孫忠人，盧英琦，胡其回，張 淼，尹洪娜△

（1.黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)，黑龍江 哈爾濱 150040；2.黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)附屬第二醫(yī)院，黑龍江 哈爾濱150001）

脊髓損傷（spinal cord injury，SCI）是世界范圍內(nèi)常見的具有高度致死性和致殘性的中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病[1]，包括原發(fā)性機(jī)械損傷和由復(fù)雜病理生理改變介導(dǎo)的繼發(fā)性損傷。據(jù)統(tǒng)計(jì)，每年SCI全球發(fā)病人數(shù)高達(dá)25～50萬(wàn)[2]。目前SCI主要治療方法包括手術(shù)、藥物、激素治療、行為治療、物理治療等[3-6]，但由于這些療法存在潛在并發(fā)癥以及本病復(fù)雜的病理生理學(xué)特點(diǎn)，使越來(lái)越多脊髓損傷患者開始選擇針灸等替代療法[7]。

SCI分子和生化改變與水腫、缺血、細(xì)胞凋亡、微循環(huán)障礙、膠質(zhì)瘢痕形成、炎癥反應(yīng)等密切相關(guān)[8-9]，對(duì)損傷后的微環(huán)境造成嚴(yán)重的后果，而這對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)再生過程至關(guān)重要。既往臨床研究表明，電針作為針灸特色療法的一種，在對(duì)脊髓損傷及其并發(fā)癥治療中，包括運(yùn)動(dòng)障礙、神經(jīng)性疼痛、痙攣、脊髓空洞癥等，療效顯著，有助于患者遠(yuǎn)期神經(jīng)和功能恢復(fù)[10-13]，為臨床應(yīng)用提供了循證依據(jù)。日前，業(yè)內(nèi)在探討電針對(duì)脊髓損傷潛在分子機(jī)制的影響方面，爭(zhēng)論激烈，各種假說林立紛繁，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)系驗(yàn)證其具體發(fā)病機(jī)理的關(guān)鍵鎖鑰?，F(xiàn)通過對(duì)電針治療脊髓損傷動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究文獻(xiàn)總結(jié)分析，探求電針療法作用靶點(diǎn)，為臨床診治、選穴提供穩(wěn)固依據(jù)，并對(duì)電針治療SCI的機(jī)制研究進(jìn)行展望。

1 資料與方法

1.1 檢索方式 選用近5年中國(guó)知識(shí)資源總庫(kù)（中國(guó)知網(wǎng)，CNKI）、萬(wàn)方數(shù)據(jù)、維普網(wǎng)及 PubMed、Web of Science中發(fā)表的有關(guān)單純電針為主要治療方案治療脊髓損傷動(dòng)物模型方面的實(shí)驗(yàn)研究文獻(xiàn)。在檢查篩選時(shí)，采用主題詞和自由詞結(jié)合的檢索方式。中文檢索詞分別為“脊髓損傷”“截癱”“電針”“電針療法”“動(dòng)物模型”“實(shí)驗(yàn)研究”等，英文檢索詞為“spinal cord injury”“paraplegia”“electroacupuncture”“animal model”“experimental study”等。

1.2 納入標(biāo)準(zhǔn) ①文獻(xiàn)發(fā)表年限為2016年6月1日至2021年4月1日；②研究類型為動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究文獻(xiàn)，文種限中文、英文；③干預(yù)措施為單純電針的治療方式為主療法。

1.3 排除標(biāo)準(zhǔn) ①個(gè)人經(jīng)驗(yàn)總結(jié)、研究進(jìn)展、文獻(xiàn)綜述、臨床實(shí)驗(yàn)的文獻(xiàn)；②全文不完整文獻(xiàn)；③沒有采用電針治療或存在2種以上干預(yù)措施的文獻(xiàn)；④碩博士學(xué)位論文及會(huì)議論文；⑤無(wú)具體觀察指標(biāo)；⑥重復(fù)發(fā)表的臨床研究，納入文獻(xiàn)質(zhì)量較高的1篇；⑦采用功能性核磁共振、正電子發(fā)射計(jì)算機(jī)斷層顯像（PET）的方法觀察針刺治療脊髓損傷動(dòng)物模型效應(yīng)的文獻(xiàn)。

1.4 文獻(xiàn)篩選結(jié)果 根據(jù)上述檢索詞檢索后共得到相關(guān)文獻(xiàn)422篇，剔除不相干和重復(fù)文獻(xiàn)139篇后，依據(jù)納排標(biāo)準(zhǔn)對(duì)剩余文獻(xiàn)進(jìn)行詳細(xì)閱讀總結(jié)后，共納入23篇相關(guān)文獻(xiàn)，其中中文17篇，英文6篇。

2 結(jié)果

經(jīng)研究結(jié)果統(tǒng)計(jì)顯示，電針治療SCI動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究腧穴配伍頻率最高的為大椎-命門及夾脊穴，出現(xiàn)頻次前兩位的分別為大椎、夾脊穴。針刺干預(yù)SCI作用機(jī)制主要為抑制炎癥反應(yīng)、改善微循環(huán)、抑制細(xì)胞凋亡、促進(jìn)髓鞘再生作用等方面。結(jié)果見表1。

表1 針灸治療SCI的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究匯總

3 電針治療脊髓損傷作用機(jī)制

3.1 電針抑制炎癥反應(yīng) SCI中的炎癥反應(yīng)具有雙向保護(hù)和損傷作用，波及到神經(jīng)與免疫兩大系統(tǒng)[37]，受微環(huán)境局部軸突再生和損傷神經(jīng)元修復(fù)限制、血-脊髓屏障破壞、外周血白細(xì)胞與先天免疫細(xì)胞（小膠質(zhì)和星形膠質(zhì)細(xì)胞）共同作用，在數(shù)小時(shí)內(nèi)上調(diào)TNF-α、IL-1β、IL-6 等促炎因子濃度，這些介質(zhì)對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)細(xì)胞產(chǎn)生細(xì)胞毒作用，導(dǎo)致小膠質(zhì)細(xì)胞和巨噬細(xì)胞脫髓鞘和神經(jīng)元丟失[38-39]。電針夾脊穴可以調(diào)控嘌呤受體P2X7（P2X7R）和核苷酸結(jié)合寡聚化結(jié)域樣受體蛋白3（NLRP3）炎癥小體表達(dá)，進(jìn)而阻斷炎癥因子IL-1β和IL-18釋放[14]，調(diào)節(jié)高遷移率族蛋白B1（HMGB1）、Toll樣受體 4（TLR4）水平[17]，下調(diào) Caspase-1、IL-1β、IL-18 表達(dá)[24]。NLRP3 炎癥小體作為一種胞漿蛋白復(fù)合物，在神經(jīng)元、小膠質(zhì)細(xì)胞和星形膠質(zhì)細(xì)胞中均有表達(dá)[40]，抑制NLRP3激活可控制神經(jīng)炎癥，減輕線粒體功能障礙，P2X7R是激活NLRP3最有效的因子之一，同時(shí)與Caspase-1、IL-1釋放密切關(guān)聯(lián)[41]，阻斷P2X7R-NLRP3炎癥信號(hào)通路，為脊髓繼發(fā)性損傷恢復(fù)提供治療新靶點(diǎn)。HMGB1在SCI后從壞死細(xì)胞被動(dòng)釋放，血清和胞漿濃度明顯上升，并通過晚期糖基化終末產(chǎn)物受體-核因子κB（RAGE-NF-κB）信號(hào)通路，將小膠質(zhì)細(xì)胞極化為促炎表型[42]，引起下游炎性因子釋放。TLR4作為Toll樣受體中與HMGB1最密切因子，會(huì)誘導(dǎo)NF-κB和環(huán)氧化酶-2（COX-2）水平上調(diào)[43]，抑制 HMGB1/TLR4可發(fā)揮抗炎、保護(hù)神經(jīng)功效。電針大椎、腰陽(yáng)關(guān)、雙側(cè)次髎、足三里可抑制胞漿型磷脂酶A2（c PLA2）、降低前列腺素 E（PGE）含量[29]。c PLA2和 PGE是Nogo/NgR和下游Rho/Rock的前炎癥反應(yīng)因子，可加速促炎反應(yīng)。

3.2 電針改善微循環(huán)，促進(jìn)營(yíng)養(yǎng)因子分泌 成年中樞神經(jīng)系統(tǒng)脊髓損傷后，軸突不可再生，這歸因于血管周圍功能、結(jié)構(gòu)損傷的互相影響[44]，及周圍局部環(huán)境既缺乏生長(zhǎng)促進(jìn)因子、又包含許多生長(zhǎng)抑制因子。即使軸突再生，也很難與正確的突觸后神經(jīng)元鏈接，進(jìn)而恢復(fù)正常功能。理想的再生環(huán)境包含高濃度神經(jīng)生長(zhǎng)因子的存在，這些因子能克服抑制影響，引導(dǎo)軸突到達(dá)適當(dāng)靶點(diǎn)，并對(duì)非受損群體無(wú)負(fù)面影響。神經(jīng)生長(zhǎng)因子家族包括神經(jīng)生長(zhǎng)因子（NGF）、腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子（BDNF）和神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)素3（NT-3）3類。均可與原肌球蛋白受體激酶（Trk）受體和泛神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)素（P75NTR）受體結(jié)合[45]，激活或上調(diào)下游信號(hào)通路如磷脂酰肌醇 3-激酶（PI3K）/蛋白激酶 B（AKT）、磷脂酶 C-γ（PLC-γ）、GTP 結(jié)合蛋白（RAS）/絲裂原活化蛋白激酶（MAPK）等[46]，在神經(jīng)元存活、軸突生長(zhǎng)及突觸可塑性中占據(jù)重要地位。電針百會(huì)、風(fēng)府、命門、大椎能上調(diào)BDNF、NT-3mRNA及蛋白水平[20]。電針肝俞、脾俞可促進(jìn)SCI后BDNF、NGF和NT-3表達(dá)，增強(qiáng)運(yùn)動(dòng)功能恢復(fù)[27]。電針長(zhǎng)強(qiáng)穴可調(diào)控NGF和BDNF水平[30]。BDNF與TrkB受體結(jié)合對(duì)損傷神經(jīng)元有保護(hù)和促生長(zhǎng)作用，促進(jìn)軸突再髓鞘形成[47]，并在一定程度上減輕谷氨酸誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡[48]。NGF能維持和促進(jìn)神經(jīng)元存活，并誘導(dǎo)感覺神經(jīng)元軸突的生長(zhǎng)[49]。電針大椎、命門可上調(diào)NT-3水平，對(duì)脊髓周圍環(huán)境有保護(hù)作用[35]。NT-3與TrkC受體高親和[50]，可防止神經(jīng)軸突退化，促進(jìn)神經(jīng)發(fā)育再生。通過電針脊中、至陽(yáng)、腰俞、長(zhǎng)強(qiáng)四穴可激活CGRP/αCaMKII/NT-3信號(hào)通路，觸發(fā)NT-3合成及分泌，增強(qiáng)脊髓內(nèi)源生長(zhǎng)能力，加強(qiáng)軸突再生[18]。

但由于SCI繼發(fā)損傷會(huì)造成大量神經(jīng)元死亡，僅僅依靠神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子自身表達(dá)很難發(fā)揮最優(yōu)效果，需要對(duì)神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子進(jìn)行有效調(diào)控。抑制軸突生長(zhǎng)髓鞘相關(guān)抑制因子（MALs），主要包括軸突生長(zhǎng)抑制因子（Nogo）、髓鞘相關(guān)糖蛋白（MAG）和少突膠質(zhì)細(xì)胞髓鞘糖蛋白（OMgp）3類[51]，其受體NgR含量的增多有助于神經(jīng)恢復(fù)，減輕炎癥。電針夾脊穴可促進(jìn)NgR表達(dá)，提高巨噬細(xì)胞吞噬能力[25]。此外，電針伏兔、足三里可以上調(diào)缺氧誘導(dǎo)因子1α、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子的mRNA及蛋白的表達(dá)，為構(gòu)建良好的血氧微環(huán)境提供依據(jù)[26]。

3.3 電針抑制細(xì)胞凋亡，增強(qiáng)神經(jīng)修復(fù) 細(xì)胞凋亡會(huì)造成損傷脊髓功能障礙，探索細(xì)胞凋亡特異性分子途徑有利于脊髓損傷的治療和恢復(fù)。

3.3.1 調(diào)節(jié)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激和自噬 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激（ERS）是凋亡關(guān)鍵性途徑之一。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)主要包括粗面和光面兩種，參與蛋白質(zhì)平衡的各個(gè)方面，對(duì)維持細(xì)胞功能和內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)有著不可或缺的作用。若局部出現(xiàn)缺氧缺血、病毒細(xì)菌感染、溫度變化等生理病理改變，就會(huì)導(dǎo)致內(nèi)質(zhì)網(wǎng)紊亂、引發(fā)ERS的產(chǎn)生[52]，過度ERS會(huì)啟動(dòng)凋亡程序。

脊髓損傷后，由于局部微環(huán)境存在多種應(yīng)激源，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中未折疊蛋白積累誘導(dǎo)未折疊蛋白反應(yīng)（UPR）的激活（包含ATF6、PERK、IRE1 3類[53]）。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)伴侶分子葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78（GRP78）是內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激的關(guān)鍵標(biāo)志物，可與UPR結(jié)合，阻止錯(cuò)誤折疊蛋白的輸出。但長(zhǎng)時(shí)間過度的UPR最終會(huì)觸發(fā)細(xì)胞凋亡，啟動(dòng)凋亡信號(hào)分子[54]，如CHOP、TRAF2和Caspase-12等3個(gè)關(guān)鍵途徑[55]，加速組織損傷速度。正常情況下CHOP表達(dá)量很低，但內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激后暴露在過量?jī)?nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激下的少突膠質(zhì)前體細(xì)胞促進(jìn)CHOP含量增多，下調(diào)B細(xì)胞淋巴瘤2（Bcl-2）基因，上調(diào)促凋亡Bax表達(dá)[56-57]，此外CHOP還可通過抑制細(xì)胞周期調(diào)節(jié)蛋白p21引發(fā)細(xì)胞死亡[58]。少突膠質(zhì)前體細(xì)胞（OPC）凋亡抑制再髓鞘形成，并擴(kuò)大受損脊髓面積[59]。TRAF2可經(jīng)IRE1集聚，激活Caspase-12，進(jìn)而激活Caspase-9和Caspase-3表達(dá)，加速細(xì)胞凋亡進(jìn)程[55]。電針夾脊穴能下調(diào)GRP78、Caspase-12、CHOP表達(dá)，抑制內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激激活[15]，并促進(jìn)OPC增殖，對(duì)運(yùn)動(dòng)功能恢復(fù)提供積極作用[22]。

自噬是細(xì)胞分解自身成分的動(dòng)態(tài)平衡過程，可觸發(fā)受損細(xì)胞器和錯(cuò)誤折疊蛋白質(zhì)的自我降解，形成自噬小體，最后被溶酶體酶降解[60]。誘導(dǎo)自噬可保護(hù)運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元免于變性，緩解SCI后痙攣性癱瘓，是維持中樞神經(jīng)系統(tǒng)穩(wěn)態(tài)必不可少的過程[61]。其主要標(biāo)志物L(fēng)C3-II反映了自噬小體的數(shù)量，P62是自噬貨物蛋白，增加自噬通量。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激可通過PERK-eIF2α、IRE1-ASK1-JNK和CaMKK-腺苷酸活化蛋白激酶-哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶蛋白3條通路誘導(dǎo)細(xì)胞自噬[62]。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激調(diào)節(jié)是在不同應(yīng)激條件下通過調(diào)節(jié)自噬和凋亡來(lái)實(shí)現(xiàn)細(xì)胞穩(wěn)態(tài)平衡的關(guān)鍵過程，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)自噬（reticulophagy）可通過消除UPR、清除受損內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、降解蛋白聚體等途徑使蛋白正確折疊、促進(jìn)內(nèi)環(huán)境平衡穩(wěn)定[52]。研究顯示，電針夾脊穴發(fā)現(xiàn)電針可以調(diào)節(jié)溶酶體功能和自噬[16]，還可以通過抑制內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激并激活自噬[15]，清除錯(cuò)誤折疊蛋白，維持脊髓損傷局部?jī)?nèi)環(huán)境平衡，延緩凋亡進(jìn)程。

3.3.2 調(diào)節(jié)鈣蛋白酶活性 鈣蛋白酶（calpain）是屬于Ca2+依賴性的非溶酶體半胱氨酸蛋白分解酶家族，可通過解阮靶蛋白從而控制細(xì)胞重構(gòu)、分化和凋亡過程[63]。其家族成員互為同工酶，在機(jī)體組織內(nèi)廣泛分布的為calpain1和calpain2兩種[64]，能參與到蛋白水解、自噬、細(xì)胞凋亡等生理過程。正常情況下，calpain在胞質(zhì)內(nèi)以酶原形式存活，若細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度增加，則calpain可通過與Ca2+結(jié)合被激活，過量鈣蛋白酶表達(dá)會(huì)引起蛋白沉積、水解蛋白結(jié)構(gòu)細(xì)胞表達(dá)失衡[65]。SCI后，受損局部受到缺血缺氧刺激，處于穩(wěn)定狀態(tài)的Ca2+濃度失調(diào)，含量大幅度升高，造成calpain異常表達(dá)。鈣蛋白酶在細(xì)胞凋亡中主要通過對(duì)凋亡途徑調(diào)控，例如導(dǎo)致促凋亡基因Bcl-2/Bax失衡、Caspase-3激活、溶酶體功能紊亂、線粒體功能異常等等，引發(fā)脊髓功能喪失，加重病情。calpain裂解后會(huì)激活Caspase-3表達(dá)，Caspase-3水解又會(huì)促進(jìn)calpain活性，并阻止鈣蛋白酶抑制劑的抑制作用，形成雙向變化環(huán)路[66]，進(jìn)一步促進(jìn)凋亡。calpain和Caspase-3也存在相似底物，例如細(xì)胞骨架、轉(zhuǎn)錄因子等，兩者形成的通路在細(xì)胞凋亡方面有獨(dú)特復(fù)雜作用?；罨腸alpain還可通過上調(diào)鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶（CaN）表達(dá)激活細(xì)胞凋亡[67]。此外，SCI損傷會(huì)上調(diào)calpain1 mRNA水平，但對(duì) calpain2表達(dá)無(wú)明顯影響[19]。calpastatin為calpain抑制蛋白，可與后者結(jié)合抑制活性[68]。研究發(fā)現(xiàn)，電針脊中、命門穴可上調(diào)calpastatin，抑制calpain1蛋白表達(dá)，進(jìn)而對(duì)脊髓損傷和運(yùn)動(dòng)功能起到修復(fù)和改善的作用[19]。

3.3.3 調(diào)節(jié)凋亡相關(guān)蛋白 Bcl-2家族蛋白是通過線粒體途徑調(diào)控凋亡的重要蛋白質(zhì)，它可與凋亡中的死亡受體途徑共同作用調(diào)節(jié)Caspase-3含量，最終決定細(xì)胞凋亡與否[69]。其最具代表性的基因?yàn)橐种频蛲鲆蜃覤cl-2和促凋亡因子Bax等。Bcl-2可在線粒體膜上構(gòu)建陽(yáng)離子通道，影響細(xì)胞色素C（Cytc）釋放，發(fā)揮抑制作用，促凋亡因子Bax主要在細(xì)胞質(zhì)內(nèi)，受凋亡因子誘導(dǎo)時(shí)，會(huì)破壞線粒體膜的完整性，激活Caspase，加速細(xì)胞凋亡進(jìn)程。兩者相反相成，協(xié)同調(diào)控，維持凋亡中的動(dòng)態(tài)平衡。Bcl-2/Bax競(jìng)爭(zhēng)性的二聚體化過程決定細(xì)胞對(duì)凋亡信號(hào)敏感性，二者構(gòu)建成平衡體系，所代表的蛋白比值決定細(xì)胞是凋亡還是存活[70]。半胱氨酸蛋白酶（Caspase）家族也是凋亡過程中的重要參與者，目前共發(fā)現(xiàn)14種，其中Caspase-3與凋亡關(guān)系最為密切，通常Caspase-3以酶原形式在細(xì)胞內(nèi)存活，需要通過轉(zhuǎn)活化和非蛋白酶活化等形式被激活。前者指當(dāng)刺激發(fā)生時(shí)，活化的凋亡信號(hào)會(huì)首先激活上游Caspase啟動(dòng)因子如 Caspase-8、Caspase-9等，引起級(jí)聯(lián)反應(yīng)，繼而啟動(dòng)Caspase-3功能，活化的Caspase-3會(huì)造成核酸斷裂，凋亡不可逆性發(fā)展[71]。后者則指酶原可被非蛋白酶物質(zhì)如阿特拉津（ATZ）、鹽霉素（SAL）等上調(diào) Caspase-3 表達(dá)[72]。此外，研究發(fā)現(xiàn)Caspase-3與細(xì)胞焦亡關(guān)系密切，可通過切割gasdermin（GSDM）蛋白參與炎癥反應(yīng)[73]。電針足三里、伏兔有助于降低Caspase-3表達(dá)[21]，同時(shí)還可上調(diào)Bcl-2/Bax比值[23]，減少細(xì)胞凋亡，促進(jìn)損傷神經(jīng)修復(fù)再生。

3.3.4 調(diào)節(jié)相關(guān)信號(hào)通路 Rho/Rock信號(hào)通路廣泛存在于神經(jīng)系統(tǒng)中，與突觸結(jié)構(gòu)功能改變、神經(jīng)細(xì)胞損傷修復(fù)等存在密切聯(lián)系。Rho/Rock的過度激活會(huì)導(dǎo)致肌球蛋白輕鏈磷酸化中斷，繼而引發(fā)神經(jīng)生長(zhǎng)錐塌陷。研究顯示SCI后7 d內(nèi)，在脊髓白質(zhì)、灰質(zhì)及星形膠質(zhì)細(xì)胞和少突膠質(zhì)細(xì)胞中都檢測(cè)到Rho信號(hào)激活[74]。說明Rho信號(hào)參與到調(diào)控脊髓損傷病理生理的不同方面，包括膠質(zhì)瘢痕增生、神經(jīng)細(xì)胞凋亡等各個(gè)方面。脊髓損傷的修復(fù)可以歸因于側(cè)支纖維的重構(gòu)[75]，下調(diào)Rho/Rock通路表達(dá)有助于神經(jīng)元的恢復(fù)。電針大椎、腰陽(yáng)關(guān)、雙側(cè)次髎、足三里可以下調(diào)Rho/Rock信號(hào)通路，進(jìn)而對(duì)髓鞘抑制因子NOGO及其受體NGR、胞漿磷脂酶 A2（CPLA2）等的活性產(chǎn)生影響[28]。ROCK II是 Rho重要的下游效應(yīng)分子之一，電針夾脊穴可減輕ROCK II表達(dá)，減少抑制因子RhoA和MLC含量，促進(jìn)神經(jīng)功能恢復(fù)[31]。

絲裂原活化蛋白激酶（MAPK）信號(hào)通路包括ERK、JNK、p38MAPK等通路，影響到炎癥反應(yīng)、細(xì)胞凋亡、軸突再生及缺血再灌注等各個(gè)方面[76]。ERK通路可磷酸化轉(zhuǎn)錄因子及蛋白激酶底物，調(diào)節(jié)蛋白合成及基因轉(zhuǎn)錄等[77]。JNK是一種促分裂原活化蛋白激酶，又稱為c-Jun氨基末端激酶，可與c-Jun結(jié)合，參與細(xì)胞生長(zhǎng)、發(fā)育、分化及凋亡。脊髓損傷后會(huì)出現(xiàn)局部磷酸化c-Jun氨基末端激酶（p-c-Jun）的大量聚集，加重神經(jīng)損傷的過程[78]。p38MAPK與應(yīng)激情況下的炎癥表達(dá)、細(xì)胞重構(gòu)和細(xì)胞凋亡等有關(guān)，影響下游基因轉(zhuǎn)錄和翻譯。電針大椎、命門穴可上調(diào)Raf/Ras/ERK信號(hào)通路表達(dá)[32]，降低p-c-Jun的表達(dá)，抑制細(xì)胞凋亡[33]，促進(jìn)運(yùn)動(dòng)功能及神經(jīng)元的修復(fù)。

Wnt/β-catenin信號(hào)通路是調(diào)節(jié)神經(jīng)元的重要因子，Wnt蛋白是一個(gè)信號(hào)蛋白大家族，參與脊髓神經(jīng)元長(zhǎng)軸突生長(zhǎng)調(diào)節(jié)。β-catenin是其關(guān)鍵組成部分，被激活時(shí)，可以移位到細(xì)胞核，與轉(zhuǎn)錄因子相互作用，誘導(dǎo)靶基因表達(dá)改變，促進(jìn)神經(jīng)干細(xì)胞分化，并抑制其向星形膠質(zhì)細(xì)胞分化[79]。電針大椎、命門能增強(qiáng)Wnt/β-catenin通路表達(dá)，促進(jìn)細(xì)胞向脊神經(jīng)元分化，增強(qiáng)脊髓損傷后神經(jīng)元的恢復(fù)[34，36]。

4 造模方法選擇

良好的動(dòng)物模型建立是保證實(shí)驗(yàn)成功的基礎(chǔ)，脊髓損傷大鼠造模方法包括打擊法、橫切法、鉗夾法等。目前臨床常用的Allen's撞擊法，是在原有方法的基礎(chǔ)上進(jìn)行改進(jìn)后的動(dòng)物造模方式，可引起模型脊髓水腫及缺血，與人類脊髓損傷病理生理特點(diǎn)類似，具有重復(fù)性，可實(shí)施性強(qiáng)的特點(diǎn)[80]。各種方法各有利弊，需要研究者根據(jù)實(shí)驗(yàn)情況的需求進(jìn)行相應(yīng)選擇。

5 討論

當(dāng)前隨著研究技術(shù)的進(jìn)步和治療手段的發(fā)展，對(duì)脊髓損傷的認(rèn)識(shí)也得到不斷深入。本病現(xiàn)有的治療手段多樣，包括藥物治療、神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子治療、細(xì)胞移植、基因治療和生物材料移植等，但由于這些手段存在治療價(jià)格昂貴、存在后遺癥等問題，使中國(guó)傳統(tǒng)治療手段針灸得到越來(lái)越多的重視。臨床觀察、動(dòng)物研究、綜述表明，針灸可以有效治療脊髓損傷后一系列并發(fā)癥，包括運(yùn)動(dòng)和感覺障礙、疼痛、壓瘡、痙攣和骨質(zhì)疏松等。

電針作為針灸治療方式的一種，兼顧針刺和電流刺激的雙重效應(yīng)，在臨床實(shí)踐中得到廣泛應(yīng)用。根據(jù)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)和臨床研究發(fā)現(xiàn)電針治療SCI機(jī)制主要包括：①抗氧化和抗炎；②上調(diào)神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子，促進(jìn)微環(huán)境平衡；③抑制神經(jīng)元凋亡；④調(diào)節(jié)相關(guān)信號(hào)通路等幾方面，可顯著改善脊髓損傷遠(yuǎn)期神經(jīng)功能恢復(fù)，為患者提供一種風(fēng)險(xiǎn)最小的新型治療手段。

目前研究電針治療脊髓損傷的穴位主要以大椎-命門穴、夾脊穴為主。督脈主一身陽(yáng)氣，為“陽(yáng)脈之?！?，若督脈受損則陽(yáng)氣不能四布，氣血運(yùn)行不暢而致氣滯血瘀，其循行路線與SCI發(fā)病部位密切相關(guān)，大椎位于第7頸椎棘突下，胸椎與頸椎交匯處，上撐頭部，下連脊骨，有支撐椎體之效。命門為原氣之所系，蘊(yùn)藏先天之氣，具有培補(bǔ)腎氣、強(qiáng)腰健脊的效用。將電針刺激用于督脈穴，能促使經(jīng)脈氣血運(yùn)行加速，調(diào)整陰陽(yáng)、扶正祛邪。夾脊穴在脊柱旁開半寸，也可以說從屬于督脈和足太陽(yáng)膀胱經(jīng)，深層為胸、腰神經(jīng)的后支，電針夾脊穴可刺激脊神經(jīng)感覺與運(yùn)動(dòng)纖維，并能刺激與脊神經(jīng)伴行血管，實(shí)現(xiàn)對(duì)內(nèi)部環(huán)境的基本調(diào)節(jié)。此外，尚可將足陽(yáng)明胃經(jīng)中的足三里、伏兔作為治療脊髓損傷的代表穴位，取胃經(jīng)多氣多血、束骨而利機(jī)關(guān)之意，體現(xiàn)了針灸治療多樣性、靈活性的特點(diǎn)，值得臨床借鑒。

不過本文尚存在一些不足之處，比如只納入了單純電針的動(dòng)物模型實(shí)驗(yàn)，當(dāng)前電針結(jié)合康復(fù)訓(xùn)練、電針結(jié)合干細(xì)胞移植、電針結(jié)合藥物等治療方式也越來(lái)越受到關(guān)注和研究，促進(jìn)傳統(tǒng)理論和研究在現(xiàn)代醫(yī)學(xué)實(shí)踐中的結(jié)合，中西并用共同治療脊髓損傷，為臨床提供有效選擇。此外，電針治療仍存在一些爭(zhēng)議，需要指導(dǎo)原則來(lái)規(guī)范穴位、刺激頻率等，未來(lái)還需要大規(guī)模、多中心的針灸試驗(yàn)方法。研究人員尚需提高科研能力，將傳統(tǒng)思維與現(xiàn)代思想相結(jié)合，為中醫(yī)治療疾病注入新鮮動(dòng)力，以更有利于中醫(yī)藥的現(xiàn)代化發(fā)展。