前 言

本標(biāo)準(zhǔn)由中國(guó)衛(wèi)生監(jiān)督協(xié)會(huì)團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)委員會(huì)提出并歸口。

本標(biāo)準(zhǔn)由中國(guó)疾病預(yù)防控制中心環(huán)境與健康相關(guān)產(chǎn)品安全所、北京協(xié)和醫(yī)院、北京北亞骨科醫(yī)院、湖北省疾病預(yù)防控制中心、北京大學(xué)深圳醫(yī)院、楷騰醫(yī)療設(shè)備（中國(guó)）有限公司、3M 中國(guó)有限公司、杭州魯沃夫貨物進(jìn)出口有限公司、北京創(chuàng)新世紀(jì)生化科技發(fā)展有限公司、上海九譽(yù)生物科技有限公司、北京佳士力科技有限公司、山東消博士消毒科技股份有限公司和南京萬(wàn)福金安生物醫(yī)藥科技有限公司起草。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：張流波、李濤、朱亭亭、邱俠、張青、李愛瓊、黃小波、王繼梅、陶威、劉芝蘭、史紹毅、王志、任銀萍、周褀、王金強(qiáng)、蔣士龍。

醫(yī)用清洗劑衛(wèi)生要求

1 范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了醫(yī)用清洗劑原料要求、基本要求、技術(shù)要求、檢驗(yàn)方法、運(yùn)輸、貯存和包裝、標(biāo)識(shí)要

求及注意事項(xiàng)。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于醫(yī)用清洗劑的生產(chǎn)與應(yīng)用。

2 規(guī)范性引用文件

下列文件對(duì)于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本文件。

凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。

GB/T 65 開槽圓柱頭螺釘

GB/T 601 化學(xué)試劑 標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的制備

GB/T 603 化學(xué)試劑 試驗(yàn)方法中所用制劑及制品的制備

GB/T 679 化學(xué)試劑 乙醇（95%）

GB/T 700 碳素結(jié)構(gòu)鋼

GB/T 1173 鑄造鋁合金

GB/T 1220 不銹鋼棒

GB/T 2059 銅及銅合金帶材

GB/T 2481.1 固結(jié)磨具用磨料 粒度組成的檢測(cè)和標(biāo)記

GB/T 5750.4 生活飲用水標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法 感官性狀和物理指標(biāo)

GB/T 9721 化學(xué)試劑 分子吸收分光光度法通則（紫外和可見光部分）

GB 9985 手洗餐具用洗滌劑

GB/T 15818 表面活性劑生物降解度試驗(yàn)方法

JB/T 7901 金屬材料實(shí)驗(yàn)室 均勻腐蝕全浸試驗(yàn)方法

ISO 15883 清洗消毒器

《消毒技術(shù)規(guī)范》（2002年版） 衛(wèi)生部

3 術(shù)語(yǔ)和定義

下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件。

3.1 醫(yī)用清洗劑 medical detergent

用于增強(qiáng)水對(duì)醫(yī)療器械、器具及其他相關(guān)物品上污物清洗效果的制劑。

3.2 酸性醫(yī)用清洗劑 acid medical detergent

pH 值≤6.5 的醫(yī)用清洗劑。

3.3 中性醫(yī)用清洗劑 neutral medical detergent

pH 值在6.5～7.5 之間的醫(yī)用清洗劑。

3.4 堿性醫(yī)用清洗劑 alkaline medical detergent

pH 值≥7.5 的醫(yī)用清洗劑。

3.5 含酶醫(yī)用清洗劑 enzyme-containing medical detergent

加入了酶制劑如蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶等，能分解相應(yīng)有機(jī)污染物的醫(yī)用清洗劑。

3.6 特殊用途的醫(yī)用清洗劑 detergent for special use

具有專門用途，如抗抑菌、去除生物膜、除垢除銹等作用的醫(yī)用清洗劑。

4 原料要求

4.1 表面活性劑：應(yīng)為無(wú)毒或低毒級(jí)物質(zhì)。

4.2 酶：其質(zhì)量應(yīng)符合企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)要求。

4.3 抗菌劑：不得使用抗菌藥物及其同名原料，不得使用各種醛類化合物。

4.4 水：在25℃條件下，電導(dǎo)率≤15μ S/cm。

5 基本要求

5.1 醫(yī)用清洗劑應(yīng)使用安全，可有效去除相應(yīng)的污染物。

5.2 醫(yī)用清洗劑應(yīng)符合下列要求：

a）與人體組織有良好的相容性，對(duì)人體無(wú)毒、無(wú)刺激；

b）與醫(yī)療器械及其材料有較好的材料相容性，不與醫(yī)療器械發(fā)生反應(yīng)或產(chǎn)生有毒、有害的產(chǎn)物；

c）應(yīng)沒有或僅有輕微的金屬腐蝕性，不影響醫(yī)療器械的機(jī)械性能，不影響消毒滅菌因子的穿透；

d）醫(yī)用清洗劑及其降解產(chǎn)物應(yīng)不會(huì)造成環(huán)境污染。

6 技術(shù)要求

6.1 感官

液體產(chǎn)品應(yīng)清澈透明，不分層，無(wú)懸浮物或沉淀，無(wú)異味，顏色宜為淺色；固體產(chǎn)品應(yīng)外形規(guī)則，色澤均勻，無(wú)明顯雜質(zhì)和污跡。

6.2 雜質(zhì)限量

熒光增白劑、甲醇、甲醛、砷（1%溶液中以砷計(jì)）、重金屬(1%溶液中以鉛計(jì))的限量要求按GB 9985。

6.3 金屬腐蝕性

中性醫(yī)用清洗劑對(duì)金屬基本無(wú)腐蝕；酸性和堿性醫(yī)用清洗劑宜對(duì)金屬基本無(wú)腐蝕或僅有輕度腐蝕；醫(yī)用清洗劑對(duì)器械的腐蝕程度不宜強(qiáng)于水洗。

6.4 硬度

醫(yī)用清洗劑宜能減少或絡(luò)合水中的金屬離子（如Ca2+和Mg2+），降低水的硬度，減少水垢沉積。

6.5 發(fā)泡

醫(yī)用清洗劑宜為低泡型，易于漂洗干凈。

6.6 穩(wěn)定性

6.6.1 物理性狀穩(wěn)定性

在高溫、低溫試驗(yàn)條件下，產(chǎn)品的物理性狀應(yīng)保持原有狀態(tài)不變。

6.6.2 有效成分含量穩(wěn)定性

6.6.2.1 有效期應(yīng)≥1年。

6.6.2.2 在有效期內(nèi)，有效成分含量下降率應(yīng)≤10%；有效成分無(wú)法測(cè)定的，其清洗效果應(yīng)達(dá)到要求。

6.6.2.3 含酶醫(yī)用清洗劑，在有效期內(nèi)，酶活力下降率應(yīng)≤20%。

6.6.3 開封后有效期

產(chǎn)品應(yīng)注明開封后有效期。在標(biāo)識(shí)的開封后有效期內(nèi)，有效成分含量下降率應(yīng)≤10%或其清洗效果達(dá)到要求。

6.7 清洗效果要求

6.7.1 醫(yī)用清洗劑應(yīng)符合下列實(shí)驗(yàn)結(jié)果：

a) 血液和細(xì)菌混合污染物試驗(yàn)：對(duì)細(xì)菌的去除率應(yīng)≥99%，且ATP 含量下降率應(yīng)≥99%。

b) 人工模擬污染物試驗(yàn)：清洗后，肉眼觀察污染物應(yīng)完全溶解脫落，外觀表面清潔光亮、無(wú)殘留物質(zhì)，且污染物去除率≥95%。

6.7.2 標(biāo)明對(duì)蛋白有特效的或標(biāo)明含有蛋白酶的醫(yī)用清洗劑，對(duì)蛋白的去除率應(yīng)≥90%；標(biāo)明對(duì)淀粉有特效的或標(biāo)明含有淀粉酶的醫(yī)用清洗劑，對(duì)淀粉的去除率應(yīng)≥60%；標(biāo)明對(duì)脂肪有特效的或標(biāo)明含有脂肪酶的醫(yī)用清洗劑，對(duì)脂肪的去除率應(yīng)≥50%。

6.7.3 標(biāo)明對(duì)生物膜有特效的醫(yī)用清洗劑，模擬生物膜中的細(xì)菌減少值在90%以上，ATP 含量減少值在90%以上。

6.7.4 有抗菌作用的醫(yī)用清洗劑，應(yīng)說(shuō)明抗菌作用的原理。在說(shuō)明書規(guī)定的浸泡時(shí)間內(nèi)，醫(yī)用清洗劑應(yīng)用液對(duì)銅綠假單胞菌、大腸桿菌和金黃色葡萄球菌的殺滅率≥90%。

6.8 安全性

6.8.1 醫(yī)用清洗劑應(yīng)達(dá)到實(shí)際無(wú)毒級(jí)。

6.8.2 醫(yī)用清洗劑應(yīng)為對(duì)皮膚無(wú)刺激或輕度刺激，不引起皮膚變態(tài)反應(yīng)。

6.8.3 醫(yī)用清洗劑表面活性劑生物降解度應(yīng)≥90%。

6.9 微生物指標(biāo)

細(xì)菌菌落總數(shù)限值為100 CFU/mL，不得含有致病菌。

7 檢驗(yàn)方法

7.1 感官：目測(cè)法和鼻嗅法。

7.2 雜質(zhì)限量：方法按GB 9985。

7.3 金屬腐蝕性：方法見附錄A。

7.4 硬度：方法按GB/T 5750.4。

7.5 穩(wěn)定性

7.5.1 物理性狀穩(wěn)定性

a)低溫試驗(yàn)：于-10℃±1℃冰箱中放置24h，取出恢復(fù)至室溫進(jìn)行觀察，觀察無(wú)結(jié)晶、無(wú)沉淀，為低溫試驗(yàn)合格；

b)高溫試驗(yàn)：于40℃±1℃溫箱中放置24h，取出立即觀察，觀察不分層、不混濁，且不改變氣味，為高溫試驗(yàn)合格。

7.5.2 有效成分含量穩(wěn)定性

可采用自然存放試驗(yàn)或加速試驗(yàn)測(cè)定有效成分含量穩(wěn)定性：

a) 自然存放試驗(yàn)：按說(shuō)明書標(biāo)識(shí)的貯存方法將樣品存放至有效期，比較貯存前后有效成分含量的變化；

b) 加速試驗(yàn)：將樣品在37℃條件下貯存90d，比較貯存前后有效成分含量的變化，下降率≤10%可判定為有效期2年。

7.5.3 酶活力測(cè)試：方法見附錄B。

7.6 清洗效果要求

7.6.1 血液和細(xì)菌混合的去除效果試驗(yàn)：方法見附錄C。

7.6.2 人工模擬污染物的去除效果試驗(yàn)：方法見附錄D。

7.6.3 對(duì)脂肪、蛋白質(zhì)和淀粉的去除效果試驗(yàn)：方法見附錄E。

7.6.4 生物膜去除效果試驗(yàn)：方法見附錄F。

7.6.5 細(xì)菌殺滅率測(cè)試：方法按《消毒技術(shù)規(guī)范》（2002 版）。

7.7 表面活性劑生物降解度測(cè)試方法：方法按GB/T 15818。

7.8 急性經(jīng)口毒性試驗(yàn)、皮膚刺激試驗(yàn)、皮膚變態(tài)反應(yīng)試驗(yàn)：方法按《消毒技術(shù)規(guī)范》（2002版）。

7.9 菌落總數(shù)計(jì)數(shù)：方法按《消毒技術(shù)規(guī)范》（2002 版）。

8 運(yùn)輸、貯存和包裝

8.1 運(yùn)輸

產(chǎn)品運(yùn)輸時(shí)應(yīng)輕裝輕卸，不得倒置，防壓、防撞、防擠、防止暴曬、雨淋，車輛應(yīng)保持干燥。

8.2 貯存

8.2.1 產(chǎn)品應(yīng)室內(nèi)保存，并滿足產(chǎn)品標(biāo)識(shí)的貯存條件。

8.2.2 堆放要采取必要的防護(hù)措施，堆放高度要適當(dāng)，避免包裝損壞。

8.2.3 在本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的運(yùn)輸和儲(chǔ)存條件下，在包裝完整未經(jīng)啟封時(shí)，產(chǎn)品的保質(zhì)期按銷售包裝標(biāo)識(shí)執(zhí)行。

8.3 包裝

8.3.1 最小銷售包裝的要求

醫(yī)用清洗劑的直接接觸容器材料應(yīng)無(wú)毒，不得含有或釋放可能對(duì)使用者造成傷害的有毒物質(zhì)。瓶蓋應(yīng)擰緊，封口應(yīng)牢固，不得有漏液沾污包裝的外表面。用其他包裝的產(chǎn)品，應(yīng)符合產(chǎn)品本身要求，以保證產(chǎn)品質(zhì)量和使用性能為原則。

8.3.2 運(yùn)輸包裝的要求

產(chǎn)品運(yùn)輸包裝材料以不損害最小銷售包裝為原則。最小銷售包裝在運(yùn)輸包裝箱中排列整齊，封口應(yīng)嚴(yán)實(shí)可靠，不得有缺數(shù)現(xiàn)象，封箱應(yīng)嚴(yán)實(shí)可靠。每一運(yùn)輸包裝內(nèi)或產(chǎn)品包裝容器上應(yīng)附有產(chǎn)品質(zhì)量檢驗(yàn)合格證明。生產(chǎn)企業(yè)應(yīng)提供每批次產(chǎn)品的質(zhì)量檢驗(yàn)報(bào)告。

9 標(biāo)識(shí)要求

9.1 產(chǎn)品說(shuō)明書

產(chǎn)品使用包裝應(yīng)符合國(guó)家有關(guān)規(guī)定，說(shuō)明書中不得夸大宣傳，相關(guān)功效應(yīng)有實(shí)驗(yàn)依據(jù)，說(shuō)明書一般應(yīng)標(biāo)注以下內(nèi)容：

a) 產(chǎn)品名稱及商標(biāo)名稱或圖案；

b) 產(chǎn)品的生產(chǎn)日期和保質(zhì)期或生產(chǎn)批號(hào)和期限使用日期；

c) 產(chǎn)品的主要有效成分、性能、應(yīng)用范圍、使用方法、注意事項(xiàng)等；

d) 產(chǎn)品貯藏及運(yùn)輸條件；

e) 生產(chǎn)企業(yè)名稱、地址、聯(lián)系方式、售后服務(wù)地址及郵政編碼。

9.2 標(biāo)志

產(chǎn)品運(yùn)輸包裝應(yīng)有下列標(biāo)志：

a) 產(chǎn)品名稱、商標(biāo)、類型；

b) 質(zhì)量規(guī)格及裝箱總數(shù)；

c) 貨箱毛重、箱體尺寸；

d) 產(chǎn)品裝箱日期；

e) 防水防潮、小心輕放和防止倒置等必要的安全儲(chǔ)運(yùn)圖案或標(biāo)記；

f) 生產(chǎn)企業(yè)名稱、地址、電話和郵政編碼。

10 注意事項(xiàng)

10.1 醫(yī)用清洗劑不得口服，置于兒童不易觸及處。

10.2 過(guò)敏者慎用。

10.3 醫(yī)用清洗劑稀釋后的應(yīng)用液應(yīng)一次性使用。

10.4 如有拮抗物質(zhì)，說(shuō)明書應(yīng)列出，避免合用。

10.5 置于避光、陰涼、干燥處保存。

10.6 開瓶后應(yīng)擰緊瓶蓋，在規(guī)定有效期內(nèi)使用。

附錄 A

（規(guī)范性附錄）

醫(yī)用清洗劑對(duì)金屬腐蝕性的測(cè)定

A.1 目的

測(cè)定醫(yī)用清洗劑對(duì)各種金屬的腐蝕程度。

A.2 試驗(yàn)器材

A.2.1 金屬片：圓形，直徑24.0mm，厚1.0mm，穿一直徑為2.0mm 小孔，表面積總值約為 9.8cm2（包括上、下、周邊表面與小孔側(cè)面）。光潔度為6。原料如下：

a)碳鋼（規(guī)格見 GB/T 700）；

注：碳鋼易氧化生銹， 應(yīng)保存于油中。

b)銅（規(guī)格見 GB/T 2059）；

c)鋁（規(guī)格見 GB/T 1173）；

d)不銹鋼（規(guī)格見 GB/T 1220）。

A.2.2 浸泡容器（玻璃制， 帶蓋，容積為800 mL～1000 mL）。

A.2.3 砂紙（120號(hào)粒度水砂紙，GB/T 2481.1）。

A.2.4 稱量杯。

A.2.5 天平（感量0.1mg）。

A.3 試驗(yàn)步驟

A.3.1 用氧化鎂糊劑涂抹除油后洗凈；以120號(hào)粒度水砂紙磨去金屬片兩面和周邊表面的氧化層，再用自來(lái)水沖凈。測(cè)量片的直徑、厚度、孔徑（精確至0.1mm）。用無(wú)水丙酮或無(wú)水乙醇再次脫脂。置 50℃恒溫培養(yǎng)箱中干燥1h，待其溫度降至室溫后稱重（每金屬片待天平回零后稱重三次，精確至0.1mg，取其平均值作為試驗(yàn)前重量。稱重時(shí)，應(yīng)戴潔凈手套，勿以手直接接觸樣片。

A.3.2 按醫(yī)用清洗劑最高使用濃度配制試驗(yàn)用醫(yī)用清洗劑，用以浸泡試驗(yàn)樣片。浸泡時(shí)，每一金屬片需浸泡在200mL醫(yī)用清洗劑中。

A.3.3 金屬樣片用塑料線系以標(biāo)簽，編號(hào)和注明日期，懸掛于醫(yī)用清洗劑中。一次性浸泡72h。易揮性或有效成分不穩(wěn)定的醫(yī)用清洗劑，根據(jù)情況，酌情定時(shí)更換醫(yī)用清洗劑，直至浸泡72h。

A.3.4 每種金屬每次試驗(yàn)放置三片樣片。浸泡時(shí)，若同種金屬每一樣片相隔1cm以上，可在同一容器內(nèi)（含600mL消毒液）進(jìn)行。

A.3.5 浸泡到規(guī)定時(shí)間后，取出金屬片，先用自來(lái)水沖洗，再用毛刷或其他軟性器具去除腐蝕產(chǎn)物。如仍有清除不掉的腐蝕產(chǎn)物，可按JB/T 7901所介紹的下列方法清除：

a）銅片：在室溫下浸泡于鹽酸溶液（500mL 36%～38%鹽酸加蒸餾水至1000mL，鹽酸比重為1.19）中 1 min～3 min；

b）碳鋼片：置含鋅粉200g/L的氫氧化鈉溶液中，煮沸5 min～30 min；

c）鋁片：浸泡于三氧化鉻磷酸溶液（三氧化鉻20 g，磷酸500 mL，加蒸餾水至1000 mL。磷酸比重為1.69）中，升溫至80℃，持續(xù)5 min～10 min。如還未清除干凈，可在室溫浸于硝酸（比重1.42）溶液中 1 min；

d）不銹鋼：浸泡于60℃硝酸溶液（66%～68%硝酸100mL加蒸餾水至1000mL）20min?；蚪?0℃檸檬酸銨溶液（檸檬酸銨150g 加蒸餾水至1000mL）中10min～60min。

A.3.6 金屬樣片除去腐蝕產(chǎn)物并清洗后，用粗濾紙吸干水分，置于墊有濾紙的平皿中，放入50℃ 恒溫培養(yǎng)箱，干燥1 h，用鑷子夾取，待其溫度降至室溫后分別在天平上稱重。天平回零后稱三次，以其平均值作為試驗(yàn)后重量。稱重時(shí)，與試驗(yàn)前相同，應(yīng)戴潔凈手套，勿以手直接接觸樣片。

A.3.7 樣片在用化學(xué)法去除腐蝕物時(shí)，需設(shè)相應(yīng)空白對(duì)照以校正誤差?？瞻讓?duì)照樣片與實(shí)驗(yàn)組樣片同樣進(jìn)行表面處理、洗凈和稱重，但不經(jīng)醫(yī)用清洗劑浸泡。同實(shí)驗(yàn)組樣片用相同方法進(jìn)行化學(xué)處理、水沖洗、干燥、稱重，并計(jì)算其平均失重值。

A.3.8 試驗(yàn)的全過(guò)程應(yīng)設(shè)銅片、碳鋼片、鋁片和不銹鋼片浸泡蒸餾水的對(duì)照，不銹鋼片浸泡前后的重量差應(yīng)＜0.3 mg。否則，在找出原因后，全部試驗(yàn)重做。

A.3.9 試驗(yàn)結(jié)果，觀察與紀(jì)錄金屬片顏色變化，并以金屬腐蝕速率（R）平均值表達(dá)，在計(jì)算時(shí)應(yīng)減去空白對(duì)照組樣片的失重值。計(jì)算見式 (A.1)：

式中：

8760— 一年中的小時(shí)數(shù)（h）；

10000—單位換算值；

R—腐蝕速率，單位為毫米每年（mm/a）；

m—試驗(yàn)前金屬片重量，單位為克（g）；

mt—試驗(yàn)后金屬片重量，單位為克（g）；

mk—化學(xué)處理去除腐蝕產(chǎn)物樣片失重值，單位為克（g），若試驗(yàn)中未進(jìn)行化學(xué)清除處理者，計(jì)算時(shí)在公式中刪去mk值；

S—金屬片的表面積總值，單位為平方厘米（cm2）；

t—試驗(yàn)時(shí)間，單位為小時(shí)（h）；

d—金屬材料密度，單位為千克每立方米（kg/m3）。

A.4 結(jié)果判定

腐蝕性分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)見表A.1。

表A.1 腐蝕性分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)

A.5.1 每張砂紙只能磨一種金屬材料。一個(gè)容器盛的醫(yī)用清洗劑只能浸泡同一種金屬。

A.5.2 稱重關(guān)系到結(jié)果的準(zhǔn)確性，應(yīng)認(rèn)真進(jìn)行，接觸樣片的器具不得帶有油垢。

A.5.3 所用金屬片大小、厚薄應(yīng)嚴(yán)格一致，表面需磨光。

A.5.4 試驗(yàn)期間，需換醫(yī)用清洗劑溶液時(shí)，操作應(yīng)迅速，勿使樣片暴露空氣中過(guò)久。

A.5.5 金屬樣片僅可使用一次，否則影響試驗(yàn)的準(zhǔn)確性。

A.5.6 試驗(yàn)在 20℃～25℃條件下進(jìn)行。

A.5.7 在報(bào)告其結(jié)果時(shí)，應(yīng)對(duì)試驗(yàn)后金屬樣片的外觀變化等現(xiàn)象進(jìn)行描述。

附 錄 B

（規(guī)范性附錄）

酶活力的試驗(yàn)方法

B.1 α-淀粉酶

B.1.1 定義

1 mL液體酶，于60℃、pH=6.0 條件，1h液化1 g可溶性淀粉，即為1個(gè)酶活力單位，以U/g(U/mL)表示。

B.1.2 原理

α -淀粉酶能將淀粉分子鏈中的α -1,4葡萄糖苷鍵隨機(jī)切斷成長(zhǎng)短不一的短鏈糊精、少量麥芽糖和葡萄糖，而使淀粉對(duì)碘呈藍(lán)紫色的特異性反應(yīng)逐漸消失，呈紅棕色，其顏色消失的速度與酶活性有關(guān)、可通過(guò)固定反應(yīng)后的吸光度計(jì)算其酶活力。

B.1.3 試驗(yàn)器材

B.1.3.1 原碘液：稱取碘(I2)1l g、碘化鉀(KI)22 g，用少量蒸餾水使碘完全溶解，然后定容至500 mL，貯存于棕色瓶中。

B.1.3.2 稀碘液：吸取原碘液(B.l.3.1)2.00 mL，加碘化鉀20 g用蒸餾水溶解并定容至500 mL，貯于棕色瓶中。

B.1.3.3 20 g/L可溶性淀粉溶液：稱取可溶性淀粉2.000 g,精確至0.00l g，用蒸餾水調(diào)成漿狀物，在攪動(dòng)下緩緩傾入70 mL沸水中，然后以30 mL蒸餾水分幾次沖洗裝淀粉的燒杯，洗液并入其中，加熱至完全透明，冷卻，定容至l00mL。此溶液需要當(dāng)天配制。

B.1.3.4 磷酸緩沖液(pH=6.0)：稱取磷酸氫二鈉(Na2HPO4·12H20)45.23 g、檸檬酸(C6H8O7·H2O)8.07 g，用水溶解并定容至1000 mL。配好后用pH計(jì)校正。

B.1.3.5 分光光度計(jì)：應(yīng)符合GB/T 9721的有關(guān)規(guī)定。

B.1.3.6 恒溫水浴：60℃±0.2℃。

B.1.3.7 秒表。

B.1.3.8 試管：25 mm×200 mm。

B.1.4 試驗(yàn)步驟

B.1.4.1 待測(cè)酶液的制備

吸取液體酶1.00 mL，用磷酸緩沖液定容至刻度(將估計(jì)酶活力除以4,即酶活力應(yīng)在3.7 U/mL～5.6 U/mL 范圍內(nèi))，搖勻。通過(guò)四層紗布過(guò)濾，濾液供測(cè)定用。

B.1.4.2 測(cè)定

B.1.4.2.1 吸取可溶性淀粉溶液(B.1.3.3)20.0 mL于試管中，加入緩沖液5.00 mL，搖勻后，于60℃±0.2℃恒沮水浴中預(yù)熱5min。

B.1.4.2.2 加入稀釋好的待測(cè)酶液1.00 mL，立刻計(jì)時(shí)，搖勻，準(zhǔn)確反應(yīng)5 min。