關(guān)永霞 申鳳霞 李倩 范建偉 陳學(xué)通 王永華 張貴民

摘要 目的：采用系統(tǒng)藥理學(xué)的方法探討半夏厚樸湯治療反流性食管炎的有效成分、作用靶點(diǎn)及作用機(jī)制，為其進(jìn)一步開發(fā)和臨床應(yīng)用提供參考。方法：利用中藥系統(tǒng)藥理學(xué)數(shù)據(jù)庫與分析平臺(tái)（TCMSP）和文獻(xiàn)檢索搜集半夏厚樸湯中的化學(xué)成分;運(yùn)用口服生物利用度（OB）、類藥性（DL）2個(gè)藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)篩選活性化合物;采用WES模型預(yù)測候選活性化合物的靶點(diǎn);通過檢索CTD數(shù)據(jù)庫和TTD數(shù)據(jù)庫，篩選出與反流性食管炎相關(guān)的靶點(diǎn);GOBP富集分析;構(gòu)建化合物-靶點(diǎn)、靶點(diǎn)-通路網(wǎng)絡(luò)圖。結(jié)果：構(gòu)建了一個(gè)包括521個(gè)化合物的半夏厚樸湯分子數(shù)據(jù)庫，通過OB、DL篩選獲得65個(gè)候選活性化合物，WES模型預(yù)測出候選活性化合物的249個(gè)靶點(diǎn);篩選出151個(gè)與反流性食管炎相關(guān)的靶點(diǎn);GOBP富集分析得到與反流性食管炎相關(guān)的生物過程條目20個(gè);KEGG通路富集篩選得到相關(guān)的通路11條。結(jié)論：半夏厚樸湯主要通過調(diào)控炎癥、調(diào)節(jié)胃腸動(dòng)力、保護(hù)胃黏膜、提高免疫力、調(diào)節(jié)膽堿能神經(jīng)等來治療反流性食管炎，半夏厚樸湯治療反流性食管炎具有多成分、多靶點(diǎn)、多通路協(xié)同作用的特點(diǎn)，有望對反流性食管炎的治療提供新的研究思路，為后期實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證提供理論依據(jù)。

關(guān)鍵詞 半夏厚樸湯;反流性食管炎;系統(tǒng)藥理學(xué);作用機(jī)制;靶點(diǎn)預(yù)測

Abstract Objective：To identify the active components，action targets and action mechanisms of Banxia Houpo Decoction in the treatment of reflux esophagitis by using systems pharmacology method，thus providing references for its further development and clinical application.Methods：Using the Traditional Chinese Medicine Systems Pharmacology （TCMSP） database and literature search，the chemical components of Banxia Houpo Decoction was collected;then OB and DL pharmacokinetic parameters was applied to screen the active compounds;WES model was used to predict the target of candidate active compounds;by searching the CTD database and the TTD database，the targets related to reflux esophagitis were screened out，and were used for GOBP and pathway enrichment analysis;finally，the compound-target，target-pathway networks were constructed.Results：A molecular database of Banxia Houpo Decoction consisting of 521 compounds was constructed，and 65 active compounds were obtained by OB and DL screening.The WES model predicted 249 targets for the active compounds;and 151 of them were screened out as reflux esophagus Inflammation-related targets.GOBP enrichment analysis of these targets yields 20 items of biological processes related to reflux esophagitis;there were 11 signal pathways in KEGG pathway enrichment screening.Conclusion：Banxia Houpo Decoction mainly treats reflux esophagitis by regulating inflammation，modulating gastrointestinal motility，protecting gastric mucosa，improving immunity，and regulating cholinergic nerves etc.Banxia Houpo Decoction treatmenting reflux esophagitis has the characteristics of multi-component，multi-target，and multi-path synergy，which is expected to provide new research ideas for the treatment of reflux esophagitis and provide theoretical basis for later experimental verification.

Keywords Banxia Houpo Decoction; Reflux esophagitis; System pharmacology; Action mechanism; Target prediction

中圖分類號：R285文獻(xiàn)標(biāo)識碼：Adoi：10.3969/j.issn.1673-7202.2021.13.007

反流性食管炎（Reflux Esophagitis，RE）是指胃、十二指腸內(nèi)容物反流入食管內(nèi)所引起的一類消化系統(tǒng)常見病[1]，主要臨床表現(xiàn)為燒心、反流、噯氣、嘔吐、胸痛等[2-3]。近幾年來，RE的發(fā)病率逐漸增高且治療周期長，嚴(yán)重影響了患者的生命質(zhì)量，目前西醫(yī)治療RE主要以降低胃酸、促進(jìn)胃動(dòng)力藥為主[4]，但是現(xiàn)代研究發(fā)現(xiàn)停藥半年后的RE與癥狀復(fù)發(fā)率分別為80%、90%[5]，如果得不到有效的治療可能導(dǎo)致嚴(yán)重的并發(fā)癥，如：潰瘍、出血等，甚至發(fā)展為癌癥[6]。

半夏厚樸湯[7]源自東漢張仲景的《金匱要略》，由半夏、厚樸、茯苓、生姜、紫蘇葉組成，原典記載“婦人咽中如有炙臠，半夏厚樸湯主之”，具有行氣散結(jié)、降逆化痰之功效，主要用于治療“梅核氣”。現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究表明，半夏厚樸湯在治療RE方面也有很好的藥理學(xué)作用[8-11]，且具有較少的不良反應(yīng)和較高的安全性;雖然半夏厚樸湯在治療RE方面取得了一定的成效，但是其治療RE的作用機(jī)制尚不明確，因此限制了該經(jīng)方的使用和推廣。

系統(tǒng)藥理學(xué)是從分子、網(wǎng)絡(luò)、細(xì)胞、組織、器官等不同水平上研究藥物治療疾病時(shí)對機(jī)體功能影響的一門新興學(xué)科，是借助計(jì)算機(jī)技術(shù)來計(jì)算化合物的藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)、預(yù)測化合物靶點(diǎn)等，進(jìn)而來闡述化合物、靶點(diǎn)、通路、器官等之間的相互作用關(guān)系。中藥方劑成分多、靶點(diǎn)多，采用傳統(tǒng)的實(shí)驗(yàn)方法分析起來費(fèi)時(shí)費(fèi)力，進(jìn)而影響了中藥現(xiàn)代化研究的發(fā)展，然而系統(tǒng)藥理學(xué)對方劑的研究提供了新的理論方法和研究思路[12]。本研究運(yùn)用系統(tǒng)藥理學(xué)的方法對半夏厚樸湯治療RE作用機(jī)制進(jìn)行分析，將有助于對中藥作用機(jī)制的探索，對新藥開發(fā)提供新的理論支撐。

1 材料與方法

1.1 半夏厚樸湯分子數(shù)據(jù)庫的建立以及候選活性化合物的篩選

通過利用中藥系統(tǒng)藥理學(xué)數(shù)據(jù)庫與分析平臺(tái)（Traditional Chinese Medicine Systems Pharmacology Database and Analysis Platform，TCMSP）和文獻(xiàn)檢索搜集這5種草藥所含有的化合物[13]?？诜锢枚龋∣ral Bioavailability，OB）是指口服藥物產(chǎn)生療效的分子占口服總量的百分比，類藥性（Drug-likeness，DL）是指候選化合物與已知藥效分子的相似性，這2個(gè)指標(biāo)都是篩選有效藥物成分的重要指標(biāo)，因此本研究選擇OB≥30%和DL≥0.18的化合物作為候選活性化合物[14-15]。

1.2 靶點(diǎn)的預(yù)測與篩選

采用加權(quán)系綜相似度（Weighted Ensemble Similarity，WES）模型來預(yù)測該經(jīng)方的靶點(diǎn)[16]。WES模型的基本流程如下：1）在整體框架中確定與藥理特性高度相關(guān)的關(guān)鍵配體結(jié)構(gòu)特征;2）通過評估整體相似性而不是通過單個(gè)配體判斷來確定藥物與靶標(biāo)的隸屬關(guān)系;3）利用貝葉斯網(wǎng)絡(luò)標(biāo)準(zhǔn)化的系綜相似度得分（Z-score），得到最終的預(yù)測結(jié)果，WES模型的外部測試和實(shí)驗(yàn)評價(jià)的準(zhǔn)確性分別為70%和71%，這表明該模型為藥物靶點(diǎn)的預(yù)測提供了一種潛在的數(shù)學(xué)模型，因此也證明了該模型的可靠性。

RE相關(guān)靶點(diǎn)的篩選利用的是比較毒物遺傳學(xué)數(shù)據(jù)庫（Comparative Toxicogenomics Database，CTD）和療效藥靶數(shù)據(jù)庫（Therapeutic Target Database，TTD），CTD數(shù)據(jù)庫是一個(gè)強(qiáng)大的公開數(shù)據(jù)庫，它提供有關(guān)基因與疾病之間的相互關(guān)系;TTD數(shù)據(jù)庫中的靶點(diǎn)是通過臨床試驗(yàn)或有關(guān)研究藥物治療靶點(diǎn)的專利、文獻(xiàn)報(bào)告得到的[17-18]。將WES預(yù)測的候選化合物的全部靶點(diǎn)分別導(dǎo)入CTD和TTD數(shù)據(jù)庫，篩選出與RE相關(guān)的靶點(diǎn)。

1.3 GOBP富集分析

基因本體論（Gene Ontology，GO）是一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)化的基因功能分類系統(tǒng)，由3部分組成，分別是參與的生物過程（Biological Process）、細(xì)胞成分（Cellular Component）和基因的分子功能（Molecular Function）[19]。DAVID數(shù)據(jù)庫為研究人員提供了一套全面的功能注釋工具，有助于我們了解大量基因背后的生物學(xué)含義。我們將上一步驟中篩選得到的靶點(diǎn)導(dǎo)入到DAVID數(shù)據(jù)庫[20]（https：//david.ncifcrf.gov/）中對其GOBP進(jìn)行富集分析。靶點(diǎn)導(dǎo)入數(shù)據(jù)庫后，將會(huì)得到這些靶點(diǎn)參與的生物過程，選擇P-Value小于0.05的生物過程進(jìn)行分析。候選活性化合物經(jīng)過口服后，作用于人體內(nèi)的靶點(diǎn)蛋白，參與的生物過程各不相同，因此為了探究前面篩選得到的151個(gè)靶點(diǎn)參與了生物體內(nèi)的哪些生物過程來參與RE的治療，我們將靶點(diǎn)導(dǎo)入到DAVID數(shù)據(jù)庫進(jìn)行GOBP富集分析，富集結(jié)果被繪制成柱狀圖。

1.4 網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建與分析

半夏厚樸湯中的候選活性化合物可以同時(shí)與多個(gè)靶點(diǎn)相互作用，同一靶點(diǎn)也可以受多個(gè)成分的同時(shí)干擾，為了更清晰地描述候選活性化合物與靶點(diǎn)之間的關(guān)系，我們繪制了化合物-靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)圖。網(wǎng)絡(luò)圖的繪制及編輯使用Cytoscape軟件[21]。為了更突出該方劑的核心候選活性化合物和靶點(diǎn)，我們借助了化合物-靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)中的節(jié)點(diǎn)的度這個(gè)參數(shù)，節(jié)點(diǎn)的度（指和該節(jié)點(diǎn)相關(guān)聯(lián)的邊的數(shù)目）是網(wǎng)絡(luò)的基本屬性[22]。Cytoscape是網(wǎng)絡(luò)生物學(xué)分析和可視化最常用的工具，是用于探索由蛋白質(zhì)、基因和其他類型的相互作用組成的生物醫(yī)學(xué)網(wǎng)絡(luò)的開放源代碼軟件。

2 結(jié)果

2.1 半夏厚樸湯分子數(shù)據(jù)庫的建立以及候選活性化合物的篩選

利用TCMSP搜索和文獻(xiàn)檢索建立了由521個(gè)化合物組成的半夏厚樸湯分子數(shù)據(jù)庫，其中符合OB≥30%且DL≥0.18的化合物有65種，占全部成分的13%，其中大部分候選活性化合物已被證實(shí)具有藥理學(xué)作用，也間接證明了選用的WES模型的可靠性。

2.2 靶點(diǎn)的預(yù)測與篩選

通過WES模型的預(yù)測，一共得到65個(gè)候選活性化合物的249個(gè)靶點(diǎn)，為了解析半夏厚樸湯治療RE疾病的作用機(jī)制，我們通過CTD和TTD數(shù)據(jù)庫的篩選得到了151個(gè)與RE疾病相關(guān)的靶點(diǎn)。

2.3 GOBP富集分析結(jié)果 圖中縱坐標(biāo)表示GOBP富集的20個(gè)條目，橫坐標(biāo)表示每個(gè)條目所對應(yīng)的P-value（P-value≤0.05）。從圖中我們可以看出，大部分靶點(diǎn)參與的生物過程與RE息息相關(guān)。其中包括對藥物的反應(yīng)、炎癥反應(yīng)、鈣離子介導(dǎo)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、花生四烯酸代謝過程、一氧化氮的生物合成過程的正調(diào)控、調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖、T細(xì)胞活化等，這些靶點(diǎn)通過參與調(diào)控炎癥反應(yīng)、提高免疫能力、抑制細(xì)胞的異常增殖等來緩解或者治療RE。見圖1。

2.4 化合物-靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)圖分析結(jié)果 圖2中共有216個(gè)節(jié)點(diǎn)（其中候選活性化合物65個(gè)，靶點(diǎn)151個(gè)），1 022個(gè)對應(yīng)關(guān)系，藍(lán)色圓形代表候選活性化合物，紅色方形代表靶點(diǎn)，邊代表化合物與靶點(diǎn)之間的相互作用關(guān)系。分析圖2表明，每個(gè)化合物平均與16個(gè)靶點(diǎn)相互作用，每個(gè)靶點(diǎn)平均與7個(gè)化合物相互作用，這一數(shù)據(jù)表明了半夏厚樸湯具有多成分、多靶點(diǎn)的作用特點(diǎn)。

2.5 化合物-通路網(wǎng)絡(luò)圖分析結(jié)果 圖3中共有113個(gè)節(jié)點(diǎn)（靶點(diǎn)102個(gè)，通路11個(gè)）和156對靶點(diǎn)-通路互作關(guān)系。圖中涉及到的信號通路主要有：代謝通路、神經(jīng)活性配體-受體相互作用、鈣離子信號通路、花生四烯酸代謝、胃酸分泌、TNF信號通路、趨化因子信號通路、P53信號通路等。

3 討論

在本研究中，首先通過利用TCMSP數(shù)據(jù)庫和文獻(xiàn)挖掘構(gòu)建了包含521個(gè)分子的半夏厚樸湯分子數(shù)據(jù)庫，從中篩選出65個(gè)候選活性成分;借助WES預(yù)測出活性化合物的524個(gè)靶點(diǎn)，通過CTD和TTD數(shù)據(jù)庫的篩選得到了151個(gè)與RE相關(guān)的靶點(diǎn)，然后對靶點(diǎn)進(jìn)行了GOBP富集分析，富集結(jié)果顯示，大部分靶點(diǎn)參與的生物過程與RE密切相關(guān)，如：對藥物的反應(yīng)、炎癥反應(yīng)、鈣離子介導(dǎo)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、花生四烯酸代謝過程、一氧化氮的生物合成過程的正調(diào)控、調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖、T細(xì)胞活化等。

然后，我們構(gòu)建了化合物-靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)圖，該圖中化合物和靶點(diǎn)的平均的度分別為16、7，這一數(shù)據(jù)驗(yàn)證了中藥多成分、多靶點(diǎn)的特點(diǎn);化合物-靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)分析結(jié)果顯示半夏厚樸湯中的一些重要成分如琥珀酸、厚樸酚（Magnolol）和厚樸酚（Honokiol）等對RE的治療有著良好的效果。并且通過分析該網(wǎng)絡(luò)圖可以得知促進(jìn)胃黏膜中PTGS1和PTGS2的表達(dá)可以催化花生四烯酸產(chǎn)生PGE2和PGI2，PGE2和PGI2可以抑制胃酸的分泌;抑制PPARG的活性起到抗炎作用，對RE的治療也有一定的療效。表明了此方劑是通過多成分、多靶點(diǎn)協(xié)同來治療RE。

隨后，分析靶點(diǎn)-通路網(wǎng)絡(luò)圖可以看出，半夏厚樸湯的靶點(diǎn)主要映射在以下通路上：代謝通路、神經(jīng)活性配體-受體相互作用、鈣離子信號通路、花生四烯酸代謝、胃酸分泌、TNF信號通路、趨化因子信號通路、P53信號通路等。這些通路可能是該經(jīng)方治療RE的重要通路，通過在不同的通路中產(chǎn)生協(xié)同疊加的作用，進(jìn)而起到治療RE的目的。

琥珀酸（Succinic Acid，MOL01）是半夏中的主要成分且與24個(gè)靶點(diǎn)有相互作用，Rubic等[23]的研究發(fā)現(xiàn)琥珀酸可以觸發(fā)細(xì)胞內(nèi)鈣動(dòng)員，誘導(dǎo)遷移反應(yīng)，并與Toll樣受體配體協(xié)同作用，產(chǎn)生炎癥介質(zhì);琥珀酸還可以增強(qiáng)樹突狀細(xì)胞介導(dǎo)的T細(xì)胞活化，通過作用于樹突狀細(xì)胞激活的早期步驟而增強(qiáng)T細(xì)胞反應(yīng)，進(jìn)而通過發(fā)揮抗炎作用和提高免疫來緩解RE疾病。厚樸中厚樸酚（Magnolol，MOL23，Degree=25）和厚樸酚（Honokiol，MOL24，Degree=28）是厚樸里主要研究的活性成分，Zhang等[24]的實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，厚樸酚（Magnolol）和厚樸酚（Honokiol）對乙酰膽堿和5-羥色胺處理的大鼠離體胃底肌條收縮有明顯的抑制作用，在他們的研究中厚樸酚（Magnolol）和厚樸酚（Honokiol）可以阻止鈣通過電位依賴性鈣離子通道（Potential Dependent Ca2+ Channels，PDC）的跨膜流入，抑制平滑肌的收縮，并緩解平滑肌的痙攣;厚樸酚（Magnolol）和厚樸酚（Honokiol）還可以顯著降低小鼠體內(nèi)核素的殘留率，并提高小鼠半固體營養(yǎng)餐的腸道推進(jìn)比，并且它們與西沙必利之間沒有顯著差異;這進(jìn)一步證明了這2個(gè)活性成分可能是通過促進(jìn)胃腸動(dòng)力來發(fā)揮治療RE疾病的藥理學(xué)作用。徐靜華等[25]研究研究了6-姜酚（6-Gingerol，MOL53）、8-姜酚（8-Gingerol，MOL55）、10-姜酚（10-Gingerol，MOL52）、姜酮（Zingerone，MOL56）及姜烯酚（Shogaol，MOL10）這5種化合物的混合物（6-姜酚約占53%，8-姜酚約占13%，10-姜酚約占30%，姜酮和姜烯酚低于1%）對胃潰瘍的影響，實(shí)驗(yàn)采用的幽門結(jié)扎法致潰瘍模型，實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示混合物組小鼠胃潰瘍指數(shù)顯著低于阿司匹林模型組，5種化合物混合物能顯著增加胃黏液的分泌，增強(qiáng)胃黏膜自身防御因子水平，起到抗損傷的作用。這些數(shù)據(jù)都表明半夏厚樸湯各個(gè)成分之間相互協(xié)同作用來治療RE疾病。

胃黏膜中PTGS1和PTGS2的表達(dá)可以催化花生四烯酸產(chǎn)生PGE2、PGI2和其他保護(hù)性因子[26]，PGE2和PGI2可以抑制胃酸的分泌，促進(jìn)胃黏液和碳?xì)浠衔锏姆置?，擴(kuò)張血管，增加胃黏膜的血流量，并促進(jìn)胃黏膜上皮細(xì)胞的更新和增殖[27]，因此，通過調(diào)節(jié)這2個(gè)靶點(diǎn)可以調(diào)控胃酸的分泌和胃黏膜的修復(fù)，進(jìn)而有助于RE疾病的治療。幽門螺桿菌陽性胃炎中NOS2表達(dá)顯著增加[28]，NOS2的表達(dá)和活性可能導(dǎo)致高水平一氧化氮（NO）的產(chǎn)生，NO的高產(chǎn)量產(chǎn)生可能對組織炎癥和傷害產(chǎn)生有害的影響，半夏厚樸湯可以作用于NOS2，通過調(diào)控NOS2的表達(dá)來減少炎癥的發(fā)生進(jìn)而控制RE。過氧化物酶體增殖物激活受體（Peroxisome Proliferator-activated Receptor，PPAR）構(gòu)成核激素受體超家族的重要子家族，已經(jīng)鑒定出3種同工型，PPARα，PPARβ和PPARγ。PPARG（Degree=43）對炎癥具有多種抑制作用，包括減少核因子κB轉(zhuǎn)錄活性，減少T淋巴細(xì)胞中炎癥介質(zhì)的產(chǎn)生，促進(jìn)先天免疫系統(tǒng)中抗炎介質(zhì)的表達(dá)，抑制巨噬細(xì)胞中炎癥介質(zhì)基因的編碼[29]。在適應(yīng)性免疫系統(tǒng)中，PPARG激活會(huì)降低樹突狀細(xì)胞對初始T淋巴細(xì)胞的免疫作用，并降低其與關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子，活化T細(xì)胞的核因子相互作用的能力，減少了淋巴細(xì)胞中促炎分子的產(chǎn)生[30];在先天免疫系統(tǒng)的細(xì)胞中，PPARG激活可促進(jìn)抗炎介質(zhì)（包括IL-10和LXR）的表達(dá)，以及有助于選擇性活化巨噬細(xì)胞的表型，對炎癥發(fā)揮抑制作用[31]。所以，半夏厚樸湯可以通過調(diào)節(jié)這些靶點(diǎn)蛋白來達(dá)到治療RE的目的。

同一個(gè)靶點(diǎn)可以參與不同的信號通路，在各條通路上可能通過發(fā)揮不同的作用來治療疾病，不同的靶點(diǎn)也可以參與到同一條通路中發(fā)揮作用，體現(xiàn)了靶點(diǎn)治療疾病的協(xié)同作用機(jī)制，這就是中藥方劑的優(yōu)勢。為了進(jìn)一步探究半夏厚樸湯治療RE的作用機(jī)制，我們研究了候選活性化合物的靶點(diǎn)參與的信號通路對RE治療的影響。我們將潛在藥效靶點(diǎn)導(dǎo)入到DAVID數(shù)據(jù)庫，導(dǎo)出靶點(diǎn)參與的生物學(xué)信號通路，然后篩選出可能與RE相關(guān)的11條生物通路，繪制了靶點(diǎn)-通路網(wǎng)絡(luò)圖。其中通過作用于神經(jīng)活性的配體-受體相互作用信號通路可以激活胃腸道5-羥色胺4受體（5-HT4），進(jìn)而刺激胃腸蠕動(dòng)反射和腸道分泌，能夠促進(jìn)消化、對消化不良起到一定的治療作用[32];鈣離子信號通路和花生四烯酸代謝通路參與了炎癥的調(diào)節(jié)[33];趨化因子信號通路在調(diào)控免疫中起重要作用[34];胃酸分泌通路則參與胃酸分泌的調(diào)節(jié)，使得胃酸分泌量適中，避免分泌過少導(dǎo)致腹脹消化不良，而分泌過多又導(dǎo)致潰瘍、出血等并發(fā)癥的發(fā)生[35]。這些信號通路通過候選活性化合物相互聯(lián)系，也進(jìn)一步證明了該方劑能在不同的信號通路中發(fā)揮協(xié)同作用。進(jìn)而我們推測半夏厚樸湯通過作用于這些信號通路，從減少炎癥、調(diào)節(jié)胃腸動(dòng)力、保護(hù)胃黏膜、調(diào)節(jié)能量代謝、提高免疫力、調(diào)節(jié)膽堿能神經(jīng)、抑制腫瘤細(xì)胞增殖等方面發(fā)揮治療RE的作用。

總之，本研究提供了一種基于系統(tǒng)藥理學(xué)，分別從分子、網(wǎng)絡(luò)、通路層面來分析半夏厚樸湯治療RE的新方法，解析了中藥方劑的多成分、多靶點(diǎn)、多通路協(xié)同調(diào)節(jié)治療RE的機(jī)制，證明了中藥方劑的整體性作用機(jī)制;為中藥方劑的研究提供了新的研究思路。后續(xù)將進(jìn)行其相應(yīng)的細(xì)胞實(shí)驗(yàn)和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證研究，進(jìn)一步明確其發(fā)揮療效的活性分子、作用靶點(diǎn)以及作用機(jī)制。

參考文獻(xiàn)

[1]盧文生.清肝和胃降逆法治療反流性食管炎臨床研究[J].吉林中醫(yī)藥，2012，32（9）：914-915.

[2]顧立梅，孫志廣.反流性食管炎中醫(yī)證治研究[J].吉林中醫(yī)藥，2010，30（11）：943-944.

[3]劉自翃，李廣英.黃連溫膽湯治療反流性食管炎38例[J].吉林中醫(yī)藥，2011，31（4）：332-333.

[4]郭震浪蘇振寧，王正飛，等.半夏瀉心湯加減治療反流性食管炎療效的Meta分析[J].中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2015，21（24）：219-224.

[5]中華醫(yī)學(xué)會(huì)消化病學(xué)分會(huì)胃腸動(dòng)力學(xué)組.胃食管反流病治療共識意見（2007·西安）[J].現(xiàn)代消化及介入診療，2008，13（1）：71-72.

[6]朱海燕，金小晶.溫通和胃法治療反流性食管炎[J].長春中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2011，27（2）：208-209.

[7]鄧中甲.方劑學(xué)[M].2版，北京，中國中醫(yī)藥出版社，2013：214-215.

[8]陳世旺，田旭東.半夏厚樸湯治療胃食管反流病的Meta分析[J].中國臨床研究，2014，27（9）：1080-1082.

[9]任萬新.半夏厚樸湯治療胃潰瘍的臨床效果及安全性[J].中西醫(yī)結(jié)合心血管?。ㄟB續(xù)型電子期刊），2019，7（31）：27.

[10]孫敘敏，張雅月，尹璐.柴胡疏肝散合旋覆代赭湯加減治療伴焦慮、抑郁的胃食管反流病的臨床療效[J].中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2021，27（08）：88-93.

[11]賈寧，李楊.半夏厚樸湯治療胃食管反流病療效觀察[J].山西中醫(yī)，2016，32（3）：19-20.

[12]王永華，楊凌.基于系統(tǒng)藥理學(xué)的現(xiàn)代中藥研究體系[J].世界中醫(yī)藥，2013，8（7）：801-808.

[13]Ru J，Li P，Wang J，et al.TCMSP：a database of systems pharmacology for drug discovery from herbal medicines[J].J Cheminform，2014，6（13）：1-6.

[14]黃超.藥物口服生物利用度預(yù)測及在中藥歸經(jīng)研究上的應(yīng)用[D].楊凌：西北農(nóng)林科技大學(xué)，2015.

[15]田盛.類藥性和生物利用度的理論預(yù)測研究[D].蘇州：蘇州大學(xué)，2011.

[16]Zheng C，Guo Z，Huang C，et al.Large-scale Direct Targeting for Drug Repositioning and Discovery[J].Sci Rep，2015，5（1）：11970.

[17]Mattingly CJ，Colby GT，F(xiàn)orrest JN，et al.The Comparative Toxicogenomics Database（CTD）[J].Environ Health Perspect，2003，111（6）：793-795.

[18]Wang Y，Zhang S，Li F，et al.Therapeutic target database 2020：enriched resource for facilitating research and early development of targeted therapeutics[J].Nucleic Acids Res，2020，48（D1）：D1031-D1041.

[19]Ashburner M，Ball CA，Blake JA，et al.Gene ontology：tool for the unification of biology.The Gene Ontology Consortium[J].Nat Genet，2000，25（1）：25-29.

[20]Dennis G Jr，Sherman BT，Hosack DA，et al.DAVID：Database for Annotation，Visualization，and Integrated Discovery[J].Genome Biol，2003，4（5）：P3.

[21]Su G，Morris JH，Demchak B，et al.Biological network exploration with Cytoscape 3[J].Curr Protoc Bioinformatics，2014，47（1）：1-24.

[22]Azuaje FJ，Zhang L，Devaux Y，et al.Drug-target network in myocardial infarction reveals multiple side effects of unrelated drugs[J].Sci Rep，2011，1（1）：1-10.

[23]Rubic T，Lametschwandtner G，Jost S，et al.Triggering the succinate receptor GPR91 on dendritic cells enhances immunity[J].Nat Immunol，2008，9（11）：1261-1269.

[24]Zhang WW，Li Y，Wang XQ，et al.Effects of magnolol and honokiol derived from traditional Chinese herbal remedies on gastrointestinal movement[J].World J Gastroenterol，2005，11（28）：4414-4418.

[25]徐靜華，陳雪梅，趙余慶，等.姜辣素對動(dòng)物實(shí)驗(yàn)性胃潰瘍的影響[J].沈陽藥科大學(xué)學(xué)報(bào)，2011，28（3）：221-225.

[26]Wooten JG，Blikslager AT，Ryan KA，et al.Cyclooxygenase expression and prostanoid production in pyloric and duodenal mucosae in dogs after administration of nonsteroidal anti-inflammatory drugs[J].Am J Vet Res，2008，69（4）：457-464.

[27]Mitchell JA，Warner TD.COX isoforms in the cardiovascular system：understanding the activities of non-steroidal anti-inflammatory drugs[J].Nat Rev Drug Discov，2006，5（1）：75-86.

[28]Fu S，Ramanujam KS，Wong A，et al.Increased expression and cellular localization of inducible nitric oxide synthase and cyclooxygenase 2 in Helicobacter pylori gastritis[J].Gastroenterology，1999，116（6）：1319-1329.

[29]Huang W，Glass CK.Nuclear receptors and inflammation control：molecular mechanisms and pathophysiological relevance[J].Arterioscler Thromb Vasc Biol，2010，30（8）：1542-1549.

[30]Szatmari I，Rajnavolgyi E，Nagy L.PPARgamma，a lipid-activated transcription factor as a regulator of dendritic cell function[J].Ann N Y Acad Sci，2006，1088（11）：207-218.

[31]Odegaard JI，Ricardo-Gonzalez RR，Goforth MH，et al.Macrophage-specific PPARgamma controls alternative activation and improves insulin resistance[J].Nature，2007，447（7148）：1116-1120.

[32]馬志平，信莎莎，董玉.與胃病相關(guān)的網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)研究[J].內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2015，37（S1）：93-97.

[33]陶迎秋，梁統(tǒng)，周克元.花生四烯酸三條代謝通路在炎癥反應(yīng)中的作用[J].國際免疫學(xué)雜志，2010，33（4）：303-306，314.

[34]馬向濤，余力偉，王杉，等.趨化因子受體CXCR4/CXCL12信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路與胃癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移關(guān)系的研究[J].中國腫瘤臨床，2007，34（10）：544-546.

[35]吳靜，李學(xué)良.胃酸分泌的調(diào)節(jié)[J].胃腸病學(xué)，2012，17（3）：179-182.

（2020-05-18收稿 責(zé)任編輯：魏慶雙，徐穎）