏈RNA 病毒，有包膜，包膜上存在棘突，整個(gè)病毒像日冕，不同的冠狀病毒的棘突有明顯的差異，包括包膜S蛋白、M 蛋白、E 蛋白及核衣殼N 蛋白四種結(jié)構(gòu)蛋白。到目前為止，已發(fā)現(xiàn)能感染人的冠狀病毒有7 種，分別是人冠狀病毒229E(HCoV-229E) 和人冠狀病毒NL63 (HCoV-OC43) 、人冠狀病毒HKU1(HCoV-HKU1)、嚴(yán)重急性呼吸綜合征病毒(SARS-CoV)、中東呼吸綜合癥病毒(MERS-CoV)和新型冠狀病毒(SARSCoV-2)。其中HCoV-229E、HCoV-NL63、HCoV-OC43 和HCoVHKU1 引起的呼吸道癥狀輕，類似普通感冒。近年來(lái)陸續(xù)出現(xiàn)的SARS-CoV、MERS-CoV 及SARS-CoV-2，可引起嚴(yán)重呼吸系統(tǒng)疾病，傳染性強(qiáng)，致死率高，在世界范圍內(nèi)大規(guī)模流行，對(duì)社會(huì)生產(chǎn)、經(jīng)濟(jì)和全球旅行產(chǎn)生重大影響，對(duì)全世界的健康形勢(shì)具有嚴(yán)峻挑戰(zhàn)。因此，建立快速有效的病毒檢測(cè)手段，及早識(shí)別患者，對(duì)防治冠狀病毒的大流行至關(guān)重要。本文將從樣本采集與病毒分離、實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)等方面對(duì)高致病性人冠狀病毒做一概述。

1 CoV 相關(guān)試驗(yàn)樣本采集及提取

1.1 檢測(cè)樣本的采集

適當(dāng)?shù)臉颖静杉窃\斷疾病的前提，需要掌握各種樣本病毒動(dòng)力學(xué)和癥狀出現(xiàn)以來(lái)的時(shí)間關(guān)系。研究表明，呼吸道標(biāo)本中的SARS-CoV、MERS-CoV 病毒載量在癥狀發(fā)作后第二周達(dá)高峰[4-5]。若流行病學(xué)提示有SARS-CoV、MERS-CoV 及SARS-CoV-2，患者在癥狀出現(xiàn)后不久檢測(cè)為陰性，應(yīng)反復(fù)檢測(cè)。不同部位的標(biāo)本，病毒載量不同，下呼吸道標(biāo)本(深咳痰液、呼吸道抽取物、支氣管灌洗液、肺泡灌洗液、肺組織活檢標(biāo)本)病毒RNA 高于上呼吸道標(biāo)本(鼻拭子、咽拭子、鼻咽抽取物)病毒RNA。血液標(biāo)本建議病人空腹，用真空采血管采集急性期的抗凝全血或急性期、恢復(fù)期的雙份血清[6]。

1.2 CoV 檢測(cè)樣本核酸提取

根據(jù)各核酸提取試劑盒的要求及實(shí)驗(yàn)室條件的不同，磁珠法、離心柱法、煮沸裂解法及一步裂解法等均有在臨床應(yīng)用，不同的核酸提取方法對(duì)RNA 保護(hù)程度提取濃度、純度不同，可影響病毒核酸檢出。不同部位臨床標(biāo)本在提取核酸前需做相應(yīng)處理，其中，痰液由于黏液濃度較大，在進(jìn)行核酸分離之前需進(jìn)行痰液勻漿，用蛋白酶-K-DNase(PK-DNase)、磷酸鹽緩沖液(PBS)和N-乙酰半胱氨酸檸檬酸鈉(NALC)三種痰勻漿方法提取有MERS 病毒株的痰液樣本，提示PK-DNase 法適用于RNA 提取前痰標(biāo)本的勻漿[7]。糞便標(biāo)本則需生理鹽水預(yù)處理制備糞便混懸液，取上清后用核酸提取試劑盒提取核酸。鼻咽拭子、肺泡灌洗液、血液、尿液等標(biāo)本可直接用試劑盒提取核酸。

2 病毒分離培養(yǎng)

病毒分離培養(yǎng)為實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)鑒定病毒的“金標(biāo)準(zhǔn)”，包括病毒的分離、培養(yǎng)、滴定、中和實(shí)驗(yàn)、活病毒及其蛋白的純化、病毒凍干以及產(chǎn)生活病毒的重組實(shí)驗(yàn)等操作，利用活病毒或其感染細(xì)胞(或細(xì)胞提取物)，不經(jīng)滅活進(jìn)行的生化分析、血清學(xué)檢測(cè)、免疫學(xué)檢測(cè)等操作視同病原培養(yǎng)。上述操作應(yīng)在生物安全三級(jí)(BSL-3)實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行。使用病毒培養(yǎng)物提取核酸，裂解劑或滅活劑的加入必須在與病毒培養(yǎng)等同條件的實(shí)驗(yàn)室或防護(hù)條件下進(jìn)行。滅活后的病毒培養(yǎng)物可在BSL-2 或BSL-1 實(shí)驗(yàn)室操作[3]。

SARS-CoV 在VreoE6 細(xì)胞中培養(yǎng)，引起明顯細(xì)胞病變，對(duì)分離的病原體進(jìn)行鑒定，確定為新的冠狀病毒[8]。MERS-CoV對(duì)宿主細(xì)胞的嗜性較廣，可在支氣管上皮細(xì)胞系Calu-3、胚胎腎細(xì)胞系HEK、胚胎成纖維細(xì)胞系HFL、肺腺癌細(xì)胞系A(chǔ)549、結(jié)直腸腺癌細(xì)胞系Caco-2、肝癌細(xì)胞系Huh-7 及惡性組織細(xì)胞瘤細(xì)胞系His-1 中觀察到明顯的細(xì)胞病變，且生長(zhǎng)速度快[9]。CAVID-19 患者的肺泡灌洗液接種在肺癌術(shù)后患者的氣道上皮細(xì)胞中或特殊致病性的人氣道上皮細(xì)胞(HAE)進(jìn)行分離培養(yǎng)，觀察到起明顯細(xì)胞病變，最終鑒定為SARS-CoV-2[10-11]。病毒培養(yǎng)在發(fā)現(xiàn)病毒、發(fā)病機(jī)制研究及疫苗研制具有重要意義，但病毒培養(yǎng)周期長(zhǎng)，需在BSL-3 實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行，使其在臨床診斷中應(yīng)用受限。

3 分子生物學(xué)檢測(cè)

傳統(tǒng)的檢測(cè)方法(病毒分離)費(fèi)時(shí)費(fèi)力，且分離陽(yáng)性率低，往往會(huì)延誤病程和疫情的控制。分子生物學(xué)診斷方法可以在急性期檢測(cè)到病毒，并且快速靈敏，可從患者的呼吸道分泌物、血液、糞便等多種標(biāo)本中檢測(cè)到冠狀病毒核酸，目前已被廣泛應(yīng)用于病毒的檢測(cè)。以下為常見(jiàn)分子生物學(xué)檢測(cè)方法。

3.1 基因測(cè)序

病毒的基因組測(cè)序是研究病毒進(jìn)化及毒力變異的基礎(chǔ)，能夠識(shí)別病原體，使人們對(duì)新型傳染病的爆發(fā)做出快速反應(yīng)并制定防治措施。我國(guó)科學(xué)家用二代測(cè)序技術(shù)對(duì)SARS-CoV-2 感染早期的5 名患者標(biāo)本全基因組進(jìn)行了測(cè)序，通過(guò)對(duì)7 個(gè)保守的非結(jié)構(gòu)蛋白序列進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)SARS-CoV-2 與SARS-CoV序列同源性為79.5%[12]?；跀?shù)據(jù)共享，通過(guò)建立的2019 新型冠狀病毒信息庫(kù)及向世界衛(wèi)生組織提供測(cè)病毒基因組測(cè)序信息[13]，為不同國(guó)家研發(fā)檢測(cè)新冠病毒試劑盒、抗病毒藥物及疫苗設(shè)計(jì)等提供支持。

3.2 逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)

冠狀病毒為單股正鏈RNA 病毒，病毒中特異性RNA 序列是識(shí)別相應(yīng)病毒的標(biāo)志物。臨床檢測(cè)中，若在患者樣本中檢測(cè)到致病病毒的特異性核酸序列，則該患者可能被確診為相應(yīng)病毒感染。首先經(jīng)反轉(zhuǎn)錄從病毒RNA 合成cDNA,再以cDNA為模板，擴(kuò)增合成病毒基因。RT-PCR 是將反轉(zhuǎn)錄(RT)與模板DNA(cDNA)的聚合酶鏈?zhǔn)綌U(kuò)增相結(jié)合的技術(shù)。此檢測(cè)方法可在出現(xiàn)臨床癥狀后3 天的SARS 患者的痰中檢測(cè)出SARS冠狀病毒基因[14]。其中逆轉(zhuǎn)錄-絕熱等溫逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-iiPCR)、實(shí)時(shí)定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(qRT-PCR)、實(shí)時(shí)逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(rtRT-PCR)及一步法RT-PCR 均為RTPCR 的進(jìn)一步優(yōu)化[15-18]。

目前最常用的是實(shí)時(shí)熒光RT-PCR 法，該方法快速簡(jiǎn)便，成本相對(duì)較低，在臨床中廣泛使用。新冠病毒檢測(cè)PCR 試劑盒當(dāng)前主要分為兩大類，一類為雙重檢測(cè)實(shí)時(shí)熒光RT-PCR 試劑盒，檢測(cè)新冠病毒RNA 聚合酶(RdRp)基因及N 基因，另一類為三重檢測(cè)實(shí)時(shí)熒光RT-PCR 試劑盒，檢測(cè)RdRp 基因、N 基因及E 基因。RT-PCR 檢測(cè)不受病毒培養(yǎng)的限制，所需時(shí)間相對(duì)短，容易在實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)，在早期診斷中占重要作用。但不能準(zhǔn)確定量，且操作過(guò)程中易污染而使得假陽(yáng)性率高，病毒載量低的樣本可能出現(xiàn)假陰性結(jié)果等缺點(diǎn)使其使用受限。實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR 法靈敏度高，特異性好，但檢測(cè)時(shí)間較長(zhǎng)，設(shè)備投入大，且對(duì)操作要求高，使缺乏RT-PCR 專業(yè)知識(shí)和設(shè)備的地區(qū)病原診斷難以實(shí)現(xiàn)。除了確診外，RT-PCR 在疾病流行期間還被用于實(shí)現(xiàn)其他一些重要的目的，包括疾病接觸者追蹤、確定不同樣本中病毒的脫落模式、根據(jù)不同病毒RNA 載量預(yù)測(cè)疾病嚴(yán)重程度和體內(nèi)外抗病毒及疫苗評(píng)價(jià)研究等方面。

3.3 其他分子檢測(cè)技術(shù)

逆轉(zhuǎn)錄環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增(RT-LAMP)是一種檢測(cè)MERSCoV N 基 因 和ORF1a 基 因 的RNA 擴(kuò) 增 技 術(shù)[19]，RT-LAMPVF 是將RT-LAMP 垂直流動(dòng)顯示條帶相組合，是RT-LAMP 的變形[20]，One-pot 逆轉(zhuǎn)錄環(huán)介導(dǎo)的等溫?cái)U(kuò)增是優(yōu)化后的RTLAMP[21]，兩者都被用于檢測(cè)MERS-CoV 的N 基因。除了以上三種方法外，還有逆轉(zhuǎn)錄等溫重組酶聚合酶擴(kuò)增(RT-RPA)及逆轉(zhuǎn)錄重組酶介導(dǎo)檢測(cè)方法(RT-RAA)均為針對(duì)MERS-CoV檢測(cè)，RT-RPA 是一種新型的等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)，針對(duì)MERS-CoV的N 基因檢測(cè)，等溫(42℃)、快速(3-7min)，是急性患者快速流動(dòng)分子MERS-CoV 監(jiān)測(cè)的理想方法，與實(shí)時(shí)RT-PCR 同樣敏感[22]。而逆轉(zhuǎn)錄重組酶介導(dǎo)檢測(cè)方法(RT-RAA)，設(shè)計(jì)、合成特異性MERS-CoV 基因的重組酶介導(dǎo)檢測(cè)(RAA)引物及探針，采用首例中國(guó)MERS-CoV 韓國(guó)地區(qū)輸入病例的咽拭子樣品、其它類似呼吸道病毒樣本以及英國(guó)QCMD 的MERS-CoV 室間質(zhì)評(píng)滅活樣本做臨床驗(yàn)證，結(jié)果顯示建立的RT-RAA 方法靈敏度、檢測(cè)時(shí)間等均低于熒光RT-PCR。用該方法檢測(cè)MERS-CoV顆粒為陽(yáng)性，而檢測(cè)其他8 種對(duì)照呼吸道病毒均呈陰性，檢測(cè)臨床陽(yáng)性樣本也與實(shí)際結(jié)果相符。RT-RAA 檢測(cè)MERS-CoV的方法靈敏、特異、快速，可用于MERS-CoV 現(xiàn)場(chǎng)快速診斷及流行病學(xué)調(diào)查[23]。

LAMP 技術(shù)促進(jìn)了便攜式醫(yī)療點(diǎn)診斷的發(fā)展，對(duì)新出現(xiàn)的感染管理至關(guān)重要，對(duì)核酸分子進(jìn)行擴(kuò)增檢測(cè)時(shí)不需要不同溫度下的變化環(huán)節(jié)，靈敏度高，簡(jiǎn)便快速，成本低?？捎迷诂F(xiàn)場(chǎng)診斷，同時(shí)適合缺乏RT-PCR 專業(yè)知識(shí)和設(shè)備地區(qū)的病原診斷。

但是易形成非特異性擴(kuò)增而導(dǎo)致假陽(yáng)性結(jié)果，使其在臨床使用受限，需要繼續(xù)改進(jìn)。

4 CoV 免疫學(xué)檢測(cè)

4.1 CoV 抗原檢測(cè)

人冠狀病毒抗原檢測(cè)主要針對(duì)病毒的結(jié)構(gòu)蛋白，制備相應(yīng)結(jié)構(gòu)蛋白的單抗或多抗，運(yùn)用雙抗體夾心技術(shù)、電化學(xué)標(biāo)記等技術(shù)檢測(cè)標(biāo)本中病毒抗原。研究者對(duì)317 例嚴(yán)重急性呼吸系統(tǒng)綜合癥(SARS)患者的血清樣本進(jìn)行了SARS-CoV N 蛋白檢測(cè)，結(jié)果提示分別在發(fā)病后5 天和6-10 天的敏感性分別為94%和78%，特異性為99.9%，N 蛋白可作為SARS 的早期診斷指標(biāo)[24]?；瘜W(xué)發(fā)光法結(jié)合的單抗，檢測(cè)感染SARS-CoV 患者鼻咽抽吸液中的N 蛋白，同時(shí)檢測(cè)了18 份陽(yáng)性標(biāo)本和20 份陰性標(biāo)本，發(fā)現(xiàn)其敏感性和特異性均達(dá)到100%，并與CoV-229E、CoVNL63、CoV-OC43 的重組N 蛋白無(wú)交叉反應(yīng)[25]。目前常用的檢測(cè)MERS 的抗原大多基于MERS-CoV N 抗原。研究者設(shè)計(jì)的針對(duì)MERS-CoV 蛋白的特異性單克隆抗體被用來(lái)證明MERSCoV 存在于組織中，亦可用在檢測(cè)呼吸道標(biāo)本中MERS-CoV 的N 蛋白檢測(cè)[26]。

抗原檢測(cè)方法的主要優(yōu)點(diǎn)是所需時(shí)間短、易于使用，可以即時(shí)檢驗(yàn)(POCT)，并在生物安全箱內(nèi)進(jìn)行，只需要培訓(xùn)較少的實(shí)驗(yàn)室人員。但其靈敏度低于核酸擴(kuò)增檢測(cè)，目前尚未在人類標(biāo)本中徹底驗(yàn)證，多用于尸體標(biāo)本及動(dòng)物模型的組織學(xué)檢查。

表1 SARS-CoV-2、MERS-CoV 和SARS-CoV 分子檢測(cè)比較

4.2 血清抗體檢測(cè)

血清抗體檢測(cè)方法包括酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)、熒光免疫法(IFA)、中和試驗(yàn)(PRNT)、蛋白印跡法(WB)及免疫層析法(ICA)等。在冠狀病毒感染過(guò)程中機(jī)體先后產(chǎn)生特異性IgM、IgG 抗體。有研究報(bào)道，SARS 感染后在血清中3-6 天可檢測(cè)到IgM 抗體，8 天后可檢測(cè)到IgG 抗體[27-28]。理論中IgM 滴度比IgG 高，但從SARS、MERS 患者的血清檢測(cè)來(lái)看，兩者之間的時(shí)間差距太短，且IgM 與其他冠狀病毒間容易存在非特異性陽(yáng)性交叉反應(yīng)，標(biāo)本制備復(fù)雜，IgM 沒(méi)有太大的臨床價(jià)值。因此在世界衛(wèi)生組織及美國(guó)防控中心公布的MERS 診斷標(biāo)準(zhǔn)中不包括MERS 特異性IgM 檢測(cè)。

病毒血清學(xué)檢測(cè)準(zhǔn)確性的一個(gè)主要影響因素是抗原來(lái)源。對(duì)于符合病毒培養(yǎng)的生物安全三級(jí)實(shí)驗(yàn)室(BSL-3)，病毒感染細(xì)胞是最方便的抗原來(lái)源，但需要可靠的方法來(lái)滅活培養(yǎng)提取物中的活病毒。此外，這種方法獲取的抗原被證明與其他冠狀病毒存在交叉反應(yīng)。而重組抗原為病毒特異性抗原，且比較安全，所以被用于多種血清抗體檢測(cè)。國(guó)內(nèi)研究者設(shè)計(jì)側(cè)向流動(dòng)免疫層析檢測(cè)法(IFLA)，15 分鐘內(nèi)可同時(shí)檢測(cè)SARS-CoV-2 病毒的IgM 和IgG 抗體，該方法基于SARS-CoV-2 S 蛋白的重組抗原同時(shí)檢測(cè)指尖血、血清和靜脈血中SARS-CoV-2 病毒的IgM 和IgG 抗體，總體檢測(cè)敏感性為88.66%，特異性為90.63%，且三種血液樣品檢測(cè)結(jié)果具有較高一致性，使用便捷、快速，在床旁檢測(cè)指尖血便可檢測(cè)病毒抗體，促進(jìn)了便攜式檢測(cè)的發(fā)展。但是血清學(xué)檢測(cè)不能確定病毒存在，只能提示近期有病毒感染，此外血清學(xué)檢測(cè)可能存在與其他冠狀病毒或流感病毒存在交叉反應(yīng)。由于各種血清學(xué)檢測(cè)方法的不足，針對(duì)MERS 的血清學(xué)診斷，世界衛(wèi)生組織建議使用ELISA 或基于IFA 的篩選實(shí)驗(yàn)，然后使用特異性中和試驗(yàn)對(duì)陽(yáng)性血清進(jìn)行驗(yàn)證篩選。美國(guó)疾病防控中心在MERS 的診斷中則采用兩階段的方法，首先用ELISA 對(duì)IgG 檢測(cè)，然后使用IFA 進(jìn)行驗(yàn)證性檢測(cè)，在ELISA 陽(yáng)性、IFA 不確定的血清上進(jìn)行微量中和反應(yīng)，以獲得最終結(jié)果。

膠體金法是將特異性的抗原或抗體以條帶狀固定在膜上，膠體金標(biāo)記試劑(抗體或單克隆抗體)吸附在結(jié)合墊上，待檢物與金標(biāo)試劑的結(jié)合物又與之發(fā)生特異性結(jié)合可通過(guò)肉眼觀察到顯色結(jié)果。免疫膠體金技術(shù)操作方便，所需時(shí)間短，可用于現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)，基層醫(yī)療單位也可使用。目前國(guó)家已審批通過(guò)了萬(wàn)孚生物等研發(fā)用于SARS-CoV-2 的IgM 和IgG 抗體的膠體金試劑(免疫層析法)，將有益于新冠病毒感染的輔助診斷、接觸者追蹤及人與動(dòng)物的流行病學(xué)調(diào)查。

表2 SARS-CoV-2、MERS-CoV 和SARS-CoV 免疫學(xué)檢測(cè)

在癥狀出現(xiàn)后的早期，免疫學(xué)方法難以檢測(cè)到相應(yīng)病毒抗原或抗體，因此免疫學(xué)檢測(cè)不能用于早期診斷，且一些測(cè)定可能顯示與其他CoV 的交叉反應(yīng)，需要驗(yàn)證性測(cè)定。但免疫學(xué)檢測(cè)可用在癥狀出現(xiàn)較晚的輕度或無(wú)癥狀患者恢復(fù)期的血清IgG抗體檢測(cè)中，且在傳染病爆發(fā)期間的回顧性診斷、對(duì)接觸者進(jìn)行追蹤及對(duì)人和動(dòng)物的血清流行病學(xué)研究方面具有重要意義。

5 討論與展望

SARS-CoV-2、MERS-CoV 和SARS-CoV 都屬于動(dòng)物源性冠狀病毒，其自然宿主都可能是蝙蝠，但在流行和基因突變方面，還存在各自的特性。首先，SARS-CoV 是非自然起源，無(wú)儲(chǔ)存宿主庫(kù)，在不到一年時(shí)間很快消失。MERS-CoV 有天然動(dòng)物儲(chǔ)存庫(kù)(如單峰駱駝)，從發(fā)病持續(xù)至今以及可能會(huì)存在較長(zhǎng)時(shí)間，其高致死率令人擔(dān)憂。而SARS-CoV-2 目前尚未發(fā)現(xiàn)中間宿主，其傳染性強(qiáng)，目前在全球范圍內(nèi)傳播，對(duì)公共健康構(gòu)成了巨大威脅。目前針對(duì)SARS-CoV-2 感染尚沒(méi)有疫苗及特異性抗病毒治療，因此早期診斷并及時(shí)管控至關(guān)重要。

SARS-CoV-2、MERS-CoV 和SARS-CoV 等病毒的出現(xiàn)說(shuō)明新的傳染病可能不斷出現(xiàn)，將成為人類健康的主要威脅?？箵粢咔樽钪匾氖窃缙谧R(shí)別病原體，信息共享、有效控制感染。實(shí)驗(yàn)室在發(fā)現(xiàn)病原體、診斷受感染患者方面發(fā)揮重要作用，目前有多種實(shí)驗(yàn)室方法用于檢測(cè)SARS-CoV-2，分子生物學(xué)診斷技術(shù)特異性高，核酸檢測(cè)在實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)技術(shù)中應(yīng)用較為廣泛，且快速精確。免疫學(xué)檢測(cè)方法操作簡(jiǎn)便，在工作中易于推廣。在臨床實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)中建議多種檢測(cè)技術(shù)相結(jié)合以提高檢測(cè)病毒的能力，協(xié)助臨床診斷疾病。