任明德，李和平，崔景浩，宋昌滿，李春植，金錦學(xué)，孫恩珠

（1.東北林業(yè)大學(xué)野生動(dòng)物與自然保護(hù)地學(xué)院，哈爾濱 150040；2.平壤農(nóng)業(yè)大學(xué)獸醫(yī)與畜牧系，朝鮮平壤 999093）

硒是人類健康不可缺少的元素，被認(rèn)為是21世紀(jì)最營(yíng)養(yǎng)的元素，也被視為“長(zhǎng)壽元素”和“抗癌之王”。微量元素硒具有強(qiáng)大的功能，是細(xì)胞抗氧化劑，能防輻射，增強(qiáng)機(jī)體免疫，使毒素分解；可以提高兒童智力，促進(jìn)發(fā)育；還可以起到預(yù)防心腦血管疾病、抗癌等作用［1-4］?？梢哉f(shuō)硒與家禽日增重、產(chǎn)蛋率、受精率、孵化率、免疫力密切相關(guān)［5-7］。在現(xiàn)代家禽生產(chǎn)中，通過(guò)滿足家禽對(duì)硒的需求可提高家禽生產(chǎn)性能，特別是在應(yīng)激狀態(tài)下家禽對(duì)硒的需求量會(huì)顯著增加［8］。家禽高產(chǎn)蛋率和高生長(zhǎng)率基因的選擇，使得家禽的生產(chǎn)效率大大提高，但同時(shí)也使得家禽更容易受到各種應(yīng)激的影響。

蛋雞日常飼料中添加硒，因來(lái)源和添加水平不同，加之微量元素之間的相互作用，往往導(dǎo)致所產(chǎn)雞蛋中硒含量存在很大差異［9-11］。中國(guó)和歐盟家禽、家畜配合飼料中硒的限量是0.5 mg/kg［3，12］，NRC（1994）最大耐受量為2 mg/kg［13］。富硒雞蛋不僅能提供微量元素，而且雞蛋中的硒是一種有機(jī)硒，有利于人體吸收［14］。普通雞蛋中的硒含量較低，平均為10～18μg/枚，而富硒雞蛋中硒含量則可達(dá)30～50μg/枚［15］。

一般而言，相關(guān)研究在相對(duì)較短的時(shí)間內(nèi)觀察到了日糧硒補(bǔ)充劑的效果，但關(guān)于達(dá)到中毒劑量硒日糧的相關(guān)數(shù)據(jù)很少，而且大多數(shù)報(bào)道都是關(guān)于日糧中添加同一硒源的不同水平對(duì)雞蛋硒含量的影響。因此，為了生產(chǎn)富硒蛋，試驗(yàn)通過(guò)在蛋雞飼糧中添加不同水平富硒豆芽粉，測(cè)定其對(duì)蛋雞生產(chǎn)性能和蛋品質(zhì)的影響，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)地及試驗(yàn)動(dòng)物

2018年9月—2019年7月，試驗(yàn)在平壤農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物試驗(yàn)站進(jìn)行，選擇32周齡的海蘭褐殼蛋雞500只，經(jīng)過(guò)7 d的預(yù)試期，確定各組蛋雞生產(chǎn)性能無(wú)明顯差異后，進(jìn)入正式試驗(yàn)期，試驗(yàn)期共20周。試驗(yàn)期間，所有蛋雞自由采食（計(jì)量不限量）、自由飲水，每天照明時(shí)間固定為16 h。保持舍內(nèi)清潔衛(wèi)生，定期進(jìn)行消毒、防疫。

1.2 富硒豆芽粉及基礎(chǔ)飼糧

1.2.1 富硒豆芽粉試驗(yàn)使用的富硒豆芽粉由平壤農(nóng)業(yè)大學(xué)生產(chǎn)。將大豆放入水溫為25℃的3倍大豆體積的水里，換水浸泡3次，共計(jì)6 h；浸泡后的大豆噴灑22℃的20 mg/L亞硒酸鈉溶液，每次持續(xù)2 min，每隔4 h 1次，持續(xù)1周；將生長(zhǎng)完成的豆芽在70℃烘干，然后粉碎成粉，獲得富硒豆芽粉。富硒豆芽粉營(yíng)養(yǎng)成分：1 kg豆芽粉含硒40 mg，碳水化合物150 g，粗蛋白質(zhì)225 g，脂肪80 g，纖維75 g，維生素A 750 IU，維生素C 400 mg，維生素E 40 IU，維生素B12 mg，維生素B20.35 mg，維生素PP30 mg，Mg1 000 mg，Ca1 000 mg，F(xiàn)e 45 mg，Zn 25 mg，Cu 7.5 mg，Mn 3.4 mg，K 7.5 g，P 3 g，Na350 mg。

1.2.2 基礎(chǔ)飼糧基礎(chǔ)飼糧含硒0.3 mg/kg，粗蛋白16.00%，粗脂肪3.20%，鈣3.5%，可溶性磷0.73%?；A(chǔ)飼糧組成和營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1。

表1 基礎(chǔ)飼糧成分和營(yíng)養(yǎng)水平

1.3 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)采用單因子試驗(yàn)設(shè)計(jì)，將500只蛋雞隨機(jī)分為5組，每組100只，每組4個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)25只，試驗(yàn)雞籠為3層階梯式，每個(gè)重復(fù)5個(gè)籠，每籠5只。A組為對(duì)照組，飼喂基礎(chǔ)飼糧，硒水平為0.30 mg/kg，硒源為亞硒酸鈉；B、C、D、E組為試驗(yàn)組，B組添加富硒豆芽粉7.5 g/kg（硒水平為0.6 mg/kg），C組添加富硒豆芽粉15.0 g/kg（硒水平為0.9 mg/kg），D組添加富硒豆芽粉22.5 g/kg（硒水平為1.2 mg/kg），E組添加富硒豆芽粉30.0 g/kg（硒水平為1.5 mg/kg）。

1.4 測(cè)定項(xiàng)目

1.4.1 生產(chǎn)性能自正式試驗(yàn)期起，以重復(fù)為單位，每天記錄當(dāng)天的產(chǎn)蛋量。每周定時(shí)稱量投喂的料重和余料重。試驗(yàn)開(kāi)始后，統(tǒng)計(jì)試驗(yàn)期每個(gè)重復(fù)的平均產(chǎn)蛋率、平均蛋重和平均料蛋比。

產(chǎn)蛋率=日產(chǎn)蛋總數(shù)/存欄雞數(shù)×100%；平均日采食量=總采食量/存欄雞數(shù)；料蛋比=總耗料量/總蛋重。

1.4.2 蛋品質(zhì)分別在正式試驗(yàn)開(kāi)始后的第15，30，60，90，120，140天采集蛋樣，于每個(gè)重復(fù)隨機(jī)取大小中等、色澤正常的雞蛋5枚，分別測(cè)定蛋品質(zhì)和全蛋液中硒含量等指標(biāo)。

蛋的縱徑長(zhǎng)、橫徑長(zhǎng)用游標(biāo)卡尺測(cè)量，計(jì)算蛋形指數(shù)（蛋形指數(shù)=蛋的縱徑/蛋的橫徑）；用螺旋測(cè)微器（CLH12-211）測(cè)定蛋殼厚度；用蛋殼強(qiáng)度測(cè)定儀（EFR-01）測(cè)定蛋殼強(qiáng)度。

1.4.3 蛋樣處理與硒含量測(cè)定將蛋內(nèi)容物（蛋黃與蛋清）無(wú)損傾入大燒杯，用攪蛋器充分?jǐn)嚢杈鶆蚝?，分裝于多支5 mL離心管，記錄編號(hào)，在-20℃冰箱中保存，用于測(cè)定雞蛋中硒含量。

1.4.4 組織樣品處理與硒含量測(cè)定在試驗(yàn)最后1天，屠宰3只達(dá)到平均體重的產(chǎn)蛋雞，提取胸肌、肝臟、皮膚、腎臟組織各5 g，測(cè)定硒含量。用原子吸收光譜法（varian spectrum AA-220FS，CA），采用電感耦合等離子體質(zhì)譜器（Agilent7500cx）對(duì)樣品硒含量進(jìn)行測(cè)定［16］。

1.5 數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)分析

用Excel軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理，用SPSS13.0程序進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，并進(jìn)行顯著性檢驗(yàn)，以P＜0.05作為差異顯著性判斷標(biāo)準(zhǔn)。

2 結(jié)果與分析

2.1 添加富硒豆芽粉對(duì)蛋雞生產(chǎn)性能的影響

見(jiàn)表2。

表2 蛋雞生產(chǎn)性能測(cè)定結(jié)果

由表2可以看出：基礎(chǔ)飼糧中富硒豆芽粉添加水平不同，蛋雞日耗料量、產(chǎn)蛋率、蛋重以及料蛋比存在不同的差異，呈現(xiàn)出對(duì)蛋雞生產(chǎn)性能改善的積極影響。在日耗料量方面，試驗(yàn)組均顯著高于對(duì)照組（P＜0.05），試驗(yàn)組間差異不顯著（P＞0.05）；B、C、D組產(chǎn)蛋率均高于對(duì)照組，其中C組顯著高于對(duì)照組（P＜0.05）；試驗(yàn)組蛋重均高于對(duì)照組，其中B、C、D組顯著高于對(duì)照組（P＜0.05）；C組料蛋比最低，顯著低于對(duì)照組（P＜0.05）。

2.2 添加富硒豆芽粉對(duì)蛋品質(zhì)的影響

見(jiàn)表3。

表3 蛋雞蛋品質(zhì)測(cè)定結(jié)果

由表3可以看出：試驗(yàn)全期試驗(yàn)組蛋重、蛋殼強(qiáng)度均高于對(duì)照組，蛋形指數(shù)從試驗(yàn)第30天開(kāi)始低于對(duì)照組，蛋殼厚度從第30天開(kāi)始高于對(duì)照組。第30，140天C組蛋重顯著高于對(duì)照組（P＜0.05），第60天D組顯著高于對(duì)照組（P＜0.05）。B組蛋形指數(shù)在第140天，C組在第60，90，120，140天，D組在第60，90天，E組在第90天均顯著低于對(duì)照組（P＜0.05）。在60，90天B、C、D、E組蛋殼強(qiáng)度均顯著高于對(duì)照組（P＜0.05），在120，140天C、D、E組蛋殼強(qiáng)度均顯著高于對(duì)照組（P＜0.05）。在第60天D、E組蛋殼厚度顯著高于對(duì)照組（P＜0.05），在第120天C、D組顯著高于對(duì)照組（P＜0.05）。

2.3 添加富硒豆芽粉對(duì)雞蛋硒含量的影響

見(jiàn)表4。

表4 雞蛋硒含量測(cè)定結(jié)果 mg·kg-1

由表4可以看出：試驗(yàn)組基礎(chǔ)日糧中添加富硒豆芽粉后，與對(duì)照組相比，均能顯著提高蛋中硒含量（P＜0.05），其中D組最高。

2.4 添加富硒豆芽粉對(duì)組織中硒含量的影響

見(jiàn)表5。

由表5可以看出：隨著富硒豆芽粉添加量的增加，蛋雞胸肌、肝臟、皮膚和腎臟中的硒含量也逐漸增加。與對(duì)照組相比，B、C、D、E組蛋雞胸肌、肝臟、皮膚和腎臟中的硒含量均顯著增加（P＜0.05）。

整個(gè)試驗(yàn)期間各組無(wú)雞只死亡，也未發(fā)現(xiàn)急性中毒癥狀（例如失明、腹痛、肌肉麻痹、呼吸困難）或者慢性中毒癥狀（例如脫毛、腳趾甲變色和變脆、關(guān)節(jié)紅腫、肝臟損害等）。

3 討論

影響蛋雞生產(chǎn)性能的因素很多，包括個(gè)體差異、環(huán)境、日糧能量水平等；而產(chǎn)蛋率、平均蛋重、蛋殼重量、蛋殼強(qiáng)度是評(píng)估蛋雞生產(chǎn)性能的重要指標(biāo)。

V.Tufarelli等［17］研究發(fā)現(xiàn)，在40周齡褐殼蛋雞日糧中添加外源硒后，蛋雞日耗料量、蛋重、產(chǎn)蛋率沒(méi)有顯著差異。然而，P.Zoran等［18］研究認(rèn)為，飼喂硒（無(wú)機(jī)硒0.4 mg/kg或酵母硒0.8 mg/kg）對(duì)蛋雞生產(chǎn)性能有影響，在飼喂到8周時(shí)對(duì)蛋重、破蛋率、日耗料量、飼料轉(zhuǎn)化率沒(méi)有顯著影響（P＞0.05），但在第9周后飼喂酵母硒的蛋雞產(chǎn)蛋量高于飼喂亞硒酸鈉（P＜0.01）。V.Tufarelli等［17］報(bào)道，飼料中加入不同水平的硒對(duì)褐殼蛋雞的產(chǎn)蛋率沒(méi)有明顯影響，但對(duì)蛋殼厚度有很大影響；添加0.40 mg/kg無(wú)機(jī)硒、不添加酵母硒的試驗(yàn)組比飼料中含0.11 mg/kg無(wú)機(jī)硒的對(duì)照組相比，蛋重分別高3.61%、2.95%，蛋殼重分別高4.26%、5.38%（P＜0.05）。

本試驗(yàn)中，蛋雞日糧中硒含量在0.3～1.5 mg/kg，而且各試驗(yàn)組日糧中硒含量均高于我國(guó)推薦水平［3］。本試驗(yàn)結(jié)果表明：添加不同水平的富硒豆芽粉對(duì)蛋雞產(chǎn)蛋率有影響，尤其是基礎(chǔ)飼糧中添加15.0～22.5 g/kg（飼料中硒含量為0.9～1.2 mg/kg）時(shí)，對(duì)產(chǎn)蛋雞的生產(chǎn)性能有積極影響，但是在較低或較高的硒水平條件下，則不會(huì)顯著影響產(chǎn)蛋率。蛋雞飼料添加富硒豆芽粉，15 d后可以得到富硒雞蛋。當(dāng)飼糧中添加富硒豆芽粉超過(guò)100 d時(shí)，B組雞蛋平均硒含量為0.478μg/g，E組雞蛋平均硒含量達(dá)到0.507μg/g。本試驗(yàn)硒的最高劑量達(dá)到1.5 mg/kg，未對(duì)蛋雞生產(chǎn)性能造成負(fù)面影響。說(shuō)明長(zhǎng)時(shí)間飼喂含硒的飼料不會(huì)對(duì)蛋雞健康構(gòu)成潛在的風(fēng)險(xiǎn)。在試驗(yàn)期間，試驗(yàn)組蛋雞均未出現(xiàn)異常癥狀或死亡；并且發(fā)現(xiàn)在此研究條件下，富硒豆芽粉（硒水平1.5 mg/kg）的添加不會(huì)引起不良癥狀，如雞急性中毒及慢性中毒，這從動(dòng)物健康角度進(jìn)一步解釋了硒補(bǔ)充劑的安全性。

NRC指出，成年人每天應(yīng)攝入50～250μg硒，并且不應(yīng)超過(guò)500μg［19］。在一些國(guó)家和地區(qū)，土壤中的硒含量通常僅為0.5～2.0 mg/kg，有些地區(qū)甚至僅為0.2 mg/kg。中國(guó)從東北到西南約有72%的地區(qū)土壤缺硒，構(gòu)成貧硒地帶；而湖北恩施、江西豐城、陜西安康等地卻蘊(yùn)藏著豐富的天然硒資源［3］。人體通常從植物和動(dòng)物中攝取硒，在硒缺乏地區(qū)，人們?nèi)粘ｏ嬍倡@得的硒達(dá)不到需求標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)這些地區(qū)的人來(lái)說(shuō)合理補(bǔ)充硒是非常必要的［20-21］。如果按雞蛋重量為60 g計(jì)算，本試驗(yàn)中對(duì)照組的雞蛋硒含量平均為0.29μg/g，那么一枚雞蛋中硒含量為60 g×0.29μg/g=17.4μg；同樣可知B、C、D、E組的一枚60 g雞蛋中硒沉積量分別為28.68μg（60 g×0.478μg/g）、34.38μg（60 g×0.573μg/g）、36.00μg（60 g×0.60μg/g），30.4μg（60 g×0.507μg/g）。如果成年人每天從其他食物中攝入20～30μg硒，每天吃1個(gè)富硒雞蛋，可以達(dá)到NRC推薦的最低硒水平50～250μg；如果每天吃2～5個(gè)富硒雞蛋則可以達(dá)到建議的劑量范圍，只要不超過(guò)500μg的最大限值就不會(huì)中毒。因此，在蛋雞飼料中硒水平為0.6～1.5 mg/kg（富硒豆芽 粉7.5～30.0 g/kg，亞硒酸鈉0.3 mg/kg）的條件下，生產(chǎn)的富硒雞蛋可以滿足普通人的硒需求，達(dá)到補(bǔ)充硒的目的。

根據(jù)NRC的數(shù)據(jù)，如果人類食物中的硒少于0.05 mg/kg，就會(huì)造成人體缺硒，超過(guò)3～5 mg/kg又會(huì)產(chǎn)生中毒，安全范圍是0.10～0.36 mg/kg［8］。富硒豆芽粉是一種有機(jī)硒，毒性較低，是補(bǔ)充硒的良好來(lái)源。

4 結(jié)論

為了生產(chǎn)富硒雞蛋，試驗(yàn)在蛋雞飼糧中添加不同水平的富硒豆芽粉，測(cè)定了蛋雞生產(chǎn)性能和蛋品質(zhì)，結(jié)果表明：在蛋雞基礎(chǔ)飼糧（無(wú)機(jī)硒含量0.3 mg/kg）中添加硒含量40 mg/kg的富硒豆芽粉7.5～30.0 g/kg，可明顯提高蛋雞產(chǎn)蛋性能和蛋品質(zhì)，表明含有機(jī)硒的豆芽粉是一種合適的富硒雞蛋生產(chǎn)材料。