趙廣平，史炯，程晶晶，陳永學(xué)

(邯鄲市中心醫(yī)院麻醉科，河北 邯鄲 056008)

術(shù)后認(rèn)知功能障礙(postoperative cognitive dysfunction,POCD)為麻醉和手術(shù)后患者出現(xiàn)的中樞神經(jīng)系統(tǒng)并發(fā)癥，患者在術(shù)后表現(xiàn)出人格、人際交往與認(rèn)知學(xué)習(xí)能力障礙，主要為記憶力、集中力及話語(yǔ)理解力、社交能力較術(shù)前退化、受損，可在術(shù)后一段時(shí)間持續(xù)，部分并發(fā)癥持續(xù)時(shí)間甚至達(dá)數(shù)周，尤其對(duì)合并基礎(chǔ)疾病多的老齡患者預(yù)后較差。延長(zhǎng)住院時(shí)間、重癥監(jiān)護(hù)室內(nèi)滯留時(shí)間增加了術(shù)后并發(fā)癥的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)[1-2]，因此如何降低POCD發(fā)生率仍是目前臨床研究的重點(diǎn)之一。川陳皮素為中藥陳皮的主要成分之一，屬于多甲氧基黃酮類化合物，對(duì)乳腺癌、胃癌、肺癌及結(jié)腸癌等多種癌癥有抵抗作用，可抑制腫瘤血管生成，從而阻礙癌細(xì)胞增殖、侵襲、遷移并促進(jìn)細(xì)胞凋亡[3-5]。川陳皮素還可預(yù)防動(dòng)脈血栓形成，減輕糖尿病性心血管功能障礙[6]。核因子E2相關(guān)因子-2(nuclear factor E2-related factor 2，Nrf-2)、γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-glutamylcysteine synthetase，γ-GCS)、血紅素氧合酶(heme oxygenase，HO-1)為神經(jīng)元細(xì)胞損傷后常見(jiàn)的氧化應(yīng)激性指標(biāo)；含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-12(caspase-12)是內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激(endoplasmic reticulum stress，ERS)通路重要調(diào)控蛋白，參與細(xì)胞凋亡的調(diào)控；環(huán)磷腺苷效應(yīng)元件結(jié)合蛋白(cAMP-response element binding protein，CREB)為特定的記憶調(diào)節(jié)基因；糖原合成酶激酶-3β(glycogen synthase kinase-3β，GSK-3β)則可調(diào)控神經(jīng)細(xì)胞生長(zhǎng)、增殖及凋亡。楊華等[7]報(bào)道川陳皮素可降低腦梗死大鼠低氧誘導(dǎo)因子-1α(hypoxia inducible factor-1，HIF-1α)含量，提高血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)含量，下調(diào)Cleaved caspase3蛋白表達(dá)而抑制神經(jīng)細(xì)胞凋亡，據(jù)此推測(cè)川陳皮素可能對(duì)改善麻醉后認(rèn)知功能障礙也有一定作用。因此，本文擬探討川陳皮素對(duì)麻醉后老齡認(rèn)知功能障礙大鼠學(xué)習(xí)記憶功能的改善作用，以Nrf-2、γ-GCS、HO-1、CREB、GSK-3β、caspase-12為監(jiān)測(cè)的定量指標(biāo)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 Sprague Dawley(SD)大鼠一般壽命為2.5～3年，依據(jù)人類60歲即為老年年齡的標(biāo)準(zhǔn)計(jì)算，SD大鼠進(jìn)入老齡化時(shí)間約為1.7年，即20月齡。本次選取18～20月齡的健康雄性SD大鼠35只，體重470～540 g，平均(505.41±51.27)g，均由武漢大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供[SCXK(鄂)2014-004]，動(dòng)物福利批次編號(hào)DWFL-201403005，依據(jù)該實(shí)驗(yàn)中心的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)倫理委員會(huì)相關(guān)規(guī)定進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作。SD大鼠均飼養(yǎng)于標(biāo)準(zhǔn)鼠籠，光照周期12/12 h光/暗循環(huán)，相對(duì)濕度45%～50%，溫度22～24 ℃，不間斷供給水、食物，適應(yīng)性飼養(yǎng)1周使大鼠適應(yīng)試驗(yàn)環(huán)境方可開(kāi)始實(shí)驗(yàn)。

1.1.2 主要儀器與試劑 水平溫控?fù)u床(XMOOOLDR-MLM，北京中西遠(yuǎn)大科技有限公司)，體重稱、高速低溫離心機(jī)、電泳轉(zhuǎn)移槽與垂直電泳儀均由北京六一儀器廠生產(chǎn)，自動(dòng)洗板儀(ELX50型，美國(guó)Bio-Tek Instruments Inc)，漩渦振蕩器(XW-80A型，上海精料實(shí)驗(yàn)有限公司)，Morris水迷宮及分析軟件(中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥物研究所)，F(xiàn)luor Chen5500凝膠成像分析系統(tǒng)(美國(guó)Thermo公司)；1.5%異氟烷(江蘇恩華醫(yī)藥公司)，川陳皮素(陜西慧科生物科技有限公司)，β-actin抗體(北京中衫金橋生物技術(shù)公司，貨號(hào)：A-09)；兔抗Nrf-2、γ-GCS、HO-1、CREB、GSK-3β、caspase-12多克隆抗體(均購(gòu)自美國(guó)KPL公司，貨號(hào)分別為A-AP52270、PAB4279、H00197259、QC999Hu01、WL03683、ABP50853)，抗體稀釋液(碧云天生物科技研究所)，SDS-聚丙烯酰胺凝膠(PAGE)電泳液粉劑(碧云天生物科技研究所)，BCA蛋白濃度測(cè)定試劑盒(北京德萊生物科技有限公司)等。

1.2 方法

1.2.1 水迷宮預(yù)訓(xùn)練 訓(xùn)練實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前，以500 g奶粉將水迷宮中的水混勻成乳白色，遮蔽圓形平臺(tái)。在適應(yīng)性訓(xùn)練開(kāi)始前1 d，將大鼠置于水中自由游泳5 min，剔除不會(huì)游泳的大鼠。后將水迷宮中平臺(tái)露出水面，使動(dòng)物可看見(jiàn)平臺(tái)，將動(dòng)物放入池中，若大鼠毫無(wú)困難直接游向平臺(tái)則說(shuō)明其視力正常，由此排除視力障礙對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響。由專門的實(shí)驗(yàn)人員進(jìn)行操作，實(shí)驗(yàn)中保持環(huán)境安靜和穩(wěn)定，動(dòng)物放入水中后立即離開(kāi)，并維持水迷宮周圍物體位置及光源不變。通過(guò)預(yù)訓(xùn)練的30只大鼠進(jìn)入后續(xù)研究。

1.2.2 分組及建模 分組：水迷宮預(yù)訓(xùn)練結(jié)束后第1天將30只大鼠隨機(jī)分為正常組、模型組、低劑量組、中劑量組、高劑量組，每組各6只。建立模型：禁食不禁水16 h后，在麻醉箱出氣口處檢測(cè)的異氟烷濃度維持在1.5%時(shí)，將模型組、低劑量組、中劑量組和高劑量組的大鼠放置于麻醉誘導(dǎo)箱內(nèi)隔板上部，麻醉生效時(shí)開(kāi)始計(jì)時(shí)，連續(xù)吸入2 h濃度為1.5%的異氟烷。正常組吸入同樣時(shí)間的含30%氧氣的混合氣體。麻醉期間監(jiān)測(cè)出氣口處的異氟烷濃度，適時(shí)調(diào)整異氟烷揮發(fā)罐刻度，保持麻醉誘導(dǎo)箱中異氟烷氣體濃度恒定。麻醉生效標(biāo)準(zhǔn)：大鼠夾尾反射消失，此時(shí)開(kāi)始計(jì)時(shí)并讓大鼠在麻醉環(huán)境中維持2 h。麻醉完全恢復(fù)標(biāo)準(zhǔn)：實(shí)驗(yàn)大鼠從麻醉箱中取出后自然蘇醒且可在地板上穩(wěn)定自主地行走，記錄其時(shí)間，為后續(xù)實(shí)驗(yàn)做參考。

1.2.3 川陳皮素注射方法 低劑量組、中劑量組、高劑量組分別腹腔內(nèi)注射10 mg/kg、20 mg/kg、30 mg/kg川陳皮素，連續(xù)3 d，模型組及正常組經(jīng)腹腔注射同等體積的吐溫-80，連續(xù)3 d。其中前2 d為麻醉實(shí)施前，第3天為麻醉完全恢復(fù)后2 h。注射藥物器具均滅菌消毒，注射時(shí)先回抽以避免注射針頭誤入血管內(nèi)。

1.2.4 Morris水迷宮實(shí)驗(yàn) 在異氟烷麻醉完全恢復(fù)24 h后，連續(xù)進(jìn)行4 d的Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)。方法：將水池分為4個(gè)象限，依據(jù)順時(shí)針?lè)较驑?biāo)記為Ⅰ～Ⅳ，水池及平臺(tái)均為黑色，平臺(tái)固定于第Ⅲ象限，將水池染成黑色以隱匿水下平臺(tái)，保持水溫26 ℃，打開(kāi)計(jì)算機(jī)，確定設(shè)備及軟件工作正常，經(jīng)自動(dòng)圖像拍攝系統(tǒng)記錄游泳軌跡，以入水時(shí)找到平臺(tái)時(shí)間為潛伏期，測(cè)4次后取均值，評(píng)估其學(xué)習(xí)記憶能力。在第4天記錄各組大鼠在目標(biāo)象限中停留時(shí)間及60 s內(nèi)穿越平臺(tái)次數(shù)，測(cè)定空間探索功能，見(jiàn)圖1。

1.2.5 海馬組織取材及制片 水迷宮實(shí)驗(yàn)結(jié)束后大鼠空腹過(guò)夜8 h。每組隨機(jī)選取4只大鼠進(jìn)行心臟灌注，予以10%水合氯醛(3 mL/kg)進(jìn)行腹腔注射麻醉(1%戊巴比妥鈉30 mg/kg)，開(kāi)胸暴露心臟，進(jìn)行左心室插管，后將右心耳剪開(kāi)，快速完整取出全腦組織放入4%中性多聚甲醛灌注固定，并參考前人的研究方法分離海馬組織，以液氮冷凍后置于-80 ℃冰箱保存待測(cè)。剪取1 mm3海馬組織，石蠟包埋，蘇木精-伊紅染色(hematoxylin-eosin staining，HE)，光鏡觀察。

1.2.6 Western blot試驗(yàn) 采用Western blot試驗(yàn)檢測(cè)海馬組織CA1區(qū)的Nrf-2、γ-GCS、HO-1、CREB、GSK-3β、caspase-12表達(dá)水平。組織蛋白試劑盒提取各組腦組織蛋白，經(jīng)BCA法對(duì)總蛋白定量。取40 μg蛋白樣品于12%的SDS-PAGE分離，轉(zhuǎn)膜、封閉后孵育1∶1 000稀釋的一抗及GAPDH，4 ℃孵育過(guò)夜，TBST洗膜(3×5 min)，二抗孵育(辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的羊抗鼠IgG，1∶1 000稀釋)，室溫孵育2 h，采用化學(xué)發(fā)光劑顯色，室溫下避光顯影，采用全自動(dòng)數(shù)目凝膠成像分析系統(tǒng)(Image J)對(duì)蛋白條帶光密度進(jìn)行測(cè)定并分析，相對(duì)表達(dá)量=目的蛋白灰度值/內(nèi)參灰度值，連續(xù)測(cè)3次后取平均值。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

2 結(jié)果

2.1 Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)結(jié)果

隨時(shí)間延長(zhǎng)，各組SD大鼠逃生潛伏期呈縮短趨勢(shì)，與正常組比較，模型組第1～3天逃生潛伏期延長(zhǎng)(P<0.05)，低劑量組、中劑量組、高劑量組在第2 天、第3天逃生潛伏期短于模型組(P<0.05)，第4天中劑量組、高劑量組逃生潛伏期短于模型組(P<0.05)。低劑量組、中劑量組、高劑量組的逃生潛伏期比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。模型組在目標(biāo)象限中停留時(shí)間、穿越平臺(tái)次數(shù)短低于正常組，低劑量組、中劑量組、高劑量組在目標(biāo)象限中停留時(shí)間及穿越平臺(tái)次數(shù)高于模型組，中劑量組、高劑量組在目標(biāo)象限中停留時(shí)間及穿越平臺(tái)次數(shù)高于低劑量組(P<0.05)，且中劑量組、高劑量組在目標(biāo)象限中停留時(shí)間與正常組仍有差異(P<0.05)，而穿越平臺(tái)次數(shù)與正常組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；中劑量組、高劑量組的上述指標(biāo)比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見(jiàn)表1、表2、圖2、圖3。

表1 Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)-學(xué)習(xí)記憶能力

表2 Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)-空間探索功能指標(biāo)

2.2 HE染色結(jié)果

光鏡下可發(fā)現(xiàn)，正常組的大鼠海馬CA1區(qū)錐體細(xì)胞數(shù)目正常，排列緊密，胞漿內(nèi)結(jié)構(gòu)清晰，腦白質(zhì)形態(tài)正常，模型組海馬CA1錐體細(xì)胞缺失脫失，排列疏松，部分細(xì)胞出現(xiàn)核固縮、深染色，腦白質(zhì)無(wú)明顯梗死灶，部分白質(zhì)纖維變稀疏且走行紊亂，低劑量組、中劑量組、高劑量組錐體細(xì)胞缺脫失程度小于模型組，腦白質(zhì)未見(jiàn)梗死灶，白質(zhì)纖維部分稀疏。見(jiàn)圖4、圖5。

2.3 Western blot結(jié)果

模型組海馬組織CA1區(qū)Nrf-2、γ-GCS、HO-1、CREB、GSK-3β、caspase-12水平高于正常組(P<0.05)；低劑量組、中劑量組、高劑量組Nrf-2、γ-GCS、HO-1、CREB、GSK-3β水平高于模型組，caspase-12低于模型組，其中高劑量組的變化最顯著(P<0.05)；低劑量組Nrf-2、γ-GCS、HO-1、CREB、GSK-3β低于中劑量組、高劑量組，而caspase-12高于中劑量組、高劑量組(P<0.05)；中劑量組與高劑量組的各指標(biāo)比較，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。見(jiàn)圖6、圖7。

3 討論

POCD為多種因素誘發(fā)及加重神經(jīng)功能退行性改變引起的并發(fā)癥[8]，而老年人群中樞神經(jīng)系統(tǒng)本身有不同程度退化，多數(shù)合并各種心腦血管疾病更易引起POCD，且近年來(lái)我國(guó)已初步進(jìn)入老齡化社會(huì)，老年人口基數(shù)龐大，接受麻醉手術(shù)的老年患者增多，POCD發(fā)生率增多，早期進(jìn)行預(yù)防、盡早識(shí)別并治療有著重要意義[9]。川陳皮素為從蕓香科柑桔屬橘子的果皮中提取出來(lái)的多甲氧基黃酮類化合物，有廣泛的藥理活性，如抗炎、抗氧化、抗癌、抗動(dòng)脈粥樣硬化、調(diào)節(jié)營(yíng)養(yǎng)神經(jīng)等[10-11]，近年來(lái)研究[12-13]也發(fā)現(xiàn)，川陳皮素有一定的保護(hù)腦屏障、抗阿爾茨海默病及帕金森病作用，但是川陳皮素對(duì)術(shù)后認(rèn)知功能障礙的改善作用目前研究甚少。

異氟烷為最常用的吸入麻醉藥，臨床研究[14]表明1.4%及更高濃度的異氟烷麻醉6 h后可誘導(dǎo)廣泛的腦神經(jīng)凋亡及認(rèn)知功能下降，其機(jī)制可能與GSK-3β活性的增加有關(guān)。本次選擇異氟烷建立麻醉后老齡認(rèn)知功能障礙大鼠模型，在水迷宮Morris實(shí)驗(yàn)-學(xué)習(xí)記憶能力測(cè)試中發(fā)現(xiàn)，隨時(shí)間延長(zhǎng)各組的逃生潛伏期呈下降趨勢(shì)，且模型組第1～3天逃生潛伏期較正常組高，予以低、中、高劑量川陳皮素的大鼠在第2天、第3天逃生潛伏期均短于模型組，而不同劑量的川陳皮素對(duì)逃生潛伏期無(wú)影響，表明川陳皮素可較好改善麻醉后認(rèn)知功能障礙老齡大鼠的學(xué)習(xí)記憶能力，提高其認(rèn)知功能，但未發(fā)現(xiàn)較明顯的劑量效應(yīng)。空間探索功能部分中，模型組在目標(biāo)象限中停留時(shí)間、穿越平臺(tái)次數(shù)短于正常組，川陳皮素給藥的三組在目標(biāo)象限中停留時(shí)間及穿越平臺(tái)次數(shù)高于模型組，且以中劑量組、高劑量組的變化更為顯著，與張紅蕊等[15]報(bào)道結(jié)果相似，均表明川陳皮素可改善麻醉后認(rèn)知功能障礙大鼠的空間探索功能，改善其認(rèn)知功能。但既往Kang等[16]卻認(rèn)為，川陳皮素可改善情緒和新奇識(shí)別記憶，但不能改善空間參照記憶，與本研究結(jié)論不一致，這可能與試驗(yàn)選取的動(dòng)物月齡及樣本量不同有關(guān)，即川陳皮素對(duì)不同種群的空間定位學(xué)習(xí)記憶能力的影響不同。

海馬為學(xué)習(xí)記憶的關(guān)鍵部位，其CA1及CA3區(qū)錐體細(xì)胞為形成記憶的長(zhǎng)時(shí)程增強(qiáng)效應(yīng)(long-term potentiation,LTP)重要區(qū)域，對(duì)異氟烷的麻醉濃度變化異常敏感，且海馬結(jié)構(gòu)與學(xué)習(xí)記憶能力密切相關(guān)，當(dāng)海馬結(jié)構(gòu)功能受損時(shí)可導(dǎo)致認(rèn)知功能障礙[17-18]。本次HE染色顯示，與其他各組相比，模型組海馬CA1錐體細(xì)胞缺失脫失，排列疏松，部分白質(zhì)纖維變稀疏且走行紊亂，與柏慧[19]的觀察結(jié)果相近，表明在異氟烷麻醉后可引起老齡大鼠海馬組織損傷，但其作用機(jī)制仍待進(jìn)一步分析。

Nrf-2屬于CNC家族，為家族中活性最強(qiáng)的轉(zhuǎn)錄因子，在正常情況下，Nrf-2被細(xì)胞質(zhì)中Keap1錨定，其活性相對(duì)抑制，Keap1對(duì)氧化還原酶較敏感，有氧化應(yīng)激時(shí)與Nrf-2解離，使其進(jìn)入細(xì)胞核，在核內(nèi)和抗氧化反應(yīng)元件(antioxidant response element,ARE)作用，啟動(dòng)下游抗氧化蛋白，增強(qiáng)解毒素酶系的表達(dá)，如γ-GCS、HO-1等，清除大量自由基，減輕細(xì)胞損傷，而經(jīng)下調(diào)膠質(zhì)細(xì)胞活化介導(dǎo)對(duì)神經(jīng)元的保護(hù)作用，此外內(nèi)質(zhì)網(wǎng)也易受機(jī)體內(nèi)環(huán)境影響，在氧化應(yīng)激時(shí)即可破壞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)穩(wěn)定性，其中caspase-12為ERS通路的重要調(diào)控蛋白，手術(shù)或麻醉后可使ERS反應(yīng)激活，活化的caspase-12能激活caspase-3、caspase-9而引起細(xì)胞凋亡[20]。本研究發(fā)現(xiàn)，模型組海馬組織CA1區(qū)Nrf-2、γ-GCS、HO-1、caspase-12高于正常組，川陳皮素給藥的三組Nrf-2、γ-GCS、HO-1也高于模型組，而caspase-12則低于模型組，其中高劑量組的變化最顯著，與田玉娜等[21]研究結(jié)果相似，表明川陳皮素可有效改善麻醉后老齡大鼠認(rèn)知功能及海馬組織神經(jīng)元結(jié)構(gòu)，上調(diào)Nrf2、γ-GCS、HO-1的表達(dá)，下調(diào)caspase-12的表達(dá)，抑制海馬組織凋亡，其機(jī)制可能與增強(qiáng)Nrf-2活性及激活抗氧化應(yīng)激通路有關(guān)。在麻醉后創(chuàng)傷環(huán)境下，對(duì)氧化應(yīng)激敏感的Keap1即釋放Nrf-2入細(xì)胞核，Nrf-2活性增強(qiáng)、表達(dá)量增多，啟動(dòng)下游抗氧化蛋白(如γ-GCS、HO-1等)表達(dá)，中和大量氧化應(yīng)激產(chǎn)物、神經(jīng)元毒素等，以保護(hù)海馬神經(jīng)元，但仍不能抵抗麻醉?yè)p傷導(dǎo)致的氧化應(yīng)激，因此海馬損傷使大鼠出現(xiàn)認(rèn)知功能障礙，經(jīng)川陳皮素治療的麻醉后老齡大鼠認(rèn)知功能有所改善，海馬Nrf-2表達(dá)水平較異氟烷麻醉者高，進(jìn)而推測(cè)川陳皮素可能為Nrf-2的激活劑，可誘導(dǎo)Nrf-2活性增強(qiáng)、表達(dá)量增多，繼而產(chǎn)生更多的抗氧化蛋白以保護(hù)海馬結(jié)構(gòu)，激活Nrf-2-ARE信號(hào)通路的抗氧化作用，因此川陳皮素對(duì)麻醉后老齡大鼠的認(rèn)知功能障礙有一定治療作用。

CREB為特定的調(diào)節(jié)記憶基因，可經(jīng)cAMP和/或Ca2+通過(guò)各種蛋白激酶在Ser133磷酸化而激活核中的CREB信號(hào)，從而改變認(rèn)知功能。GSK-3β為一種絲氨酸/酸酸蛋白激酶，對(duì)神經(jīng)細(xì)胞生長(zhǎng)、增殖及凋亡有重要調(diào)控作用。早期研究[22]發(fā)現(xiàn)，通過(guò)川陳皮素治療可增加CREB信號(hào)傳導(dǎo)而挽救亞硝基-谷胱甘肽還原酶(S-nitrosoglutathione reductase,GSNOR)誘導(dǎo)衰老過(guò)程中的神經(jīng)衰老。本次模型組海馬組織CA1區(qū)CREB、GSK-3β水平高于正常組，川陳皮素給藥的三組CREB、GSK-3β水平高于模型組，其中高劑量組的變化最顯著，表明川陳皮素可通過(guò)增加老齡大鼠的海馬體中CREB/GSK-3β依賴性的信號(hào)傳導(dǎo)途徑，減輕麻醉后海馬神經(jīng)元損傷，改善其認(rèn)知功能。早期Bi等[23]也報(bào)道，川陳皮素有抗氧化、抗炎、抗凋亡作用，川陳皮素可通過(guò)激活磷酸化磷酸化蛋白激酶B(phosphorylated-akt，P-Akt)、CREB及腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)蛋白表達(dá)，降低B細(xì)胞淋巴瘤2相關(guān)X蛋白水平，改善衰老大鼠由異氟烷誘導(dǎo)的認(rèn)知障礙。Zhang等[24]的研究也發(fā)現(xiàn)，川陳皮素可通過(guò)抑制表達(dá)Slug的神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞中AKT/GSK3beta/β-catenin信號(hào)傳導(dǎo)途徑來(lái)抑制侵襲。畢俊英[25]發(fā)現(xiàn)，川陳皮素可改善老年大鼠麻醉后學(xué)習(xí)記憶功能的損害，且大劑量川陳皮素的改善作用更明顯，其可能是通過(guò)調(diào)節(jié)PI3K/Akt-核轉(zhuǎn)錄因子κB(nuclear transcription factor-κB,NF-κB)通路所介導(dǎo)的中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)炎癥反應(yīng)及氧化應(yīng)激反應(yīng)來(lái)實(shí)現(xiàn)的。以上研究均表明激活CREB/GSK-3β通路可能也是川陳皮素減輕老齡大鼠麻醉后認(rèn)知功能障礙的機(jī)制。

綜上所述，川陳皮素可能通過(guò)激活Nrf-2、γ-GCS、HO-1、CREB、GSK-3β的表達(dá)增強(qiáng)抗氧化應(yīng)激，減少caspase-12的表達(dá)抑制凋亡，進(jìn)而改善麻醉后老齡認(rèn)知障礙大鼠的學(xué)習(xí)記憶功能。