李 賢，符悅冠，陳俊諭，王建贇，朱俊洪，張方平*

（1.海南大學(xué)植物保護(hù)學(xué)院，?？?570228；2.中國(guó)熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院環(huán)境與植物保護(hù)研究所，?？?571101）

橡副珠蠟蚧ParasaissetianigraNietner是橡膠樹(shù)上的一種重要害蟲(chóng)。自2004年以來(lái)，該蟲(chóng)相繼在云南及海南暴發(fā)成災(zāi)，并對(duì)生產(chǎn)造成巨大損失[1]。目前，該蟲(chóng)仍是海南苗圃的重要害蟲(chóng)之一。隨著人們對(duì)生態(tài)安全的要求越來(lái)越高，綠色防控技術(shù)在害蟲(chóng)防治中的作用日益突顯。天敵昆蟲(chóng)作為綠色防控的重要組成部分，長(zhǎng)期以來(lái)在介殼蟲(chóng)的防治上發(fā)揮著重要作用[2]。自橡副珠蠟蚧在國(guó)內(nèi)暴發(fā)以來(lái)，多位學(xué)者對(duì)其開(kāi)展了天敵資源調(diào)查及防控技術(shù)的研究，并發(fā)現(xiàn)了日本食蚧蚜小蜂CoccophagusjaponicusCompere、副珠蠟蚧闊柄跳小蜂MetaphycusparasaissetiaeZhang and Huang、優(yōu)雅岐脈跳小蜂DiversinervuselegansSilvestri和藍(lán)色長(zhǎng)盾金盾金小蜂ScutellistacaeruleaFonscolombe等優(yōu)勢(shì)天敵[3-6]，它們?cè)谠撓x(chóng)的防控上起著重要作用。

日本食蚧蚜小蜂，屬膜翅目Hymenoptera，小蜂總科Chalcidoidea，蚜小蜂科Aphelinidae食蚧蚜小蜂屬Coccophagus[7]。該蜂是橡副珠蠟蚧的一種跨期內(nèi)寄生蜂[8]，能寄生2齡若蟲(chóng)至褐色成蟲(chóng)在內(nèi)的所有蟲(chóng)態(tài)，并偏好寄生 3齡若蟲(chóng)至褐色期成蟲(chóng)[9]。藍(lán)色長(zhǎng)盾金小蜂ScutellistacaeruleaFonscolombe，屬膜翅目Hymenoptera，小蜂總科 Chalcidoidea，金小蜂科 Pteromalidae[10]，該蜂是一種外寄生蜂，將卵產(chǎn)在寄主的腹面，以寄主產(chǎn)在腹下的卵為食[11]，且只寄生橡副珠蠟蚧成蟲(chóng)[6]。目前，國(guó)外未見(jiàn)關(guān)于日本食蚧蚜小蜂的研究，國(guó)內(nèi)報(bào)道了日本食蚧蚜小蜂生物學(xué)及擴(kuò)繁技術(shù)方面的相關(guān)研究，明確了該寄生蜂的寄生行為、適應(yīng)的寄主齡期及對(duì)橡副珠蠟蚧控害能力等[3,8,9,12,13]。對(duì)于藍(lán)色長(zhǎng)盾金小蜂的報(bào)道多以其分布范圍和寄主種類(lèi)[14,15]和生物學(xué)習(xí)性為主[6]。

利用寄生蜂對(duì)寄主害蟲(chóng)進(jìn)行田間防控時(shí)，其防治效果會(huì)受到許多因素的影響。其中，溫度[16-20]、寄主齡期[21-24]、放蜂比例[25,26]是重要的3個(gè)影響因子。Hackett-Jones等[27]基于離散-時(shí)間模型，得出了利用不同寄生蜂之間的不同生態(tài)位，同時(shí)釋放兩種寄生蜂可以將同一種害蟲(chóng)的種群密度在較長(zhǎng)時(shí)間內(nèi)控制在一個(gè)合適的平衡點(diǎn)的結(jié)論。為探明日本食蚧蚜小蜂與藍(lán)色長(zhǎng)盾金小蜂在同一生態(tài)系統(tǒng)中共同釋放后是否會(huì)增強(qiáng)二者對(duì)橡副珠蠟蚧的控制效率，并明確寄主齡期、兩種蜂的釋放比例以及釋放時(shí)的溫度對(duì)控制效果的影響，筆者在室內(nèi)進(jìn)行了3因子5水平，即寄主齡期（若蚧＋成蚧）、寄生蜂比例（蚜小蜂＋金小蜂）、溫度的正交試驗(yàn)，以期找到合理的放蜂溫度、寄主齡期、寄生蜂比例組合并明確這3個(gè)因子的主次關(guān)系，為兩種蜂大田聯(lián)合釋放提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 供試蟲(chóng)源

橡副珠蠟蚧：于云南省熱帶作物研究所試驗(yàn)場(chǎng)6隊(duì)的橡膠樹(shù)上采集，在中國(guó)熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院環(huán)境與植物保護(hù)研究所內(nèi)的養(yǎng)蟲(chóng)室（溫度25 ℃～27 ℃、相對(duì)濕度70%～90%），用南瓜進(jìn)行飼養(yǎng)繁殖以備用。

日本食蚧蚜小蜂：于海南省儋州市中國(guó)熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院環(huán)境與植物保護(hù)研究所的試驗(yàn)基地里采集日本食蚧蚜小蜂褐蛹，待其羽化后，用橡膠樹(shù)上的橡副珠蠟蚧進(jìn)行繁殖，形成數(shù)量較大的試驗(yàn)種群后，將蜂轉(zhuǎn)接到南瓜飼養(yǎng)的橡副珠蠟蚧上，形成以南瓜為植物寄主的種群以供試驗(yàn)所需。

藍(lán)色長(zhǎng)盾金小蜂：于海南省瓊中縣新進(jìn)農(nóng)場(chǎng)橡膠增殖苗圃園收集金小蜂蛹，待其羽化后，用南瓜飼養(yǎng)的橡副珠蠟蚧繁殖，形成以南瓜為植物寄主的種群以供試驗(yàn)所需。

1.2 試驗(yàn)方法

在南瓜表面上挑選橡副珠蠟蚧，并將帶蟲(chóng)區(qū)的南瓜用小刀切下，去瓜囊及多余的瓜肉，僅留厚度為3 mm左右的帶介殼蟲(chóng)的南瓜表皮，將帶有蚧蟲(chóng)的南瓜塊表面朝上放入培養(yǎng)皿（D＝15 cm，用150目的紗網(wǎng)封皿，以便透氣）中，并用脫脂棉蘸取15%的蔗糖水貼于培養(yǎng)皿底部作為小蜂的補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)。在人工氣候箱內(nèi)（相對(duì)濕度70%，光周期12L∶12D）接蜂（在試管中交配了24 h的雌蜂）24 h后取出，通過(guò)體視鏡（NIKON，SMZ1500）解剖統(tǒng)計(jì)蚜小蜂與金小蜂的產(chǎn)卵數(shù)，計(jì)算寄生率。以寄主齡期（3齡若蟲(chóng)＋褐色期成蟲(chóng)）（A）、寄生蜂（日本食蚧蚜小蜂＋藍(lán)色長(zhǎng)盾金小蜂）（B）、溫度（C）為考察因子，每因子 5個(gè)水平，按表 1進(jìn)行正交試驗(yàn)。共計(jì)25個(gè)處理，每個(gè)處理重復(fù)3次。

表1 正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)Table 1 Orthogonal test design

1.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

金小蜂寄生率（%）＝被金小蜂寄生的成蟲(chóng)數(shù)/處理成蟲(chóng)頭數(shù)×100%；蚜小蜂寄生率（%）＝被蚜小蜂寄生的蚧蟲(chóng)數(shù)/處理蚧蟲(chóng)頭數(shù)×100%；若蟲(chóng)被寄生率（%）＝被寄生若蟲(chóng)數(shù)/處理若蟲(chóng)數(shù)×100%；成蟲(chóng)被寄生率（%）＝被寄生成蟲(chóng)數(shù)/處理成蟲(chóng)數(shù)×100%；總寄生率（%）＝被寄生蚧蟲(chóng)數(shù)/處理蚧蟲(chóng)數(shù)×100%。

采用極差、方差、多重比較（Duncan氏法），分析不同因素對(duì)兩種寄生蜂的產(chǎn)卵量和寄生率的影響。試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用Excel 2010、SAS 9.2統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行處理。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同處理對(duì)日本食蚧蚜小蜂和藍(lán)色長(zhǎng)盾金小蜂聯(lián)合控害效果的影響

因處理組合不同，日本食蚧蚜小蜂和藍(lán)色長(zhǎng)盾金小蜂對(duì)橡副珠蠟蚧產(chǎn)卵量和寄生率存在明顯差異。藍(lán)色長(zhǎng)盾金小蜂產(chǎn)卵量最高的處理為S3，為46.0粒；日本食蚧蚜小蜂產(chǎn)卵量最高的處理為S21，為99.3粒；藍(lán)色長(zhǎng)盾金小蜂寄生率最高的為處理S7（90.00%）；日本食蚧蚜小蜂寄生率最高的為處理S9（68.00%）；對(duì)于藍(lán)色長(zhǎng)盾金小蜂與日本食蚧蚜小蜂對(duì)蚧蟲(chóng)總的寄生率，處理S8最高，為71.00%，處理S12時(shí)最低，為5.67%。綜合來(lái)看，在所進(jìn)行的試驗(yàn)中，處理S8，即組合A1B4C3，若蚧＋成蚧＝10＋90、日本食蚧蚜小蜂＋藍(lán)色長(zhǎng)盾金小蜂＝3＋1、溫度為27 ℃時(shí)，兩蜂對(duì)橡副珠蠟蚧總的寄生率最高（表2）。

表2 不同處理對(duì)日本食蚧蚜小蜂和藍(lán)色長(zhǎng)盾金小蜂產(chǎn)卵量和寄生率的影響Table 2 Different treatment on the impact of the number of eggs and parasitic rate of C.japonicus and S.caerulea

2.2 試驗(yàn)各因子的多重比較

寄主齡期對(duì)藍(lán)色長(zhǎng)盾金小蜂產(chǎn)卵量、藍(lán)色長(zhǎng)盾金小蜂寄生率、日本食蚧蚜小蜂寄生率、成蟲(chóng)被寄生率、總寄生率均有顯著影響。其中藍(lán)色長(zhǎng)盾金小蜂產(chǎn)卵量、總寄生率在水平3時(shí)最高，分別為22.1粒、46.52%；藍(lán)色長(zhǎng)盾金小蜂寄生率、日本食蚧蚜小蜂寄生率和成蟲(chóng)被寄生率在水平5時(shí)最高，分別為39.61%、34.08%和55.17%；寄主齡期組成對(duì)日本食蚧蚜小蜂產(chǎn)卵量和若蟲(chóng)被寄生率無(wú)顯著影響。

兩種蜂的組成比例對(duì)產(chǎn)卵量、寄生率、若蟲(chóng)被寄生率、總寄生率均有顯著影響。其中，藍(lán)色長(zhǎng)盾金小蜂產(chǎn)卵量和寄生率在水平1時(shí)最高，分別為24.6粒和44.07%；日本食蚧蚜小蜂產(chǎn)卵量和寄生率、若蟲(chóng)被寄生率在水平5時(shí)最高，分別為74.4粒、49.61%和50.00%；兩蜂聯(lián)合控害的總寄生率也在水平5時(shí)最高，為49.61%。

溫度對(duì)所有指標(biāo)均有顯著影響。藍(lán)色長(zhǎng)盾金小蜂產(chǎn)卵量和寄生率在水平 5時(shí)最高，分別為 23.2粒和41.80%；日本食蚧蚜小蜂產(chǎn)卵量、寄生率、若蟲(chóng)被寄生率、成蟲(chóng)被寄生率和總寄生率在水平3時(shí)最高，分別為52.3粒、39.07%、39.94%、59.83%和48.84%。

總體上，寄主齡期組成在水平3、兩種蜂的組合為水平5、溫度在水平3，即若蚧＋成蚧＝50＋50、27 ℃單獨(dú)接蚜小蜂的控害效果最好（表3）。

表3 不同因子對(duì)日本食蚧蚜小蜂和藍(lán)色長(zhǎng)盾金小蜂防控效果影響的多重比較分析Table 3 The multiple comparison analysis of the effects of different factors on C.japonicus and S.caerulea’s prevention and control

2.3 試驗(yàn)各因子主次效應(yīng)分析

對(duì)于金小蜂產(chǎn)卵量、蚜小蜂產(chǎn)卵量、金小蜂寄生率、蚜小蜂寄生率、若蟲(chóng)被寄生率、總寄生率而言，各因子的主次水平均為寄生蜂比例＞溫度＞寄主齡期；對(duì)于成蟲(chóng)被寄生率而言，各因子主次水平為溫度＞寄主齡期＞寄生蜂比例。同時(shí)由表4可知，日本食蚧蚜小蜂與藍(lán)色長(zhǎng)盾金小蜂聯(lián)合控制橡副珠蠟蚧時(shí)，總寄生率最適組合為A3B5C3，即若蚧＋成蚧＝50＋50、27 ℃單獨(dú)接蚜小蜂時(shí)，總寄生率最高。

表4 日本食蚧蚜小蜂和藍(lán)色長(zhǎng)盾金小蜂防控指標(biāo)的極差分析Table 4 The range analysis of C.japonicus and S.caerulea’s prevention and control indicators

3 討論

寄生蜂是最常見(jiàn)的一種寄生性昆蟲(chóng)，屬膜翅目，分為內(nèi)寄生和外寄生兩大類(lèi)[28]，前者是把卵產(chǎn)在寄主體內(nèi)，后者是把卵產(chǎn)在寄主體表。本試驗(yàn)涉及的日本食蚧蚜小蜂和藍(lán)色長(zhǎng)盾金小蜂分別是橡副珠蠟蚧的內(nèi)寄生蜂和外寄生蜂，其取食對(duì)象分別為蚧蟲(chóng)的體液和腹下的卵粒，理論上這兩種蜂對(duì)橡副珠蠟蚧的防治可以起到互補(bǔ)作用。在自然界中，影響寄生蜂防效的因子有很多，如溫度、濕度、光周期、寄主種類(lèi)及齡期等[29-32]。本研究以寄生率作為指標(biāo)評(píng)價(jià)防治效果，就寄主齡期、接蜂時(shí)兩種寄生蜂與蚧蟲(chóng)的比例及環(huán)境溫度對(duì)控害效果的影響進(jìn)行了3因子5水平正交試驗(yàn)，得到最優(yōu)組合為A3B5C3，即若蟲(chóng)∶成蟲(chóng)=1∶1、27 ℃、單獨(dú)接蚜小蜂的寄生效果最好，并通過(guò)極差分析法分析多種因子在寄生過(guò)程中的主次作用，對(duì)于兩蜂對(duì)蚧蟲(chóng)總的寄生率而言，各因子的主次水平為寄生蜂比例＞溫度＞寄主齡期。

利用兩種不同生態(tài)位的寄生蜂進(jìn)行組合釋放，可以彌補(bǔ)單一寄生蜂控制害蟲(chóng)所帶來(lái)的寄生率低、防治成本增加、生態(tài)系統(tǒng)不穩(wěn)定等缺陷[33,34]，Ehler[35]、Heinz和Nelson[36]發(fā)現(xiàn)寄生蜂聯(lián)合應(yīng)用比單獨(dú)使用一種寄生蜂能殺死更多的害蟲(chóng)。Moreno-Ripoll等[37]將麗蚜小蜂Encarsiaformosa和碩恩蚜小蜂E.pergandiella聯(lián)合釋放后，發(fā)現(xiàn)二者對(duì)煙粉虱的控制效果均好于單獨(dú)釋放；利用淺黃恩蚜小蜂E.sophia與麗蚜小蜂聯(lián)合控制粉虱時(shí)，在釋放寄生蜂20 d內(nèi)，單一釋放淺黃恩蚜小蜂的防治效果最佳，但隨著時(shí)間的增加，兩種蜂聯(lián)合釋放的防治效果好于單一釋放一種蜂的防治效果[38]。本研究中，室內(nèi)接蜂24 h時(shí)，日本食蚧蚜小蜂與藍(lán)色長(zhǎng)盾金小蜂同時(shí)接蜂的寄生率顯著高于只接藍(lán)色長(zhǎng)盾金小蜂時(shí)的寄生率，但低于只接日本食蚧蚜小蜂時(shí)的寄生率，表明日本食蚧蚜小蜂的寄生能力顯著高于藍(lán)色長(zhǎng)盾金小蜂[6,9]。實(shí)驗(yàn)室前期研究發(fā)現(xiàn)，日本食蚧蚜小蜂在最適溫區(qū)24 ℃～27 ℃時(shí)，發(fā)育快、出蜂量較高，有較強(qiáng)的種群增長(zhǎng)能力。當(dāng)溫度高達(dá)33 ℃以上時(shí)，日本食蚧蚜小蜂仍然有較高的產(chǎn)卵量和寄生率，但不能完成世代發(fā)育（未發(fā)表）。另外，藍(lán)色長(zhǎng)盾金小蜂在33 ℃時(shí)，有較強(qiáng)的種群增長(zhǎng)能力（未發(fā)表）。在高溫情況下，藍(lán)色長(zhǎng)盾金小蜂與日本食蚧蚜小蜂聯(lián)合釋放，可彌補(bǔ)日本食蚧蚜小蜂高溫下不能完成世代發(fā)育的缺陷。研究發(fā)現(xiàn)在海南、云南等地區(qū)橡副珠蠟蚧3個(gè)繁殖高峰期分別是3月初和6至7月及9至10月[39]，根據(jù)天氣網(wǎng)可知海南3月白天平均氣溫28 ℃，6至7月白天平均氣溫為34 ℃，9至10月白天平均氣溫為33 ℃。其次由試驗(yàn)結(jié)果可知，日本食蚧蚜小蜂在寄主若蟲(chóng)占比高情況下的寄生率要顯著高于寄主若蟲(chóng)占比較低時(shí)的寄生率，且前期試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)日本食蚧蚜小蜂偏好寄生3齡若蟲(chóng)至褐色期成蟲(chóng)，幾乎不寄生黑色期成蟲(chóng)，而藍(lán)色長(zhǎng)盾金小蜂偏好寄生褐色期成蟲(chóng)和黑色期成蟲(chóng)，在田間聯(lián)合放蜂時(shí)，可根據(jù)表3中寄主齡期比例對(duì)聯(lián)合防控寄生率影響做參考。

本文通過(guò)3因子5水平正交試驗(yàn)，得到日本食蚧蚜小蜂與藍(lán)色長(zhǎng)盾金小蜂聯(lián)合防控效率受溫度、齡期和蜂比的影響，這對(duì)指導(dǎo)二者的田間釋放有一定的意義，但對(duì)于田間兩種蜂聯(lián)合防控的具體效果，仍需做長(zhǎng)時(shí)間的研究記錄。