張成龍, 國 菲, 楊瑞琴*,, 李 鵬*,,3

(1. 中國人民公安大學(xué) 偵查學(xué)院，北京 100038；2. 山東省淄博市公安局刑偵支隊(duì)，山東 淄博 255000；3. 山西醫(yī)科大學(xué)，太原 030001)

有機(jī)磷農(nóng)藥是人工合成的磷酸酯類化合物，具有廣譜、高效和低殘留等特點(diǎn)，在國內(nèi)外農(nóng)業(yè)和園林種植領(lǐng)域得到廣泛應(yīng)用[1-2]。該類物質(zhì)毒性大，因誤服導(dǎo)致的急性中毒事件、自殺和投毒事件時(shí)有發(fā)生。據(jù)世界衛(wèi)生組織報(bào)道，每年有300多萬起有機(jī)磷農(nóng)藥意外中毒事件和自殺、投毒案件發(fā)生[3]。要想查明真相，確定中毒毒物的種類及含量，及時(shí)快速開展毒物檢驗(yàn)工作是第一步，但大多數(shù)有機(jī)磷農(nóng)藥體內(nèi)代謝或體外分解較快[4-6]，從中毒發(fā)生到檢材提取再到檢材檢測有一定時(shí)間的延遲，致使有機(jī)磷農(nóng)藥定量檢測濃度與實(shí)際中毒濃度往往相差較大，送檢不及時(shí)，甚至?xí)霈F(xiàn)假陰性現(xiàn)象。有機(jī)磷農(nóng)藥代謝物作為中毒生物標(biāo)志物之一[7]，具有監(jiān)測有機(jī)磷農(nóng)藥接觸水平[8-11]、毒性反應(yīng)[12-14]及預(yù)測可能毒性的作用[15-16]。因此，對生物檢材中有機(jī)磷農(nóng)藥代謝物的準(zhǔn)確檢測具有重要意義。

1 有機(jī)磷農(nóng)藥體內(nèi)代謝概述

有機(jī)磷農(nóng)藥通過無損皮膚、消化道及呼吸道等途徑進(jìn)入人體內(nèi)后，可迅速分布于全身臟器并與乙酰膽堿酶結(jié)合，造成輕重不等的中毒現(xiàn)象[17]。有機(jī)磷農(nóng)藥種類不同，其在體內(nèi)的代謝也有一定差異[18]，其中肝細(xì)胞多功能氧化酶的氧化作用和磷酸三酯酶的水解作用為其在體內(nèi)主要代謝途徑[19-21]。其代謝物大體可分為兩類：一類是二烷基磷酸酯類化合物 (DAP)。多數(shù)有機(jī)磷農(nóng)藥可代謝為1種及1種以上的DAP[22]，人體在接觸有機(jī)磷農(nóng)藥后的24～48 h 在尿流中可檢測到DAP[7]，DAP包括磷酸二甲酯 (DMP)、磷酸二乙酯 (DEP)、二甲基硫代磷酸酯 (DMTP)、二乙基硫代磷酸酯 (DETP)、二甲基二硫代磷酸酯 (DMDTP) 和二乙基二硫代磷酸酯(DEDTP) 6種化合物。另一類是特殊代謝物(SM)。SM是一種或少數(shù)幾種有機(jī)磷農(nóng)藥的代謝物，具有特異性。在實(shí)際案件中，可結(jié)合具體案情確定農(nóng)藥的種類，例如：2-異丙基-4-甲基-6-羥基嘧啶 (IMPY) 為二嗪磷的特殊代謝物，2-(二乙氨基)-6-甲基-4-羥基嘧啶 (DEAMPY) 為甲基嘧啶磷的特殊代謝物，對硝基酚 (PNP) 為對硫磷和甲基對硫磷特殊代謝物，3,5,6-三氯-2-吡啶醇 (TCP)為毒死蜱和甲基毒死蜱的特殊代謝物等[22-23]。

2 有機(jī)磷農(nóng)藥代謝產(chǎn)物實(shí)驗(yàn)室檢測技術(shù)及應(yīng)用

2.1 氣相色譜分析技術(shù)

氣相色譜 (GC) 技術(shù)是實(shí)驗(yàn)室常用的分析手段之一，靈敏度較高，其中火焰光度檢測器的使用對含磷的代謝物具有良好選擇性。由于二烷基磷酸酯類化合物極性較高，采用GC進(jìn)行檢測時(shí)，前處理常用五氟芐基溴 (PFBBr) 對6種DAP進(jìn)行衍生反應(yīng)以降低其極性，但該過程繁瑣費(fèi)時(shí)，且衍生試劑具有強(qiáng)烈刺激性氣味，污染環(huán)境。

Aprea等[24]介紹了一種精確、重現(xiàn)性強(qiáng)的定量測定尿樣中6種DAP的分析方法。分別在室溫和90 ℃條件下對尿樣中含硫DAP和不含硫的DAP分兩步衍生，經(jīng)CN柱凈化，用毛細(xì)管氣相色譜?火焰光度檢測器 (GC-FPD) 技術(shù)檢測。該方法準(zhǔn)確度及精密度均較高，檢出限在2～3 ng/mL之間，可滿足職業(yè)暴露和普通人群中的DAPs檢測。Oglobline等[25]采用改進(jìn)的氣相色譜法分析了有機(jī)磷農(nóng)藥接觸工人尿液中的6種DAP，通過PFBBr對6種DAP進(jìn)行衍生化處理，尿液樣本經(jīng)凍干后，采用雙毛細(xì)管柱GC-FPD方法測定，檢出限為5～50 ng/mL。該方法前處理使用冷凍干燥機(jī)處理可大大縮短樣本制備時(shí)間，適用于職業(yè)性接觸有機(jī)磷農(nóng)藥工人尿液的大批量常規(guī)分析。

楊玉林等[26]采用GC-FPD檢測技術(shù)建立了尿液中6種DAP的定量分析方法。通過衍生化溫度、時(shí)間等條件的優(yōu)化，選用50 ℃下進(jìn)行PFBBr一步衍生，反應(yīng)14～16 h，以二丁基磷酸酯 (DBP)為內(nèi)標(biāo)，直接進(jìn)樣，大大簡化了操作步驟，并在衍生過程中充入高純氮，有效避免了含硫代謝物的氧化。6種DAP在100 ng/mL下的檢出限為2～15 ng/mL，回收率為66%～90%。金忠秀等[27]創(chuàng)建了血漿中有機(jī)磷農(nóng)藥含硫代謝物DETP、DEDTP的GC-FPD檢測方法。結(jié)果表明，經(jīng)V(乙醚) :V(乙腈) = 1 : 1液-液萃取后，40 ℃下用PFBBr進(jìn)行衍生反應(yīng)4 h，能有效避免基質(zhì)中相鄰峰干擾，并提高分析效率。DETP和DEDTP的回收率分別為92.46% 和 98.10%，檢出限分別為5.0 ng/mL和 1.0 ng/mL，經(jīng)實(shí)際樣本檢測，證明該方法對大批量低接觸有機(jī)磷農(nóng)藥的普通人群的分析極為有利。

2.2 氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用分析技術(shù)

氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用 (GC-MS) 技術(shù)結(jié)合了色譜的高分離效能和質(zhì)譜的定性準(zhǔn)確特點(diǎn)，具有更高的靈敏度和更低的檢出限，樣本用量少，近年來被廣泛應(yīng)用于有機(jī)磷農(nóng)藥代謝物的檢測分析。

Ueyama等[28]創(chuàng)建了安全、靈敏的GC-MS方法，可實(shí)現(xiàn)對尿液中DMP、DEP、DMTP和DETP的同時(shí)檢測，并對pH值對氮吹蒸發(fā)的影響、衍生反應(yīng)的溫度和時(shí)間、抗氧化劑的添加以及凈化步驟進(jìn)行了優(yōu)化，檢出限和定量限分別為0.1～0.3 ng/mL和0.3～1 ng/mL，回收率為60.5%～92.4%。之后，Ueyama等[29]對上述方法進(jìn)行了改進(jìn)，在衍生反應(yīng)前增加脫水處理，并使用氣相色譜-電子轟擊離子源-質(zhì)譜 (GC-EI-MS) 進(jìn)行檢測。4種分析物的檢出限和定量限分別為0.05～0.15 ng/mL和0.20～0.50 ng/mL，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差在15.7%以下，改進(jìn)后的方法在高通量和低成本的情況下，獲得了更高的靈敏度和精密度。

Alwis等[30]介紹了一種自動(dòng)固相萃取、同位素稀釋結(jié)合GC-MS/MS技術(shù)分析尿液中6種DAP的方法，分析物經(jīng)過自動(dòng)離線固相萃取裝置提取后，采用1-氯-3-碘丙烷進(jìn)行衍生反應(yīng)，檢出限為0.05～0.17 ng/mL，回收率為56%～104%。該方法省時(shí)、省力、重復(fù)性高，樣本制備時(shí)間短，只需4 h，是之前所用時(shí)間的1/5[31]。Bravo等[32]同樣采用同位素稀釋結(jié)合GC-MS/MS技術(shù)對尿液中6種DAP進(jìn)行定量分析，前處理使用凍干法，6種DAP檢出限為0.1～0.6 ng/mL，回收率為75%～100%。通過對1 100份美國加利福尼亞州孕婦和兒童尿液樣本檢測分析，證實(shí)該方法的靈敏度可用于一般人群監(jiān)測。之后，Alwis等[33]以磷酸二丁酯 (DBP)為內(nèi)標(biāo)，對尿液中6種DAP進(jìn)行自動(dòng)固相萃取后，改用PFBBr進(jìn)行衍生化反應(yīng)，GC-MS檢測，檢出限為0.1～0.15 ng/mL，回收率為58%～119%。較之前方法相比保持了簡單、快捷、準(zhǔn)確等優(yōu)點(diǎn)，而且更為經(jīng)濟(jì)、普適，為大規(guī)模生物檢材的監(jiān)測提供了技術(shù)支撐。

Margariti等[34]開發(fā)并驗(yàn)證了GC-MS 法定量測定頭發(fā)中3種DAP (DMP、DMTP、DEP) 的分析方法。前處理包括去污步驟、固液萃取、液-液萃取、PFBBr衍生化和Florisil/PSA柱凈化。向空白頭發(fā)樣品中添加1 和10 ng/mg分析物，回收率為56.1%～107.9%，日內(nèi)相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為13.5%～17.5%。檢出限為0.02～0.10 ng/mg 。Elodie等[35]采用GC-MS技術(shù)對血清和頭發(fā)樣品中的DMP進(jìn)行檢測，以研究尿道下裂與有機(jī)磷農(nóng)藥接觸的關(guān)系。頭發(fā)前處理步驟包括去污、干燥粉碎、超聲輔助固-液萃取、PFBBr衍生化后氮吹至近干，定容后進(jìn)樣；血清前處理主要是在酸性條件下液-液萃取，之后采用PFBBr衍生化后氮吹至近干，定容后進(jìn)樣。研究結(jié)果表明，后代尿道下裂，父母血清和頭發(fā)樣本中DMP的濃度比一般人群報(bào)告的要高得多，并支持有機(jī)磷農(nóng)藥暴露可能是尿道下裂的潛在危險(xiǎn)因素的假設(shè)。孫?琳[36]建立了高分離度、高精確性的GC-MS法，對血液和組織器官樣本中對硫磷及其4種代謝物 (對氧磷、DETP、DEP和PNP) 進(jìn)行檢測分析，并對對硫磷的體內(nèi)代謝轉(zhuǎn)化進(jìn)行了研究。通過優(yōu)化分流比、升溫程序、質(zhì)譜設(shè)置等條件的優(yōu)化，5種分析物在30 min內(nèi)可完成分離檢測，檢出限為2.0～16.7 ng/mL，線性范圍6.25～500 ng/mL。

Guo等[37]建立了高靈敏度GC-MS/MS方法，對尿液中DMP、DMTP、DETP和TCP進(jìn)行分析，除TCP外，采用多反應(yīng)離子監(jiān)測 (MRM) 結(jié)合保留時(shí)間定性，內(nèi)標(biāo)法定量。結(jié)果檢出限、定量限分別為 0.083～0.667 ng/mL、0.2～2.0 ng/mL，回收率為54.1%～68.6%。該方法選用硅烷化試劑N-(叔丁基二甲基硅烷基) -N-甲基三氟乙酰胺(MTBSTFA) 對分析物進(jìn)行衍生化，所需時(shí)間大幅縮短，且不需要其他試劑參與。李曄等[38]采用GC-MS技術(shù)對尿液中DMP、DEP、DETP、DMDTP和DEDTP 5種DAP進(jìn)行了測定。多篇文獻(xiàn)給出50 ℃條件下反應(yīng)16 h的PFBBr衍生條件[26]，該研究基于乙腈沸點(diǎn)，采用80 ℃下衍生反應(yīng)30 min，并加入焦亞硫酸鈉作為抗氧化劑，DAPs在0.05～10 mg/L內(nèi)線性關(guān)系良好，回收率為51.6%～90.8%，檢出限為1～2 ng/mL，該方法在有效保證檢測準(zhǔn)確度的同時(shí)加快了檢測速度，適用于對中毒物快速檢測。

Takayasu等[39]應(yīng)用GC-MS技術(shù)報(bào)道了中毒病例死后甲基毒死蜱、殺蟲磷及其代謝物 (TCPY、3MNP) 在血液、尿液和器官組織中的分布。對各類檢材主要采用Extrelut? NT柱進(jìn)行固相萃取，并在85 ℃條件下采用N-甲基-N-三甲基硅烷基三氟乙酰胺 (含1% 三甲基氯硅烷) 對TCPY、3MNP進(jìn)行衍生反應(yīng)，為提高定量準(zhǔn)確性，在尿液處理前過程中加入β-葡萄糖醛酸酶，以水解目標(biāo)物的葡萄糖醛酸軛合物。其中TCPY、3MNP在血液中的定量限均為10 ng/mL，回收率分別為76%～94.3%、83.9%～102%；在尿液中定量限也均為10 ng/mL，回收率分別為77.4%～95.4%、85.2%～99%。

2.3 液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用分析技術(shù)

液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜 (LC-MS/MS) 技術(shù)具有靈敏度高、重現(xiàn)性好、分辨率高和簡便高效等優(yōu)點(diǎn)，與其他檢測方法相比，其不需要衍生化，前處理簡單安全，對環(huán)境污染較小，但儀器造價(jià)和運(yùn)行成本較為昂貴。

Dulaurent等[40]首次報(bào)道了溶劑萃取前處理結(jié)合LC-MS/MS技術(shù)對尿中的6種DAP同時(shí)進(jìn)行檢測，使用ODS3 C18色譜柱分離，多反應(yīng)監(jiān)測 (MRM)模式下進(jìn)行質(zhì)譜檢測。檢出限為0.5～1.3 ng/mL。該方法靈敏度高，在環(huán)境暴露的志愿者尿液中檢測到DAP的存在，證實(shí)了LC–MS/MS技術(shù)在該領(lǐng)域的適用性，但6種DAP的回收率偏低，均在70%以下。

Odetokun等[41]開發(fā)了全自動(dòng)固相萃取結(jié)合高效液相色譜-電噴霧電離-串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)，對尿中6種DAP進(jìn)行定量分析。該操作系統(tǒng)采用96孔板-弱陰離子交換固相萃取板對分析物進(jìn)行自動(dòng)提取后直接進(jìn)樣，萃取效率為40%～98%，檢出限為0.044～1.549 ng/mL。該方法大大減少了工作量，提高了工作效率，每周可檢測1 152份樣本，是之前檢測量的兩倍[32]，可用于職業(yè)和非職業(yè)有機(jī)磷農(nóng)藥暴露的環(huán)境及應(yīng)急生物監(jiān)測。Ueyama等[29]開發(fā)了一種靈敏、可靠的固相萃取結(jié)合液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)，檢測尿液中DMP、DEP、DMTP和DETP的含量，并實(shí)際應(yīng)用于日本兒童尿液中DAPs濃度的測定。該方法的優(yōu)勢是使用包含陰離子和陽離子配體的多模式ODS色譜柱，能較好地保留4種較高極性分析物，該方法的靈敏度較高，檢出限低于0.4 ng/mL。該研究成為評估人類有機(jī)磷農(nóng)藥暴露風(fēng)險(xiǎn)的重要一步。

王娜等[42]建立了尿中毒死蜱等有機(jī)磷農(nóng)藥特殊代謝物3,5,6-三氯-2-吡啶醇 (TCP) 的超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜 (UPLC-MS/MS) 分析檢測方法。前處理選用V(二氯甲烷) :V(乙酸乙酯) = 20 : 80溶液對待測物進(jìn)行液-液萃取，回收率高達(dá)97.9%，在電噴霧電離負(fù)離子 (ESI?) 模式下，選擇離子監(jiān)測(SIR) 方式檢測，檢出限為0.41 ng/mL。該方法為生物負(fù)荷的痕量監(jiān)測提供了技術(shù)支撐。Davis等[43]采用高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜 (HPLC-MS/MS) 技術(shù)，對尿液中幾種農(nóng)藥的12種生物標(biāo)記物進(jìn)行定量分析，其中包括有機(jī)磷農(nóng)藥的5種特殊代謝物(PNP、TCPY、MDA、IMPY、DEAMPY)。該方法通過使用較窄直徑的分析柱和對每個(gè)分析物使用同位素稀釋量化，可以達(dá)到示蹤級分析所需的選擇性和靈敏度，檢出限低至0.04 ng/mL，回收率為94.1%～98.0%。周志榮等[44]建立了對尿液中DMDTP、DEP、DEDTP、PNP、CMHC和TCPY LC-MS/MS測定方法。采用近年國外尿樣中使用的水酶解技術(shù)進(jìn)行前處理，并對固相萃取柱、流動(dòng)相、離子源進(jìn)行了優(yōu)化，檢出限在2 ng/mL以下，回收率為79%～130%。該方法可同時(shí)檢測DAPs和SMs，為進(jìn)一步擴(kuò)大有機(jī)磷農(nóng)藥代謝物檢測范圍奠定了基礎(chǔ)。

Roca等[45]開發(fā)了液相色譜靜電場軌道肼高分辨質(zhì)譜方法 (LC-HRMS)，可同時(shí)檢測尿液中6種DAP和多種SM，是目前國內(nèi)外可同時(shí)檢測有機(jī)磷農(nóng)藥代謝物種類最多的技術(shù)。該方法使用全掃描模式，一次檢測可完成對正負(fù)離子的同時(shí)掃描，可實(shí)現(xiàn)對多種物質(zhì)的同時(shí)檢測，大大簡化了操作步驟，縮短了檢測時(shí)間。在前處理過程中使用β-葡萄糖醛酸酶進(jìn)行水解，創(chuàng)新性地采用改進(jìn)的QuEChERS技術(shù)進(jìn)行提取，有效地降低了基質(zhì)效應(yīng)，提高了回收率。各有機(jī)磷農(nóng)藥代謝物在0.8～200 ng/mL內(nèi)線性關(guān)系良好，定量限為0.8～50 ng/mL，回收率為60%～120%。

3 有機(jī)磷農(nóng)藥代謝產(chǎn)物快速檢測技術(shù)及應(yīng)用

快速檢測技術(shù)操作簡便、結(jié)果直觀，在現(xiàn)場初篩和生物監(jiān)測方面發(fā)揮著重要作用[46-47]。在中毒案件中，快速檢測技術(shù)可縮小實(shí)驗(yàn)室檢測范圍或直接篩查出中毒因子，為搶救中毒者贏得時(shí)間。本文介紹了3種常見的有機(jī)磷農(nóng)藥代謝物快速檢測方法：熒光探針法、免疫分析法和生物傳感器法。

3.1 熒光探針法

典型的熒光探針由識別基團(tuán) (受體)、熒光團(tuán)和連接兩者的連接基團(tuán)所組成。熒光探針法是受體和底物集合后，導(dǎo)致受體分子的光物理性質(zhì)發(fā)生變化，從而熒光團(tuán)部分發(fā)生熒光淬滅或增強(qiáng)的方法[48]。Wang等[49]報(bào)道了EU3+功能化的Hf-MOF熒光探針 (Eu3+@1) 探測尿液中對硫磷和甲基對硫磷特殊代謝物對硝基苯酚 (PNP) 和殺螟松特殊代謝物3-甲基-4-硝基苯酚 (PNMC)。Hf-MOF探針上的有機(jī)配體可向Eu3+傳遞能量敏化Eu3+發(fā)光[50]，而PNP和PNMC與Eu3+@1在紫外吸收光譜上存在部分重疊，PNP和PNMC對輻射光競爭吸收可降低有機(jī)配體向Eu3+的傳能效率，導(dǎo)致其熒光淬滅而被檢測出來。該熒光探針對水和pH耐受性強(qiáng)，在1 min內(nèi)可完成檢測，PNP和PNMC的檢出限分別為0.36 μg/mL和 0.41 μg/mL，具有快速、高效和高選擇性等優(yōu)點(diǎn)。此外，該熒光探針可循環(huán)使用，綠色環(huán)保，節(jié)約成本。

3.2 免疫分析法

免疫分析法是利用毒物與標(biāo)記毒物競爭性結(jié)合抗體，從而檢測毒物的方法[51-52]。Zhang等[53]報(bào)道了檢測人體唾液中毒死蜱特殊代謝物TCP的納米金免疫層析 (ITS) 技術(shù)，該技術(shù)是免疫分析法的一種，當(dāng)待測物與膜上固定的納米金標(biāo)記的抗體 (或?yàn)榭乖? 特異性結(jié)合后，復(fù)合物再與膜上檢測線的抗原 (或?yàn)榭贵w) 相結(jié)合，根據(jù)檢測線的顏色深淺進(jìn)行定量。作者采用實(shí)驗(yàn)室研制的前處理緩沖液對ITS樣本墊進(jìn)行預(yù)處理，優(yōu)化了Au納米顆粒與TCP抗體偶聯(lián)比等參數(shù)，實(shí)現(xiàn)了對TCP的高靈敏度和選擇性的直接檢測，TCP在0.625～20 ng/mL內(nèi)線性關(guān)系良好，檢出限為0.47 ng/mL。

3.3 生物傳感器法

生物傳感器法是利用生物反應(yīng)或生物物質(zhì)間的親和作用，選擇性地檢測生物試樣或系統(tǒng)的化學(xué)成分、提供生產(chǎn)過程有關(guān)信息的方法[54-55]。Zou等[56]開發(fā)了一種便攜式量子點(diǎn) (QD) 熒光免疫傳感器，用于血漿中毒死蜱特殊代謝物TCP的生物監(jiān)測。該傳感器是生物傳感器的一種，抗體與TCY和QD-TCY偶聯(lián)體發(fā)生競爭性免疫反應(yīng)后，根據(jù)其捕獲量子點(diǎn)的熒光量實(shí)現(xiàn)對血漿中TCY的定量分析。該技術(shù)集成了免疫層析法、量子標(biāo)記技術(shù)和X射線光電子能譜、熒光光譜技術(shù)，具有簡單、快速和靈敏等優(yōu)點(diǎn)。最佳條件下，可在15 min內(nèi)完成檢測，檢出限為1.0 ng/mL，添加回收率102.0%，是床旁快速檢測和環(huán)境生物監(jiān)測的新途徑之一。Wang等[57]也開發(fā)了用于血漿中TCP生物監(jiān)測的免疫層析電化學(xué)生物傳感器，該裝置結(jié)合了電化學(xué)免疫傳感器和測流免疫層析技術(shù)，競爭性酶聯(lián)免疫反應(yīng)在免疫色譜條帶上進(jìn)行，絲網(wǎng)印刷的碳電極測定檢測區(qū)捕獲的HRP標(biāo)記的抗體。與傳統(tǒng)的酶聯(lián)免疫吸附法相比，該裝置更為輕便、靈敏，檢出限低至0.1 ng/mL，為農(nóng)藥中毒的臨床診斷和現(xiàn)場快速篩查提供了可能。

4 問題與展望

現(xiàn)階段，國內(nèi)外對于有機(jī)磷農(nóng)藥代謝產(chǎn)物的檢測分析雖已取得初步成果，但從實(shí)踐的角度來看，目前的檢測水平仍然存在一些問題：1) 有機(jī)磷農(nóng)藥在生物體內(nèi)的代謝規(guī)律研究還不全面，國內(nèi)外文獻(xiàn)報(bào)道多針對原藥動(dòng)力學(xué)開展研究。因此，今后應(yīng)繼續(xù)深入研究有機(jī)磷農(nóng)藥的體內(nèi)代謝機(jī)制，及其代謝物的穩(wěn)定性和分布規(guī)律，為更全面地檢測代謝物奠定基礎(chǔ)。2) 有機(jī)磷農(nóng)藥代謝物快速檢測技術(shù)專屬性高，大多只適用于單一分析物的檢測，對于多種目標(biāo)物同時(shí)進(jìn)行檢測只能依賴于GC-MS、LC-MS/MS 等實(shí)驗(yàn)室確證方法。為提高檢測效率，擴(kuò)大檢測范圍，開發(fā)同時(shí)檢測生物樣本中包含DAPs和SMs在內(nèi)的多種有機(jī)磷農(nóng)藥代謝物的檢測技術(shù)顯得尤為重要。3) 目前采用的方法以色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法為主，需耗費(fèi)大量的時(shí)間和有機(jī)溶劑對復(fù)雜基質(zhì)進(jìn)行提取和凈化，以保護(hù)儀器，消除基質(zhì)干擾。因此，建立簡單、高效、綠色和環(huán)保的前處理方法將是今后發(fā)展趨勢之一。QuEChERS技術(shù)快速、低廉、針對大部分極性較高物質(zhì)回收率高，在未來必會(huì)凸顯其重要性。4) 目前國內(nèi)外的各種檢測技術(shù)多為生物監(jiān)測而開發(fā)，檢測對象也以血、尿等活體生物檢材為主，為滿足公安機(jī)關(guān)辦理有機(jī)磷農(nóng)藥中毒死亡案件的實(shí)踐需要，需進(jìn)一步探索針對死者生物檢材的檢測技術(shù)，為相關(guān)案件的司法鑒定提供全面的科學(xué)依據(jù)。