丁雪珍

（濰坊職業(yè)學(xué)院農(nóng)林科技學(xué)院，山東 濰坊 262737）

長壽花（Narcissus jonquilla L.）又名壽星花、伽藍(lán)花，為景天科伽藍(lán)菜屬多肉植物。多年生肉質(zhì)草本。株高10-30厘米。圓錐狀聚傘花序，花序長7-10厘米。每株有花序5-7個(gè)，花瓣4片，花朵色彩豐富。近年來長壽花憑借植株小巧、株型緊湊、花色艷麗、花量大、花期長、易養(yǎng)植、耐干旱等特點(diǎn)脫穎而出，成為人見人愛的室內(nèi)觀花小盆栽。

長壽花通常采用播種、扦插和分株等繁殖，但由于市場銷量大的重瓣系列多為進(jìn)口品種，扦插繁殖退化嚴(yán)重，播種繁殖變異較大，遠(yuǎn)遠(yuǎn)滿足不了市場的需要。為保持重瓣長壽花品種的優(yōu)良特性，同時(shí)提高其繁殖速率，為生產(chǎn)提供大量優(yōu)質(zhì)種苗，本試驗(yàn)對(duì)重瓣長壽花進(jìn)行組織培養(yǎng)，以找到一種適合重瓣長壽花的快速繁殖方法。

1.試驗(yàn)材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

試驗(yàn)用長壽花品種為紫繽，取自濰坊職業(yè)學(xué)院農(nóng)林科技學(xué)院智能溫室。2017年11月從盆栽植株上選取幼嫩葉片和莖段作為外植體。

1.2 培養(yǎng)基的配制

以MS為基本培養(yǎng)基，添加2%-3%的白砂糖和0.65%的瓊脂粉。根據(jù)各階段試驗(yàn)設(shè)計(jì)添加不同濃度的6-BA和NAA，pH值均為6.2-6.4。按照固體培養(yǎng)基常規(guī)制作方法進(jìn)行配制、分裝、高壓滅菌，滅菌完成后取出冷卻備用。

1.3 外植體的選擇與處理

從盆栽植株上，選取健壯無病蟲害的最上端第一片展開葉片和幼嫩莖段（2～3cm）作為外植體。

將莖段剪去葉片，留下大約5mm長的葉柄；葉片不用修剪。把處理好的莖段和葉片沖洗干凈，再放到5%的洗潔精溶液中浸洗約5min，最后用流水沖洗干凈，放到帶蓋的廣口瓶中備用。

1.4 外植體的表面滅菌與接種

超凈工作臺(tái)按照常規(guī)進(jìn)行消毒后，將洗凈的外植體放到超凈工作臺(tái)上，先用75%酒精消毒30-60s，再用有效氯濃度1%的次氯酸鈉溶液滅菌 10～20 min。最后，用無菌水沖洗3遍后，分別接種于不同的誘導(dǎo)培養(yǎng)基上。

1.5 外植體的初代培養(yǎng)

將外植體接種于誘導(dǎo)培養(yǎng)基上，誘導(dǎo)分化試驗(yàn)所用激素濃度和配比如下：6-BA選擇0.2mg/L，0.5mg/L兩個(gè)濃度梯度，NAA選擇0.1mg/L，0.2mg/L兩個(gè)濃度梯度，以不添加任何激素的空白MS培養(yǎng)基為對(duì)照，共5個(gè)處理，每個(gè)處理接種20瓶。接種后放到溫度25℃左右、光照時(shí)間12 h/d、光照強(qiáng)度1000～2000 lx的培養(yǎng)條件下，每天觀察記錄分化情況，30天統(tǒng)計(jì)分化率。

1.6 增殖培養(yǎng)

以初代培養(yǎng)分化出的新生小苗（或愈傷組織）為轉(zhuǎn)接材料，把它們接種到不同配方的MS培養(yǎng)基上，6-BA（mg/L）設(shè)0.1，0.5，1.0三個(gè)濃度梯度，NAA（mg/L）設(shè)0.1，0.2兩個(gè)濃度梯度。30天統(tǒng)計(jì)增殖情況。

1.7 生根培養(yǎng)

將幼苗剪切成1.5～2.0cm長的嫩莖，轉(zhuǎn)接至1/2MS培養(yǎng)基上，添加IBA濃度（mg/L）為0.1，0. 25，0.5 三個(gè)梯度。每天觀察記錄生根情況，15天統(tǒng)計(jì)生根率，從而篩選出最適生根培養(yǎng)基配方。

2.結(jié)果與分析

2.1 外植體初代培養(yǎng)情況

外植體在不同配方的初代培養(yǎng)基的分化情況見表1、表2。

表1 不同培養(yǎng)基配方對(duì)長壽花葉片誘導(dǎo)分化的影響

表2 不同培養(yǎng)基配方對(duì)長壽花莖段誘導(dǎo)分化的影響

1 0．2 0．1 55 18．2 2 0．2 0．2 65 38．5 3 0．5 0．1 80 62．5 4 0．5 0．2 95 84．2 5 0 0 0 0

由表1可知，不同濃度的激素配比，既影響到葉片的愈傷組織發(fā)生率，也影響到芽的分化率。6-BA0.5mg/L與NAA0.2mg/L組合下，長壽花葉片分化率高，為最佳組合。

由表2可以看出，6-BA0.5mg/L與NAA0.1mg/L的激素組合，長壽花莖段不僅分化率高，而且分化芽數(shù)量多，芽體大小適中，為莖段培養(yǎng)最佳初代培養(yǎng)基。

2.2 不同濃度激素對(duì)增殖培養(yǎng)的影響

將初代培養(yǎng)得到的小芽轉(zhuǎn)入不同激素濃度的增殖培養(yǎng)基中，觀察繼代增殖情況，30天的統(tǒng)計(jì)結(jié)果見表3。

表3 不同濃度激素對(duì)長壽花增殖培養(yǎng)的影響

由表3可知， 6-BA與NAA組合對(duì)長壽花的增殖有明顯的促進(jìn)作用，但長壽花對(duì)激素比較敏感，高濃度的6-BA雖能促進(jìn)增殖，但苗體細(xì)弱不利于后期的生根與移栽。所以，增殖培養(yǎng)適宜的激素組合為6-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L或6-BA0.5mg/L+NAA0.2mg/L。

2.3 不同濃度IBA對(duì)生根培養(yǎng)的影響

長壽花組培苗在生根培養(yǎng)基上，大約5天左右就開始生根，同時(shí)苗體也開始長高，不同濃度IBA處理對(duì)生根的影響見表4。

表4 不同濃度IBA對(duì)長壽花生根培養(yǎng)的影響

IBA（mg/L） 0．1 0．25 0．5根原基形成時(shí)間（天） 7 5 8生根率（%） 92 100 100根系生長情況 較細(xì) 健壯基部有愈傷組織，生長較慢

由表4可以看出，處理2（1/2MS +NAA0.25mg/L）不僅生根速度快，而且生根率高、根系生長健壯，是最佳生根培養(yǎng)基。

3.結(jié)語

試驗(yàn)結(jié)果表明，以重瓣長壽花的葉片和莖段作為外植體進(jìn)行組培快繁，操作容易、速度快，便于推廣。

葉片誘導(dǎo)（圖1）、莖段誘導(dǎo)（圖2）、增殖培養(yǎng)（圖3）情況如下圖所示。

圖1

圖2

圖3