王才友，張晟春，謝政軍，安立，趙春平，王才會

（遵義醫(yī)科大學(xué)第五附屬（珠海）醫(yī)院 檢驗(yàn)科，廣東 珠海 519100）

0 引言

鼻咽的解剖位置較為隱蔽，大部分鼻咽癌的早期癥狀不顯著，早期診斷率較低，甚至出現(xiàn)早期診斷延誤現(xiàn)象，加上部分患者可能早期伴有頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，直接給疾病的治療以及預(yù)后帶來極大影響，由此看出，早期選擇科學(xué)合理的診斷方式至關(guān)重要[1]。以往臨床多選擇影像學(xué)進(jìn)行疾病診斷，但難以在短時(shí)間之內(nèi)持續(xù)多次診斷，因此無法實(shí)時(shí)掌握患者病情的改變[2]。另經(jīng)影像學(xué)檢查雖然能夠觀看到患者病灶的具體大小以及形態(tài)特征，但無法體現(xiàn)患者的分子水平差異，從而限制其在疾病診斷中的應(yīng)用。隨后臨床發(fā)現(xiàn)EB 病毒抗體、SCCA（鱗狀細(xì)胞癌抗原）可成為疾病診斷以及判斷惡性程度的指標(biāo)，其中SCCA 與鱗狀上皮細(xì)胞來源的惡性腫瘤存在密切關(guān)聯(lián)，而EB 病毒作為皰疹病毒，屬于線形雙鏈DNA 病毒，EB 病毒感染與鼻咽癌的發(fā)生存在一定關(guān)聯(lián)[3-4]。但兩者聯(lián)合診斷疾病的相關(guān)報(bào)道較少，對此本文展開實(shí)驗(yàn)，結(jié)果如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2019 年5 月至2020 年12 月在遵義醫(yī)科大學(xué)第五附屬（珠海）醫(yī)院耳鼻咽喉科、腫瘤科門診和住院經(jīng)病理確診未經(jīng)放化療治療的鼻咽癌患者80例作為A 組，收集經(jīng)放化療治療后的鼻咽癌患者42例作為B 組，收集同期在遵醫(yī)五院耳鼻咽喉科診門診就診的慢性鼻炎、咽炎以及扁桃體炎患者60 例作為C 組，最后收集同期在遵醫(yī)五院體檢中心體檢正常的對照者70 例作為D 組。A 組男52 例，年齡20～83 歲，平均（48.56±2.03）歲，女28 例，年齡23～93 歲，平均（48.11±2.14）歲；B 組男28 例，年齡35～80 歲，平均（49.01±2.10）歲，女14 例，年齡32～85 歲，平均（49.20±2.05）歲；C 組男39 例，年齡20～80 歲，平均（48.96±2.14）歲，女21 例，年齡19～83 歲，平均（49.13±2.17）歲；D 組男42 例，年齡18～75 歲，平均（48.40±2.13）歲，女28 例，年齡19～78 歲，平均（49.07±2.08）歲。各組基本資料相比無差異（P>0.05）。

納入標(biāo)準(zhǔn)[5]：①符合疾病診斷標(biāo)準(zhǔn)，且未合并其他腫瘤；②D 組身心健康，無心、肝、肺及腎臟等腫瘤疾病及自身免疫性疾病；③觀察對象與家屬簽訂知情書，并經(jīng)過本院倫理委員會批準(zhǔn)通過。

剔除標(biāo)準(zhǔn)：①慢性腎臟病、血液透析、銀屑病和濕疹者；②未經(jīng)確診的疑似鼻咽癌患者；③合并感染、心肺肝腎等重要器官功能嚴(yán)重異常、血液系統(tǒng)疾病、免疫缺陷疾病。

1.2 方法

依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)規(guī)范選擇黃色分離膠管收集患者空腹血（5mL），待標(biāo)本凝固收縮后，按3000 轉(zhuǎn)離心10min，分離血清各兩份，放在-70℃冰箱保存待檢。

EB 病毒抗體：校準(zhǔn)酶標(biāo)儀與洗板機(jī)，保證儀器設(shè)備可正常使用，依據(jù)說明書要求加樣（1:10 稀釋）、溫育、洗板、加酶、溫育、洗板、顯色、加終止液，選擇酶標(biāo)儀讀數(shù)，獲得檢測結(jié)果。同時(shí)利用臨界值（Cut off 值）對結(jié)果進(jìn)行判定，若Cut off 值=0.10+陰性對照平均（NC）A 值(若陰性平均A 值不足0.05 時(shí)以0.05 計(jì)算；而陰性平均A 值≥0.05 時(shí)以實(shí)際值計(jì)算)，質(zhì)控要求空白孔的吸光度值不超過0.08，陽性對照（PC）A 值>0.30，陰性對照平均A值<0.08，判斷結(jié)果時(shí)將標(biāo)本吸光度小于臨界值為陰性，反之標(biāo)本吸光度≥臨界值即為陽性。針對1:10陽性的標(biāo)本，仍以1:20，1:40，1:80 比例稀釋，再次檢測。

SCCA 檢測：將標(biāo)本置于室溫平衡20min，校正儀器設(shè)備，保證檢測項(xiàng)目室內(nèi)質(zhì)量控制在控，依照儀器和項(xiàng)目SOP 標(biāo)準(zhǔn)化操作對標(biāo)本進(jìn)行測定，并記錄原始數(shù)據(jù)。

1.3 觀察指標(biāo)

統(tǒng)計(jì)各組患者的SCCA、EB-VCR-IgA（EBV 衣殼抗原IgA 抗體）、EB-NA-IgA（EBA 核抗原IgG 抗體）、EA-IgA（EBV 早期抗原IgA 抗體）指標(biāo)水平，并記錄各指標(biāo)的陽性檢出率，最后計(jì)算聯(lián)合與單一診斷的準(zhǔn)確性、靈敏度、特異性、陽性以及陰性預(yù)測值。

設(shè)定真陰性a，假陰性b，真陽性c，假陽性d，陰性預(yù)測值=a/（a+b），陽性預(yù)測值=c/（c+d），靈敏度=c/（c+b），特異度=a/（a+d），準(zhǔn)確度=（c+a）/總例數(shù)*100.00%[6]。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

2 結(jié)果

2.1 四組EB 病毒抗體、SCCA 指標(biāo)水平的對比

四組的SCCA、EB-VCR-IgA、EB-NA-IgA、EA-IgA指標(biāo)相比差異顯著（P<0.05），見表1。

表1 四組EB 病毒抗體、SCCA 指標(biāo)水平的對比（）

表1 四組EB 病毒抗體、SCCA 指標(biāo)水平的對比（）

2.2 EB 病毒抗體、SCCA 檢測結(jié)果的分析

聯(lián)合診斷的準(zhǔn)確性、靈敏度、特異性、陽性以及陰性預(yù)測值均高出單一SCCA、EB-VCR-IgA、EBNA-IgA、EA-IgA（P<0.05），見表2、表3。

表2 四組EB 病毒抗體、SCCA 指標(biāo)的檢測結(jié)果

表3 不同診斷方式的結(jié)果分析

3 討論

鼻咽癌通常發(fā)生在患者鼻咽腔頂部以及側(cè)壁，早期癥狀不典型，極易被忽視，隨著疾病持續(xù)加重，可明顯提升放射性損傷、齲齒以及中耳炎發(fā)生的風(fēng)險(xiǎn)性[7-8]。目前臨床多選擇放療進(jìn)行干預(yù)，可有效殺滅機(jī)體中鼻咽癌細(xì)胞，并延長生存時(shí)長，但不同病理特征患者的預(yù)后差異較大，若可通過動態(tài)評估方式對療效及預(yù)后進(jìn)行判斷，可達(dá)到指導(dǎo)后續(xù)治療的價(jià)值[9-10]。

研究表示[11]，核酸類標(biāo)志物中EBV DNA、EBV 編碼的miRNA，實(shí)時(shí)熒光定量PCR 的血漿EBV DNA 檢測作為臨床較為多見的鼻咽癌標(biāo)志物，其血漿或血清中EBV DNA 陽性對疾病診斷的敏感性以及特異性達(dá)到90%左右，其中血漿組敏感性、特異性較血清組更高。隨后臨床展開多次試驗(yàn)，均顯示患者治療前后血漿EBV DNA 水平與鼻咽癌的預(yù)后存在關(guān)系。但實(shí)際工作中仍發(fā)現(xiàn)PCR 檢測ENV DNA 存在較多局限性，例如EBV DNA 檢測缺少統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)，從而導(dǎo)致結(jié)果出現(xiàn)偏差，甚至增加誤診漏診的發(fā)生率[12]。EBV 血清抗體標(biāo)志物包含EB-VCR-IgA、EB-NA-IgA、EA-IgA 等，其中VCR-IgM 被廣泛應(yīng)用在急性感染的診斷中，但其抗體在機(jī)體中消失速度較快，單一診斷可造成漏診，進(jìn)而延誤病情，因此臨床在診斷過程中應(yīng)與其他指標(biāo)進(jìn)行聯(lián)合檢測，進(jìn)而提升檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。隨后研究深入探究，發(fā)現(xiàn)在此基礎(chǔ)上加用SCCA 檢測的價(jià)值更高，但相關(guān)報(bào)道較少[13]。本文對此進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，結(jié)果顯示：四組的SCCA、EBVCR-IgA、EB-NA-IgA、EA-IgA 水平相比差異顯著（P<0.05）；聯(lián)合診斷的準(zhǔn)確性、靈敏度、特異性、陽性以及陰性預(yù)測值均高出單一指標(biāo)（P<0.05），提示聯(lián)合診斷的價(jià)值更高，不僅能夠檢出疾病，同時(shí)可對患者預(yù)后進(jìn)行評價(jià)。一旦EB 病毒進(jìn)入機(jī)體，在鼻咽部上皮細(xì)胞上增殖，并長時(shí)間位于該位置的淋巴細(xì)胞，若機(jī)體免疫系統(tǒng)發(fā)生紊亂，潛伏的EB病毒被激活，進(jìn)而引發(fā)感染，與此同時(shí)機(jī)體中出現(xiàn)VCR-IgA、NA-IgA、EA-IgA 等抗體，最終導(dǎo)致腫瘤出現(xiàn)，由此看出EB 病毒抗體在疾病診斷中的意義。隨后醫(yī)療水平不斷進(jìn)步發(fā)展，臨床對鱗癌抗原檢測進(jìn)行深入研究，發(fā)現(xiàn)SCCA 是鱗狀細(xì)胞癌特異性較高的腫瘤標(biāo)志物，其水平與臨床分期具有一定相關(guān)性，同時(shí)能夠?qū)χ委熜Ч邦A(yù)后進(jìn)行評估，但在疾病早期診斷上的價(jià)值不高。其中SCCA 作為腫瘤相關(guān)抗原，通常處于正常鱗狀上皮或者鱗癌細(xì)胞中，健康者機(jī)體中含量較低，若鱗癌患者血清中該指標(biāo)表達(dá)升高，則表明其血中存在該抗原[14]。另有研究經(jīng)試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)[15]，SCCA 指標(biāo)呈現(xiàn)高表達(dá)后，患者出現(xiàn)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的風(fēng)險(xiǎn)隨之增大，因此隨著疾病嚴(yán)重程度的升高，SCCA 表達(dá)水平隨之增加。此結(jié)論與本文結(jié)果較為相近，證實(shí)SCCA 能夠?qū)颊哳A(yù)后進(jìn)行判斷。與EB病毒抗體聯(lián)合后，進(jìn)一步提升診斷結(jié)果的準(zhǔn)確性，不僅能夠鑒別疾病，同時(shí)還可對治療效果以及預(yù)后進(jìn)行評估，值得推廣。

綜上所述，EB 病毒抗體+SCCA 聯(lián)合診斷的價(jià)值更高，為疾病診斷以及預(yù)后判斷提供一定指導(dǎo)意義。