格絨初，李 麗，裴超信，鄧 飛，邵 靚，周莉媛，邱明雙

(1.丹巴縣動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，四川 丹巴 626300；2.四川省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，四川 成都 610041)

0 引言

禽流感(Avian Influenza，AI)又名真性雞瘟、歐洲雞瘟，1878年首次發(fā)生于意大利[1]，被世界動(dòng)物衛(wèi)生組織列為A類動(dòng)物疫病，我國(guó)將其列為一類疫病。禽流感是一種由正粘病毒科流感病毒屬A型流感病毒引發(fā)的一種傳播速度快、死亡率高的禽類烈性傳染病，根據(jù)病毒毒力強(qiáng)弱可分為高致病性禽流感和低致病性禽流感[2]。其中，H5和H7亞型屬高致病性禽流感，是國(guó)家強(qiáng)制免疫的病種。防控禽流感最有效的措施是做好家禽的免疫以及抗體的檢測(cè)[3]。為了解四川省2020年高致病性禽流感的免疫效果，四川省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心實(shí)驗(yàn)室在開展完春、秋兩防免疫后，從全省21 個(gè)市(州)中抽取幾個(gè)縣采集樣品，并對(duì)這些樣品進(jìn)行抗體檢測(cè)試驗(yàn)，為后期四川省高致病性禽流感的有效防控提供真實(shí)可靠的依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 試驗(yàn)材料

1)試劑耗材，如表1所示。

表1 主要試劑

2)樣品采集。在春、秋兩季免疫21 d后，采用抽檢的方式分別從全省21個(gè)市(州)部份縣的規(guī)模場(chǎng)、散養(yǎng)戶和交易市場(chǎng)采集樣品并進(jìn)行抗體檢測(cè)。春季共采集2 053份，秋季共采集2 000份，2020年共采集禽血清4 053份。

1.2 方法

采用血凝試驗(yàn)(HA)和血凝抑制試驗(yàn)(HI)對(duì)禽流感H5和H7的亞型抗體進(jìn)行效價(jià)測(cè)定，用完全抑制4單位血凝抗原的血清最高稀釋倍數(shù)作HI滴度并作為本實(shí)驗(yàn)結(jié)果的判定。綜上，當(dāng)HI抗體效價(jià)≥4 log2時(shí)，免疫合格。

2 結(jié)果

2.1 AIV-H5

2020年春、秋兩季檢測(cè)雞、水禽血清樣品共計(jì)4 053份，合格達(dá)3 745份，平均合格率為93.92 %。春季合格率為96.49%，秋季合格率為91.35%。

1)2020年全年共檢測(cè)雞血清3 173份，合格2 994份，合格率為94.36%。其中，規(guī)模場(chǎng)共檢測(cè)1 741份，合格1 643份，合格率為94.37%；散養(yǎng)戶共檢測(cè)1 412份，合格1345份，合格率為95.25%；交易市場(chǎng)共檢測(cè)20份，合格6份，合格率30%。具體實(shí)驗(yàn)結(jié)果，如表2所示。

表2 2020年四川省雞群禽流感H5亞型免疫抗體檢測(cè)結(jié)果

2)2020年全年共檢測(cè)水禽血清樣品 880份，合格樣品為 814份，合格率為92.5%。規(guī)模場(chǎng)共檢測(cè)642份，合格597份，合格率為92.99%；散養(yǎng)戶共檢測(cè)238份，合格217份，合格率為91.18%。具體實(shí)驗(yàn)結(jié)果，如表3所示。

表3 2020年四川省水禽禽流感H5亞型免疫抗體檢測(cè)結(jié)果

2.2 AIV-H7

2020年春、秋兩季共檢測(cè)雞、水禽血清4 053份，合格3 782份，平均合格率為93.28%，其中，春季合格率為96.4%，秋季合格率為90.15%。

1)2020年全年共檢測(cè)雞血清3 173份，合格2 986份，合格率為94.11%。其中，規(guī)模場(chǎng)檢測(cè)1 741份，合格1 630份，合格率為93.63%；散養(yǎng)戶檢測(cè)1 412份，合格1 336份，合格率為94.64%；交易市場(chǎng)檢測(cè)20份，合格20份，合格率為100%。具體實(shí)驗(yàn)結(jié)果，如表4所示。

表4 2020年四川省雞禽流感H7亞型免疫抗體檢測(cè)結(jié)果

2)2020年全年共檢測(cè)水禽血清880份，合格796份，合格率為90.46%。其中，規(guī)模場(chǎng)檢測(cè)642份，合格590份，合格率為91.90%；散養(yǎng)戶檢測(cè)238份，合格206份，合格率為86.56%。具體實(shí)驗(yàn)結(jié)果，如表5所示。

表5 2020年四川省水禽禽流感H7亞型免疫抗體檢測(cè)結(jié)果

3 討論

抗體檢測(cè)是判斷是否感染病毒或反映免疫情況的重要依據(jù)，血凝抑制試驗(yàn)是監(jiān)測(cè)禽流感抗體的常用方法之一[4]。從檢測(cè)結(jié)果整體合格率看，2020年春、秋季高致病性禽流感的群體免疫抗體合格率都高于70%，達(dá)到了農(nóng)業(yè)部70%的標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定，表明四川省在開展高致病性禽流感免疫工作上取得了顯著成效。從種禽免疫平均合格率來看，春、秋季水禽平均檢測(cè)合格率都低于雞平均檢測(cè)合格率，這可能與各養(yǎng)殖戶對(duì)水禽免疫重視程度還不夠強(qiáng)有關(guān)。從春、秋兩季平均合格率看，秋季免疫合格率略低于春季合格率，這可能說秋季開展的免疫工作不如春季的嚴(yán)謹(jǐn)，所以各養(yǎng)殖戶還需加強(qiáng)秋季禽流感疫苗免疫以及畜禽的飼養(yǎng)管理。

2020全年四川省發(fā)生過1起高致病性禽流感疫情，總體形勢(shì)比較平穩(wěn)。2020年2月2日四川省南充市西充縣鳳鳴鎮(zhèn)發(fā)現(xiàn)疑似禽流感疫情，西充縣動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心接到報(bào)告后現(xiàn)場(chǎng)采集樣品并送至南充市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心實(shí)驗(yàn)室，檢測(cè)結(jié)果疑似禽流感病毒核酸陽性，隨即該樣品送至四川省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心實(shí)驗(yàn)室復(fù)核，復(fù)核結(jié)果為高致病性禽流感病毒H5亞型核酸陽性9份，H7亞型核酸陰性，初步診斷本次疫情由高致病性禽流感病毒H5亞型感染引起。2020年2月8日，經(jīng)哈爾濱獸醫(yī)研究所確診該病毒為H5N6亞型高致病性禽流感病毒，屬于2.3.4.4分支，與實(shí)驗(yàn)室分離株DK/SC/4096/2018(H5N6)的HA基因核苷酸同源性最高為98.9%，與Re-8疫苗株核苷酸同源性為94.3%，與Re-11疫苗株核苷酸同源性為98.2%。經(jīng)調(diào)查，該飼養(yǎng)場(chǎng)設(shè)施設(shè)備有限，飼養(yǎng)環(huán)境差；無專業(yè)技術(shù)人員和執(zhí)業(yè)獸醫(yī)師；飼養(yǎng)方式為林下養(yǎng)雞，同時(shí)混養(yǎng)鴨和鵝；引種雞苗無免疫記錄和檢疫證明，也未向當(dāng)?shù)匦竽敛块T申報(bào)；引入的家禽未進(jìn)行禽流感等疫苗的免疫，以上多種原因?qū)е铝舜舜我咔榈陌l(fā)生。

目前禽流感尚無有效的治療方法，預(yù)防家禽高致病性禽流感必須從消滅病原、切斷傳播途徑、免疫易感動(dòng)物三方面入手。養(yǎng)殖戶平時(shí)需樹立好“以預(yù)防為主，綜合管理”的觀念和意識(shí)。本次檢測(cè)基本掌握了四川省2020年春、秋兩季集中免疫的效果，但由于檢測(cè)次數(shù)少、被抽查縣少、交易市場(chǎng)樣品數(shù)量不足等原因，數(shù)據(jù)不足以全面反映四川省高致病性禽流感的抗體水平，因此還需進(jìn)行長(zhǎng)期高頻監(jiān)測(cè)、擴(kuò)大監(jiān)測(cè)范圍點(diǎn)、補(bǔ)齊交易市場(chǎng)及環(huán)境樣品相關(guān)數(shù)據(jù)，更全面了解全省范圍的真實(shí)抗體水平，為四川省高致病性禽流感的科學(xué)防控提供保障。