易麗貞　楊俊　謝濤　吳雪芬　劉欣　岳增輝

〔摘要〕 目的 觀察隔藥餅灸對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化（atherosclerosis， AS）易損斑塊兔Toll樣受體2（toll like receptor 2， TLR2）、Toll樣受體4（toll like receptor 4， TLR4）、核因子κB（nuclear factor kappa B， NF-κB）變化的影響，探討其可能的作用機(jī)制。方法 將60只普通級(jí)新西蘭兔隨機(jī)分為空白組、模型組、直接灸組、隔藥餅灸組、藥物組，每組12只。通過高脂飼養(yǎng)+腹主動(dòng)脈球囊損傷制作兔AS易損斑塊模型。采用免疫組化法觀察腹主動(dòng)脈TLR2、TLR4、NF-κB的抗原活性;透射電鏡觀察腹主動(dòng)脈超微結(jié)構(gòu)。結(jié)果 與空白組比較，模型組、直接灸組、隔藥餅灸組和藥物組TLR2、TLR4、NF-κB灰度值均顯著降低（P<0.05或P<0.01）;與模型組比較，直接灸組、隔藥餅灸組和藥物組TLR2、TLR4、NF-κB灰度值均顯著升高（P<0.05或P<0.01）;與直接灸組相比，隔藥餅灸組和藥物組TLR2、TLR4、NF-κB灰度值明顯升高（P<0.05或P<0.01）。電鏡下觀察，模型組較空白組主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞病變更嚴(yán)重，內(nèi)皮細(xì)胞內(nèi)含大量脂質(zhì);直接灸組、隔藥餅灸組、藥物組內(nèi)皮細(xì)胞大多形態(tài)正常，有少量脂質(zhì)沉積。結(jié)論 隔藥餅灸穩(wěn)定AS易損斑塊的機(jī)制可能是通過降低TLR2、TLR4、NF-κB的抗原活性，下調(diào)其表達(dá)，以延緩AS的形成。

〔關(guān)鍵詞〕 隔藥餅灸;動(dòng)脈粥樣硬化;易損斑塊;Toll樣受體2;Toll樣受體4;核轉(zhuǎn)錄因子κB

〔中圖分類號(hào)〕R245? ? ? ?〔文獻(xiàn)標(biāo)志碼〕A? ? ? ?〔文章編號(hào)〕doi：10.3969/j.issn.1674-070X.2021.03.008

〔Abstract〕 Objective To observe the effects of herbal cake separated moxibustion on the changes of toll like receptor 2 （TLR2）， toll like receptor 4 （TLR4） and nuclear factor kappa B （NF-κB） in vulnerable plaques of atherosclerosis （AS） in rabbits， and to explore the possible mechanism. Methods 60 ordinary New Zealand rabbits were randomly divided into the blank group， the model group， the direct moxibustion group， the herbal cake separated moxibustion group and the medicine group， with 12 rabbits in each group. AS vulnerable plaques rabbit model was established by feeding high-fat diet and balloon injury of abdominal aorta. Immunohistochemistry was used to observe the antigen activity of TLR2， TLR4 and NF-κB in abdominal aorta. A transmission electron microscope was used to observe the ultrastructure of the abdominal aorta. Results Compared with the blank group， the grey levels of TLR2， TLR4 and NF-κB were significantly reduced （P<0.05 or P<0.01） in the model group， the direct moxibustion group， the herbal cake separated moxibustion group and the medicine group; compared with the model group， the grey levels of TLR2， TLR4 and NF-κB were significantly raised （P<0.05 or P<0.01） in the direct moxibustion group， the herbal cake separated moxibustion group and the medicine group; compared with the direct moxibustion group， the grey levels of TLR2， TLR4 and NF-κB were significantly raised （P<0.05 or P<0.01） in the herbal cake separated moxibustion group and the medicine group. Under the electron microscope， compared with the blank group， the pathological changes of aortic endothelial cells were more serious and contained a large amount of lipid in model group; most of the endothelial cells in direct moxibustion group， the herbal cake separated moxibustion group and the medicine group， had normal morphology with a small amount of lipid deposition. Conclusion The mechanism of herbal cake separated moxibustion to stabilize vulnerable plaques of AS may be through reducing the antigen activity of TLR2， TLR4， NF-κB， and down regulating their expression， so as to delay the formation of AS.

〔Keywords〕 herbal cake separated moxibustion; atherosclerosis; vulnerable plaque; toll like receptor 2; toll like receptor 4;nuclear factor kappa B

動(dòng)脈粥樣硬化（atherosclerosis， AS）是目前所知導(dǎo)致冠狀動(dòng)脈心臟病、頸動(dòng)脈疾病及外周動(dòng)脈疾病最常見的原因。AS給人們的生存質(zhì)量和健康狀況帶來了嚴(yán)重的影響，其發(fā)展是慢性炎癥過程，以炎癥細(xì)胞聚集等為特征[1]。易損斑塊（vulnerable plaque， VAP）是指短期內(nèi)具有高血栓形成風(fēng)險(xiǎn)并有可能極速變成罪犯斑塊的AS斑塊，其形成與炎癥反應(yīng)、內(nèi)皮功能損傷等病理過程有著密切聯(lián)系[2]。Toll樣受體（toll

like receptor， TLRs）是天然免疫過程中的關(guān)鍵參與者，同時(shí)它也是炎癥與AS之間的聯(lián)系紐帶，是天然免疫系統(tǒng)中的細(xì)胞跨膜受體，也是病原模式識(shí)別受體[3]，可與配體結(jié)合后促進(jìn)核轉(zhuǎn)錄因子κB（nuclear factor kappa B， NF-κB）發(fā)生核轉(zhuǎn)移，與AS的發(fā)展聯(lián)系密切[4]。研究[5-6]發(fā)現(xiàn)，Toll樣受體2（toll like

receptor 2， TLR2）通過促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞活化及炎癥反應(yīng)的發(fā)生促使AS斑塊形成。Toll樣受體4（toll like

receptor 4， TLR4）能促使斑塊破裂進(jìn)而增強(qiáng)斑塊的不穩(wěn)定性[7]。本課題組前期研究[8-13]表明，隔藥餅灸可改善脂質(zhì)代謝，干預(yù)炎癥反應(yīng)，減少炎癥因子的釋放，能夠緩解AS的發(fā)展，穩(wěn)定AS斑塊。本研究通過探討隔藥餅灸對(duì)AS易損斑塊兔TLR2、TLR4、NF-κB的影響，探討其可能的作用機(jī)制。

1 材料與方法

1.1? 實(shí)驗(yàn)材料

1.1.1? 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物? 健康新西蘭兔60只，雌雄各半，體質(zhì)量1.5～2.0 kg，購于湖南省長沙市天勤生物有限公司[質(zhì)量許可證號(hào)：SCXK（湘）2009-0012]。分籠飼養(yǎng)于動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心（普通級(jí)），自由飲水，飼養(yǎng)溫度范圍18～24 ℃，濕度范圍50%～70%。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物處置均符合《關(guān)于善待實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的指導(dǎo)性意見》。

1.1.2? 主要試劑及儀器? 艾柱（河南南陽漢醫(yī)艾絨廠，型號(hào)：東方一型）;阿托伐他汀鈣片（10 mg/片，北京嘉林藥業(yè)股份有限公司，批號(hào)：H19990258）;Ad5-p53重組載體（廣東省深圳賽百諾基因技術(shù)有限公司，批號(hào)：20080401）;組胺（美國sigma公司，批號(hào)：HT-7250）;斑點(diǎn)蝰蛇毒（廣州新源蛇毒）;SABC免疫組化染色試劑盒、DAB顯色試劑盒（武漢博士德生物工程有限公司，批號(hào)：08C20B、08G01A22）;TLR2、TLR4、NF-κB抗體（abcam公司，批號(hào)：ab13855、ab3066、ab95020）。雙目顯微鏡（麥克奧迪實(shí)業(yè)集團(tuán)有限公司，型號(hào)：Motic B3）;球囊導(dǎo)管與附件[（3.0～3.5 mm）×15 mm普通球囊導(dǎo)管、0.014/195 cm導(dǎo)引導(dǎo)絲、球囊擴(kuò)張壓力泵，美國Cordis公司]。

1.2? 分組與造模

1.2.1? 動(dòng)物分組? 60只新西蘭兔隨機(jī)分為5組：空白組、模型組、直接灸組、隔藥餅灸組、藥物組，每組12只。實(shí)驗(yàn)期間，空白組死亡2只（腹瀉2只），模型組死亡3只（術(shù)后感染2只，腹瀉1只），直接灸組死亡4只（術(shù)后感染1只，猝死1只，腹瀉2只），隔藥餅灸組死亡3只（術(shù)后感染2只，猝死1只），藥物組死亡3只（麻醉意外1只，腹瀉1只，猝死1只）。

1.2.2? 模型建立? 造模方法參照文獻(xiàn)[14]和[15]，采用球囊損傷術(shù)結(jié)合高脂喂養(yǎng)方式復(fù)制AS易損斑塊模型。高脂飼料由15%蛋黃粉、2%膽固醇、0.5%膽酸鈉、5%豬油、77.5%普通飼料組成。除空白組外，其余組均行腹主動(dòng)脈球囊損傷術(shù)。術(shù)后連續(xù)3 d給予青霉素肌肉注射（80萬U/d）防止術(shù)后感染[16]。術(shù)后第8周末利用球囊注入Ad5-p53重組載體（今又生）進(jìn)行基因轉(zhuǎn)染，共2周。于動(dòng)物處死前48 h、24 h，將除空白組外的實(shí)驗(yàn)兔在腹膜下推注斑點(diǎn)蛇蝰毒0.15 mg/kg，30 min后沿耳緣靜脈處注射組胺0.02 mg/kg，先后兩次以觸發(fā)易損斑塊破裂。模型以腹主動(dòng)脈出現(xiàn)AS斑塊為造模成功標(biāo)準(zhǔn)。

1.3? 干預(yù)方法

1.3.1? 空白組、模型組? 將實(shí)驗(yàn)兔捆綁于兔臺(tái)上，不進(jìn)行操作，每天20 min，連續(xù)8周。

1.3.2? 直接灸組? 將實(shí)驗(yàn)兔穴位剃毛后捆綁于兔臺(tái)，將艾柱（艾柱下有紙質(zhì)墊片）放置穴位上進(jìn)行施灸，每日施灸連續(xù)3壯。穴位的選?。孩窠M穴位（巨闕、天樞、豐?。?、Ⅱ組穴位（心俞、肝俞、脾俞），每天交替施灸，共治療8周。治療期間若出現(xiàn)水泡，保持干燥，以防感染。

1.3.3? 隔藥餅灸組? 取3～5 g藥粉（由等比例丹參、郁金、澤瀉、大黃、山楂藥物組成）用陳醋調(diào)成糊狀后制作大小合適的的藥餅，將艾柱放置在藥餅上再一同放置于穴位上進(jìn)行施灸，其余操作同直接灸組，共治療8周。

1.3.4? 藥物組? 按照1 mg/（kg·d）的劑量給予阿托伐他汀鈣片拌入實(shí)驗(yàn)兔第1口飼料，吃完后再補(bǔ)充剩余高脂飼料，共治療8周。

1.4? 觀察指標(biāo)及檢測方法

1.4.1? 免疫組化法檢測TLR2、TLR4、NF-κB抗原活性? 于13周末處死動(dòng)物，剖開腹部，選取主動(dòng)脈弓到髂總動(dòng)脈分叉處的主動(dòng)脈剪下，再將基因轉(zhuǎn)染處及血栓形成處血管段分3段備用。將所取的腹主動(dòng)脈用PBS沖洗后再用4%多聚甲醛固定，常規(guī)脫水、包埋、切片、脫蠟、抗原修復(fù)、過氧化氫滅活、血清封閉。滴加適當(dāng)稀釋一抗兔TLR2、TLR4、NF-κB 單克隆抗體（1∶100）、生物素化山羊抗兔 IgG、SABC后加入DAB顯色，蘇木素襯染，沖洗、封片，顯微鏡觀察。每個(gè)切片計(jì)數(shù)1個(gè)視野，每個(gè)切片重復(fù)測量3次，在MIAS醫(yī)學(xué)圖象分析系統(tǒng)分析，取平均值作為該切片指標(biāo)表達(dá)的灰度值。

1.4.2? 電鏡觀察內(nèi)皮超微結(jié)構(gòu)變化? 取材后使用2.5%的戊二醛混合固定液固定、脫水、滲透、包埋后，半薄切片，用甲苯氨藍(lán)染色觀察，光鏡定位選取所需要的部位，超薄切片（500 A），醋酸鈉、硝酸鉛雙重染色，透射電鏡觀察并采集照片。

1.5? 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

所有實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS 17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。各檢測指標(biāo)統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)均以“x±s”表示，服從正態(tài)分布則采用單因素方差分析，組間比較方差齊采用LSD檢驗(yàn)，方差不齊采用非參數(shù)檢驗(yàn)，均以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1? 各組兔一般情況

實(shí)驗(yàn)期間，空白組實(shí)驗(yàn)兔精神狀態(tài)良好，動(dòng)作靈敏，毛色光澤，大小便情況無明顯改變。模型組實(shí)驗(yàn)兔精神狀態(tài)較差，體質(zhì)量增長顯著，目光呆滯，反應(yīng)遲鈍，毛色黯淡。各治療組實(shí)驗(yàn)兔精神狀態(tài)一般，反應(yīng)尚可。

2.2? 各組兔腹主動(dòng)脈TLR2、TLR4、NF-κB抗原活性比較

與空白組比較，模型組TLR2、TLR4、NF-κB灰度值均顯著降低（P<0.01）;與模型組比較，直接灸組、隔藥餅灸組和藥物組TLR2、TLR4、NF-κB的灰度值均具有明顯的上調(diào)（P<0.05或P<0.01），且隔藥餅灸組、藥物組優(yōu)于直接灸組（P<0.05或P<0.01）。見表1、圖1。

2.3? 各組兔腹主動(dòng)脈超微結(jié)構(gòu)變化

電鏡下觀察，模型組較空白組腹主動(dòng)脈內(nèi)皮病變嚴(yán)重，內(nèi)皮細(xì)胞內(nèi)含大量脂質(zhì)和泡沫樣變細(xì)胞;直接灸組、隔藥餅灸組、藥物組內(nèi)皮細(xì)胞大多形態(tài)正常，偶見線粒體水腫，有少量脂質(zhì)沉積。見圖2。

3 討論

隔藥餅灸是指在穴位上放置藥餅，再將艾柱放置藥餅上的一種灸法，是集腧穴、藥物、艾灸作用為一體的治療方法。研究[17]表明，艾葉燃燒時(shí)可使物理因子和化學(xué)因子與腧穴特性和經(jīng)絡(luò)傳導(dǎo)結(jié)合，通過調(diào)控機(jī)體神經(jīng)、內(nèi)分泌和免疫等系統(tǒng)，使艾灸不僅能產(chǎn)生局部有效刺激，還能對(duì)調(diào)整機(jī)體的內(nèi)環(huán)境起到重要作用。有研究[18-19]表明隔藥餅灸具有確切的抗炎作用。中醫(yī)學(xué)中并無“動(dòng)脈粥樣硬化”這一疾病記載，根據(jù)其臨床表現(xiàn)可歸為“中風(fēng)”“頭痛”“胸痹”等范疇。中醫(yī)病機(jī)為本虛標(biāo)實(shí)、虛實(shí)夾雜，本虛可累及心、肝、腎等臟腑，標(biāo)實(shí)主要為痰濁、瘀血阻滯。因此，選取具有化濁降脂、行氣散瘀的山楂、丹參、郁金、大黃、澤瀉等藥物做成藥餅。相關(guān)研究[20-24]表明，上述5種藥物均可有效改善血脂水平、保護(hù)血管內(nèi)皮，預(yù)防AS并改善其癥狀，穩(wěn)定AS易損斑塊?！熬揸I”“天樞”為心和小腸的募穴，“豐隆”為治痰要穴，“心俞”“脾俞”和“肝俞”分別為心、脾和肝的背俞穴，本課題組前期研究[8-13]已證實(shí)，選取以上穴位可有效調(diào)節(jié)血脂、改善AS癥狀。

AS是一種脂蛋白驅(qū)動(dòng)的疾病，通過內(nèi)膜炎癥、壞死、纖維化和鈣化導(dǎo)致易在動(dòng)脈交叉部位形成斑塊，斑塊破裂則會(huì)導(dǎo)致威脅生命的冠狀動(dòng)脈血栓形成。脂質(zhì)代謝失衡是促進(jìn)AS發(fā)生與進(jìn)展的重要危險(xiǎn)因素。高密度脂蛋白（high density lipoprotein， HDL）、低密度脂蛋白（low density lipoprotein， LDL）與AS的發(fā)生有密切關(guān)系，LDL升高則表示危險(xiǎn)因素增加，易導(dǎo)致AS性心血管疾病的風(fēng)險(xiǎn)增加[25]，HDL保護(hù)心血管的作用與其促進(jìn)膽固醇逆向轉(zhuǎn)運(yùn)、抗氧化、抗炎功能有關(guān)[26]。

AS的起始環(huán)節(jié)為內(nèi)皮細(xì)胞的活化和功能紊亂，而內(nèi)皮細(xì)胞活化的基因調(diào)控位點(diǎn)上存在很多NF-κB結(jié)合位點(diǎn)。NF-κB在炎癥反應(yīng)中是一種重要的轉(zhuǎn)錄因子，可調(diào)控多種細(xì)胞因子、趨化因子、黏附因子、急性期反應(yīng)蛋白，并參與炎癥反應(yīng)的酶的基因表達(dá)[27]。NF-κB活化是TLR2/4-NF-κB信號(hào)通路介導(dǎo)炎癥反應(yīng)的關(guān)鍵環(huán)節(jié)[28]。有研究[29]表明，NF-κB活化可促進(jìn)AS斑塊的形成，通過抑制其活化可緩解AS的發(fā)生發(fā)展。TLRs在AS中發(fā)揮調(diào)控炎癥應(yīng)答的作用，TLR2、TLR4可通過脂多糖誘導(dǎo)細(xì)胞內(nèi)信號(hào)通路的激活，使NF-κB等轉(zhuǎn)錄因子激活，進(jìn)而調(diào)節(jié)釋放和合成炎性細(xì)胞因子，影響AS的進(jìn)程。在AS病變表面存在大量內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)模式識(shí)別受體TLR2，可導(dǎo)致內(nèi)皮細(xì)胞凋亡。TLR4被激活后可引起機(jī)體慢性炎癥反應(yīng)，使AS形成加速。炎癥細(xì)胞因子可促進(jìn)斑塊中膠原酶增多，能使細(xì)胞外基質(zhì)中的膠原纖維降解，使AS斑塊的穩(wěn)定性減弱，最終導(dǎo)致斑塊破裂[30-31]。有相關(guān)研究[32]表明，在TLR2和TLR4基因缺陷的小鼠中，AS相關(guān)的炎癥應(yīng)答被顯著抑制。研究[33]表明，干預(yù)TLR4的表達(dá)能使促炎因子的生成受抑制，通過減少炎癥反應(yīng)進(jìn)而減少斑塊中泡沫細(xì)胞，以增加斑塊的穩(wěn)定性，延緩AS的發(fā)展。有學(xué)者發(fā)現(xiàn)在AS斑塊中TLRs基因表達(dá)明顯上調(diào)，其中TLR2表達(dá)水平是正常動(dòng)脈中的3倍[34]。TLR2/TLR4活化可通過髓樣分化因子88依賴性途徑啟動(dòng)下游信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄因子NF-κB的活性，促進(jìn)炎癥反應(yīng)的發(fā)生，導(dǎo)致AS進(jìn)一步發(fā)展[35]。

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，模型組TLR2、TLR4、NF-κB表達(dá)升高，表明TLR2/4-NF-κB信號(hào)通路被激活，且與模型組相比，隔藥餅灸組、直接灸組和藥物組TLR2、TLR4、NF-κB表達(dá)下降，這與前期發(fā)表文獻(xiàn)中PCR結(jié)果趨勢一致[13]。而隔藥餅灸組TLR2、TLR4、NF-κB表達(dá)下降說明隔藥餅灸可抑制TLR2/TLR4的表達(dá)，從而下調(diào)NF-κB表達(dá)，抑制促炎因子的釋放，最終達(dá)到抗AS并穩(wěn)定易損斑塊的目的。因此，隔藥餅灸可能通過下調(diào)TLR2、TLR4、NF-κB的表達(dá)，抑制炎癥反應(yīng)，減少泡沫細(xì)胞的的數(shù)量，增強(qiáng)AS易損斑塊的穩(wěn)定性。

參考文獻(xiàn)

[1] WOLF D， LEY K. Immunity and inflammation in atherosclerosis[J]. Circulation Research， 2019， 124（2）： 315-327.

[2] FINN A V， NAKANO M， NARULA J， et al. Concept of vulnerable/unstable plaque[J]. Arteriosclerosis， Thrombosis， and Vascular Biology， 2010， 30（7）： 1282-1292.

[3] HOLLESTELLE S C， DE VRIES M R， VAN KEULEN J K， et al. Toll-like receptor 4 is involved in outward arterial remodeling[J]. Circulation， 2004， 109（3）： 393-398.

[4] LIN J T， KAKKAR V， LU X J. Essential roles of toll-like receptors in atherosclerosis[J]. Current Medicinal Chemistry， 2016， 23（5）： 431-454.

[5] DUNZENDORFER S， LEE H K， SOLDAU K， et al. Toll-like receptor 4 functions intracellularly in human coronary artery endothelial cells： Roles of LBP and sCD14 in mediating LPS responses[J]. FASEB Journal， 2004， 18（10）： 1117-1119.

[6] LI Y Q， SHEN S X， DING S K， et al. Toll-like receptor 2 downregulates the cholesterol efflux by activating the nuclear factor-κB pathway in macrophages and may be a potential thera

peutic target for the prevention of atherosclerosis[J]. Experimental and Therapeutic Medicine， 2018， 15（1）： 198-204.

[7] ALI M， GIRGIS S， HASSAN A， et al. Inflammation and coronary artery disease： From pathophysiology to Canakinumab Anti-Inflammatory Thrombosis Outcomes Study （CANTOS）[J]. Coronary Artery Disease， 2018， 29（5）： 429-437.

[8] 常小榮，嚴(yán)? 潔，岳增輝，等.隔藥餅灸對(duì)高脂血癥兔血漿前列環(huán)素和血栓素含量的影響[J].中國臨床康復(fù)，2004，8（33）：7446-7447.

[9] 岳增輝，嚴(yán)? 潔，常小榮，等.隔藥餅灸對(duì)高脂血癥兔主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的影響[J].中國針灸，2005，25（1）：64-67.

[10] 岳增輝，嚴(yán)? 潔，常小榮，等.隔藥餅灸對(duì)兔高脂血癥合并動(dòng)脈粥樣硬化血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附因子E選擇素mRNA表達(dá)的影響[J].中國中醫(yī)藥信息雜志，2006，13（7）：37-39.

[11] 岳增輝，常小榮，嚴(yán)? 潔，等.隔藥餅灸對(duì)兔高脂血癥合并動(dòng)脈粥樣硬化主動(dòng)脈血管細(xì)胞粘附分子-1 mRNA表達(dá)的影響[J].針刺研究，2006，31（3）：145-148.

[12] 岳增輝，何新群，常小榮，等.隔藥餅灸對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化兔血清載脂蛋白A及載脂蛋白B水平的影響[J].中國中醫(yī)藥信息雜志，2011，18（9）：33-34.

[13] 鄭雪娜，楊? 俊，謝? 濤，等.隔藥餅灸對(duì)兔動(dòng)脈粥樣硬化斑塊中Toll樣受體與核因子表達(dá)的影響[J].針刺研究，2018，43（2）：92-97.

[14] 楊? 俊，岳增輝，謝? 濤，等.高脂飼養(yǎng)結(jié)合腹主動(dòng)脈球囊損傷制作兔腹主動(dòng)脈粥樣硬化模型的研究[J].中國中醫(yī)急癥，2014，23（5）： 792-793，796.

[15] 劉? 毅，李志樑，雷? 霄，等.兔腹主動(dòng)脈粥樣硬化模型的建立及評(píng)估方式[J].南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2009，29（9）：1874-1877.

[16] 張? 艷，楊? 潁，劉? 鋒，等.高脂飲食聯(lián)合不同類型球囊損傷制備兔腹主動(dòng)脈粥樣硬化斑塊模型實(shí)驗(yàn)研究[J].中華實(shí)用診斷與治療雜志，2017，31（9）：850-853.

[17] 蘭曉燕，張? 元，朱龍波，等.艾葉化學(xué)成分、藥理作用及質(zhì)量研究進(jìn)展[J].中國中藥雜志，2020，45（17）：4017-4030.

[18] 陽晶晶，趙? 釗，石? 佳，等.隔藥餅灸對(duì)高脂血癥合并動(dòng)脈粥樣硬化兔血清TNF-α、INF-γ含量的影響[J].湖南中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2018，38（11）：1258-1261.

[19] 廖宗力，孫? 璐，朱重政，等.不同促透劑運(yùn)用于隔藥餅灸對(duì)高脂血癥合并動(dòng)脈粥樣硬化兔主動(dòng)脈形態(tài)及血清IL-6、IL-10的影響[J].湖南中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2019，39（11）：1368-1372.

[20] 杜怡雯，馮江毅，胡黎文，等.大黃的藥理活性研究及臨床應(yīng)用[J].中醫(yī)臨床研究，2018，10（25）：24-27.

[21] 曹端華，王婷婷，閆海燕，等.復(fù)方丹參滴丸聯(lián)合阿托伐他汀治療頸動(dòng)脈粥樣硬化的療效研究[J].中國全科醫(yī)學(xué)，2019，22（27）：3323-3327.

[22] 封若雨，朱新宇，張苗苗.近五年山楂藥理作用研究進(jìn)展[J].中國中醫(yī)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)雜志，2019，25（5）：715-718.

[23] 黃? 科，周瑤瑤.姜黃素通過影響巨噬細(xì)胞的極性延緩動(dòng)脈粥樣硬化進(jìn)展[J].中國動(dòng)脈硬化雜志，2019，27（5）：386-390.

[24] 趙? 樂.澤瀉降血脂研究概況[J].實(shí)用中醫(yī)內(nèi)科雜志，2019，33（3）：71-73，77.

[25] FERENCE B A， GINSBERG H N， GRAHAM I， et al. Low-density lipoproteins cause atherosclerotic cardiovascular disease. 1. Evidence from genetic， epidemiologic， and clinical studies. A consensus statement from the European Atherosclerosis Society Consensus Panel[J]. European Heart Journal， 2017， 38（32）： 2459-2472.

[26] ZHANG T H， CHEN J， TANG X Y， et al. Interaction between adipocytes and high-density lipoprotein： New insights into the mechanism of obesity-induced dyslipidemia and atherosclerosis[J]. Lipids in Health and Disease， 2019， 18（1）： 223.

[27] GAO W， LIU H B， YUAN J， et al. Exosomes derived from mature dendritic cells increase endothelial inflammation and atherosclerosis via membrane TNF-α mediated NF-κB pathway[J]. Journal of Cellular and Molecular Medicine， 2016， 20（12）： 2318-2327.

[28] XANTHOULEA S， CURFS D M， HOFKER M H， et al. Nuclear factor kappa B signaling in macrophage function and atherogenesis[J]. Current Opinion in Lipidology， 2005， 16（5）： 536-542.

[29] 王? 婷，葉小漢，吳錦波，等.心脈康方對(duì)兔動(dòng)脈粥樣硬化及NF-κB p65表達(dá)的影響[J].廣州中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2020，37（10）：1963-1968.

[30] SENEVIRATNE A N， MONACO C. Role of inflammatory cells and toll-like receptors in atherosclerosis[J]. Current Vascular Pharmacology， 2015， 13（2）： 146-160.

[31] COLE J E， GEORGIOU E， MONACO C. The expression and functions of toll-like receptors in atherosclerosis[J]. Mediators of Inflammation， 2010， 2010： 393946.

[32] ROSHAN M H， TAMBO A， PACE N P. The role of TLR2， TLR4， and TLR9 in the pathogenesis of atherosclerosis[J]. International Journal of Inflammation， 2016， 2016： 1532832.

[33] 姜明賀，宮麗鴻.穩(wěn)斑湯對(duì)AopE基因敲除動(dòng)脈粥樣硬化小鼠不穩(wěn)定斑塊TLR4的影響[J].中醫(yī)雜志，2015，56（7）：598-601.

[34] EDFELDT K， SWEDENBORG J， HANSSON G K， et al. Expression of toll-like receptors in human atherosclerotic lesions： a possible pathway for plaque activation[J]. Circulation. 2002，105（10）： 1158-1161.

[35] FITZGERALD K A， KAGAN J C. Toll-like Receptors and the Control of Immunity[J]. Cell， 2020， 180（6）： 1044-1066.