蘇梅芬

（廣西欽州市第二人民醫(yī)院病理科，廣西 欽州 535000）

漿膜腔積液中惡性腫瘤屬于臨床中較為復(fù)雜的類型之一，漿膜腔積液內(nèi)腫瘤細(xì)胞的檢測(cè)在臨床病理送檢中屬于較為常見的現(xiàn)象[1]。在診斷過(guò)程中受到傳統(tǒng)細(xì)胞學(xué)涂片判讀的限制，很難為臨床提供腫瘤的來(lái)源與分類，加上晚期腫瘤患者難以耐受手術(shù)和極易出血，不易獲取原發(fā)部位腫瘤的組織學(xué)標(biāo)本[2]。而漿膜腔積液經(jīng)常被臨床中當(dāng)作首發(fā)癥狀，較為容易獲取，因此在臨床病理工作中利用漿膜腔積液的樣本進(jìn)行制作蠟塊加做免疫組化檢測(cè)來(lái)診斷具有較為積極的作用，能為臨床治療惡性腫瘤提供個(gè)性化的幫助和參考[3]。因此，有效的免疫組化標(biāo)志物的檢測(cè)手段顯得尤為重要，為了分析免疫組化標(biāo)志物在鑒別漿膜腔積液惡性腫瘤細(xì)胞中的應(yīng)用有效性，我院針對(duì)收治的60 例漿膜腔積液惡性腫瘤患者展開了觀察及診斷分析。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

選擇我院2019年1月至2020年12月收治的由細(xì)胞學(xué)篩選的漿膜腔積液惡性腫瘤患者60 例作為本次觀察對(duì)象，采用數(shù)字隨機(jī)分組的方式將其分成三組，A 組20 例患者中男性患者11 例，女性9 例，最大年齡為81 歲，最小年齡為39歲，年齡均值為（62.56±5.69）歲，其中心包積液患者3 例，腹水患者7 例，胸水患者10 例；B 組20 例患者中男性患者12例，女性8 例，最大年齡為82 歲，最小年齡為40 歲，年齡均值為（62.57±5.72）歲，其中心包積液患者4 例，腹水患者7 例，胸水患者9 例；C 組20 例患者中男性患者10 例，女性10 例，最大年齡為80 歲，最小年齡為41 歲，年齡均值為（62.62±5.70）歲，其中心包積液患者3 例，腹水患者8 例，胸水患者9 例。

對(duì)三組漿膜腔積液惡性腫瘤患者的一般資料進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，結(jié)果顯示組間差異小且可比性高。本研究觀察之前，60例患者經(jīng)臨床病理學(xué)診斷后均確診為漿膜腔積液惡性腫瘤患者；本觀察開展前，60 例患者及其家屬均對(duì)本次觀察的目的、內(nèi)容、形式和結(jié)果等展開了詳細(xì)的了解且均已簽署知情同意協(xié)議；本次觀察均在我院倫理委員會(huì)審批下通過(guò)。

1.2 方法

本次觀察中使用的4 種檢測(cè)手段中涉及到的儀器設(shè)備包括切片機(jī)、離心機(jī)及脫水機(jī)、包埋機(jī)等等；使用的試劑包括免疫組化染色采用的EnVision 法，抗體包括CEA、CK20、TTF-1、CK7、CK8、CK、EMA、CA125、PAX-5、CDX-2、Villin、NapsinA、CR、MC、D2 -40、WT -1、PR、ER、HER -2、CD15、MUM1、CD20、CD3、vimentin、Ki-67、P53 等等。將60 例患者的漿膜腔積液標(biāo)本編號(hào)后分成2 份，一份80ml，將其分別放置在2 個(gè)離心管中，通過(guò)3000r/min 轉(zhuǎn)速的速度實(shí)施離心操作5 分鐘，兩管將上清液去除后保留沉淀物等待檢測(cè)。

針對(duì)A 組20 例患者實(shí)施常規(guī)細(xì)胞學(xué)涂片檢查，針對(duì)B組20 例患者實(shí)施薄層液基細(xì)胞技術(shù)制片檢查，選擇1 管沉淀物給予2 張常規(guī)涂片的檢測(cè)，將濕片固定在95%的乙醇溶液中給予HE 的染色處理；再將剩下的沉淀物全部轉(zhuǎn)入薄層液基細(xì)胞保存瓶?jī)?nèi)，選擇由手工型制片對(duì)液基薄層細(xì)胞技術(shù)的處理。檢測(cè)后呈巢團(tuán)、彌漫或散在的分布顯著異型細(xì)胞，明確為免疫組化染色的基本條件。

針對(duì)C 組20 例患者實(shí)施細(xì)胞蠟塊切片結(jié)合免疫組化檢測(cè)的聯(lián)合診斷，利用一管沉淀物注入40ml 的福建泰普生物有限公司生產(chǎn)的細(xì)胞提取液，給予3000r/min 的低速離心操作，連續(xù)離心操作5 分鐘后將上清液去除，再加入10%的50ml 中性福爾馬林，重復(fù)進(jìn)行5 分鐘的離心操作，將上清液去除后沉淀物能凝固成塊，后將固塊包在濾紙內(nèi)放置如包埋盒中，采用全自動(dòng)脫水機(jī)進(jìn)行固定、脫水處理，然后實(shí)施包埋、切片及HE 染色的處理，將細(xì)胞蠟塊切片后實(shí)施免疫組化染色的檢測(cè)。檢測(cè)完成后參照組織學(xué)的原則，細(xì)胞核、細(xì)胞膜及細(xì)胞質(zhì)出現(xiàn)定位較為清晰的棕黃色或黃色顆粒的患者，且量在10%以上的異型細(xì)胞則屬于陽(yáng)性，完全不著色則屬于陰性。各類抗體陽(yáng)性的結(jié)果可靠，染色定位較為準(zhǔn)確。

1.3 觀察指標(biāo)

對(duì)比觀察三組漿膜腔積液惡性腫瘤患者檢測(cè)診斷之后對(duì)比檢出率及鑒別漿膜腔積液中惡性腫瘤的來(lái)源和分類的陽(yáng)性率等指標(biāo)的差異。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用spss27.0 軟件對(duì)三種診斷技術(shù)下的診斷結(jié)果進(jìn)行處理，檢出率及鑒別漿膜腔積液中惡性腫瘤的來(lái)源和分類的陽(yáng)性率為計(jì)數(shù)資料，采用x2 表示，當(dāng)P 小于0.05 表示三種診斷技術(shù)下的診斷結(jié)果之間的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 三種檢測(cè)漿膜腔積液中惡性腫瘤細(xì)胞陽(yáng)性檢出率的對(duì)比

C 組漿膜腔積液中惡性腫瘤患者檢測(cè)后的檢出率顯著高于A 組漿膜腔積液中惡性腫瘤患者及B 組漿膜腔積液中惡性腫瘤患者（P＜0.05），差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；見表1所示：

表1 三種檢測(cè)漿膜腔積液中惡性腫瘤細(xì)胞陽(yáng)性檢出率

2.2 漿膜腔積液中惡性腫瘤的來(lái)源和分類

A 組惡性漿膜腔積液患者、B 組惡性漿膜腔積液患者及C 組惡性漿膜腔積液患者的臨床資料、細(xì)胞學(xué)特點(diǎn)及免疫組化結(jié)果的分析下，對(duì)其組織來(lái)源和類型進(jìn)行分析的具體結(jié)果見表2所示：

表2 三組患者的惡性腫瘤細(xì)胞免疫組化表達(dá)（陽(yáng)性率/總數(shù)）

3 討論

漿膜腔積液屬于臨床中較為多發(fā)的病癥之一，有時(shí)甚至是唯一的臨床癥狀。對(duì)于患者來(lái)說(shuō)早期開展疾病良惡性的鑒別診斷對(duì)于預(yù)后及疾病的治療具有較為積極的意義，準(zhǔn)確而有效的鑒別診斷技術(shù)是提高患者生存質(zhì)量、延長(zhǎng)患者生存時(shí)間的重要保證。因此，在臨床病理中針對(duì)惡性漿膜腔積液患者應(yīng)給予相應(yīng)的鑒別診斷操作[4]。

以往一般針對(duì)惡性漿膜腔積液患者實(shí)施常規(guī)細(xì)胞學(xué)涂片檢測(cè)及薄層液基細(xì)胞技術(shù)制片的檢測(cè)。在病理鑒別診斷的過(guò)程中由于常規(guī)細(xì)胞學(xué)涂片的檢測(cè)過(guò)程中可能會(huì)由于細(xì)胞重疊、細(xì)胞排列分散、細(xì)胞結(jié)構(gòu)不清晰及細(xì)胞數(shù)量少等等客觀因素的影響增加診斷的難度[5]。而液基薄層細(xì)胞技術(shù)制片的檢測(cè)中保存液雖然能很好的固定標(biāo)本，還能讓制作的液基薄片減少甚至消除影響因素，具有背景干凈整潔、細(xì)胞量聚集、細(xì)胞退變較少及細(xì)胞平鋪排列等等優(yōu)點(diǎn)。但檢測(cè)的過(guò)程中依舊存在著不確定的病例，具有一定的局限性[6]。相對(duì)于常規(guī)細(xì)胞學(xué)檢測(cè)液基薄層細(xì)胞技術(shù)制片的檢測(cè)來(lái)說(shuō)，細(xì)胞蠟塊切片收集的細(xì)胞量較大、分布較為均勻，且不存在重疊現(xiàn)象，結(jié)構(gòu)較為清晰，在組織形態(tài)上和組織學(xué)切片較為類似，能減少漏診及誤診現(xiàn)象的出現(xiàn)[7]。此外，細(xì)胞蠟塊切片的檢測(cè)還能更好的提高細(xì)胞的完整性及切片的數(shù)量，提高腫瘤細(xì)胞的檢出率，還能對(duì)其進(jìn)行免疫組化染色的檢測(cè)，聯(lián)合抗體檢測(cè)能更好的判斷腫瘤的來(lái)源與分類，并能進(jìn)行基因檢測(cè)。免疫組化標(biāo)志物屬于外科組織病理學(xué)中最常見的診斷技術(shù)之一，能幫助病理診斷中對(duì)腫瘤的良惡性、組織的來(lái)源及亞型等進(jìn)行確診[8]。如在不明來(lái)源腺癌的鑒別診斷中可以通過(guò)NapsinA、Tg、CK7、TTF-1、villin、CDX-2、ER 、PR、WT-1、CK20、PAX-8、CA125 等等組合明確組織的來(lái)源；而對(duì)于鱗癌、惡性淋巴瘤等的分類診斷可以通過(guò)P63、P40、CK5/6、CD20、CD3、PAX-5、MUM1 等等抗體進(jìn)行分類診斷[9]。

由此可見，臨床病理工作中在對(duì)漿膜腔積液惡性腫瘤細(xì)胞的鑒別診斷中單獨(dú)通過(guò)某一種檢測(cè)手段（常規(guī)細(xì)胞學(xué)涂片檢查或薄層液基細(xì)胞技術(shù)制片檢查）很難鑒別漿膜腔積液惡性腫瘤的類型及來(lái)源，通過(guò)細(xì)胞蠟塊切片結(jié)合免疫組化檢測(cè)的免疫組化標(biāo)志物的檢測(cè)能很好的提高惡性腫瘤細(xì)胞的檢出率，并幫助臨床中判斷腫瘤細(xì)胞的來(lái)源和分類，為臨床治療提供參考依據(jù)。