魯春靈 李軍國 蔣萬春 于紀(jì)賓 楊 潔*

(1.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院飼料研究所，北京 100081；2.河北工程大學(xué)生命科學(xué)與食品工程學(xué)院，邯鄲 056038)

發(fā)酵飼料原料是指將單一飼料原料作為發(fā)酵底物，接種單一或復(fù)合菌種再通過發(fā)酵工程技術(shù)發(fā)酵3～5 d后制成的原料[1]。發(fā)酵飼料原料具有較低的抗?fàn)I養(yǎng)因子、較小的蛋白分子質(zhì)量以及富含活性益生菌等特點(diǎn)。飼糧中添加一定比例的發(fā)酵飼料原料不僅能提高動(dòng)物的飼料轉(zhuǎn)化效率和生長性能，而且可以抑制有害菌的生長和疾病發(fā)生，特別是緩解動(dòng)物營養(yǎng)性腹瀉的問題。因此，從動(dòng)物健康水平以及動(dòng)物食品安全性角度出發(fā)，發(fā)酵飼料原料可以在一定程度上減少抗生素等藥物的使用[2]。

豆粕粗蛋白質(zhì)含量為43%～46%，不但蛋白質(zhì)含量高，而且氨基酸平衡良好，除了半胱氨酸與蛋氨酸外，必需和非必需氨基酸比例都很高[3]。然而，豆粕中含有一定的抗?fàn)I養(yǎng)因子，這降低了蛋白質(zhì)和礦物質(zhì)等的消化率，降低了豆粕蛋白質(zhì)的營養(yǎng)價(jià)值，導(dǎo)致畜禽消化和代謝疾病，從而降低了畜禽的生長性能和價(jià)值。與豆粕相比，發(fā)酵豆粕降低了豆粕中的抗?fàn)I養(yǎng)因子含量，半纖維素和植酸磷含量也顯著下降，而且還能利用發(fā)酵微生物的菌體蛋白質(zhì)，粗蛋白質(zhì)含量提高約10%，并且三氯乙酸可溶性蛋白、小肽和游離氨基酸的含量也提高了6.5倍；同時(shí)，發(fā)酵豆粕中的高濃度乳酸和低pH抑制了腸桿菌科細(xì)菌的增殖[4]。因此，發(fā)酵豆粕在畜禽生產(chǎn)中被廣泛應(yīng)用。

相關(guān)研究表明，發(fā)酵濕飼料飼喂肉仔雞可降低胚胎死亡率，提高雛雞的出欄數(shù)[5]。發(fā)酵飼料飼喂雛雞后，十二指腸和盲腸中乳桿菌總數(shù)顯著升高，而乳酸菌分泌乳酸降低胃腸道pH，從而抑制大腸桿菌生長。濕發(fā)酵芝麻粕和黑曲霉發(fā)酵銀杏葉對肉仔雞、肉鴨的脂肪代謝、胸肌肉品質(zhì)和脂肪酸組成都有積極的影響，黑曲霉發(fā)酵銀杏葉還可以減少脂質(zhì)過氧化[6-7]。發(fā)酵豆粕、發(fā)酵橄欖葉和發(fā)酵濕飼料均可以顯著提高肉雞的生長性能和屠宰性能，降低腹脂率[8-10]。復(fù)合菌制劑和發(fā)酵木薯廢漿通過提高盲腸內(nèi)容物中丁酸和丙酸含量來改善肉雞腸道對病原體的過度炎癥反應(yīng)[11-12]。發(fā)酵豆粕和發(fā)酵濕飼料可以抑制沙門氏菌在腸道和內(nèi)臟器官的定植和侵襲，降低異嗜性細(xì)胞與淋巴細(xì)胞比值，改善腸道組織形態(tài)和健康[13-14]。肉雞飼喂益生菌發(fā)酵飼料后，發(fā)現(xiàn)消化性能、血清白細(xì)胞介素-4含量以及淀粉酶、蛋白酶等消化酶活性都顯著提高[15]。研究還表明，發(fā)酵豆粕和菜籽粕能通過提高肉雞血漿中免疫球蛋白含量、血清中新城疫病毒的酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)效價(jià)、細(xì)胞介導(dǎo)的免疫反應(yīng)(CMI)值以及新城疫病毒抗體滴度來改善免疫應(yīng)答[16-19]。

發(fā)酵飼料原料在畜禽養(yǎng)殖中應(yīng)用廣泛，但固態(tài)發(fā)酵烘干過程增加了飼料企業(yè)成本同時(shí)還降低了益生菌活性。濕態(tài)發(fā)酵原料可以降低飼料加工成本的同時(shí)保護(hù)益生菌活性，但是濕態(tài)發(fā)酵原料由于水分含量高，在畜禽養(yǎng)殖中添加量受到限制，實(shí)際生產(chǎn)中濕態(tài)發(fā)酵原料添加比例在5%左右，益生菌活性得不到很好的利用，濕態(tài)發(fā)酵原料在畜禽生產(chǎn)應(yīng)用中鮮有報(bào)道。因此，本文旨在通過研究飼糧添加不同比例濕態(tài)發(fā)酵豆粕對肉雞生長性能、抗氧化能力和腸道健康的影響，從而為肉雞養(yǎng)殖提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)選取1日齡科寶肉仔雞768只，按體重相近原則隨機(jī)分為4組，每組12個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)16只雞(公母各占1/2)。對照組(F0組)飼喂不添加濕態(tài)發(fā)酵豆粕的基礎(chǔ)飼糧，基礎(chǔ)飼糧為參照NRC(1994)[20]營養(yǎng)需要配制的配合飼料；試驗(yàn)組飼喂在基礎(chǔ)飼糧中分別添加6%(F6組)、8%(F8組)和10%(F10組)濕態(tài)發(fā)酵豆粕(活菌數(shù)為4.34×106CFU/g)的試驗(yàn)飼糧，其中濕態(tài)發(fā)酵豆粕和玉米粉按3∶7比例預(yù)混合后再添加到配合飼料中。各組飼糧組成及營養(yǎng)水平見表1。試驗(yàn)期42 d，期間肉仔雞自由采食、充足飲水，按正常免疫程序進(jìn)行免疫接種。

表1 飼糧組成及營養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))

1)濕態(tài)發(fā)酵豆粕水分含量為44.01%。The moisture content in wet fermented soybean meal was 44.01%。

1.2 指標(biāo)檢測

1.2.1 飼糧中有益菌數(shù)量

飼糧中芽孢桿菌、乳酸菌和酵母菌數(shù)量測定參考劉曉明等[21]的方法。

1.2.2 生長性能

每日觀察并記錄雞群發(fā)病和死亡只數(shù)，分別于21和42日齡每個(gè)重復(fù)隨機(jī)選取1只雞進(jìn)行個(gè)體空腹稱重，統(tǒng)計(jì)試驗(yàn)期內(nèi)的采食量，計(jì)算各組前期(1～21日齡)、后期(22～42日齡)和全期(1～42日齡)的平均體重、平均日增重(ADG)、平均日采食量(ADFI)和料重比(F/G)。計(jì)算公式為：

ADFI(g/d)=總耗料量/(只數(shù)×天數(shù))；
ADG(g/d)=總增重/(只數(shù)×天數(shù))；
F/G=總耗料量/總增重。

1.2.3 屠宰性能

42日齡時(shí)，每重復(fù)隨機(jī)挑選1只肉雞，頸靜脈放血處死，測定屠宰率、全凈膛率、胸肌率和腿肌率。計(jì)算公式為：

屠宰率(%)=100×屠體重/活體重；
全凈膛率(%)=100×全凈膛重/活體重；
胸肌率(%)=100×胸肌重/全凈膛重；
腿肌率(%)=100×腿肌重/全凈膛重。

1.2.4 免疫器官指數(shù)

42日齡時(shí)，每個(gè)重復(fù)隨機(jī)選取1只肉雞，頸靜脈放血處死，分離脾臟和法氏囊并稱重，計(jì)算免疫器官指數(shù)。

免疫器官指數(shù)(mg/g)=免疫器官重/活體重。

1.2.5 肉品質(zhì)

42日齡時(shí)，每個(gè)重復(fù)隨機(jī)選取1只肉雞，屠宰解剖后，統(tǒng)一取左側(cè)和右側(cè)整塊胸肌和腿肌，測定肉品質(zhì)。

1)肉色：取樣現(xiàn)場立即測定。采用CR-10全自動(dòng)色差計(jì)測定胸肌和腿肌新鮮切面的亮度(L*)值、紅度(a*)值和黃度(b*)值。

2)滴水損失：試驗(yàn)第42天時(shí)，將肉雞胸肌修整為3 cm×2 cm×1 cm的肉塊，稱重(W1)，然后用細(xì)鐵絲鉤住肉樣，使肌纖維垂直向下，懸吊于4 ℃，24 h后取出肉樣后稱重(W2)，計(jì)算24 h滴水損失；再過24 h后取出肉樣稱重(W3)，計(jì)算48 h滴水損失；再過24 h后取出肉樣稱重(W4)，計(jì)算72 h滴水損失。每個(gè)樣品2個(gè)平行，計(jì)算公式為：

24 h滴水損失(%)=100×(W1-W2)/W1；
48 h滴水損失(%)=100×(W1-W3)/W1；
72 h滴水損失(%)=100×(W1-W4)/W1。

3)pH：胸肌置于4 ℃中保存24 h后，將HANNA HI8424C酸度計(jì)(意大利)的電極頭插入肌肉中(深度不小于1 cm)，電極頭部完全包埋后讀取pH。每個(gè)樣品于不同位置測量3次，結(jié)果取其平均值。

4)蒸煮損失：試驗(yàn)第42天，屠宰肉雞，用取樣器切取肉塊，并去除結(jié)締組織，再用密封袋包裝。在4 ℃條件下熟化24 h，稱取胸肌重量(W1)。之后在Thermopet NTT-1100恒溫水浴鍋(日本)中75 ℃水浴15 min，用濾紙擦干，稱胸肌重量(W2)，蒸煮損失計(jì)算公式為：

蒸煮損失(%)=100×(W1-W2)/W1。

5)剪切力：將測定蒸煮損失后的樣品順著肌纖維方向切為截面為1 cm×1 cm的3個(gè)肉條，再以垂直肌纖維方向采用TA-XY2i質(zhì)構(gòu)儀(美國)對其進(jìn)行剪切，每個(gè)肉條剪切1次，讀取3次剪切力讀數(shù)的平均值。

1.2.6 血清生化和抗氧化指標(biāo)

42日齡時(shí)，每個(gè)重復(fù)隨機(jī)選取1只肉雞，頸靜脈放血處死，取血，4 000 r/min離心5 min分離血清，-20 ℃保存待測。測定血清中總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLB)、免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白M(IgM)、尿素氮(UN)和丙二醛(MDA)含量、總抗氧化能力(T-AOC)以及谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)、過氧化氫酶(CAT)和超氧化物歧化酶(SOD)活性。上述指標(biāo)采用科華ZY KHB-1280全自動(dòng)生化儀(上海)測定。

1.2.7 小腸組織形態(tài)

42日齡時(shí)，每個(gè)重復(fù)隨機(jī)選取1只肉雞，剪取十二指腸、空腸和回腸組織，用生理鹽水洗凈內(nèi)容物后，置于4%多聚甲醛中固定。組織經(jīng)脫水、包埋后，制作厚度為4 μm組織切片，并進(jìn)行蘇木精-伊紅(HE)染色。每例樣本選取3個(gè)完整的典型絨毛和隱窩，使用醫(yī)學(xué)圖像分析軟件ImagePro Plus 7.0測量絨毛高度和隱窩深度，并計(jì)算絨毛高度/隱窩深度(V/C)值。

1.2.8 盲腸微生物

盲腸微生物測定參考劉鳳美等[22]的方法。

1.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS 20.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行單因素方差分析(one-way ANOVA)，采用Duncan氏法進(jìn)行多重比較，顯著性水平為P<0.05，結(jié)果用“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 濕態(tài)發(fā)酵豆粕對飼糧中有益菌數(shù)量的影響

由表2可知，與對照組(F0組)相比，試驗(yàn)組1～21日齡飼糧中芽孢桿菌和乳酸菌數(shù)量以及22～42日齡飼糧中芽孢桿菌、乳酸菌和酵母菌數(shù)量均顯著提高(P<0.05)，F(xiàn)10組1～21日齡飼糧中酵母菌數(shù)量顯著提高(P<0.05)。

表2 濕態(tài)發(fā)酵豆粕對飼糧中有益菌數(shù)量的影響

2.2 濕態(tài)發(fā)酵豆粕對肉雞生長性能的影響

由表3知，與F0組相比，F(xiàn)10組肉雞1～21日齡平均體重顯著提高(P<0.05)，其他各試驗(yàn)組差異不顯著(P>0.05)；與F0組、F6組和F8組相比，F(xiàn)10組肉雞1～21日齡料重比顯著降低(P<0.05)，F(xiàn)0組、F6組和F8組之間差異不顯著(P>0.05)；各組肉雞1～21日齡平均日采食量和平均日增重之間差異均不顯著(P>0.05)。

與F0組和F6組相比，F(xiàn)8組和F10組肉雞22～42日齡平均體重顯著提高(P<0.05)，平均日采食量顯著提高(P<0.05)；與F0組相比，F(xiàn)10組肉雞22～42日齡平均日增重顯著提高(P<0.05)，其他各試驗(yàn)組差異不顯著(P>0.05)；與F0組相比，F(xiàn)8組和F10組肉雞22～42日齡料重比顯著降低(P<0.05)，F(xiàn)6組差異不顯著(P>0.05)。

與F0組相比，F(xiàn)8組和F10組肉雞1～42日齡平均日增重顯著提高(P<0.05)，F(xiàn)6組差異不顯著(P>0.05)；各組肉雞1～42日齡平均日采食量和料重比之間差異均不顯著(P>0.05)。

表3 濕態(tài)發(fā)酵豆粕對肉雞生長性能的影響

2.3 濕態(tài)發(fā)酵豆粕對肉雞屠宰性能的影響

由表4可知，隨著濕態(tài)發(fā)酵飼料添加比例的提高，各組肉雞屠宰率、全凈膛率和腿肌率均有升高的趨勢，但差異不顯著(P>0.05)，這說明添加濕態(tài)發(fā)酵豆粕可以獲得較多的可食用肉質(zhì)[23]。

表4 濕態(tài)發(fā)酵豆粕對肉雞屠宰性能的影響

2.4 濕態(tài)發(fā)酵豆粕對肉雞免疫器官指數(shù)的影響

由表5可知，隨著濕態(tài)發(fā)酵豆粕添加比例的提高，各組肉雞脾臟指數(shù)和法氏囊指數(shù)有升高的趨勢，但差異不顯著(P>0.05)，這說明濕態(tài)發(fā)酵豆粕對機(jī)體的免疫機(jī)能有一定的促進(jìn)作用。

表5 濕態(tài)發(fā)酵豆粕對肉雞免疫器官指數(shù)的影響

2.5 濕態(tài)發(fā)酵豆粕對肉雞肉品質(zhì)的影響

由表6可知，隨著濕態(tài)發(fā)酵豆粕添加比例的提高，各組肉雞胸肌和腿肌的肉色有升高的趨勢，但差異不顯著(P>0.05)。肉的顏色是影響消費(fèi)者購買肉產(chǎn)品的最主要因素，肉色提高可以得到更多消費(fèi)者青睞[24]。

表6 濕態(tài)發(fā)酵豆粕對肉雞肉色的影響

由表7可知，與F0組、F6組和F10組相比，F(xiàn)8組肉雞胸肌pH顯著降低(P<0.05)，優(yōu)質(zhì)雞肉的pH為6.0～6.5[25]，F(xiàn)0組和F8組不符合優(yōu)質(zhì)雞肉標(biāo)準(zhǔn)。隨著濕態(tài)發(fā)酵豆粕添加比例的提高，各組肉雞胸肌蒸煮損失、剪切力和滴水損失有降低趨勢，但差異不顯著(P>0.05)，這說明濕態(tài)發(fā)酵豆粕可以提高肉雞肌肉系水力，進(jìn)而改善肌肉嫩度和口感[26]。

表7 濕態(tài)發(fā)酵豆粕對肉雞胸肌肉品質(zhì)影響

2.6 濕態(tài)發(fā)酵豆粕對肉雞血清生化和抗氧化指標(biāo)的影響

由表8可知，隨著濕態(tài)發(fā)酵豆粕添加比例的提高，各組肉雞血清ALB、IgM和IgA含量有升高趨勢，但各組血清生化指標(biāo)差異不顯著(P>0.05)。免疫球蛋白廣泛參與動(dòng)物機(jī)體的體液免疫[27]，本試驗(yàn)結(jié)果說明濕態(tài)發(fā)酵豆粕對肉雞的體液免疫具有一定的促進(jìn)作用。

表8 濕態(tài)發(fā)酵豆粕對肉雞血清生化指標(biāo)的影響

由表9可知，與F0組相比，F(xiàn)10組肉雞血清SOD活性顯著提高(P<0.05)，其他各試驗(yàn)組差異不顯著(P>0.05)；與F0組相比，F(xiàn)6組、F8組和F10組肉雞血清MDA含量顯著降低(P<0.05)；各組間其他血清抗氧化指標(biāo)差異不顯著(P>0.05)。

表9 濕態(tài)發(fā)酵豆粕對肉雞血清抗氧化指標(biāo)的影響

2.7 濕態(tài)發(fā)酵豆粕對肉雞小腸組織形態(tài)和盲腸微生物的影響

由表10可知，與F0組和F6組相比，F(xiàn)8組和F10組肉雞十二指腸絨毛高度顯著提高(P<0.05)；與F0組、F6組和F8組相比，F(xiàn)10組肉雞十二指腸隱窩深度顯著降低，F(xiàn)8組肉雞十二指腸隱窩深度顯著低于F0組(P<0.05)；與F0組、F6組和F8組相比，F(xiàn)10組肉雞十二指腸V/C值顯著提高(P<0.05)，F(xiàn)8組肉雞十二指腸V/C值與F0組和F6相比顯著提高(P<0.05)，F(xiàn)0組和F6組差異不顯著(P>0.05)。

表10 濕態(tài)發(fā)酵豆粕對肉雞小腸組織形態(tài)的影響

與F0組相比，F(xiàn)6組、F8組和F10組肉雞空腸絨毛高度和V/C值顯著提高(P<0.05)；與F0組和F6組相比，F(xiàn)8組和F10組肉雞空腸V/C值顯著提高(P<0.05)；各組肉雞空腸隱窩深度差異不顯著(P>0.05)。

與F0組相比，F(xiàn)6組、F8組和F10組肉雞回腸絨毛高度和V/C值顯著提高(P<0.05)；F8組和F10組肉雞回腸隱窩深度顯著降低(P<0.05)，F(xiàn)6組差異不顯著(P>0.05)。各組肉雞十二指腸、空腸和回腸的組織切片見圖1。

圖1 肉雞十二指腸、空腸和回腸的組織切片

由表11可知，與F0組和F6組相比，F(xiàn)10組肉雞盲腸乳酸菌數(shù)量顯著提高(P<0.05)，F(xiàn)6組和F8組肉雞盲腸乳酸菌數(shù)量顯著高于F0組(P<0.05)；與F0組相比，F(xiàn)10組肉雞盲腸沙門氏菌數(shù)量顯著降低(P<0.05)，其他各試驗(yàn)組差異不顯著(P>0.05)；各組肉雞盲腸大腸桿菌數(shù)量之間差異不顯著(P>0.05)。

表11 濕態(tài)發(fā)酵豆粕對肉雞盲腸微生物的影響

3 討 論

3.1 濕態(tài)發(fā)酵豆粕對肉雞生長性能的影響

豆粕中含有胰蛋白酶抑制劑等多種抗?fàn)I養(yǎng)因子，然而家禽缺乏消化豆粕抗?fàn)I養(yǎng)因子的內(nèi)源性水解酶導(dǎo)致豆粕利用受到限制。豆粕在發(fā)酵過程中可降低抗?fàn)I養(yǎng)因子含量，并將大分子蛋白質(zhì)降解為動(dòng)物機(jī)體易消化和利用的小分子蛋白，進(jìn)而提高飼料轉(zhuǎn)化效率，這是發(fā)酵豆粕能改善肉雞生長性能的主要原因。魏蓮清等[28]和Niu等[29]研究發(fā)現(xiàn)，飼糧添加6%發(fā)酵棉籽粕可提高肉雞生長性能。柯祥軍等[8]研究發(fā)現(xiàn)，飼糧添加10%發(fā)酵豆粕也可提高肉雞生長性能和屠宰性能。Akinola等[10]研究發(fā)現(xiàn)，飼糧按1∶1.3的比例與水混合發(fā)酵成發(fā)酵濕飼料飼喂肉雞提高了肉雞的平均體重。本試驗(yàn)中，與F0組相比，F(xiàn)10組肉雞1～21日齡平均體重顯著提高；與F0組、F6組和F8組相比，F(xiàn)10組肉雞1～21日齡料重比顯著降低；與F0組和F6組相比，F(xiàn)8組和F10組肉雞22～42日齡平均體重和平均日采食量顯著提高；與F0組相比，F(xiàn)8組和F10組肉雞22～42日齡料重比顯著降低。這說明添加濕態(tài)發(fā)酵豆粕可以提高肉雞生長性能。這可能是因?yàn)闈駪B(tài)發(fā)酵豆粕中的芽孢桿菌、乳酸菌和酵母菌在發(fā)酵過程中將大分子蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)化為小肽和氨基酸，同時(shí)降低了抗?fàn)I養(yǎng)因子、粗纖維和粗脂肪等含量，提高了必需氨基酸和營養(yǎng)物質(zhì)消化率[30-31]。濕態(tài)發(fā)酵豆粕中的芽孢桿菌還可以降低pH，從而給乳酸菌提供合適的環(huán)境，乳酸菌產(chǎn)生乳酸又進(jìn)一步使環(huán)境中pH下降，進(jìn)而抑制有害菌繁殖，改善腸道健康，從而提高生長性能。芽孢桿菌還可增強(qiáng)免疫功能并促進(jìn)腸道內(nèi)源性抗菌肽的合成，進(jìn)而提高生長性能[32]。然而，也有研究表明，益生菌對肉雞的生長性能影響沒有顯著影響[33]。這些結(jié)果的差異可能與益生菌的菌種、接種量、制備方法、禽齡、飼糧組成和衛(wèi)生狀況有關(guān)[34]。

3.2 濕態(tài)發(fā)酵豆粕對肉雞血清免疫和抗氧化指標(biāo)的影響

脾臟是一種外周免疫器官，對保護(hù)性免疫反應(yīng)有重要影響。法氏囊被認(rèn)為是肉雞免疫球蛋白合成的主要部位，與B淋巴細(xì)胞發(fā)育有關(guān)，并為B淋巴細(xì)胞的產(chǎn)生提供必要的微環(huán)境。免疫器官重量的增加表明肉雞的免疫健康狀況較好[35]。Naji等[16]研究發(fā)現(xiàn)，飼糧添加丁酸梭菌顯著提高了肉雞法氏囊指數(shù)。而本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，飼喂?jié)駪B(tài)發(fā)酵豆粕后，肉雞胸腺指數(shù)和法氏囊指數(shù)沒有顯著性差異，但有上升的趨勢，說明濕態(tài)發(fā)酵豆粕對機(jī)體的免疫機(jī)能有一定的促進(jìn)作用，這可能是因?yàn)闈駪B(tài)發(fā)酵豆粕中芽孢桿菌有利于法氏囊的發(fā)育[35]。與本研究結(jié)果相似，Tang等[36]和Choi等[37]研究發(fā)現(xiàn)發(fā)酵海藻飼喂肉雞后，免疫器官指數(shù)沒有顯著變化，這可能與發(fā)酵菌種和發(fā)酵方法有關(guān)。

氧化應(yīng)激是指體內(nèi)氧化與抗氧化作用失衡的一種狀態(tài)，主要由活性氧引起?；钚匝醢ǔ蹶庪x子自由基、羥基自由基和過氧化氫，是正常耗氧代謝過程的產(chǎn)物[38]。SOD是一種抗超氧陰離子自由基的天然清除劑，在保護(hù)細(xì)胞免受由活性氧引起的損害中起著重要作用。MDA是重要的脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物之一，其含量可以間接反映細(xì)胞的氧化損傷程度[39]。發(fā)酵黃芪飼喂肉雞使得血清SOD活性提高，血清MDA含量降低[40]；在肉雞飼糧中添加黑曲霉發(fā)酵松針和黑曲霉發(fā)酵銀杏葉也有類似效果[6,41]；飼糧添加25%發(fā)酵豆粕可以提高肉仔雞的生長性能和血清免疫力[42]。在本試驗(yàn)中，飼糧添加濕態(tài)發(fā)酵豆粕沒有引起大多數(shù)血清抗氧化指標(biāo)的顯著變化，但是與F0組相比，F(xiàn)10組肉雞血清SOD活性顯著提高，血清MDA含量顯著降低，這說明濕態(tài)發(fā)酵豆粕可能通過其中益生菌的金屬離子螯合能力，調(diào)節(jié)信號傳導(dǎo)途徑來調(diào)節(jié)宿主的氧化還原狀態(tài)[43]。乳酸菌和芽孢桿菌可能通過增加抗氧化劑基因的表達(dá)來增強(qiáng)抗氧化劑酶的活性，抑制可能引起細(xì)胞損傷的過量活性氧，并最終降低組織的MDA含量[44-45]。同時(shí)，濕態(tài)發(fā)酵豆粕在發(fā)酵過程中芽孢桿菌可能產(chǎn)生抗氧化酶、氨基酸、乳酸和抗氧化維生素，進(jìn)而提高肉雞抗氧化能力[43]。

3.3 濕態(tài)發(fā)酵豆粕對肉雞小腸組織形態(tài)和盲腸微生物的影響

腸道健康與肉雞的生長性能密切相關(guān)。腸道絨毛高度和隱窩深度被認(rèn)為是評估腸道健康的重要指標(biāo)[46]。絨毛高度增加，腸表面積增大，可以提高養(yǎng)分吸收效率，改善肉雞的生長性能。相反，較短的絨毛和較深的隱窩可能降低營養(yǎng)吸收效率，從而降低抵抗力和生長性能[45]。

發(fā)酵飼料可以提高肉雞腸道內(nèi)乳酸菌數(shù)量[13,16,18]，增加有益菌的豐度和減少潛在有害細(xì)菌的豐度，抑制肉雞腸道內(nèi)有害菌的增殖，從而改善腸道健康[42,47]。Feng等[48]研究發(fā)現(xiàn)，飼喂發(fā)酵豆粕飼糧能顯著提高肉雞十二指腸和空腸絨毛高度。Chachaj等[49]研究發(fā)現(xiàn)，飼糧添加6%發(fā)酵豆粕能夠提高肉雞腸道絨毛高度，減少空腸中真菌和大腸菌群總數(shù)。在本試驗(yàn)中，飼糧添加濕態(tài)發(fā)酵豆粕能提高肉雞小腸各腸段絨毛高度，降低隱窩深度；還可以提高盲腸乳酸菌數(shù)量，降低沙門氏菌數(shù)量。這可能與芽孢桿菌產(chǎn)生的蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶降解豆粕中抗?fàn)I養(yǎng)因子，促使小肽等小分子物質(zhì)增加有關(guān)。Yang等[50]研究發(fā)現(xiàn)，肉雞飼糧中添加芽孢桿菌可以促進(jìn)養(yǎng)分吸收進(jìn)而誘導(dǎo)肉雞的腸道上皮細(xì)胞增殖，改善腸道健康。濕態(tài)發(fā)酵豆粕中的乳酸菌還可以產(chǎn)生短鏈脂肪酸，降低腸道不同部位的pH，從而形成天然的防御屏障，抵抗感染和沙門氏菌等病原菌，改善腸道菌群的平衡，從而提高腸道健康[51]。

4 結(jié) 論

飼糧添加濕態(tài)發(fā)酵豆粕可以顯著提高肉雞生長性能和抗氧化能力，改善小腸組織形態(tài)，提高盲腸乳酸菌數(shù)量，降低盲腸沙門氏菌數(shù)量，并且添加比例為10%時(shí)效果最佳。